缺氧预处理对于老年大鼠心肌顿抑的影响

目的　探讨缺氧预处理对于老年大鼠心肌顿抑的影响及其保护机制。方法　老年和成年SD大鼠分别随机分为单纯心肌顿抑组、缺氧预处理 +心肌顿抑组、SB2 0 35 80 +缺氧预处理 +心肌顿抑组和假手术组 4组 ,采用在体心脏心肌顿抑模型 ,观察缺氧预处理对于心肌舒缩功能、乳酸脱氢酶、肌酸激酶漏出和亚硝酸盐含量的影响 ,以及p38丝裂素活化蛋白激酶 (p38MAPK)选择性抑制剂SB2 0 35 80对于缺氧预处理作用的影响。结果　缺氧预处理明显减轻老年大鼠心肌收缩功能抑制的程度 ,与单纯心肌顿抑组比较 ,收缩期左心室内压力变化最大速率 (+dp dtmax)和零负荷时左室心肌最大收缩速率 (Vmax)分别高 35 %和 4 9% (P <0 .0 5 )。缺氧预处理减轻再灌注结束时心肌顿抑大鼠血清亚硝酸盐的下降程度 ,与老年心肌顿抑组大鼠比较 ,其含量高 5 4 % (P <0 .0 1) ,SB2 0 35 80 2消除缺氧预处理上调血清亚硝酸盐含量和老年大鼠心肌收缩功能的保护作用。结论　缺氧预处理可以减轻老年大鼠心肌顿抑所致收缩功能抑制 ,其保护机制涉及p38MAPK介导的一氧化氮的上调。     

两种大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型建立方法的比较

目的:以对缺氧敏感的转录调控因子——缺氧诱导因子(HIF)-1α作为评价指标,比较物理方法与化学方法建立大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧模型效果。方法:1植块法培养2周龄雄性SD大鼠心肌微血管内皮细胞,鉴定并传代培养。2在不同时间点分别以缺氧发生装置和氧耗剂Na2S2O4对心肌微血管内皮细胞进行缺氧干预,选择最佳干预时间。3免疫印迹和细胞免疫荧光法检测两种方法建立心肌微血管内皮细胞缺氧模型后,HIF-1α的表达情况。结果:1植块法培养原代心肌微血管内皮细胞纯度较高,可见典型铺路石样形态和管腔样结构;26hHIF-1α表达较其他时间点高,故选择6h作为最佳缺氧干预时间;3物理缺氧法干预心肌微血管内皮细胞后HIF-1α表达较化学缺氧法显著增加(P0.05)。结论:对构建体外心肌微血管内皮细胞缺氧模型,物理法效果优于化学法。     

左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞乳酸脱氢酶和肌钙蛋白的影响

目的　探讨钙离子拮抗剂左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞损伤标记物及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法　在离体乳鼠心肌细胞培养基础上制备心肌细胞缺氧模型 ,随机分为正常对照组、缺氧损伤组和钙拮抗剂干预缺氧损伤组。分别测定各组心肌培养基中乳酸脱氢酶、肌钙蛋白的含量 ,心肌细胞内游离钙离子的浓度 (荧光探针法 )。结果　缺氧损伤组心肌培养基中乳酸脱氢酶和肌钙蛋白的含量及心肌细胞内游离钙离子浓度较正常对照组明显增加 (P均 <0 .0 1) ;经左旋氨氯地平干预后细胞培养基中乳酸脱氢酶和肌钙蛋白的含量及心肌细胞内游离钙离子浓度较缺氧损伤组明显降低 (P均 <0 .0 1)。结论　左旋氨氯地平对缺氧心肌细胞具有保护作用 ,其机理可能与减轻心肌细胞内钙超负荷有关     

绿原酸对缺氧复氧心肌细胞内ankyrin-B的调节作用及其机制

目的:探讨绿原酸对缺氧复氧导致的心肌细胞内锚定蛋白-B(ankyrin-B)下降的调节作用及其机制。方法:培养乳鼠心肌细胞,分为对照组、缺氧复氧组和绿原酸处理组。以流式细胞法检测心肌细胞内活性氧(ROS)的水平,用Western-blot检测心肌细胞内ankyrin-B的表达。结果:缺氧复氧后心肌细胞内ROS水平明显增高,绿原酸预处理能够抑制ROS水平的增高[对照组:(237.6±22.3);缺氧复氧组:(612.1±25.6),绿原酸处理组:(375.9±30.1);P0.05]。缺氧复氧后心肌细胞内ankyrin-B的表达显著降低,绿原酸预处理能够上调ankyrin-B的表达。结论:绿原酸可能通过清除细胞内的ROS从而减少缺氧复氧引起的心肌细胞内ankyrin-B的表达降低。     

慢性缺氧大鼠心肌HSP47 mRNA的表达及其与PⅠCP和PⅢNP含量的相关性研究

目的探讨慢性缺氧大鼠心肌HSP47 mRNA表达与血清Ⅰ型前胶原C端原肽(PⅠCP)、Ⅲ型前胶原N端原肽(PⅢNP)含量及心肌纤维化的相关性。方法模拟缺氧环境,建立慢性缺氧大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为5组,每组8只。对照组不给于缺氧处理(A组),各慢性缺氧组大鼠分别缺氧7 d(B组)、14 d(C组)、21 d(D组)、28 d(E组)。采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测心肌中热休克蛋白(HSP47)mRNA的表达量;运用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清及心肌中PⅠCP、PⅢNP的浓度;采用HE和MASSON染色法对对照组和慢性缺氧组大鼠进行组织切片染色。结果与对照组比较,模型组的HSP47 mRNA表达量增多(P0.01),血清和心肌的PⅠCP、PⅢNP浓度升高(P0.01);心肌HSP417 mRNA的表达与血清和心肌的PⅠCP、PⅢNP含量呈正相关(P0.05);HE和MASSON染色显示慢性缺氧组心肌组织广泛纤维化。结论在慢性缺氧条件下HSP47 mRNA的表达量与PⅠCP、PⅢNP浓度正相关,提示HSP47作为心肌胶原分子伴侣在慢性缺氧所致心肌纤维化中起一定作用。     

硒对缺氧培养心脏功能、膜系统通透性和早期超微结构的影响

用器官培养的小鼠胎心研究硒对早期缺氧心肌的影响。结果表明:镧示踪剂标记心肌细胞膜通透性变化的电镜技术证明,硒有维持早期缺氧心肌细胞膜、线粒体膜通透性功能。酸性磷酸酶电镜组化技术表明,硒有保护溶酶体膜完整性的作用。电镜观察表明,硒在一定限度内有延缓缺氧心肌早期膜系统病变出现的时间,并可能在蚤白质合成和细胞修复中起作用。     

葛根素对慢性缺氧心肌保护作用的实验研究

目的探讨葛根素对慢性缺氧小鼠心肌的保护作用。方法建立小鼠慢性缺氧模型30只，随机分为葛根素治疗组、缺氧组各15只，男设正常对照组10只。实验2周后处死小鼠，取新鲜心肌标本。检测琥珀酸脱氢酶（SDH）、三磷酸腺苷酶（ATP）、乳酸脱氢酶（LDH），并进行光镜、电镜下心肌病理形态及超微结构变化的比较观察。结果缺氧组SDH、ATP降低，LDH升高，心肌间质水肿，心肌细胞线粒体肿胀。肌丝排列紊乱，与对照组及葛根素治疗组比较有显著差异（P〈0．01）；葛根素治疗组心肌酶和心肌超微结构与对照组相比均无显著差异（P〉0．05）。结论慢性缺氧可以导致心肌酶和心肌超微结构的改变，缺氧导致心肌损伤后心肌酶改变比超微结构改变更敏感；葛根素具有保护心肌、改善心功能的作用。     

心绞痛的病因诊断和治疗(一)

心绞痛是心肌突然发生暂时性缺血或缺氧所引起的一种病征,见于多种疾病与情况,其发生机理系冠状动脉供血不足造成心肌暂时性缺氧血所致。凡是使心脏,     

热休克蛋白72和诱导型一氧化氮合酶基因在体外循环术前后先天性心脏病患儿心肌的表达及其作用

目的研究热休克蛋白72(HSP72)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在慢性缺氧型及非缺氧型先天性心脏病患儿体外循环术(CPB)前后的表达及其相关性;探讨HSP72和一氧化氮(NO)对缺血缺氧心肌的作用。方法在已确诊先天性心脏病(房间隔缺损、室间隔缺损、法洛四联症)住院患儿中,随机抽取18例分为慢性缺氧组[动脉氧饱和度(SaO2)<85%]及非缺氧组(SaO2>95%),每组9例。两组分别于CPB中主动脉交叉钳夹(ACC)前、CPB结束时收集患儿心肌标本保存在液氮中。试验采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定心肌细胞中HSP72和iNOSmRNA的相对含量,比较两组心肌CPB前后HSP72和iNOSmRNA水平,并分析其临床意义。结果①与CPB术前相比,非缺氧组及慢性缺氧组HSP72mRNA水平均明显增高(P<0.05);CPB术前及术后,慢性缺氧组HSP72mRNA水平均明显高于非缺氧组(P<0.05)。②与CPB前相比,非缺氧组iNOSmRNA水平明显增高(P<0.05),而慢性缺氧组iNOSmRNA水平无明显变化(P=0.795);CPB术前及术后,慢性缺氧组iNOSmRNA水平均明显高于非缺氧组(P<0.05)。结论缺血应激上调了非缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72、iNOS及慢性缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72的基因表达,慢性缺氧应激也上调了慢性缺氧型先天性心脏病患儿心肌组织HSP72、iNOS的基因     

缺氧性肺动脉高压对左心室心肌细胞凋亡的影响及与心肌AngⅡ含量的相关分析

目的:探讨缺氧性肺动脉高压(PAH)对左心室心肌细胞凋亡及凋亡基因表达的影响以及与心肌组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量变化的相关关系。方法:采用心肌细胞原位末端标记、左心室心肌凋亡基因免疫组织化学染色及半定量分析和HPLCRIA法分别检测了2001年10月至2003年2月因各种原因引起缺氧和缺氧合并PAH[PASP>30mmHg,PAMP>20mmHg(1mmHg=0.133kPa)]死亡的17例患儿心肌细胞凋亡指数和5种相关凋亡基因蛋白表达及心肌AngⅡ的含量。结果:与对照组相比较,缺氧组的左心室心肌细胞凋亡指数和凋亡基因的蛋白表达明显高于对照组(P<0.01),而缺氧合并PAH组与缺氧组却无明显差异(P>0.05),单纯缺氧及缺氧合并PAH组心肌组织AngⅡ均显著高于对照组(P<0.01),缺氧合并PAH组高于单纯缺氧组,2组相比较P<0.05。缺氧和缺氧合并PAH患儿心肌组织AngⅡ与心肌细胞凋亡指数呈显著正相关(相关系数分别为0.513,P<0.01,0.551,P<0.05)。结论:缺氧是引起左心室心肌细胞凋亡的主要原因,而PAH的形成并未进一步使左心室心肌细胞凋亡加重,缺氧与AngⅡ在引起左心室心肌细胞凋亡过程中发挥了重要作用。     

缺氧对心肌细胞内游离钙离子浓度和SERCA2表达的影响及薯蓣皂甙的干预作用

目的　研究缺氧对心肌细胞内游离钙离子浓度和肌浆网上的钙离子ATP酶(SERCA2 )的表达的影响及薯蓣皂甙的干预作用。方法　在离体心肌细胞培养基础上制备心肌细胞缺氧模型 ,随机分为 4组 :正常对照组 ,缺氧损伤组 ,薯蓣皂甙组 ,钙拮抗剂组。分别测定各组心肌细胞内游离钙离子的浓度 (FURA2 /AM荧光探针法 )和SERCA2的含量 (Westernblot法 )。结果　缺氧损伤组心肌细胞内游离钙离子的浓度较正常对照组明显增加 ,SERCA2的表达明显减弱 (P均 <0 0 1 ) ;薯蓣皂甙组和钙拮抗剂组心肌细胞内游离钙离子的浓度较缺氧损伤组明显降低 (P <0 0 1 ) ,SERCA2的表达明显增强 (P <0 0 5 )。结论　薯蓣皂甙通过增强肌浆网上钙泵SERCA2的表达减轻缺氧心肌细胞的钙超负荷 ,它对缺氧心肌细胞具有保护作用 ,其作用与钙拮抗剂类似。     

缺氧条件下心肌组织的形态学改变及缺氧诱导因子-1在心脏内的表达

目的观察缺氧条件下心肌组织的形态学改变以及缺氧诱导因子-1(HIF-1α)在心脏内的表达情况。方法将40只SD大鼠随机分为正常对照组、低氧12 h组、低氧24 h组,低氧36 h组。其中低氧12 h、低氧24 h、低氧36 h组制备体内缺氧模型。采用95%氮气+5%氧气,制备缺氧模型,缺氧时间分别为12、24、36 h,每天缺氧时间为2 h,其他时间置于空气中。所有大鼠在实验结束时均实施腹腔注射麻醉,断髓法处死,制备心肌组织石蜡切片,HE染色镜下观察心肌组织的形态学变化。SABC免疫组化法检测各组大鼠心肌细胞HIF-1α的表达情况。结果正常对照组心肌组织切片心肌细胞结构完整,核大呈圆形;低氧组大鼠的心肌细胞结构逐渐变化,心肌细胞明显肿胀,细胞间隙明显增加,核变小而不规则。免疫组化染色切片HIF-1α蛋白阳性物质定位于细胞核和细胞质,呈弥散或颗粒状。与正常对照组心肌组织HIF-1α的蛋白IOD比较,各缺氧组HIF-1α的蛋白IOD明显增加,有统计学意义(P<0.05)。结论低氧可诱导大鼠心肌组织出现破坏。HIF-1α在缺血心肌组织中高表达,可能参加了心肌缺血的代偿机制,有助于改善心肌供血。     

一氧化氮对缺氧豚鼠心肌细胞游离钙浓度的影响

目的:探讨左旋精氨酸(L-arginine,L-arg)及NG-亚硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitric-L-arginine-methyl ester,LNAME)对缺氧豚鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)变化影响.方法:采用离体豚鼠心Langendorff法灌注,胶原酶I型分离细胞,再用荧光指示剂方法(Fure-2/AM)标记心肌[Ca2+]i变化.分为3组:对照组、L-arg组和L-NAME组.观察缺氧后心肌[Ca2+]i的变化.结果:①正常氧状态下,心肌[Ca2+]i均值为120.0±14.3 nmol/L(n＝10).②缺氧状态下心肌[Ca2+]i增加与缺氧时间(程度)成正相关,相关系数r为0.99左右.③一氧化氮(NO)在缺氧条件下对心肌[Ca2+]i有影响.结论:在短期轻度缺氧条件下,NO不足使心肌[Ca2+]i增加,若能设法增加细胞内的NO含量,可以提高心肌细胞的自我保护作用.在长时间重度缺氧条件下,NO可能对心肌细胞有损伤作用.     

间歇缺氧大鼠模型主动脉及心肌结构的改变

目的探讨间歇缺氧对大鼠动脉以及心肌的影响。方法清洁SD大鼠30只,采用成组设计的方法随机分成三组:正常对照组;间歇缺氧组;持续缺氧组。普通饲料饲养,每日缺氧8h,连续35d,然后采用ELISA方法测定血清中NF-kB、MCP-1、VCAM-1的水平;处死大鼠快速分离近心脏的主动脉以及心肌,弹力纤维染色观察结构的改变。结果在持续缺氧组以及间歇缺氧组血清中NF-kB、MCP-1、VCAM-1的水平较正常对照组明显升高,主动脉中膜增厚,弹力纤维中断、排列紊乱,间质胶原纤维增生,心肌细胞肿胀,心肌细胞排列较正常对照组紊乱。结论缺氧可导致主动脉以及心肌细胞增殖、结构紊乱,炎症反应可能为其关键因素。     

ERK1/2信号通路介导心肌营养素1对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的探讨心肌营养素1对心肌缺氧复氧损伤的保护作用及其信号通路。方法用改良的方法培养出生1～3天的乳鼠心肌细胞,分为五组:对照组、缺氧复氧组、缺氧复氧+心肌营养素1组、缺氧复氧+心肌营养素1+PD98059(ERK阻断剂)组及缺氧复氧+心肌营养素1+DMSO组。缺氧3 h,复氧3 h。MTS法测定心肌细胞存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位,二氯荧光磺双乙酸盐(DCFH-CA)检测细胞活性氧水平,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR检测心肌细胞促凋亡基因Bad mRNA表达,Western blot检测ERK1/2蛋白水平。结果缺氧复氧后心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平较对照组明显增加,分别是19.4%±2.3%比2.2%±0.2%及14.28±1.42比3.54±0.46(P<0.05),而心肌细胞存活率显著降低,心肌细胞线粒体膜电位下降。而心肌营养素1处理后,心肌细胞存活率明显高于缺氧复氧组,心肌细胞凋亡率及细胞内活性氧水平显著减少,心肌细胞线粒体膜电位更高,ERK1/2磷酸化蛋白水平增加,Bad mRNA表达明显下调。心肌营养素1的这种作用能被ERK阻断剂PD9...     

腺苷与心脏保护的研究进展

恢复冠状动脉(冠脉)血流和心肌再灌注对于缺血缺氧的心肌复苏是十分必要的.然而缺血心肌在再灌注时也可导致心肌损伤.     

氨氯地平对缺氧和复氧损伤心肌细胞内PH值及Ca^2＋浓度的影响

用荧光探针Ｆｕｒａ－２及ＢＣＥＣＦ结合计算机图象处理技术，观察氨氯地平对缺氧和复氧损伤心肌细胞内ｐＨ值和Ｃａ２＋浓度的影响。发现缺氧和复氧损伤细胞内游离钙离子的浓度明显上升，ｐＨ值下降；氨氯地平能显著地降低缺氧损伤的心肌细胞内的游离Ｃａ２＋浓度，并抑制细胞酸化；但对缺氧损伤后再复氧的心肌细胞内游离Ｃａ２＋的浓度和ｐＨ值均无显著影响。     

心肌转染缺氧诱导因子1α对大鼠心肌梗死的保护作用

目的 目的 评价心肌内注射缺氧诱导因子1α进行基因转染对大鼠心肌梗死的保护作用.方法 选择雄性大鼠72只进行实验,将实验分为转染腺病毒缺氧诱导因子1α组,转染空质粒对照组和假手术组.每组以术后的不同时间处死,取材分3、7、14天三个亚组,每个亚组8只.建立心肌梗死模型.当左前降支被结扎后,在室游离壁的三个不同部位分别注射50μg腺病毒缺氧诱导因子1α质粒和50μg的空质粒.假手术组不结扎左前降支.观察缺氧诱导因子1α的基因表达、心肌毛细血管密度和大鼠心肌梗死面积.结果 缺氧诱导因子1α组与对照组相比,心肌组织中缺氧诱导因子1α基因表达明显增强,梗死区毛细血管密度明显增加(P<0.01),心肌梗死面积分别为23.85%±2.25%和38.74%±3.12%,心肌梗死面积明显减少(P<0.01).结论 心肌内注射缺氧诱导因子1α进行基因转染可以增加缺氧诱导因子1α基因表达,增加心肌毛细血管生成,明显减少心肌梗死面积,对大鼠心肌梗死起保护作用.     

缺氧预处理对大鼠钝性心肌挫伤保护作用的研究

目的观察缺氧预处理(HPC)对大鼠钝性心肌挫伤的保护作用,并进一步探讨其机制。方法Wistar大鼠建立钝性心脏挫伤模型,并用常规HE染色、免疫组织化学技术(SP法),结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性心脏挫伤及缺氧预处理后Bcl-2、肌钙蛋白T(cTnT)的染色变化。结果免疫组织化学染色①心脏挫伤2h可见大鼠心肌cTnT明显脱失,随着时间延长挫伤组cTnT脱失逐渐加重,与单纯挫伤组相比缺氧预处理组cTnT的脱失显著减轻(P<0.05),对照组心肌未见明显脱失;②对照组有少量Bcl-2表达,单纯挫伤组随时间延长Bcl-2表达逐渐增多,与单纯挫伤组相比缺氧预处理组Bcl-2表达明显增强(P<0.05)。结论Bcl-2的表达说明其参与了心脏挫伤后心肌损伤的形成。缺氧预处理对大鼠钝性心肌挫伤有保护作用,表现为HPC能减轻心肌细胞cTnT的脱失及促进Bcl-2的表达。     

阿魏酸钠对离体大鼠心肌顿抑的保护作用

心肌反复短暂缺血缺氧造成心肌顿抑，这种损伤不能立即恢复，并有累积效应。阿魏酸钠能促进顿抑心肌功能及代谢的恢复，减轻心肌超微结构的损害，降低钙超载。