肌肉特异性微小RNA和成肌调节因子在C2C12细胞成肌分化 过程中的表达

背景：骨骼肌细胞的增殖与分化是由多因素参与的受严格调控的复杂生物学过程,其中,微小RNA和成肌调节因子作为调控基因表达的重要分子在成肌分化过程中起着关键的调控作用。 目的：探讨微小RNA-1,133,206在C2C12细胞成肌分化过程中的表达变化及成肌调节因子的调控作用。 方法：用含体积分数2%马血清的高糖DMEM培养基诱导C2C12细胞体外成肌分化,分别诱导分化后0,1,2,3,4,6 d时提取细胞总RNA,用于real time RT-PCR检测。 结果与结论：倒置显微镜观察和免疫荧光染色显示诱导C2C12细胞分化后3 d开始有肌管和肌球蛋白重链阳性细胞形成,并随诱导时间延长而增多。Real time RT-PCR检测显示,C2C12细胞成肌分化过程中,微小RNA-1,133,206与成肌调节因子MyoD和myogenin mRNA的表达水平均先上升后又恢复至接近分化前水平,而pax7 mRNA的表达则无明显变化。提示肌肉特异性微小RNA及成肌调节因子可能对C2C12细胞的成肌分化发挥一定的调控作用。     

H9C2细胞培养液诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

背景:文献报道间充质干细胞经体外化学药物诱导或自体移植体内诱导或模拟心肌样微环境体外诱导等方法可不同程度的诱导心肌细胞分化,但这些方法诱导率低、操作复杂、毒副作用大。目的:验证心肌细胞株H9C2细胞培养液对骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的诱导作用。方法:运用全骨髓贴壁筛选法分离培养大鼠间充质干细胞,制备H9C2细胞培养液作为诱导培养液,将间充质干细胞诱导培养1,3,5,7 d;以单独10%F12-DMEM培养液培养的H9C2细胞为阳性对照组;单独10%F12-DMEM培养液培养的间充质干细胞为阴性对照组。用免疫荧光法和western-blot检测其肌钙蛋白T、心肌细胞结蛋白的表达,用实时荧光定量检测其心肌细胞特征性基因α-肌球蛋白重链和β-肌球蛋白重链mRNA的表达。结果与结论:H9C2细胞培养液诱导间充质干细胞培养7 d,间充质干细胞增殖分化细胞中肌钙蛋白T阳性细胞达(16±7)%,显著高于对照组(P0.05);与阴性对照组比较,western-blot检测诱导培养间充质干细胞后分化细胞肌钙蛋白T表达明显上调(P0.05),结蛋白表达明显上调(P0.05);RT-PCR检测分化细胞α-肌球蛋白重链与β-肌球蛋白重链mRNA表达均上调(P0.05)。结果提示H9C2细胞培养液能诱导间充质干细胞向心肌样细胞分化。     

尼古丁对大鼠气道平滑肌细胞内钙离子浓度及膜瞬时受体电位通道mRNA表达的影响

目的 观察尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)后细胞内基础钙离子浓度的改变及平滑肌细胞膜瞬时受体电位通道(TRPC1,TPRC6)mRNA表达水平变化.方法 不同浓度尼古丁[O(对照组)、10、20、50、100μg/L]刺激大鼠气道平滑肌细胞,作用24及48 h后,采用Incyte细胞内钙浓度检测系统观察细胞内钙离子浓度的变化.提取细胞总RNA,反转录成cDNA,实时定量PCR方法检测细胞TRPC1和TRPC6 mRNA表达量变化.结果 20、50、100μg/L的尼古丁刺激大鼠气道平滑肌细24和48 h后,细胞内基础钙离子浓度均较对照组明显升高[(117.99±19.39)、(122.89±17.91)、(124.70±17.93)nmol/L比(85.85±12.60)nmol/L;(142.07±18.99)、(162.27±19.91)、(207.30±26.56)nmol/L比(98.04±2.39)nmol/L,均P＜0.05].而细胞中TRPC1和TPRC6 mRNA相对浓度也均较对照组显著升高(P＜0.05),其中,100μg/L尼古丁刺激气道平滑肌细胞48 h后,细胞内基础钙离子浓度和TRPC6 mRNA相对表达量均较刺激24 h后的明显升高(P＜0.05).结论 尼古丁可能通过上调大鼠气道平滑肌细胞膜瞬时受体电位通道TRPC1和TPRC6的表达而导致大鼠气道平滑肌细胞内基础钙离子浓度增加.     

骨形态发生蛋白2诱导成骨分化与长链非编码RNA AK007000的影响

背景：长链非编码RNA调控一系列生理过程,被认为在发育、分化和代谢的基因调控中发挥重要的作用。MC3T3-E1、C2C12和C3H10T1/2细胞可向骨细胞、肌细胞等多个方向分化,用于肌肉骨骼等运动系统相关疾病的研究。 目的：观察长链非编码RNA在骨形态发生蛋白2诱导成骨分化中的作用。 方法：对MC3T3-E1、C2C12和C3H10T1/2细胞在骨形态发生蛋白2诱导下,成骨分化过程中的长链非编码RNA表达变化进行芯片分析,找到在3株细胞中同时变化的长链非编码RNA,siRNA干扰方法观察长链非编码RNA对骨形态发生蛋白2诱导成骨分化的影响,采用Real-Time PCR与碱性磷酸酶染色检测成骨相关指标。 结果与结论：骨形态发生蛋白2诱导MC3T3-E1、C2C12和C3H10T1/2成骨分化过程中,相应成骨指标增高,成肌指标肌细胞生成素降低。筛选出骨形态发生蛋白2诱导成骨分化过程中出发挥作用的长链非编码RNA AK007000。AK007000被干扰后成骨分化指标碱性磷酸酶、骨钙素、RUNX2、SP7表达下降,肌细胞生成素表达上升。因此,AK007000可能具有促进成骨抑制成肌作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

dt_2-cAMP,IFN-γ和PMA对U937胞浆Ca~(2 )和酪氨酸激酶的影响

目的探讨dt2 cAMP ,PMA和IFN γ对U937细胞C5aR表达的影响 ,以及rhC5a刺激受dt2 cAMP ,PMA和IFN γ分化的U937细胞后 ,其胞浆Ca2 浓度的变化情况。方法用流式细胞仪分析胞膜C5aR和胞浆蛋白酪氨酸激酶的表达 ;荧光发光法测定胞浆Ca2 浓度的变化。结果dt2 cAMP ,PMA和IFN γ等可不同程度地上调C5aR表达。用0.5mmol/L的dt2 cAMP就足以上调U937细胞C5aR分子 ,10～20nmol/L浓度范围的PMA对C5aR表达的上调没有明显差异 ,IFN γ也可上调U937细胞上C5aR的表达。此外 ,rhC5a刺激受dt2 cAMP ,PMA和IFN γ分化的U937细胞 ,可使其细胞浆Ca2 浓度上升。蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂Genistein可明显抑制rhC5a所致U937细胞胞浆Ca2 浓度升高。结论PTK可能参与了C5a C5aR相互作用过程中的信号转导。     

3种方法诱导猪去分化脂肪细胞成肌分化效果的比较

目的 采用3种方法比较诱导猪去分化脂肪细胞（DA）成肌分化的效果，旨在筛选诱导猪DA成肌分化的较优方法。方法 采用糖皮质激素、半乳糖凝集素-1（galectin-1）法、5-氮胞苷（5-aza）分别诱导猪DA成肌分化，于培养6 d、15 d和21 d后，并分别用倒置显微镜观察分化的细胞形态；诱导21 d后用间接免疫荧光法检测成肌特异蛋白结蛋白（desmin）和肌球蛋白重链（MyHC）的表达，用Real-time PCR检测肌细胞生成素（MyoG） mRNA的表达,每种方法诱导3组，每组重复检测3次。 结果 诱导细胞的形态学观察显示，galectin-1法诱导的肌管形态最佳，多核细胞数量也最多；5-aza法次之，但诱导过程中细胞死亡率较高；糖皮质激素法诱导的细胞形态不规则，多形成放射状突起，而且出现较多成脂分化细胞。间接免疫荧光分析显示，galectin-1法和糖皮质激素法诱导的细胞Desmin、MyHC和MyoG mRNA都呈强阳性表达，而在5-aza法诱导的细胞这两种蛋白和基因都呈弱表达。 结论 从诱导细胞的肌管形态，分化的纯度，生存能力，特异蛋白和基因的表达量等综合判断，诱导猪DA成肌分化，galectin-1法优于糖皮质激素法和5-aza法。     

IRAK-4对成骨细胞分化BMP-Smad通道的影响

目的　探讨白细胞介素-l受体相关激酶-4对成骨细胞分化过程BMP-Smad通道的影响。 方法　 C2C12细胞是肌卫星细胞,不同培养条件下有不同分化潜能。它可分化为成骨细胞,是研究体外成骨细胞分化的理想模型。C2C12细胞培养于培养板中,随机分为3组,每组加入不同培养物,模拟干细胞向成骨细胞分化过程中受到的不同刺激。检测ALP活性、Smad1 mRNA、P-Smad1蛋白表达,观察不同刺激对成骨细胞分化的影响。 结果　与正常对照组比较,BMP-2组ALP活性明显增加,与BMP-2组比,BMP2+IRAK-4siRNA转染组ALP活性增加,BMP2+IRAK-4siRNA转染组和BMP-2组比Smadl 　mRNA的表达只是轻微增加,P-Smad1蛋白表达明显增加。 结论　BMP-2可增强C2C12细胞成骨化,IRAK-4可抑制C2C12细胞被BMP-2诱导的成骨化,其机制可能是通过减弱BMP-Smad通道中Smad1磷酸化水平实现的。     

骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中长链非编码RNA的作用

背景：人类长链非编码RNA是现今的研究热点,已有研究报道其在肿瘤发生中的作用机制,但其在成骨分化方面的机制并不明确。 目的：观察人类长链非编码RNA在经骨形态发生蛋白2诱导小鼠C3H10T1/2细胞成骨分化中的作用,并探讨其分子机制。 方法：首先进行碱性磷酸酶染色和成骨指标基因检测。对C3H10T1/2细胞在骨形态发生蛋白2诱导下的成骨分化过程长链非编码RNA表达变化进行芯片分析。采用高通量测序比较骨形态发生蛋白2诱导组和未经骨形态发生蛋白2诱导组的表达变化,筛选出表达下降的基因。过表达相应长链非编码RNA后观察对骨形态发生蛋白2诱导成骨分化的影响。 结果与结论：骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2细胞导致碱性磷酸酶活性增加。骨形态发生蛋白2诱导72 h后,碱性磷酸酶、Id1、骨钙素、Runx2、sp7表达上升(P < 0.05)。未诱导C3H10T1/2细胞与骨形态发生蛋白2诱导细胞芯片杂交后结果比较,下降达1.5倍的长链非编码RNAs有24条,其中只有AK035085有内含子。与未过表达AK035085的对照组相比,骨形态发生蛋白2诱导72 h后AK035085过表达的C3H10T1/2细胞碱性磷酸酶、Id1、骨钙素、Runx2、sp7表达均下降(P < 0.05)。提示骨形态发生蛋白2可刺激C3H10T1/2细胞发生成骨分化,AK035085可能对C3H10T1/2细胞的成骨分化存在抑制作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

Sirt6通过调控P53/SLC7A11/GPX4通路抑制骨骼肌细胞铁死亡

目的：探讨骨骼肌细胞铁死亡的发生及sirtuin 6 (Sirt6)对其调控的分子机制。方法：将C2C12小鼠成肌细胞分为对照组、erastin(Era；铁死亡诱导剂)组、Era+ferrostatin-1(铁死亡拮抗剂)组、Era+MDL-800(Sirt6激动剂)组和Era+OSS-128167(Sirt6抑制剂)组；通过细胞活力和C2C12成肌细胞肌源性分化情况观察铁死亡诱导剂及拮抗剂的影响；RT-qPCR和Western blot测定成肌细胞及肌管中Sirt6、肌萎缩标志物、铁死亡标志物的mRNA及蛋白表达水平；进一步检测P53蛋白乙酰化水平、胞内亚铁离子(Fe²⁺)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)及脂质过氧化指标Liperfluo；免疫荧光法检测肌管分化标志物肌球蛋白重链(MHC)荧光信号。结果：Era降低成肌细胞活力和肌管分化质量，伴有Sirt6的mRNA和蛋白水平下降(P<0.05)，肌萎缩标志物肌肉环指蛋白1(MuRF1)和肌萎缩F盒蛋白(MAFbx)表达增加(P<0.05)。激活Sirt6可抑制P53蛋白第381位赖氨酸乙酰化，...     

过表达长链非编码RNA Gm16104影响C3H10T1/2间充质干细胞的成骨分化

背景：间充质干细胞的成骨分化过程受多种分子调控,长链非编码RNA因可参与调控多种生物学过程而备受关注,但其对间充质干细胞成骨分化的调控作用尚未得到充分探索。目的：探讨长链非编码RNA Gm16104对C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化的影响。方法：采用骨形态发生蛋白2诱导C3H10T1/2间充质干细胞成骨分化,成骨诱导5 d进行碱性磷酸酶染色检测细胞成骨分化情况,成骨分化第0,1,3,5天,采用qRT-PCR检测Alpl和Gm16104的表达水平。转染Gm16104过表达质粒然后诱导成骨分化,成骨诱导4 d进行碱性磷酸酶染色和qRT-PCR检测细胞的成骨分化状况,Western blot检测成骨相关信号通路蛋白的表达水平。结果与结论：(1)成骨诱导5 d后,碱性磷酸酶活性显著提高;(2)与第0天比较,成骨诱导第1,3,5天,成骨标志基因Alpl表达升高,而Gm16104的表达水平下调;(3)pcDNA-Gm16104质粒转染C3H10T1/2细胞后Gm16104表达水平显著增加;(4)过表达Gm16104可抑制细胞的碱性磷酸酶活性以及成骨标志基因Alpl和成骨相关转录因子Oster...     

敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ抑制干扰素-γ诱导C2C12细胞免疫分子的表达

目的 探究敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ（CaMKⅣ）基因对炎性培养条件下C2C12细胞免疫分子表达的影响。 方法 采用慢病毒基因干扰技术敲减C2C12细胞的CaMKⅣ基因,以2%马血清将C2C12细胞分化成肌管,以干扰素-γ（IFN-γ）刺激C2C12细胞,采用Real-time PCR和Western blotting检测CaMKⅣ的表达,采用Western blotting和免疫荧光检测免疫分子主要组织相容性复合体（MHC） class Ⅰ(H-2K^b)、MHC class Ⅱ(H2-Ea)、Toll样受体3（TLR3）的表达,采用Real-time检测肌细胞分泌型促炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α、巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1α和单核细胞趋化因子（MCP）-1的基因表达。 结果 IFN-γ可诱导成肌干细胞以及分化肌管表达或上调表达免疫分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、TLR3,同时上调C2C12细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MIP-1α和MCP-1的基因表达量;敲减CaMKⅣ基因导致上述上调趋势被抑制。 结论 敲减CaMKⅣ基因可有效抑制IFN-γ诱导的免疫分子的表达,可能提示CaMKⅣ参与调节肌细胞的免疫学特性。     

Glutathione depletion impairs myogenic differentiation of murine skeletal muscle C2C12 cells through sustained NF-kappaB activation

Skeletal muscle differentation is a complex process regulated at multiple levels. This study addressed the effect of glutathione (GSH) depletion on the transition of murine skeletal muscle C2C12 myoblasts into myocytes induced by growth factor inactivation. Cellular GSH levels increased within 24 hours on myogenic stimulation of myoblasts due to enhanced GSH synthetic rate accounted for by stimulated glutamate-L-cysteine ligase (also known as gamma-glutamylcysteine synthetase) activity. In contrast, the synthesis rate of GSH using gamma-glutamylcysteine and glutamate as precursors, which reflects the activity of the GSH synthetase, did not change during differentiation. The stimulation of GSH stores preceded the myogenic differentiation of C2C12 myoblasts monitored by expression of muscle-specific genes, creatine kinase (CK), myosin heavy chain (MyHC), and MyoD. The pattern of DNA binding activity of NF-kappaB and AP-1 in differentiating cells was similar both displaying an activation peak at 24 hours after myogenic stimulation. Depletion of cellular GSH levels 24 hours after stimulation of differentiation abrogated myogenesis as reflected by lower CK activity, MyHC levels, MyoD expression, and myotubes formation, effects that were reversible on GSH replenishment by GSH ethyl ester (GHSEE). Moreover, GSH depletion led to sustained activation of NF-kappaB, while GSHEE prevented it. Furthermore, inhibition of NF-kappaB activation restored myogenesis despite GSH depletion. Thus, GSH contributes to the formation of myotubes from satellite myoblasts by ensuring inactivation of NF-kappaB, and hence maintaining optimal GSH levels may be beneficial in restoring muscle mass in chronic inflammatory disorders.     

周期性张应力对C2C12成肌细胞增殖的影响

背景：在力学刺激下,肌肉组织发生改建,其中的成肌过程是一个多阶段的发育过程,细胞外基质的许多信号参与了成肌过程,其中力学信号是肌肉形成和再生的重要外界因子。目前国内外有许多关于周期性张应力刺激成肌细胞凋亡和增殖的报道,但是力学刺激在成肌作用中的具体机制目前还明确。 目的：探讨周期性张应力对C2C12成肌细胞增殖的作用及影响机制。 方法：采用FX4000T应力加载系统对体外培养的C2C12成肌细胞施加10%的周期性张应力,分别作用6,12,24 h。 结果与结论：MTT结果显示,随着加力时间的延长C2C12成肌细胞的增殖情况及S期的细胞周期率逐渐增加,在应力作用12 h时增殖效果最明显(P < 0.05),随后开始降低。Western blot检测显示,C2C12成肌细胞中核转录因子κB蛋白的表达随加力时间增加而不断减少,加力24 h时表达量又开始上升。结果提示,周期性张应力可以诱导C2C12成肌细胞增殖,能够改变其细胞周期,核转录因子κB可能也参与了此调节过程。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

Induction of High-Affinity Interleukin 2 Receptors on Human T Lymphocytes

The relationship between free cytoplasmic calcium, activation of protein kinase C (PKC) and expression of high-affinity interleukin 2 receptors (HA-IL-2R) on human T lymphocytes was studied. Induction of HA-IL-2R by phytohaemagglutinin (PHA) was associated with an increase in free cytoplasmic calcium and a transient increase in membrane-associated PKC. However, whereas addition of EGTA inhibited induction of receptors by PHA, addition of the PKC-inhibitor H7 did not. 12-o-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (PMA) and 1-oleoyl-2-acetyl-rac-glycerol (OAG) were both found to activate and translocate PKC. However, only PMA induced expression of HA-IL-2R. Not surprisingly, the effect of PMA was independent of extracellular calcium, but was inhibited by H7. Furthermore, a correlation between the number of HA-IL-2R and free cytoplasmic calcium upon stimulation with ionomycin was observed. Associated with the rise in intracellular calcium, the ionophore caused a slight increase in membrane-associated PKC. Also, addition of H7 inhibited expression of HA-IL-2R. Finally, OAG and ionomycin acted synergistically on expression of HA-IL-2R. In conclusion, induction of HA-IL-2R requires at least two different signals and neither activation of PKC nor an increase in free cytoplasmic calcium is sufficient. However, these two signals may act synergistically. There is evidence for both a PKC- and calcium-independent pathway.     

核转录因子κB信号通路在应力调控成肌细胞分化中的作用

背景：NF-κB信号通路在细胞生长分化、炎症反应、肿瘤生长等过程中发挥重要的调节作用,也参与成肌细胞分化的调控。 目的：分析NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化中的作用及其作用机制。 方法：成功构建大鼠C2C12成肌细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,以0.5 Hz的加载频率和10%的细胞拉伸变形幅度对细胞进行拉伸培养2,6,12,24 h。 结果与结论：①C2C12成肌细胞在周期性机械拉伸力作用下,NF-κB信号通路被激活。当细胞受到应力刺激6 h后,胞核NF-κB p65亚基蛋白表达水平开始增强,24 h内NF-κB p65亚基蛋白表达水平达到峰值。加力12,24 h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P < 0.05)。②IκBα蛋白表达水平在加力6 h后表达显著下降,24 h内IκBα蛋白表达水平减弱达到最低。加力12,24 h组与未加力对照组之间差异有显著性意义(P < 0.05)。③周期性张应力促进C2C12成肌细胞分化过程中Myogenin的表达,加入NF-κB信号通路特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸 (20 μmol/L) 后再加力,Myogenin的表达明显降低。以上结果提示：①NF-κB信号通路可能参与应力介导的C2C12成肌细胞分化的调控过程。②当细胞受到应力刺激时,胞质IκBα发生磷酸化并降解。③NF-κB信号通路在应力介导的C2C12成肌细胞分化过程中发挥重要作用,但不是这一调控过程的惟一通路。     

Retardation of C2C12 myoblast cell proliferation by exposure to low-temperature atmospheric plasma

As the first step in evaluating the possibility of low-temperature atmospheric plasma for clinical applications in the treatment of rhabdomyosarcoma (RMS), we determined the effects of plasma exposure on C2C12 myoblasts. The low-temperature atmospheric plasma was generated through an electrical discharge in argon gas. One minute of plasma exposure every 24 h inhibited the cell proliferation, whereas myoblast differentiation was not affected. Plasma exposure increased the phosphorylation of ERK and JNK at 30 min after the exposure, but the phosphorylation of both was decreased to less than control levels at 1 and 4 h after the exposure. Plasma exposure increased the percentage of cells in the G2/M phase at 8 h after the exposure. In conclusion, plasma exposure retarded the proliferation of C2C12 myoblasts by G2/M arrest. Therefore, plasma exposure can be a possible treatment for the anti-proliferative effects of malignant tumors, such as RMS, without affecting differentiated skeletal muscle cells.     

Reversine对小鼠C2C12成肌细胞增殖与分化作用的初步研究

目的　初步探讨Reversine对小鼠C2C12成肌细胞增殖分化的影响。 方法　体外培养　C2C12成肌细胞系.实验第一步分三组:A组：正常对照组,B组：1μM Reversine处理12h组,C组：1μM 　Reversine处理24 h组。上述三组用Annexin-V/PI双染法处理C2C12成肌细胞并用流式细胞仪技术检测三组C2C12细胞凋亡的影响;实验第二步分五组：D组：正常对照组,E组：单独1 μM Reversine处理7d,F组：单独成骨诱导7 d,G组：1 μM Reversine诱导12h＋单独成骨诱导7d,H组：1μM Reversine诱导12h+1 μM Reversine联合成骨诱导7 d。上述五组光镜下观察细胞形态的变化,并通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测五组C2C12成肌细胞分化抑制因子（ID2）,肌肉发生调节因子（Myogenin）,生肌因子后结蛋白(Desmin)mRNA的表达。 结果　与A组相比,C组1μM Reversine处理24h能引起C2C12细胞明显的凋亡,B组1 μM Reversine处理12 h的C2C12细胞未见明显的凋亡。与D组相比,E组和H组的细胞增殖明显受到抑制,F组和G组细胞逐渐增殖并融合。 结论　Reversine能够显著的抑制成肌细胞的增殖分化过程。     

NDRG2, a novel regulator of myoblast proliferation, is regulated by anabolic and catabolic factors

Skeletal muscle tissue undergoes adaptive changes in response to stress and the genes that control these processes are incompletely characterised. NDRG2 (N-myc downstream-regulated gene 2), a stress- and growth-related gene, was investigated in skeletal muscle growth and adaption. While NDRG2 expression levels were found to be up-regulated in both differentiated human and mouse myotubes compared with undifferentiated myoblasts, the suppression of NDRG2 in C2C12 myoblasts resulted in slowed myoblast proliferation. The increased expression levels of the cell cycle inhibitors, p21 Waf1/Cip1 and p27 Kip1, and of various muscle differentiation markers in NDRG2-deficient myoblasts indicate that a lack of NDRG2 promoted cell cycle exiting and the onset of myogenesis. Furthermore, the analysis of NDRG2 regulation in C2C12 myotubes treated with catabolic and anabolic agents and in skeletal muscle from human subjects following resistance exercise training revealed NDRG2 gene expression to be down-regulated during hypertrophic conditions, and conversely, up-regulated during muscle atrophy. Together, these data demonstrate that NDRG2 expression is highly responsive to different stress conditions in skeletal muscle and suggest that the level of NDRG2 expression may be critical to myoblast growth and differentiation.