姜黄素对gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用及机制研究

目的:探讨姜黄素改善HIV-1包膜糖蛋白gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用及机制.方法:用gp120侧脑室灌注制备拟艾滋痴呆症动物模型,并用水迷宫实验观察侧脑室灌注gp120造成的大鼠认知功能的障碍. SD大鼠随机分为6组:对照组、假手术组、模型组、姜黄素低、中和高剂量治疗组.除对照组、假手术组外其余4组侧脑室缓慢注射5 μL的gp120,连续3 d.第4天开始,姜黄素低、中、高剂量治疗组分别给予50 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)、200 mg/(kg·d)的姜黄素灌胃,对照组、假手术组和模型组大鼠用双蒸水灌胃,连续灌胃14 d.然后各组大鼠进行水迷宫测试,并分组进行NMDA2B受体免疫组化染色.结果:50 ng/d的gp120侧脑室灌注3 d,可制备拟艾滋痴呆症动物模型. Morris水迷宫可见模型组大鼠逃避潜伏期与对照组相比明显延长(P<0.05),姜黄素低、中、高剂量治疗组大鼠的逃避潜伏期与模型组相比缩短,其中姜黄素低剂量组效果更好(P<0.05).免疫组化结果显示模型组大鼠海马内N-甲基天冬氨酸受体(NMDA2B)的表达与对照组相比有所降低(P<0.01),姜黄素各剂量治疗组NMDA2B受体的表达与模型组相比有所上调.结论:gp120侧脑室灌注可制备拟艾滋痴呆症动物模型,姜黄素具有改善侧脑室灌注gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与对抗NMDA2B受体表达下调有关.     

p62/NF-κB通路调控HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症的机制研究

目的：探讨自噬关键蛋白p62在HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症中的作用及相关信号分子机制。方法：野生型C57BL6小鼠随机分成4组：空白组、假手术组（人工脑脊液组）、模型组（gp120 V3环组）及gp120V3环+NF-κB活化阻滞剂BAY 11-7082组,每组12只。用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;免疫荧光染色检测海马和皮层Iba-1表达水平;ELISA法检测海马和皮层炎症因子的表达水平;Western blot检测海马和皮层相关蛋白表达水平。结果：（1）Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长（P<0.01）,平台区域停留时间及穿越平台次数显著减少（P<0.05）;与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组小鼠逃避潜伏期显著缩短（P<0.01）,平台区域停留时间及穿越平台次数显著增加（P<0.05）。（2）免疫荧光染色结果显示,与空白组相比,模型组海马和皮层Iba-1荧光强度显著增强（P<0.05）;与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组海马和皮层Iba-1荧...     

黄精对AD模型大鼠空间学习记忆及α7 nAChR表达的影响

目的:探讨黄精对AD模型大鼠空间学习记忆能力及前额叶皮质和海马α7 n AChR表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠随机分为四组:对照组、模型组、黄精低剂量组、黄精高剂量组。皮下注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35构建AD模型大鼠,黄精低、高剂量组同时每天分别给予低剂量(15 g/kg/d)或高剂量(30g/kg/d)的黄精水煎剂灌胃治疗,连续6周。Morris水迷宫测试大鼠的空间学习和记忆能力;免疫组织化学技术检测大鼠前额叶皮质和海马α7 n AChR的表达。结果:Morris水迷宫结果显示,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)与对照组相比明显延长(P0.01),在目标象限游泳时间和穿越站台次数减少(P0.01);与模型组比较,黄精低剂量组、高剂量组的EL缩短(P0.01),在目标象限游泳时间和穿越站台次数增多(P0.01);黄精高剂量组的EL较低剂量组缩短(P0.05或P0.01),在目标象限游泳时间和穿越站台次数差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,模型组大鼠前额叶皮质和海马α7 n AChR表达水平较对照组明显降低(P0.01);黄精低剂量组、高剂量组大鼠前额叶皮质和海马α7n AChR表达水平较模型组明显上调(P0.05或P0.01);黄精高剂量组大鼠α7 n AChR表达水平较低剂量组大鼠增多(P0.05)。结论:黄精可以明显改善AD模型大鼠的空间学习记忆能力,其作用机制可能与调节α7 n AChR表达有关。     

冈田酸对大鼠学习记忆功能及脑内ChAT和GFAP表达的影响

为了研究冈田酸(OA)对大鼠认知能力的影响及其可能的机制,采用冈田酸进行海马CA1区微量多次注射,通过Morris水迷宫观察大鼠行为学变化,免疫组化法观察海马及皮层中ChAT和GFAP的表达。结果发现:OA注射后,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P<0.01),原站台象限活动时间明显缩短(P<0.01),穿越原站台次数明显减少(P<0.01)。海马及皮层中ChAT表达减少(P<0.01),而GFAP阳性反应物表达明显增多(P<0.01)。以上结果提示:OA的神经毒性可以诱导大鼠学习记忆能力的降低,其可能机制是OA导致胆碱能神经元损伤,功能低下,以及反应性星形胶质细胞的增生肥大。     

纳洛酮对蛛网膜下腔出血早期脑损伤大鼠学习记忆能力及海马区凋亡的影响

目的:探究纳洛酮(Naloxone)对蛛网膜下腔出血(SAH)早期脑损伤大鼠学习记忆及海马区凋亡的影响。方法:将雄性成年清洁级SD大鼠随机分为Sham组、EBI组、Naloxone组,每组各8只。采用经颈外动脉颈内动脉穿刺法建立SAH大鼠早期脑损伤模型,造模成功后,Naloxone组给予纳洛酮(1.0mg/kg腹腔注射1次/12h),Sham组和EBI组同法注射等量生理盐水,干预后72h穿梭箱记录大鼠行为轨迹并分析,海马区组织进行HE染色及TUNEL染色,观察海马区细胞形态及凋亡情况。结果:与Sham组比较,EBI组大鼠穿梭箱逃避反应次数减少(P<0.05),逃避反应时间延长(P<0.05),海马区正常神经细胞数目减少(P<0.05),TUNEL染色示凋亡细胞增多(P<0.05);与EBI组比较,Naloxone组逃避反应次数增多(P<0.05),逃避反应时间减少(P<0.05),海马区正常神经细胞稍多(P<0.05),TUNEL染色示凋亡细胞减少(P<0.05)。结论:Naloxone通过减少海马区神经细胞凋亡,改善脑损伤,从而改善SA...     

自噬对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的影响

 目的:观察哺乳动物雷帕雷素靶蛋白（mTOR）依赖性自噬信号转导通路对HIV-1 gp120V3环介导的海马神经元L-型钙离子通道电流的影响。方法：取出生1 d内的乳鼠海马神经元原代培养7 d后用于实验。实验分为2个平行实验组,即空白对照组、gp120V3组、自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）组和gp120V3+3-MA组;空白对照组、gp120V3组、自噬激动剂雷帕雷素（rapamycin)组和gp120V3+rapamycin组。以膜片钳技术记录海马神经元的L型钙离子通道电流。结果：gp120V3组及3-MA组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;gp120V3+3-MA组与gp120V3组比较,L-型钙离子通道电流密度增大（P<0.05）;rapamycin组与空白对照组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）;gp120V3+rapamycin组与gp120V3组比较,L型钙离子通道电流密度减小（P<0.05）。结论：从电生理角度证明,自噬可能参与了HIV-1gp120V3环介导的海马神经元L型钙离子通道电流的改变。     

吗啡诱导的CPP复燃大鼠前额叶皮层和海马区EAAT3蛋白表达的变化

目的: 观察吗啡诱导的条件性位置偏爱(CPP)复燃大鼠前额叶皮层和海马区兴奋性氨基酸转运蛋白3(EAAT3)的表达变化,探讨前脑皮层及海马区EAAT3在阿片类药物复吸过程中的作用。方法: 成年雄性SD大鼠40只,随机分为对照组(control)、CPP建立(Es)、消退(Ex)、复燃2 h(Re2)、复燃4 h(Re4)组,每组8只。腹腔注射吗啡(10 mg/kg)连续10 d,建立CPP模型;停止给药使CPP逐渐消退;单次腹腔注射吗啡 2.5 mg/kg诱导已消退的CPP复燃。Western blotting检测各组大鼠前额叶皮层和海马区EAAT3蛋白表达变化。 结果: (1)腹腔注射恒定剂量的吗啡10 mg/kg, Es组大鼠在伴药箱的停留时间比control组明显延长(P<0.05),成功建立CPP模型;待CPP消退后,吗啡2.5 mg/kg腹腔注射诱发Re2和Re4组大鼠在伴药箱的停留时间再次比control组明显延长(P<0.05),CPP复燃。(2)Es组前额叶皮层EAAT3比control组表达减少(P<0.05),CPP消退的Ex组表达回升,在Re4组表达再次减少(P<0.05)。(3)海马区EAAT3在各组表达水平未见明显变化(P>0.05);而Es、Ex组海马CA1区EAAT3比control组表达明显升高(P<0.05)。 结论: 吗啡诱导CPP复燃时,前额叶皮层EAAT3的蛋白表达水平降低,重现CPP建立时的变化,提示阿片类药物复吸行为的形成可能与前脑皮层EAAT3的表达减少有关。     

旱莲草对老年痴呆模型大鼠空间学习记忆及海马神经元突触可塑性的影响

目的:观察旱莲草对D-半乳糖联合β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)致老年痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠空间学习记忆及海马神经元突触可塑性的影响。方法:选用健康成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、药物低剂量组、高剂量组,每组11只。采用皮下注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35构建痴呆模型大鼠,同时每天给予低剂量(8 g/kg)或高剂量(24 g/kg)的旱莲草水提物灌胃治疗8周。用药结束后,用Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆功能,采用高频刺激(HFS)Schaffer侧支,在同侧海马CA1区诱导长时程增强(LTP)的方法检测大鼠海马神经元突触可塑性的变化。结果:Morris水迷宫实验结果显示:与对照组相比,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)明显延长(P<0.01)、平台所在象限的距离百分比明显减低(P<0.01);药物低剂量组、高剂量组的EL与模型组相比有明显缩短(P<0.05),平台所在象限的距离百分比明显增多(P<0.01);药物高剂量组的EL较低剂量组缩短(P<0.05),平台所在象限的距离百分比增多(P<0.05)。模型组与对照组相比海马CA1区LTP幅度显著降低(P<0.01);药物低剂量组与模型组比较,PS幅度差异不明显(P>0.05);而药物高剂量组PS幅度明显高于模型组和低剂量组,能减轻D-半乳糖联合Aβ25-35对海马CA1区LTP的抑制作用,改善突触功能的可塑性(P<0.01)。结论:旱莲草对老年痴呆模型大鼠空间学习记忆功能具有改善作用,其机制之一可能与提高大鼠海马CA1区的LTP,明显改善突触的可塑性有关。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠空间学习记忆和海马NMDAR1表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆(VaD)大鼠空间学习记忆和海马N-甲基-D-天冬氨酸型离子型谷氨酸受体1型亚单位(NMDAR1)表达的影响。方法:采用四血管阻断法制备VaD大鼠模型,设立假手术组、模型组、尼莫地平组(10 mg/kg/d,灌胃30 d)和银杏叶提取物组(50 mg/kg/d,灌胃30 d)。利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆的改变,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠海马神经元NMDAR1蛋白水平的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NMDAR1的mRNA表达变化。结果:与假手术组相比,模型组大鼠水迷宫逃避潜伏期延长,撤后台靶象限平均探索次数减少(P<0.05),银杏叶提取物明显改善了VaD大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与银杏叶提取物组之间比较无统计学差异(P>0.05)。模型组大鼠的NMDAR1蛋白及其mRNA在海马CA1区的表达水平较假手术组明显降低(P<0.05);银杏叶提取物组大鼠海马的NMDAR1蛋白及mRNA表达水平较模型组明显升高(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可以减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤,这可能与上调海马组织内NMDAR1蛋白及mRNA的表达密切相关。     

吸食安钠咖对大鼠学习记忆能力的影响及其机制研究

目的 探讨吸食安钠咖对大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响。 方法 取33只SD大鼠随机分为对照组（C）、安钠咖小剂量组（A-LD）和安钠咖大剂量组（A-HD）,每组11只,连续60 d灌胃给药1次/日（C组予生理盐水1 mL,A-LD组予安钠咖溶液60 mg/kg,A-HD组予安钠咖溶液120 mg/kg）。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和Western blot检测海马突触素（synaptophysin,SYN）和突触后致密蛋白95（postsynaptic density 95,PSD95）表达,Golgi染色检测海马CA1区树突棘密度,透射电镜和体视学方法检测海马CA1区突触数密度（Nv）和面密度（Sv）。 结果 Morris水迷宫实验显示,与C组比较,A-LD组大鼠逃避潜伏期、目标象限停留时间和穿越平台次数无统计学差异（P>0.05）,A-HD组逃避潜伏期明显延长,目标象限停留时间和穿越平台次数明显减少,差异具有统计学意义（P<0.01）。免疫组织化学染色和Western blot结果显示,与C组比较,A-LD组海马SYN和PSD95表达无统计学差异（P>0.05）,A-HD组海马SYN和PSD95表达明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）。Golgi染色和透射电镜技术结果显示,与C组比较,A-LD组树突棘密度、Nv和Sv无统计学差异（P>0.05）,A-HD组树突棘密度、Nv和Sv都明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 大剂量吸食安钠咖可降低大鼠海马突触可塑性,导致学习记忆能力受损。     

粒细胞集落刺激因子与血管性痴呆大鼠海马凋亡相关蛋白

背景：研究表明粒细胞集落刺激因子在保护神经元免受各种因素所致的神经元变性和死亡中发挥重要作用。 目的：观察粒细胞集落刺激因子对血管性痴呆大鼠海马组织神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。 方法：采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立SD大鼠血管性痴呆模型,以未进行血管结扎的大鼠作为假手术组。造模成功后,治疗组大鼠每日皮下注射粒细胞集落刺激因子50 μg/kg,假手术组和模型组注射等量的生理盐水。分别于造模后7,14,28 d取大鼠海马组织用于检测。 结果与结论：Morris水迷宫结果显示,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P < 0.01),而治疗组各时间点大鼠逃避潜伏期较模型组缩短(P < 0.01);TUNEL及免疫组织化学结果显示,与模型组比较,治疗组各时间点大鼠海马TUNEL及Bax阳性细胞吸光度值明显减小(P < 0.01),Bcl-2阳性细胞吸光度值明显增加(P < 0.01)。说明粒细胞集落刺激因子可提高血管性痴呆大鼠海马Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,减少神经细胞凋亡,改善大鼠的学习记忆功能。     

雌激素与葛根素组合治疗去卵巢大鼠骨症的最佳剂量

背景：小剂量的葛根素联合雌二醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗效果与单独使用较大剂量的葛根素或较大剂量的雌二醇效果相近。 目的：寻找治疗Ⅰ型骨质疏松症最佳的雌二醇和葛根素的剂量搭配。 方法：64只健康雌性大白鼠等分为假手术组、去卵巢模型组、葛根素-50组、雌二醇-200组、葛根素+雌二醇-5,50,100,150组。除假手术组外,其余大鼠均建立去卵巢动物模型。葛根素-50组大鼠皮下注射葛根素50 mg/kg,1次/d;雌二醇-200组大鼠皮下注射雌二醇200 μg/kg,2次/周;葛根素+雌二醇-5,50,100,150组大鼠皮下注射葛根素25 mg/kg,1次/d同时分别注射雌二醇5,50,100,150 μg/kg,2次/周。 结果与结论：去卵巢模型组大鼠骨密度和骨钙、骨磷水平明显低于假手术组(P < 0.05),骨组织呈骨质疏松的病理改变;葛根素和/或雌二醇治疗10,20周后骨密度和骨钙、骨磷水平明显升高(P < 0.05),其中葛根素+雌二醇-100组治疗去卵巢大鼠骨质疏松的效果最为明显,提示葛根素25 mg/kg,1次/d+雌二醇100 μg/kg,2次/周是治疗去卵巢大鼠骨质疏松的最佳搭配剂量。     

脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞的定向分化

背景：有研究表明脑源性神经营养因子可以维持神经元的存活、影响神经元的迁移,在体外可以促进神经干细胞的存活和分化。 目的：探讨脑源性神经营养因子对低血糖幼鼠海马神经干细胞定向分化的作用。 方法：取新生1 d低血糖模型大鼠脑海马组织进行原代、传代及单细胞克隆培养。培养的细胞一部分进行神经干细胞鉴定,另一部分依据培养液中脑源性神经营养因子质量浓度的不同将单克隆细胞分为0,100,200 μg/L组,取第4代细胞进行诱导分化,行神经元特异性烯醇化酶免疫荧光染色,计数阳性细胞比例。 结果与结论：单克隆培养后3组细胞均呈巢蛋白阳性,诱导分化后细胞呈行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性;100,200 μg/L组神经干细胞生长较快,且分化为神经元特异性烯醇化酶阳性细胞比例较高(P < 0.05),但两组神经干细胞之间差异无显著性意义(P > 0.05)。提示脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞向神经元定向分化。     

葛根素联合雌二醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

背景：雌激素治疗绝经后骨质疏松症产生的不良反应较大。 目的：观察小剂量葛根素联合雌二醇对去卵巢大鼠骨组织的影响。 方法：120只健康雌性大白鼠等分成只切除卵巢旁的一小块脂肪垫的假手术组和切除双侧卵巢的去卵巢模型组、葛根素组、雌二醇组及葛根素+雌二醇组。1周后葛根素组、雌二醇组和雌二醇+葛根素组分别皮下注射葛根素(50 mg/kg,1次/d)、雌二醇(200 μg/kg,2次/周)和雌二醇(100 μg/kg,2次/周)+葛根素(25 mg/kg,1次/d)。 结果与结论：去卵巢模型组大鼠骨组织稀疏,骨钙、磷水平和骨密度明显低于假手术组 (P < 0.01),而经雌二醇和/或葛根素治疗后大鼠骨组织形态明显改善、骨钙、磷水平和骨密度明显升高。其中小剂量的葛根素联合雌二醇治疗与较大剂量的葛根素或雌二醇治疗效果接近。提示较小剂量的雌二醇与葛根素联合治疗也可对去卵巢大鼠骨质疏松症产生良好的治疗效果。     

HIV-1包膜糖蛋白gp120对大鼠海马脑片电生理特性的影响

目的探讨人类免疫缺陷病毒I型(HIV-1)的包膜糖蛋白gp120对大鼠海马脑片CA1区神经元电生理特性及突触传递的影响。方法用盲法全细胞记录技术,观察gp120对大鼠海马脑片CA1区神经元电生理特性及对高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠海马长时程增强效应(LTP)的影响。结果①在电流钳,gp120可使终末去极化电流激发快速动作电位的数目增加;②在电压钳,gp120对大鼠海马CA1区神经元的全细胞电流无明显作用;③将gp120(100 pmol/L)与海马脑片共孵育1h后,在钳制电压为-60 mV时,发现HFS后海马CA1区的兴奋性突触后电流(EPSC)显著减小,LTP的强度减少到(108.5±8.0)%(n=11,P<0.01)。结论gp120可使海马神经元的兴奋性增加,并可能通过抑制海马CA1区的LTP诱发参与艾滋病痴呆(HIV-1 associated dementia,HAD)的病理生理过程。     

SKF 83566 attenuates the effects of ghrelin on performance in the object location memory task

Increasing research implicates ghrelin, a metabolic signaling peptide, in memory processes including acquisition, consolidation, and retention. The present study investigated the effects of ghrelin on spatial memory acquisition by utilizing the object location memory task paradigm. Given the co-expression of ghrelin and dopamine D₁ receptors within hippocampal neurons, we examined a potential interaction between these two systems on memory performance. When injected into the dorsal third ventricle (D3V) of male Sprague-Dawley rats, proximal to hippocampal tissue, ghrelin (500 pmol) increased the amount of time spent with objects in novel locations. This effect was completely reversed by the D₁ antagonist SKF 83566 (100 μg/kg IP), although when administered alone, the antagonist had no effect on task performance (10-100 μg/kg). We also examined the feeding effects of D3V ghrelin and found that the peptide reliably increased food intake (500 pmol) but that this effect was not blocked by SKF 83566 (100 μg/kg). When given alone, SKF 83566 did not alter food intake (10-100 μg/kg). Our findings indicate that, in addition to an orexigenic effect, ghrelin improves acquisition of spatial location memories. Furthermore, D₁ receptor activation is necessary for ghrelin to improve the encoding of spatial memories but does not impact the increase in food intake elicited by the peptide.     

App17肽防治去卵巢大鼠海马神经细胞的凋亡

目的:观察去卵巢大鼠几种神经元凋亡相关蛋白的表达,并用TUNEL试剂盒检测,研究缺乏雌激素是否引起神经元凋亡;评估App17肽是否能改善去卵巢大鼠的神经细胞凋亡,初步探讨App17肽的神经保护作用机制。方法:雌性Wistar大鼠随机分3组:假手术组(shamcontrol组),卵巢去势对照组(OVX组),App17肽实验组(17P+OVX组)。Sham组做假手术,OVX组和17P+OVX组做双侧卵巢切除术。17P+OVX组从卵巢去势第7周开始用App17肽治疗6周,用免疫组化和Westernblot方法观察AIF、Bax、Bcl-2的表达,用TUNEL法检测凋亡情况。结果:免疫组织化学和Westernblot结果表明App17肽实验组AIF、Bax表达明显少于去卵巢组;Bcl-2在App17肽实验组的表达明显高于去卵巢组。TUNEL结果表明App17肽实验组凋亡细胞明显少于去卵巢组。结论:雌激素缺乏引起去卵巢大鼠海马和皮层神经细胞凋亡相关蛋白改变和出现凋亡细胞,App17肽具有明显的防治作用。     

Functional roles of the V3 hypervariable region of HIV-1 gp160 in the processing of gp160 and in the formation of syncytia in CD4+ cells.

To study the roles of the V3 hypervariable region (amino acid residues 301-336) of the HIV-1 envelope glycoprotein (gp160) during infection, we constructed recombinant vaccinia viruses that expressed either wild-type gp160 (v-env10) or mutant gp160 in which the V3 region was deleted (v-dl29.1 and v-dl29.2). In v-dl29.1 the V3 loop, formed by disulfide bonding between cysteine residues 301 and 336, was deleted from cys301 to cys336 (inclusive) and replaced by one serine residue. In v-dl29.2 the V3 loop was deleted from arg303 to ala334 and replaced by three residues: gly-ala-gly. Cells infected with all three recombinant vaccinia viruses expressed gp160 on the cell surface, but v-dl29.1-derived gp160 was not cleaved into gp120 and gp41 and did not bind the CD4 glycoprotein. In contrast, gp160 produced by recombinant v-dl29.2 was cleaved normally, and the mutant gp120 produced was secreted and retained binding activity to CD4+ cells. However, both mutants failed to induce syncytia in HeLa CD4+ cells. Thus a disulfide loop at the V3 portion of gp160 is required for cleavage into gp120 and gp41, presumably because the loop is required for proper tertiary structure. The sequence within the V3 loop, however, is not required for cleavage and secretion of gp160, or for binding to CD4+, but this region is essential for gp120-mediated syncytia formation.