γ-干扰素抗体对早期流产大鼠γ-干扰素、白细胞介素-2、白细胞介素-4的表达及滋养层细胞凋亡的影响

目的:探讨γ-干扰素(IFN-γ)抗体对孕鼠早期流产的影响及其机制.方法:实验孕鼠随机分成流产模型组、IFN-γ抗体组、流产模型+ IFN-γ抗体组及正常对照组.酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清IFN-γ、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)水平,免疫组织化学检测子宫蜕膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达,Hoechst 33342荧光染色检测滋养层细胞凋亡情况.结果:血清测定数据显示,流产模型组IFN-γ、IL-2水平高于正常对照组,IL-4水平低于正常对照组;流产模型+IFN-γ抗体组IFN-γ、IL-2水平低于流产模型组,高于IFN-γ抗体组;IL-4水平高于流产模型组,低于IFN-γ抗体组.免疫组织化学Bcl-2和Bax蛋白阳性产物光密度值比值(Bax/Bcl-2)流产模型+IFN-γ抗体组低于流产模型组.结论:大鼠血清中3种细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4表达的改变及滋养层细胞凋亡可能是流产发生的重要因素.应用IFN-γ抗体可降低孕鼠IFN-γ、IL-2水平,升高IL-4水平,抑制滋养层细胞的凋亡,从而使流产率降低.     

鱼腥草总黄酮对肺炎支原体感染小鼠Bcl-2 和Bax 表达的影响

目的:探讨鱼腥草总黄酮对肺炎支原体感染小鼠肺组织Bcl-2、Bax蛋白与mRNA表达水平及血清炎症因子的影响及作用机制。方法:50只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、鱼腥草总黄酮低、中和高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg),滴鼻给予肺炎支原体。HE染色观察肺组织病理变化,Western blot法与RT-PCR法分别检测各组小鼠肺组织Bcl-2、Bax蛋白与mRNA表达水平,ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子TNF-α、IFN-γ和IL-6水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠肺湿重指数明显升高(P0.05),肺组织出现炎症病变,肺泡璧增厚、肺泡间隔变宽、可见炎症细胞浸润,肺组织Bcl-2蛋白与mRNA表达水平明显降低(P0.05),Bax蛋白与mRNA表达水平明显升高(P0.05),Bcl-2/Bax值明显降低(P0.05),血清TNF-α、IFN-γ和IL-6水平明显升高(P0.05)。与模型组相比,鱼腥草总黄酮低、中和高剂量组小鼠肺湿重指数明显降低(P0.05),炎症细胞浸润情况改善,肺组织Bcl-2蛋白与mRNA表达水平明显升高(P0.05),Bax蛋白与mRNA表达水平明显降低(P0.05),Bcl-2/Bax值明显升高(P0.05),血清TNF-α、IFN-γ和IL-6水平明显降低(P0.05)。结论:鱼腥草总黄酮可上调Bcl-2蛋白与mRNA表达,下调Bax蛋白与mRNA表达,降低炎症因子水平,减少细胞凋亡,对肺炎支原体感染小鼠起抗感染作用。     

补肾益气方对TNF-α/IFN-γ诱导的早孕期人滋养层细胞凋亡的影响

目的：探讨补肾益气方对TNF-α/IFN-γ诱导的早孕期人滋养层细胞凋亡的调节作用。方法：TNF-α/IFN-γ和含药血清共培养细胞后,采用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞亚二倍体峰,原位缺口末端标记法（TUNEL染色）、caspase-3活性检测试剂盒检测凋亡,Western blot检测Bcl-2和XIAP蛋白。结果：TNF-α和IFN-γ联合给药培养后,细胞活力降低,亚二倍体细胞较未处理组明显增多,凋亡细胞数明显高于正常对照组,caspase-3酶活性明显升高,TNF-α/IFN-γ与含药血清共培养后,细胞活力升高,亚二倍体细胞数和凋亡细胞数却明显减少,caspase-3酶活性降低,Bcl-2和XIAP蛋白增加,并呈时间和剂量依赖性。结论：补肾益气方降低TNF-α和IFN-γ诱导的滋养层细胞凋亡的发生率。     

青藤碱调控LncRNA BLACAT1对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响

目的：探讨青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对LncRNA BLACAT1的调控作用。方法：采用脂多糖（LPS）诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞,si-NC、si-BLACAT1分别转染软骨细胞后加入LPS处理细胞,pcDNA、pcDNA-BLACAT1分别转染入软骨细胞后加入青藤碱与LPS处理细胞;采用qRT-PCR法检测BLACAT1的表达量;采用CCK-8实验检测细胞增殖能力;采用平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α的水平;采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果：青藤碱可降低LPS诱导的软骨细胞中BLACAT1的表达水平、凋亡率、Bax蛋白水平和IFN-γ、TNF-α的水平,并可增加细胞活力及克隆形成数,还可提高Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学意义（P<0.05）;转染si-BLACAT1能够增强LPS诱导的软骨细胞活力及克隆形成数,降低凋亡率、Bax蛋白水平及IFN-γ、TNF-α的水平,提高Bcl-2蛋白水平,差...     

氨基胍对大鼠局灶性脑缺血损伤后TNF-α、IL-1β及细胞凋亡的作用

目的： 观察氨基胍（AG）对局灶性脑缺血损伤后炎症因子和神经细胞凋亡的作用，探讨AG保护脑缺血损伤组织的作用机制。方法： 健康雄性SD大鼠30只，体重250-280 g，随机分为3组：假手术组（SH组）、缺血组（IS组）、AG治疗组（AG组），每组10只。IS、AG组采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型。AG组每次腹腔注射AG 100 mg/kg,每日2次，连续3 d。IS组给予等量的生理盐水。将大鼠断头取脑，采用免疫组化法检测脑组织中TNF-α表达变化，放免法检测IL-1β水平变化，流式细胞仪测定脑组织神经元凋亡率、Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达及Bcl-2蛋白与Bax蛋白比值（Bcl-2/Bax）。结果： IS组脑缺血灶范围内TNF-α表达明显强于SH组，IL-1β水平显著高于SH组，神经凋亡率及Bax蛋白表达高于SH组，Bcl-2/Bax低于SH组；AG组脑缺血灶范围内TNF-α表达明显低于IS组，IL-1β水平显著低于IS组，神经凋亡率低于IS组，Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax高于IS组，Bax蛋白表达低于IS组 。结论： AG通过抑制TNF-α和IL-1β的升高，增加Bcl-2蛋白表达，降低Bax蛋白表达，调节Bcl-2/Bax平衡，对脑缺血大鼠脑神经元产生一定程度的保护作用。     

HSP70调控Bcl-2表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制研究

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制。方法 SD大鼠30只随机分为对照组、脓毒症组、干预组,每组10只,脓毒症组腹腔注射20 mg/kg内毒素,干预组尾静脉注射溶于15 mL林格液的800μg重组质粒pcDNA3.1-HSP70,48 h后腹腔注射20 mg/kg内毒素;对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后采血检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α水平,采血后将各组大鼠处死取其肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,检测各组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率,检测各组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示干预组大鼠肺组织病理改变较模型组明显改善。脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著高于对照组(P0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著低于脓毒症组(P0.05);脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bax、Bcl-2蛋白表达水平显著高于对照组(P0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2蛋白表达水平显著高于脓毒症组(P0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中Bax表达水平显著低于脓毒症组(P0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及IL-6、TNF-α、HSP70、Bax、Bcl-2水平较对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论 HSP70可能通过下调Bax及上调Bcl-2表达,减轻脓毒症大鼠炎症反应,减少肺血管内皮细胞凋亡,抑制肺血管内皮细胞损伤,从而起到保护肺血管内皮细胞的作用,这可能成为脓毒症肺损伤治疗的新靶点。     

中药六味地黄汤对衰老大鼠卵巢组织Bax/Bcl-2及Caspese-3蛋白表达的影响

目的探讨六味地黄汤对衰老大鼠卵巢组织凋亡相关基因Bax/Bcl-2及Caspese-3蛋白表达的影响。方法D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老动物模型,造模后灌胃何首乌饮连续60天后,大鼠断头取卵巢。采用免疫组织化学分析方法检测各组大鼠凋亡相关基因Bcl-2,Bax的表达;Western Bloting法检测各组大鼠卵巢Caspese-3蛋白表达的变化。结果模型组较正常组卵巢细胞Bax、Caspse-3表达量增加,Bcl-2表达减弱;六味地黄汤可使卵巢Bax、Caspse-3表达量降低,Bcl-2表达增加。差异有统计学意义(P<0.05)。结论六味地黄汤剂能延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生,其机制可能是通过干预凋亡相关基因Bax/Bcl-2及Caspese-3蛋白表达抑制卵巢细胞的凋亡。     

促红细胞生成素/神经生长因子对大鼠压迫性损伤后背根神经节细胞的影响

目的:观察促红细胞生成素(EPO)/神经生长因子(NGF)对慢性压迫中的大鼠背根神经节(DRG)细胞的影响。方法:暴露大鼠多节段DRG,行慢性压迫造模型,并分离DRG,模型组分离的DRG细胞给予外源EPO或NGF,台盼蓝染色检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光法检测Bcl-2和Bax表达,荧光探针法检测活性氧(ROS)活性,ELISA法检测炎症因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ的水平。结果:EPO或NGF可减轻DRG细胞的损伤和凋亡,下调促凋亡因子Bax的表达,并上调抗凋亡因子Bcl-2的表达,降低ROS活性。结论:EPO和NGF有利于受损的DRG细胞抗炎和抗氧化作用。     

瓜蒌皮提取物通过调控NQO1对高糖诱导的人肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响北大核心CSCD

目的:探讨瓜蒌皮提取物(PT)通过调控NQO1对高糖诱导的人肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响。方法:采用5.5 mmol/L和30 mmol/L的D-葡萄糖处理人肾小管上皮细胞HK-2,记为对照组和高糖(HG)组;分别用12.5、25、50μg/ml的PT处理细胞,进行高糖处理,记为HG+PT-L组、HG+PT-M组、HG+PT-H组;采用脂质体法将vector和NQO1转染至细胞后,进行高糖处理,记为HG+vector组和HG+NQO1组;si-NC和si-NQO1转染细胞后,用50μg/ml PT和高糖处理细胞,记为HG+PT+si-NC组和HG+PT+si-NQO1组。MTT检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、NQO1蛋白表达;ELISA检测IL-1β、IL-10、TNF-α表达水平。结果:HG组细胞活力、Bcl-2、NQO1蛋白表达明显低于对照组,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α水平明显高于对照组。HG+PT-L组、HG+PT-M组、HG+PT-H组细胞活力、Bcl-2、NQO1蛋白表达明显高于HG组,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α水平明显低于HG组。HG+NQO1组NQO1、Bcl-2蛋白表达、细胞活力明显高于HG+vector组,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α水平明显低于HG+vector组。HG+PT+si-NQO1组NQO1、Bcl-2蛋白表达、细胞活力明显低于HG+PT+si-NC组,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α水平明显高于HG+PT+si-NC组。结论:PT通过上调NQO1表达减轻高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡和炎症损伤。     

高压氧治疗对癫痫大鼠血清白细胞介素1β、白细胞介素2、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平及海马神经元Bax及Bcl-2表达的影响

目的：探究高压氧治疗对癫痫大鼠血清白细胞介素（IL）1β、IL-2、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表 达及海马神经元细胞凋亡基因表达的影响。方法：采用随机数字法将36 只成年健康SD大鼠进行编号,1 ～ 12 号 实验动物为空白对照组,剩余动物接受匹罗卡品建立癫痫模型,根据Racine 评分作为完成标准,随机选取12 只 接受高压氧治疗,利用ELISA 法检测实验动物血清IL-1β、IL-2、IL-8、TNF-α 表达水平,利用免疫印迹和免疫 荧光染色检测实验动物海马神经元细胞凋亡蛋白Bax 和Bcl-2 表达。结果：与空白对照组相比,癫痫模型组大鼠 血清IL-1β、IL-8、TNF-α 表达水平均显著升高,IL-2 表达水平明显降低;经过高压氧治疗后,与癫痫模型组相比, 实验大鼠血清IL-1β、IL-8、TNF-α 表达水平显著降低,IL-2 表达水平明显升高。免疫印迹和免疫荧光染色结果 显示,与空白对照组相比,癫痫模型组促凋亡蛋白Bax 表达显著升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2 表达显著下降,经过 高压氧治疗后,Bax 蛋白水平显著下调,而Bcl-2 蛋白水平显著上调。结论：高压氧治疗可减少癫痫大鼠血清IL- 1β、IL-8、TNF-α 的表达,增加IL-2 的表达, Bax 蛋白水平显著下调而Bcl-2 蛋白水平显著上调,因此本研究可作 为高压氧治疗癫痫病作用机制之一。     

罗布麻颗粒对化疗型卵巢早衰大鼠Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的： 探讨罗布麻颗粒对化疗型卵巢早衰大鼠Bax 和Bcl-2 蛋白表达的影响。方法：性成熟SD雌鼠随机分 为对照组、造模组,腹腔注射（ 顺铂1.5 mg/kg）制备卵巢早衰模型,随机分为卵巢早衰模型组和罗布麻颗粒高、 中、低剂量治疗组。H-E 染色观察卵巢形态;ELISA 检测各组大鼠血清Bax、Bcl-2 和雌二醇、促黄体生成素（LH）、 促卵泡激素（FSH））的含量,免疫组织化学法检测卵巢Bax 与Bcl-2 蛋白表达。结果：卵巢早衰模型组大鼠中初 级卵泡减少,闭锁卵泡增多,罗布麻颗粒高剂量治疗组大鼠可见初级卵泡,闭锁卵泡较卵巢早衰模型组减少;卵 巢早衰模型组大鼠血清中雌二醇及Bcl-2 含量降低,FSH、LH、Bax 的含量升高; 各药物治疗组雌二醇、Bcl-2 含 量升高,FSH、LH、Bax 的含量降低;Bax 蛋白主要表达在颗粒层细胞及卵泡液中,卵巢早衰模型组大鼠较对照 组表达显著升高, 各药物治疗组在不同程度上能够降低其表达;Bcl-2 蛋白在各组主要表达在颗粒层细胞中,卵 巢早衰模型组大鼠较对照组表达显著下降, 各药物治疗组在不同程度上能够升高其表达。结论：顺铂能够导致雌 性大鼠血清中性激素水平的紊乱及卵巢组织形态的改变,可能与细胞凋亡因子Bax 与Bcl-2 在血清及卵巢组织中 表达水平的高低有关;罗布麻颗粒可能通过下调Bax 蛋白、上调Bcl-2 蛋白从而改善顺铂致卵巢早衰大鼠的卵巢 功能。     

过表达PGRN抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤

目的:探讨颗粒体蛋白前体(progranulin,PGRN)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人肺泡上皮A549细胞和HPAEpi C细胞增殖、凋亡及炎症的影响。方法:实验分为4组:对照(control)组为正常培养的细胞;LPS组用LPS(10 mg/L)处理;PGRN+LPS组在转染pc DNA3.1-PGRN质粒后加入LPS处理;pc DNA3.1+LPS组在转染pc DNA3.1-EGFP质粒后加入LPS处理。MTT试剂盒检测细胞活力;Brd U掺入实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-q PCR和Western blot分别检测PGRN的mRNA和蛋白表达;Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65和p-IκB-α的蛋白水平。结果:与对照组相比,LPS组的细胞增殖率下降(P0.05),凋亡率上升(P0.05),caspase-3和Bax的蛋白表达上调(P0.05),Bcl-2的蛋白表达下调(P0.05),IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达上调(P0.05),p65和p-IκB-α的蛋白水平增加(P0.05),与LPS组相比,PGRN+LPS组的细胞增殖率上升(P0.05),凋亡率下降(P0.05),caspase-3和Bax的蛋白表达下调(P0.05),Bcl-2的蛋白表达上调(P0.05),IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达下调(P0.05),p65和p-IκB-α的蛋白水平降低(P0.05)。结论:PGRN过表达可以减轻LPS诱导的A549细胞和HPAEpi C细胞增殖、凋亡异常及炎症因子产生等损伤,这可能与PGRN参与调控NF-κB信号通路有关。     

生育年龄妇女早期卵泡细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达

目的:研究生育年龄妇女早期卵泡的细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达。方法:12例卵巢组织标本来自进行妇科手术的生育年龄妇女(年龄23-38岁),并经过组织病理学检查证实无明显形态异常。利用末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法研究早期卵泡(包括始基卵泡、间期和初级卵泡)细胞凋亡和Bcl-2/BAX蛋白表达。结果:早期卵泡内18.75%卵细胞表现TUNEL阳性,但是卵泡内未见TUNEL阳性颗粒细胞。BAX在早期卵泡的卵细胞内表达,阳性表达率76.07%;相反未见Bcl-2在卵细胞表达。另外,早期卵泡内颗粒细胞也没有表达Bcl-2和BAX。结论:生育年龄妇女早期卵泡的卵细胞发生凋亡,促凋亡蛋白BAX在卵细胞凋亡过程中发挥调节作用,由此提示BAX介导的卵细胞凋亡可能是生育年龄妇女早期卵泡闭锁的机制。     

低剂量米非司酮对人卵巢颗粒细胞的影响

目的 观察低剂量米非司酮对体外培养的人卵巢颗粒细胞的影响,探讨其抑制或延迟排卵的分子机制. 方法 应用细胞培养,通过倒置显微镜、电子显微镜观察米非司酮对体外培养的人卵巢颗粒细胞形态及超微结构的影响;用免疫细胞化学和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测不同浓度米非司酮处理24h后对颗粒细胞Bcl-2和Bax蛋白及其mRNA表达水平的影响. 结果 米非司酮可以诱导人卵巢颗粒细胞发生凋亡;不同浓度米非司酮(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)处理24h后,颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平进行组织化学评分(HSCORE),分别为2.15±0.16、1.88±0.13和1.64±0.16,与对照组的2.51±0.16比较,差异有显著性(P<0.001);Bax蛋白表达则出现相反的变化,3组的HSCORE分别为1.85±0.10、2.00±0.18和2.29±0.20,与对照组的1.50±0.16比较,差异有显著性(P<0.001);而bcl-2和bax基因mRNA表达与对照组相比无明显改变(P>0.05). 结论 米非司酮能诱导人卵巢颗粒细胞凋亡;Bcl-2和Bax蛋白表达可能参与米非司酮诱导的颗粒细胞凋亡.     

不同补肾方法减轻化疗后卵巢功能损害的比较研究

目的: 探讨不同补肾方法对化疗导致的卵巢早衰(POF)大鼠卵巢功能的影响。方法: 以连续腹腔注射环磷酰胺(CTX)14 d的方法建立卵巢早衰模型。之后分别连续灌服补肾阴中药(六味地黄丸)和补肾阳中药(金匮肾气丸)复方28 d,以青年大鼠为空白对照,观察卵巢的形态学变化,并计数各级卵泡及黄体数目,酶联免疫法检测外周血雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)和抗卵巢抗体(AoAb)水平。结果: POF大鼠卵巢内各级卵泡及黄体数目减少,外周血E₂下降,FSH 升高,AoAb升高。补肾方药能使各级卵泡及黄体数增加,提高体内E₂水平,降低血FSH水平,抑制AoAb产生,尤以补肾阴组作用显著。结论: 补肾方药能减轻化疗导致的卵巢功能损害,尤其以补肾阴中药效果更显著。     

阿托伐他汀对碘普罗胺引起的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

 目的：观察糖尿病大鼠造影剂急性肾损伤(CI-AKI)发病过程中肾小管上皮细胞凋亡变化,并探讨阿托伐他汀对碘普罗胺引起的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法：腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,饲养8周后糖尿病大鼠随机分为6组：空白对照组(N组)、糖尿病对照组(DM组)、糖尿病+造影剂组(DM+CM组)、糖尿病+造影剂+5 mg·kg-1·d-1阿托伐他汀组(ATO1组)、糖尿病+造影剂+10 mg·kg-1·d-1阿托伐他汀组(ATO2组)和糖尿病+造影剂+30 mg·kg-1·d-1阿托伐他汀组(ATO3组)。注入碘普罗胺注射液24 h后收集尿标本,检测尿肌酐(UCr)以及24 h尿微量白蛋白(24 h-UAlb),记录24 h尿量并计算尿微量白蛋白排泄率(24 h-UAER)。注射碘普罗胺后48 h收集血标本,检测血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN),并计算内生肌酐清除率(CCr)。处死大鼠,摘取肾脏左肾行组织病理学分析,TUNEL检测凋亡情况及免疫组织化学法检测肾髓质Bax和Bcl-2蛋白的表达,并留取右肾,采用免疫印迹技术法检测肾髓质的Bcl-2及Bax蛋白表达情况。结果：与N和DM组比较,DM+CM组注入造影剂后SCr、BUN和24 h-UAER水平明显升高(P＜0.05),Ccr水平明显下降,肾小管上皮细胞的凋亡明显增加,肾髓质Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下降;与DM+CM组比较,ATO1、ATO2和ATO3组注入造影剂后SCr、BUN和24 h-UAER水平均有下降,CCr升高,肾小管上皮细胞的凋亡明显减少,肾髓质Bax蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达升高,且ATO3组的变化更为明显。结论: 碘普罗胺可诱导糖尿病大鼠肾小管上皮细胞的凋亡;阿托伐他汀能改善碘普罗胺引起的糖尿病大鼠肾功能损伤,此保护作用可能与之抑制碘普罗胺诱导的肾小管上皮细胞凋亡有关,且这种保护作用有剂量依赖性。     

Estrogen modulates Bcl-2 family protein expression in the sexually dimorphic nucleus of the preoptic area of postnatal rats

In the sexually dimorphic nucleus of the preoptic area (SDN-POA) of postnatal rats, apoptotic cells are detected more frequently in females than males. This sex difference is under the influence of aromatized androgen. We have reported that there are sex differences in the levels of Bcl-2 (femalemale) in the central division of the medial preoptic nucleus (MPNc), a significant component of the SDN-POA, followed by a sex difference in induction of apoptosis via caspase-3 activation (female>male). In the present study, we examined effects of estradiol benzoate (EB) on expression of Bcl-2 and Bax in the MPNc. Female rats were subcutaneously injected with EB (25 or 50 microg per head) on postnatal day 5. MPNc and caudate putamen (CP) tissues were obtained from EB-treated female and male rats on postnatal day 6. Protein levels of Bcl-2 and Bax were determined by Western blotting. In the MPNc of female rats, EB at a dose of 50 microg/head but not 25 microg/head significantly increased Bcl-2 protein level and decreased Bax protein level. The levels of Bcl-2 and Bax of female rats treated with 50 microg of EB were comparable to those of male rats. However, the protein levels of Bcl-2 and Bax in the CP did not change with EB treatment. These results suggest that estrogen up-regulates Bcl-2 expression and down-regulates Bax expression in the MPNc of postnatal rats. Effects of estrogen on the Bcl-2 family are presumably responsible for sex difference in postnatal apoptosis of the SDN-POA.     

Cyclopamine在佐剂性关节炎大鼠肾脏损伤中的保护作用及机制研究

目的：观察佐剂性关节炎(AA) 大鼠Hedgehog信号通路活化,并探讨Cyclopamine对大鼠关节炎症及肾脏损伤的影响。方法：将40只大鼠随机分为空白组、Cyclopamine组、AA+Cyclopamine组、AA模型组。采用弗氏完全佐剂建立AA大鼠模型,使用Cyclopamine腹腔注射,并通过测量足爪肿胀、全身炎症反应及关节炎症评分的方法进行半定量评价。HE染色检测各组大鼠肾脏病理改变,Western blot检测各组大鼠肾脏Gli1蛋白表达水平,免疫组织化学法染色检测各组大鼠肾脏TNF-α、IFN-γ、IL-6表达。结果：使用Cyclopamine后,能够明显降低AA大鼠足爪肿胀度和改善AA大鼠的关节炎指。与对照组相比,AA模型组大鼠Cr、BUN和脏器系数出现明显升高改变,差异有统计学意义,同时肾脏电镜病理检测发现AA模型组大鼠出现明显的病理改变,AA大鼠使用抑制剂Cyclopamine后能够明显降低肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和脏器系数改变。Western blot检测各组肾脏组织中Gli1的蛋白表达,发现对照组与Cyclopamine组相比Gli1蛋白表达无明显差异,AA模型组及AA+Cyclopamine组Gli1蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义,AA+Cyclopamine组与AA模型组相比,Gli1蛋白表达水平明显有下降趋势,差异有统计学意义;免疫组化法检测肾脏组织中促炎因子TNF-α、IFN-γ、IL-6表达改变情况并进行半定量评分,与空白组相比,AA模型组及AA+Cyclopamine组肾脏TN-α、IFN-γ表达明显升高,且使用Cyclopamine后,AA大鼠肾脏TNF-α、IFN-γ表达显著降低,AA模型组肾脏IL-6表达较对照组明显升高。结论：Cyclopamine能够明显改善AA大鼠的关节炎症和肾脏损伤程度,在此过程中Hh通路处于活化状态,并诱导炎性因子表达改变。     

自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏后大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨自噬水平变化对心脏骤停心肺复苏(CA/CPR)后大鼠海马神经元凋亡的影响。方法将40只大鼠随机分为假手术组(sham)、CA/CPR模型组(model)、雷帕霉素(Rapa)组(CA/CPR+Rapa)及3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(CA/CPR+3-MA)。采用呼气末夹闭气管窒息法复制大鼠CA/CPR动物模型,分别给予自噬激动剂Rapa 0.2 mg/kg及自噬抑制剂3-MA 10 mg/kg进行干预。采用神经功能缺陷评分(NDS)评价CA/CPR大鼠神经功能;用TUNEL染色法检测大鼠海马神经元的凋亡变化;用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠海马内微管蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1、Bax、Bcl-2及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,CA/CPR模型组大鼠NDS评分明显降低;海马神经元TUNEL染色阳性细胞数明显增多,凋亡率显著升高;海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达上调,Bcl-2表达下调(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,CA/CPR+Rapa大鼠NDS评分明显降低,而海马神经元凋亡率明显有所增加,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显上调,而Bcl-2表达则明显有所下降;CA/CPR+3-MA大鼠NDS评分明显升高,而海马神经元凋亡率下降,海马内LC3、Beclin-1、Caspase-3、Bax表达明显下调,而Bcl-2表达则有所升高(P<0.05,P<0.01)。结论 CA/CPR后自噬水平升高促进海马神经元凋亡,自噬水平降低抑制海马神经凋亡,两者相互作用共同参与CA/CPR的病理过程。     

下调SLP-2基因表达抑制脑胶质瘤细胞增殖及诱导凋亡的机制研究

目的：探讨下调人Stomatin like protein 2(SLP-2)基因表达对脑胶质瘤细胞增殖凋亡的影响。方法：SLP-2的靶向siRNA序列转染人脑胶质瘤U251细胞（SLP-2敲低组）,另设空白组（细胞未做任何处理）和阴性对照组（细胞转染无义siRNA序列）,转染48 h后Western blot检测各组细胞中SLP-2、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Notch1、Hes1的蛋白表达;CCK8检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：阴性对照组SLP-2的蛋白表达与空白组差异无统计学意义（P>0.05）,而SLP-2敲低组SLP-2的蛋白表达显著低于空白组（P<0.05）;阴性对照组细胞存活率、细胞凋亡率、IL-6和TNF-α的mRNA表达及Bcl-2、Bax、Notch1、Hes1蛋白表达与空白组差异无统计学意义（P>0.05）,而SLP-2敲低组细胞存活率、IL-6和TNF-α的mRNA表达及Bcl-2、Notch1、Hes1的蛋白表达显著低于空白组,细胞凋亡率及Bax蛋白表达显著高于空白组（P>0.05）。结论：下调SLP-2基因表达可显著抑制脑胶质瘤细胞增殖及诱导细胞的凋亡,下调炎症细胞因子IL-6和TNF-α的表达,其机制与抑制Notch1信号通路有关。