淫羊藿苷通过下调转移相关蛋白2抑制MGC803细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨淫羊藿苷是否通过调控转移相关蛋白2(MTA2)表达抑制人胃癌细胞系MGC803细胞增殖、迁移和侵袭及其作用机制。方法以不同浓度淫羊藿苷干预MGC803细胞,MTT法检测细胞活力; Transwell小室法和Western blot分别检测细胞迁移和侵袭及MMP-2、MMP-9和MTA2蛋白表达;将MTA2 siRNA转染至MGC803细胞后检测细胞活力、迁移和侵袭;将pc DNA-MTA2转染至MGC803细胞,联合淫羊藿苷处理,MTT法和Traswell小室法检测细胞活力、迁移和侵袭。结果不同浓度淫羊藿苷均能有效抑制MGC803细胞活力。以200μmol/L淫羊藿苷干预MGC803细胞后,细胞迁移和侵袭能力下降(P0. 05),MMP-2、MMP-9、MTA2蛋白表达下调。敲减MTA2能够抑制细胞活力、迁移和侵袭。过表达MTA2可部分逆转淫羊藿苷对MGC803细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论淫羊藿苷能够通过调控MTA2、MMP-2和MMP-9蛋白表达,抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

淫羊藿苷上调miR-519d表达抑制人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的淫羊藿苷(Icariin)对人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的机制。方法针对SKOV3细胞,给予Icariin不同浓度处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖的变化;应用realtime PCR方法检测Icariin处理不同时间后mi R-519d在SKOV3细胞中的表达变化;利用Lipofect AMINE 2000将antimi R-519d以及其阴性对照质粒载体转染至SKOV3细胞,再给予Icariin,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭能力变化。结果 Icarin显著抑制了SKOV3细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖;随时间变化,Icarin显著上调了mi R-519d在SKOV3细胞的表达水平;转染anti-mi R-519d后,Icarin的作用被阻断,SKOV3细胞的增殖,以及迁移、侵袭能力基本恢复。结论 mi R-519d参与了Icariin抑制SKOV3细胞的增殖,迁移和侵袭的调控过程。     

淫羊藿苷促进骨折愈合作用机制的研究进展

近年来 , 国内外学者对中药淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷加速骨折愈合的机制做了一系列研究,目前研究结果显示, 淫羊藿苷加速骨折愈合的机制主要是通过激活 Wnts、BMP、MAPK、ER 等相关信号通路促进 BMSCs、ASCs 的迁移归巢,进行成骨性分化为成骨细胞,同时促进成骨细胞的成熟、矿化以形成骨痂,并抑制破骨细胞的骨吸收活性。本文从淫羊藿苷对相关细胞以及对血管重建的作用方面对淫羊藿苷加速骨折愈合的作用机制做一回顾综述,以期为后续的研究提供参考。     

淫羊藿苷调节细胞增殖作用的研究进展

淫羊藿苷是传统补益中药淫羊藿的有效活性成分之一,研究发现可影响多种细胞的增殖。淫羊藿苷主要促进骨组织相关细胞增殖,包括成骨细胞、软骨细胞、骨膜细胞、间充质干细胞,淫羊藿苷抑制多种肿瘤细胞增殖,包括骨肉瘤细胞、乳腺癌细胞和卵巢癌细胞等,淫羊藿苷亦可调节其他细胞的增殖,包括神经干细胞、平滑肌细胞等。但淫羊藿苷对细胞增殖促进和抑制的双重调节机制需要进一步研究,方能为其在细胞增殖紊乱相关疾病中的应用提供理论依据。     

中药淫羊藿苷抑制肝癌HepG2.2.15细胞增殖和免疫逃逸作用研究

目的:观察中药淫羊藿苷(ICA)对HepG2.2.15细胞增殖及对CD3AK细胞杀伤活性的影响,探讨ICA对肝癌细胞Fas/FasL途径免疫逃逸的逆转作用,为ICA的开发应用提供新的理论和实验依据.方法:MTT法检测细胞增殖和细胞杀伤活性;流式细胞术检测细胞表面分子表达水平和细胞凋亡率.结果:50 μg/mlICA作用HepG2.2.15细胞48、72小时的增殖抑制作用明显,抑制率分别为22.04%、29.68%(P＜0.05),呈时间依赖效应.HepG2.2.15细胞经ICA处理后,FasL的表达率由16.22%显著下降至8.29%,Fas表达率由0.79%提高到1.70%(P＞0.05).ICA可明显抑制HepG2.2.15细胞诱导Jurkat细胞凋亡,凋亡率从46.66%下降为18.20%.ICA处理HepG2.2.15细胞后,不同效靶比的CD3AK细胞的杀伤活性,可分别由对照组的15.81%、35.04%、42.85%显著提高至42.58%、67.55%、88.93%(P＜0.05,P＜0.01),呈效靶比依赖效应.结论:ICA能有效地抑制HepG2.2.15细胞增殖,并有一定时间依赖效应;ICA可下调FasL的表达,上调细胞表面Fas的表达,对HepG2.2.15细胞诱导的T淋巴细胞凋亡作用有一定阻断,逆转肿瘤细胞的免疫逃逸作用;ICA显著增强HepG2.2.15细胞对CD3AK细胞杀伤的敏感性.     

淫羊藿苷对大鼠血管平滑肌细胞钙化的抑制作用

目的:研究淫羊藿苷(Icariin)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的抑制作用。方法:组织贴壁法培养大鼠胸主动脉VSMCs,取5-8代细胞分为对照组、钙化模型组和淫羊藿苷干预A、B、C组。对照组用DMEM培养基培养;钙化模型组用含10mmol/Lβ-甘油磷酸盐(β-GP)的DMEM培养基培养;干预A、B、C组均以钙化模型组为基础分别与10-6 mol/L、10-5 mol/L和10-4 mol/L Icariin的DMEM培养基共培养,茜素红-S染色法鉴定各组细胞钙化情况,硝基苯酚法测定各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,RT-PCR检测各组细胞内骨保护素(OPG)和核因子κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)的mRNA水平,用Western blotting检测各组细胞OPG和RANKL的蛋白表达。结果:与对照组比较,钙化模型组VSMCs发生细胞钙化,并形成红色结节,ALP活性显著升高(P0.01),OPG、RANKL mRNA和蛋白表达均增加(P0.01);与钙化模型组比较,干预A、B、C组细胞钙化减少,ALP活性减低(P0.01),OPG、RANKL mRNA和蛋白表达均下调(P0.01),尤以干预B组效果最显著。结论:淫羊藿苷可能通过降低ALP活性及OPG、RANKL表达来抑制动脉钙化。     

淫羊藿总黄酮的药理学研究

目的 研究淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用.方法 将人脐静脉内皮细胞体外培养、传代后随机分为六组:空白对照组、TFE模型组、溶血性磷脂酰胆碱(LPC)损伤组、LPC+TFE(50 mg/L)组、LPC+TFE(100 mg/L) 、LPC+TFE(200mg/L)组,比较淫羊藿总黄酮对内皮细胞损伤的作用.结果 TFE模型组与空白组比较,各组数据无明显差异;LPC损伤组中MDA值、LDH值和细胞内KOS水平较空白组显著增加,而NO含量降低;在加入LPC+TFE的三组中,随着TFE的浓度增加,细胞上清液中NO含量升高,MDA和LDH含量以及ROS水平降低.结论 淫羊藿总黄酮对内皮细胞损伤具有保护作用.     

淫羊藿苷防治血管性痴呆的实验研究

目的：观察淫羊藿苷(Icariin，ICA)对血管性痴呆(vascular dementia。VD)大鼠学习记忆的保护作用．探讨ICA防治VD的作用机制。方法：采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法(2-VO法)以及脑缺血再灌注方法(I10-R10-I10)制作VD大鼠模型，利用Morris水迷宫检测ICA对大鼠空间辨别学习记忆能力的影响；用光化学法检测大脑皮层及海马组织中SOD活性、MDA和AChE含量．并检测大鼠血清中AChE的含量；用免疫组化方法检测海马内AChE及ChAT的水平，并通过图象处理软件进行定量分析；     

淫羊藿苷对哮喘影响的研究进展

哮喘是常见的呼吸道疾病之一,激素类药物因起效迅速、疗效确切而被广泛用于治疗哮喘,但其不良反应多,且哮喘的患病率仍呈逐年上升趋势。寻求新型抗炎药物用于联合甚至替代激素成为目前药物开发的主导方向。淫羊藿苷具有广泛免疫调节作用,可明显减轻气道炎症反应、改善哮喘症状,为联合用药治疗哮喘提供了新方向。本文结合国内外研究,综述淫羊藿苷在哮喘中的作用研究进展,从淫羊藿苷对哮喘气道高反应性、炎症反应（包括炎症类型、炎症细胞因子、转录分化、趋化因子受体等）和气道重塑等方面的影响进行论述,以期为治疗哮喘提供新思路。     

淫羊藿苷对糖皮质激素诱导的骨微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的体外建立糖皮质激素诱导骨微血管内皮细胞（Human bone microvascular endothelial cell,HBMEC）损害的模型,研究糖皮质激素对HBMEC的损害情况;探讨淫羊藿苷（Icariin,ICA）对糖皮质激素所致HBMEC损伤的保护作用。方法HBMEC分离与体外培养,建立体外糖皮质激素杀伤细胞模型,用MTF法观察ICA对激素损伤的HBMEC活性的影响,测定细胞生存率,并对细胞进行台盼蓝染色以观察ICA对激素诱导的HBMEC坏死的影响。结果糖皮质激素诱导HBMEC损害,台盼蓝染色显示细胞损害为坏死而非凋亡,并呈现一定的浓度依赖和时间依赖性;ICA能保护激素诱导的HB—MEC损害,使细胞生存率明显提高,ICA能显著抑制激素诱导的内皮细胞坏死。结论ICA具有保护激素诱导的HBMEC损伤的作用,这为早期干预治疗激素性骨坏死提供了实验药理依据。     

青藤碱抑制人卵巢癌SKOV3细胞活力、迁移和侵袭

目的:观察青藤碱对人卵巢癌SKOV3细胞活力、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:分别采用不同浓度的青藤碱处理SKOV3细胞12、24和48 h,采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞周期,采用Transwell实验检测细胞迁移率和侵袭率,同时采用Western blot法检测细胞周期素(cyclin)A、cyclin D1、E-cadherin和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的蛋白表达水平。结果 :随着青藤碱作用浓度和作用时间的增加,SKOV3和IOSE80细胞活力逐渐降低,青藤碱作用SKOV3和IOSE80细胞48 h的半数抑制浓度(IC_(50))分别为2.12 mmol/L和17.35 mmol/L;青藤碱可呈剂量依赖性地诱导SKOV3细胞发生G_0/G_1期和S期阻滞(P0.05),抑制SKOV3细胞迁移和侵袭(P0.05),下调cyclin A、cyclin D1和MMP-9蛋白水平(P0.05),并上调E-cadherin蛋白水平(P0.05)。结论 :青藤碱可在体外抑制人卵巢癌SKOV3细胞活力、迁移和侵袭,这可能与其下调cyclin D1、cyclin A和MMP-9蛋白水平,以及上调E-cadherin蛋白水平有关。     

HOXB7基因沉默对人胃癌细胞活力、迁移和侵袭的影响

目的:探讨靶向沉默HOXB7基因对人胃癌SGC-7901细胞活力、迁移和侵袭作用的影响及潜在机制。方法:设计靶向HOXB7的siRNA,然后瞬时转染胃癌SGC-7901细胞,实时荧光定量PCR和Western blot法检测siRNA靶向沉默的效果。MTT法检测细胞的活力,Western blot法检测细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1蛋白的表达水平,Transwell小室侵袭实验检测SGC-7901细胞的侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western blot法检测胃癌SGC-7901细胞PTEN和VEGF的表达水平以及p-AKT的蛋白水平。结果:胃癌组织中HOXB7基因在mRNA和蛋白水平的表达均显著高于对照组织。siRNA可有效靶向沉默SGC-7901细胞中HOXB7的表达,且沉默HOXB7表达后SGC-7901细胞活力明显下降,同时细胞周期相关蛋白CDK4和cyclin D1的表达亦下调。靶向沉默HOXB7可明显抑制SGC-7901细胞中AKT的磷酸化水平,抑制胃癌细胞的侵袭转移,同时下调VEGF的表达水平,抑制胃癌组织中的肿瘤血管生成。结论:HOXB7作为一个癌基因,可上调细胞周期相关蛋白CDK4、cyclin D1和侵袭相关分子VEGF的表达,上调AKT的磷酸化水平,进而抑制PTEN的功能,促进胃癌细胞SGC-7901的生长、迁移和侵袭能力。     

M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响.方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞标志物CD86和诱导型一氧化氮合酶的表达情况.建立R...     

抑制lncRNA LINC01503通过靶向调控miR-335-5p对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01503对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:将人肺癌H1299细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01503组(转染si-LINC01503)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01503组(转染pcDNA-LINC01503)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-335-5p组(转染miR-335-5p mimics)、si-LINC01503+anti-miR-NC组(共转染si-LINC01503和anti-miR-NC)、si-LINC01503+anti-miR-335-5p组(共转染si-LINC01503和anti-miR-335-5p)、miR-NC+WT-LINC01503组(共转染miR-NC和WT-LINC01503)、miR-NC+MUT-LINC01503组(共转染miR-NC和MUT-LINC01503)、miR-335-5p+WT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和WT-LINC01503)和miR-335-5p+MUT-LINC...     

ELMO1在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用

目的:探讨吞噬和细胞运动蛋白1(ELMO1)的表达在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用和功能。方法:用Western blot和实时荧光定量PCR实验检测5种胃癌细胞和1种人正常胃黏膜上皮细胞ELMO1的蛋白和mRNA表达水平,并筛选出ELMO1表达量高的胃癌细胞株;用细胞转染实验沉默胃癌细胞株的ELMO1;用细胞划痕实验以及Trenswell小室迁移和侵袭实验检测抑制该基因的表达对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:胃癌细胞中ELMO1的表达量明显高于人正常胃黏膜上皮细胞(P0.01),其中SGC7901细胞的ELMO1表达量最高;在SGC7901细胞中ELMO1-siRNA可显著沉默ELMO1的表达(P0.05);沉默ELMO1可显著降低胃癌细胞侵袭和转移的能力(P0.01)。结论:ELMO1在胃癌细胞中高表达,并可促进胃癌细胞的侵袭和迁移。     

RARG对胃癌细胞活力和迁移能力的影响

目的:探讨视黄酸受体γ(retinoic acid receptor gamma,RARG)对胃癌细胞活力和迁移能力的影响及其机制。方法:采用生物信息学技术分析在线数据库中胃癌和正常胃组织的RARG表达水平及其与胃癌患者总生存率的相关性;利用过表达质粒转染和RNA干扰技术,在体外促进和抑制胃癌细胞中RARG的表达,并采用MTT和Transwell实验检测RARG对胃癌细胞活力和迁移能力的影响;通过Western blot和TOP/FOP双萤光素酶报告基因检测RARG对Wnt/β-catenin信号通路的调控;利用免疫共沉淀和免疫荧光共定位实验检测RARG与β-catenin蛋白的相互作用情况。结果 :过表达RARG能够增强胃癌细胞SGC7901的活力和迁移能力(P0.05),敲减RARG能够减弱胃癌细胞MGC-803的活力和迁移能力(P0.05)。同时,过表达RARG能够增加β-catenin、c-Myc、cyclin D1、Twist和Snail的蛋白表达水平(P0.05),以及TOP/FOP双萤光素酶报告基因活性(P0.05)。另外,RARG与β-catenin蛋白存在相互作用。结论 :RARG通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞的活力和迁移能力,其基因在胃癌的发生发展中扮演着癌基因的角色。     

白皮杉醇抑制前列腺癌细胞株增殖、迁移与侵袭

目的:观察白皮杉醇对前列腺癌细胞株DU145的细胞活力、迁移与侵袭能力的作用并初步讨论其机制。方法:CCK-8法检测不同浓度白皮杉醇(0、5、10、20、40和80μmol/L)作用不同时间(12、24、36和48 h)对DU145细胞活力的影响;划痕实验与Transwell小室法分别检测白皮杉醇对DU145细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot法检测p-JAK2与p-STAT3的蛋白水平。结果:CCK-8法结果显示白皮杉醇呈浓度依赖性抑制DU145细胞的活力;给予白皮杉醇干预后,细胞迁移数和侵袭数显著减少,p-JAK2与p-STAT3蛋白水平显著下降。结论:白皮杉醇呈浓度依赖性抑制前列腺癌细胞的生长,并具有抑制细胞迁移与侵袭的作用,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

NEU3对人前列腺癌DU145细胞生物学行为的影响

目的:探讨神经氨酸酶3(NEU3)与人前列腺癌DU145细胞活力、侵袭和凋亡的关系,并探讨其分子机制。方法:体外培养人前列腺癌DU145细胞,并分为空白对照组和处理组,处理组再分别给予神经氨酸酶活性抑制剂DANA处理和RNA干扰靶向沉默NEU3,采用CCK-8法检测细胞的活力;Transwell法检测细胞侵袭能力;q PCR法检测2种处理方式对凋亡抑制蛋白Bcl-2 mRNA水平的影响;Western blot法检测2种处理方式对NEU3、基质金属蛋白酶2(MMP2)和Bcl-2表达的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:与空白对照组相比,DANA处理后前列腺癌细胞的NEU3表达无明显变化,细胞活力增强,MMP2蛋白表达减少,侵袭力减弱,凋亡无明显变化,Bcl-2的mRNA和蛋白表达减少(P 0.05);NEU3沉默后NEU3蛋白表达减少,细胞活力增强,MMP2蛋白表达和细胞侵袭力无明显变化,凋亡能力增强,Bcl-2的mRNA和蛋白表达均下降(P 0.05)。结论:抑制NEU3可以减弱人前列腺癌DU145细胞活力,增强细胞凋亡能力,但对侵袭能力无明显影响。     

紫檀芪对前列腺癌骨转移PC-3细胞活力、凋亡及能量代谢的影响

目的:探讨紫檀芪对人前列腺癌骨转移PC-3细胞活力、凋亡及能量代谢的影响.方法:采用CCK-8法检测紫檀芪对PC-3细胞活力的半数抑制浓度(IC50)和时间依赖性.采用流式细胞术测定紫檀芪对PC-3细胞周期及凋亡的影响.采用分光光度法测定紫檀芪对PC-3细胞能量代谢的影响.采用Western blot法检测相关凋亡蛋白...     

The use of Alamar Blue assay for quantitative analysis of viability, migration and invasion of choriocarcinoma cells

BACKGROUND: The current techniques for quantifying trophoblast viability, migration and invasion are mainly limited by the need to sacrifice the cells during the test procedure. In this study, the vital dye AB (AB) was used to quantify cell number and viability of BeWo and JEG-3 choriocarcinoma cells, as well as their migration and invasion through fibronectin-coated filters. METHODS :AB was directly added to culture medium of incubated test and control cells. At various time intervals, the redox reaction, in which AB is reduced by the cells, was measured by absorbance readings at 540 and 630 nm. For cell migration and invasion, cells were cultured onto uncoated or fibronectin-coated inserts, respectively. AB reduction of migrated cells was normalized to that of control cells to calculate percentages of migration. This model was also tested in the presence of a reported inhibitor, transforming growth factor (TGF) beta. RESULTS: The curve of %AB reduction versus cell number was linear, with intra- and inter-assay Coefficient of Variations of 1.88%and 2.94%, respectively. AB reduction increased with both seeding concentrations and incubation time with AB. TGFbeta treatment caused a modest decrease in AB reduction in both JEG-3 and BeWo cells. TGFbeta treatment also decreased migration in BeWo, but not in JEG-3, cells. CONCLUSIONS: AB assay is a simple and reliable method for quantifying trophoblast viability, migration and invasion.