两种染色方法对神经元显示效果的比较

目的：探讨理想的显示神经元微细结构的方法。方法：取初生小牛脊髓横断切片，分别采用硫瑾－伊红与苏木精－伊红染色方法显示神经元结构。结果：硫瑾－伊红染色后神经元胞核大而圆，染色浅，核仁明显，胞体及树突内可见紫蓝色尼氏体分布。苏木精－伊红染色，胞核不清楚，尼氏体不明显，轴突与树突难以区分。结论：光镜下硫瑾－伊红染色比苏木精－伊红染色更能清楚显示神经元的结构特征。     

显示小脑普肯耶细胞的染色法

①目的 探讨显示小脑普肯耶细胞形态结构的染色方法。②方法 Golgi镀银法显示普肯耶细胞，并与常规的苏木精-伊红染色法相比较。③结果 采用Golgi镀银制片法，能够显示出小脑普肯耶细胞的胞体、树突、轴突及树突棘的特殊形态结构，普肯耶细胞呈扇形，其形态结构十分典型，清晰可见。而常规的苏木精-伊红染色只能显示普肯耶细胞的胞体。④结论 Golgi镀银法是显示小脑普肯耶细胞形态结构的理想染色方法。     

组织染色剂伊红Y的化学性质及改良配制法探讨

组织切片最常规的染色方法是苏木精-伊红染色法,简称HE染色法.对胞核染色剂苏木精的探讨有许多文献报道过,但对胞质染色剂伊红化学性质探讨的文献,目前不多.其实,在切片染色中,伊红染液的质量好坏和苏木精染液一样重要,直接关系到切片染色的成败.掌握了它们的化学性质,在配制染液过程中有很大的发挥空间.配制优质苏木精、伊红染液是组织、病理切片制作人员的愿望.为此,笔者就伊红Y染料的化学性质在此进行了一些探讨,并将伊红染液的配制改良法作一介绍,以供参考.     

用苏木精染色显示培养中凋亡的上皮细胞

苏木精染色是组织学ＨＥ染色法中的一个基本步骤,其与伊红染色相结合被广泛应用于组织学切片的常规染色.苏木精是碱性染料,易与组织中的嗜碱性物结合,主要用于显示细胞核.此外,近年对苏木精染色的使用范围也有所扩展,一些文献已报道还可将其用于显示神经元内的尼氏体,本文介绍将其用于显示培养中凋亡的上皮细胞.1　材料与方法取培养的血管内皮细胞分为两组,一组作为对照组,另一组加同型半胱氨酸(10μｍｏｌ/Ｌ)诱导内皮细胞凋亡作为实验组,培养48ｈ后,将两组细胞用4%多聚甲醛固定,水洗无味后用苏木精染色10ｍｉｎ,水洗后盐酸酒精分色20ｓ,水…     

脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的形态学特征

①目的 观察局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的形态学特征。②方法 应用苏木精-伊红染色、甲基绿-派诺宁染色和透射电镜技术观察凋亡神经细胞的形态结构特征。③结果 苏木精-伊红染色：缺血半影区神经细胞数量减少，细胞核染色质凝聚，未见到典型的凋亡细胞。甲基绿-派诺宁染色：缺血半影区细胞数量减少，结构完整，可见到少数胞浆呈紫红色且胞核呈绿色的凋亡细胞。透射电镜：在缺血半影区，神经细胞细胞核固缩、染色质凝聚，胞膜完整、胞质减少，线粒体和内质网结构清晰，可见到不典型的凋亡小体。缺血中心区细胞核染色质溶解、核膜破坏，细胞浆线粒体和内质网等细胞器溶解，细胞轮廓不清。④结论 脑缺血再灌注缺血中心区神经细胞主要表现为坏死特征，缺血半影区主要表现为凋亡特征。     

SD大鼠海马神经元原代培养及形态学观察

目的：掌握SD大鼠海马神经元体外培养方法,观察神经元形态学特点,测定细胞生长曲线。方法：新生SD乳鼠,剥离海马,胰酶消化,接种,1 d换为Neurobasal培养基;小鼠抗大鼠微管相关蛋白-2、兔抗鼠神经元特异性烯醇化酶为一抗,免疫细胞化学法计数阳性细胞百分率并显微摄影;1%甲苯胺蓝、苏木精伊红染色。结果：原代培养神经元6~8 h内开始贴壁,培养5~7 d突起增粗增长,连接成网,以多极神经元为主,胞体呈三角形、梭形、椭圆形;MAP-2、NSE染色为棕褐色,经鉴定神经元纯度达90%左右;细胞经历生长潜伏期,对数生长期,平台期;细胞核大而圆,HE染色胞核深蓝色,胞浆红色,胞体中可见尼氏颗粒。结论：相差显微镜下神经元形态多样,MAP-2、NSE染色阳性细胞,HE染色细胞核呈深蓝色,胞浆为红色,尼氏体位于细胞质内,神经突起内少见。     

两种染色方法对脑垂体三种嗜色细胞显示效果的比较

目的：为了更清晰地显示脑垂体三种嗜色细胞，筛选出优秀的染色方法。方法：取成年雌狗脑垂体,Zenker液固定，分别用苏木精一伊红和Mallory氏两种染色方法相比较。结果：用苏木精一伊红染色法；不易区分三种嗜色细胞。而采用的Mallory氏染色方法。能够较清楚地区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论：Mallory氏染色法能够较清楚地显示脑垂体三种嗜色细胞结构。为实验教学提供了优良的切片标本。     

三种不同染色技术在体内组织工程中的组织学研究

目的分析对比三种染色方法在显示新生骨成骨情况的差异性,为体内组织工程研究提供更好的组织学鉴别方法。方法将大节段多孔生物陶瓷/聚乳酸复合支架植入犬4个不同的非骨部位,6个月后取材脱钙,石蜡包埋及切片分别做苏木精-伊红染色、Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色,在光镜下观察其组织学形态并做比较。结果苏木精-伊红染色下可以清楚的观察到成骨细胞、类骨质等成分;Masson染色胶原纤维及成骨现象着色鲜艳,易于观察;亚甲基蓝-碱性品红染色成骨细胞更加清晰,与周围组织对比明显。结论苏木精-伊红染色更符合常规病理学观察习惯,Masson染色和亚甲基蓝-碱性品红染色在胶原纤维、成骨细胞等成分的观察上更具优势,因此三者结合更有利于镜下组织形态学观察。     

尸体标本腹腔神经节的细胞形态学观察

目的了解教学用尸体腹腔神经节微细结构保存情况。方法取18例成人尸体腹腔神经节作石蜡切片,HE、尼氏和Masson染色,光镜观察。结果绝大部分切片组织结构、细胞形态、胞核清楚,神经元尼氏体明显,胶原纤维清楚。结论局部解剖学用的尸体腹腔神经节结构保存较好,可作细胞形态的研究。     

家兔孤束核区微量注射羟基马桑毒素对该区神经组织的形态学影响

用经乌拉坦麻醉、肌肉麻痹、切断双侧颈迷走神经的8只日本大耳白兔,于一侧孤束核区微量注射(10μg/μl)羟基马桑毒素后4小时,光镜下(n=5)见注射区部分神经元胞体尼氏体溶解,核嗜碱性增加,神经毡空隙增大呈“海绵状”。尼氏体溶解的神经元与正常神经元混杂分布。电镜下(n=3)见上述神经元胞体中粗面内质网池异常扩张,核异染色质明显增加;神经毡中部分神经胶质成分水肿,树突变空。偶见轴突肿胀。对照侧神经元及神经毡的结构无明显改变。提示:羟基马桑毒素破坏某些神经元的胞体-树突,可能有兴奋性毒性作用。     

两种染色方法对X染色质显示效果的比较

①目的 探讨理想的显示口腔黏膜细胞内X染色质的方法。②方法 取人口腔黏膜细胞，分别采用吉姆萨与硫堇两种染色方法显示X染色质结构。③结果 吉姆萨染色后，细胞背景染料杂质少，细胞轮廓清楚，核质均匀，X染色质形态清晰，阳性率高。硫堇染色后，胞核胞浆着色对比不明显，细胞轮廓不清楚，且细胞背景染料杂质多，易与X染色质混淆。④结论 吉姆萨染色比硫堇染色更能清楚显示X染色质，提高了X染色质分辨率。     

MPTP诱导小鼠黑质神经元凋亡

目的　探讨 1-甲基 - 4苯基 - 1,2 ,3,6 -四氢吡啶 (MPTP)的神经毒性及其作用机制。　方法　 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,总量为 15 0 mg/kg,取中脑黑质 Nissl染色 ,TH免疫组织化学 ,TUNEL法和电镜观察黑质致密带的神经元改变。　结果　 MPTP处理后 ,黑质致密带的存活神经元和 TH阳性神经元的数目明显减少 (P<0 .0 1) ,TUNEL结果表明黑质神经元出现明显的 DNA断裂的特征性凋亡改变 (P<0 .0 1) ,黑质致密带神经元的超微结构出现早期凋亡改变。　结论　 C5 7BL小鼠腹腔注射 MPTP,可诱导黑质神经元凋亡 ,细胞凋亡是 MPTP的毒性作用方式之一。     

大鼠大脑中动脉闭塞局灶脑缺血再灌注改良模型的建立

目的 介绍一种简便可靠的插线法，可用于制作SD大鼠大脑中动脉(MCA)闭塞局灶脑缺血再灌注模型。方法 结扎并游离颈外动脉，用2-0丝线悬吊翼腭动脉，用插入端蘸不饱和聚酯的白色鱼线从颈外动脉切口处插入，经颈内动脉，可逆性阻断大鼠一侧大脑中动脉。随后进行神经病学评分、TTC染色、亚甲蓝染色以观察模型的可靠性，将此改良法与经典的Longa法进行对比研究。结果 大鼠MCA阻断2h后进行再灌注，模型成功则出现Horner’s征阳性、神经病学评分≥1分，TTC染色显示梗死范围，亚甲蓝染色提示MCA供血区神经元大量缺失。与经典的Longa法模型对比，改良模型的成功率高、死亡率低。结论 该改良模型简便可靠，稳定性好，是研究MCA局灶脑缺血再灌注较为理想的实验动物模型。     

胎儿鼻软骨及其他组织的发育

目的 探讨胎儿鼻软骨、鼻肌及鼻皮肤发育规律,为鼻的胚胎发育及年龄解剖学提供资料。方法 对39例3－10月龄的胎儿游离软骨性外鼻标本,采用石尤其是包埋片片,HE染色光镜观测。结果 （1）软骨细胞的大小随胎龄增长而增大,其密度随胎龄增长而减小,两者在7－8月龄变化明显。（2）鼻肌4个月出现横纹,6个月横纹明显,大多数胞核位于股膜下。（3）鼻皮肤表皮的角化、表皮嵴的发育及附属器的出现均有恒定的时间。结论 （1）7－8月龄是胎儿鼻软骨发育重要（旺盛）时期。（2）鼻皮肤的成熟程度与胎龄间有严格的对应关系。     

胞间粘附分子1对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用

目的 观察大鼠脑缺血再灌注不同时相不同脑区胞间粘附分子1（ICAM－1）的方法。方法 采用双侧颈总动脉阻断＋全身低血压法建立SD大鼠脑缺血模型，随机分为假手术组、缺血再灌注（24，48，72，96，168h）组，于规定时间取脑组织石蜡包埋切片，常规苏木精－伊红染色、亚甲蓝染色及ICAM－1免疫组织化学染色对标本进行检测。结果 与假手术组相比，缺血组海马CA1区神经元尼氏体缺失明显，缺血脑区微血管肿胀变形，白细胞粘附、浸润；缺血再灌注后24h皮质及海马ICAM－1表达均显著升高，48h达高峰。可维持7d。结论 ICAM－1在脑缺血再灌注时表达明显上调，介导白细胞和脑血管内皮细胞粘附，参与缺血再灌注损伤。     

去松果体对大鼠下丘脑-神经垂体系激素分泌影响免疫细胞化学研究

探讨松果体摘除对下丘脑－神经垂体系血管升压素（ＶＰ）、催产素（ＯＸＴ）合成和分泌影响。方法选用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，自然光照，分成正常对照组、假手术对照组和松果体摘除组。用改良的手术方法摘除松果体，术后１，２，４，８周取下丘脑，Ｂｏｕｉｎｓ液固定，石蜡包埋连续切片，用免疫细胞化学Ｓ－Ｐ法染抗ＶＰ、抗ＯＸＴ和抗垂体后叶激素运载蛋白（ＮＰ），再用计算机图像分析仪测定下丘脑视上核、室旁核中各阳性细胞数及染色程度。结果松果体摘除后１周室旁核中ＶＰ阳性神经元数量及视上核、室旁核两核之和的ＶＰ、ＮＰ阳性细胞增多（Ｐ＜０．０５），术后４周时视上核及室旁核之和的各阳性细胞数量均较对照组明显升高并延续至术后第８周，而同期染色强度则从术后２周起下降。结论松果体摘除解除了对下丘脑－神经垂体系的抑制作用，因而促进血管升压素、催产素合成、转运和分泌，该作用从术后１周起开始出现。     

小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后的抑郁样行为学变化及杏仁核内FosB／△FosB的异常表达

目的探讨双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后小鼠的行为学变化,投射到杏仁核的5-HT能神经纤维的精确来源以及杏仁核神经元的异常功能活动,为验证杏仁核-中缝核群5-HT在抑郁症发病机制中的联系提供实验资料。方法雄性昆明小鼠32只,随机分为对照组和实验组,每组各16只,应用脑立体定位注射技术向双侧杏仁核注射5,7-双羟色胺（5,7-DHT,5μg／侧）,悬尾实验和强迫游泳实验检测抑郁行为;脑石蜡切片H—E染色检测5-HT能投射神经元的位置;脑冰冻切片免疫组织化学染色检测杏仁核FosB／AFosB的表达。结果①行为学检测：实验组小鼠强迫游泳无动时间和悬尾无动时间较对照组显著减少（P〈0．01）;②H—E染色：实验组小鼠中缝背核尾侧份与中缝正中核嘴侧份的部分神经元胞体皱缩变形,胞质呈深紫伊红色染色,尼氏小体溶解或消失,胞核缩小或消失;③免疫组织化学染色：FosB／△FosB阳性神经元在实验组小鼠杏仁核明显增多,与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论杏仁核的5-HT能纤维投射主要来自中缝背核的尾侧和中缝正中核的嘴侧;单独的杏仁核去5-HT支配即可引发小鼠产生抑郁样行为;杏仁核内的即早基因FosB／△FosB在抑郁样行为形成的相关精神病理学机制中占有重要地位。