以聚合酶链反应法研究乙型肝炎HBV－DNA与e系统的关系

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测了１２２例乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ。对照患者ｅ系统的模式，发现ＨＢｅＡｇ（＋），抗－ＨＢｅ（－）者ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９０．９％，抗－ＨＢｅ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）者ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５０．１％，ＨＢｅＡ（－）、抗－ＨＢｅ（－）者ＨＢＶＤＮＡ阳性率为３５．７％。结果表明，ＰＣＲ法较ｅ系统更能准确反映ＨＢＶ的复制情况。     

以聚合酶链反应法研究乙型肝炎HBV—DNA与e系统的关系

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测了１２２例乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ。对照患者ｅ系统的模式，发现ＨＢｅＡｇ（＋），抗－ＨＢｅ（－）者ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９０．９％，抗－ＨＢｅ（＋），ＨＢｅＡｇ（－）者ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５０．１％，ＨＢｅＡｇ（－），抗－ＨＢｅ（－）者的ＨＢＶＤＮＡ阳性率为３５．７％。结果表明，ＰＣＲ法较ｅ系统更能准确反映了ＨＢＶ的复制情况。     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的临床意义

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对２７３７例乙肝患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，结果发现各组ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率：①ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为９９．２７％；②ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４４．７７％；③ＨＢｓＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４２．８６％；④ＨＢＶ标志物均阴性为１５．９２％。结果表明ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检出先于其它乙肝病毒标志物，可早期发现乙肝。ＰＣＲ法直接检测ＨＢＶ－ＤＮＡ更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。     

血清HBV-DNA定量PCR检测对干扰素治疗的指导意义

目的 探讨有限稀释定量ＰＣＲ检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ对干扰素抗病毒治疗的指导意义。方法 利用有限稀释定量ＰＣＲ技术分别检测３８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性患者α－２ｂ干扰素治疗前后血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果 ３８例患者干扰素治疗１２周ＨＢＶ－ＤＮＡ阴转７例（１８．４％）;治疗２４周阴转１１例（２８．９％）。其中病毒滴度〉２５０ｐｇ／ｍＬ者阴转１１．１％（１／９）;病毒滴度２５ｆｇ￣２５０ｐｇ／ｍ     

乙型肝炎患者血清Pre-S-2抗原的意义

目的研究ＰｒｅＳ２抗原与乙型肝炎患者ＨＢＶ标记的关系．方法血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例及健康献血者２０例，血清用ＲＩＡ法检测ＰｒｅＳ２抗原及用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ．结果血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者２６例，ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性（１００％）；血清ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｂ（＋），ＨＢｃＡｂ（＋）的乙型肝炎患者４７例，ＰｒｅＳ２抗原３０例阳性（６３８％），１７例阴性（３６２％），ＨＢＶＤＮＡ３２例阳性（６８１％），１５例阴性（３１９％），ＰｒｅＳ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ均阳性２８例（５９６％），均阴性１４例（３００％）．健康献血者２０例，ＰｒｅＳ２抗原阳性１例（５０％），阴性１９例（９５０％），ＨＢＶＤＮＡ阳性２例（１００％），阴性１８例（８００％），ＰｒｅＳ２抗原及ＨＢＶＤＮＡ均阳性０例（０％），均阴性１８例（８００％）．结论ＰｒｅＳ２抗原可作为预测慢性乙型肝炎患者病情活动与传染的标志．     

聚合酶链反应检测HBV DNA的临床意义

应用ＰＣＲ对１７１例肝病血清检测结果，ＨＢＶＤＮＡ阳性率５９．１％，ＥｌｉＳＡ检测ＨＢｓＡｇ阳性率４３．２７％，二者比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１），ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ阳性率７９．５％，而ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）组主５７．９％，ＨＢｓＡｇ（－）／抗－ＨＢｓ（＋）组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率３６．８％。     

套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA

为了更准确、简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究。发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平。检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）、ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝炎１３例（Ｂ组）、ＨＢｓＡｇ阴性和乙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＢｃ）阳性正常对照组３０例（Ｃ组）及ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（－）肝硬化患者１２例（Ｄ组），分别有４５．５％、３０．８％、１３．３％和１００％患者血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性。ＨＢＶＤＮＡ在一些抗－ＨＢｓ（＋）肝病患者和所谓健康人的血清中也存在。Ａ、Ｂ两组检出有ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染患者分别占８１．８％和５３．８％。提示套式和免疫套式ＰＣＲ是简便、快速而又高度敏感的检测方法；ＨＢＶ感染可能是引起ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝病的重要原因，且ＨＢｓＡｇ阴性肝病病因大多与病毒感染有关；应该重新认识自然感染者血清中抗－ＨＢｓ的临床意义。     

PCR检测HBV感染患者血清HBV DNA的临床意义

目的探讨急、慢性乙型肝炎及与ＨＢＶ感染相关的肝硬变和肝癌患者血清ＨＢＶＤＮＡ的临床意义．方法应用ＰＣＲ技术检测不同ＨＢＶ感染２０５例，患者血清ＨＢＶＤＮＡ，并与正常人２０例作比较．结果ＨＢＶ感染患者２０５例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６９３％，慢性乙肝、乙肝后肝硬变和肝癌患者的阳性率分别为７６４％，７１９％和７００％，显著高于急性乙肝患者２１７％的阳性率（Ｐ＜００１）；ＨＢｅＡｇ（＋）患者血清ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９３６％，显著高于ＨＢｅＡｇ（－）抗ＨＢｅ（＋）／（－）和ＨＢｓＡｇ（－）患者的阳性率（４５６％，２５０％和１２５％，Ｐ＜００１）；血清ＨＢＶＤＮＡ阳性和阴性两组患者的血清ＡＬＴ水平无明显差异（Ｐ＞００５）．结论血清中ＨＢＶＤＮＡ持续存在可能与乙型肝炎的慢性化有关，而与ＨＢＶ感染患者的肝损伤无明显关系     

CPH肝组织,血清HBV与血清HBV标志物不同状态的相关性探讨

目的和方法：经肝活检诊断为慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）５１例，均做ＰＣＲ、斑点杂交进行肝组织、血清ＨＢＶＤＮＡ检测，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＢＶ血清标志物。结果，ＨＢＶＤＮＡ检出率依次为肝组织ＰＣＲ９４１％（４８／５１）、血清ＰＣＲ９２２％（４７／５１）和肝组织斑点杂交９０２％（４６／５１）。三者之间无显著差异（χ２＝０４９５，Ｐ＞００５）。各项血清标志物总检出率ＨＢｓＡｇ３７２％（１９／５１），ＨＢｅＡｇ３３３％（１７／５１）和抗－ＨＢｅ２１５％（１１／１５），显著低于ＰＣＲ和斑点杂交ＨＢＶＤＮＡ的检出率（χ２＝３０．９，Ｐ＜０００５）。在抗－ＨＢｅ（＋）的１１例患者中１０例检出肝组织和血清ＨＢＶＤＮＡ，８例抗－ＨＢｓ（＋）患者，６例肝组织及血清ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ阳性，结论：表明抗－ＨＢｅ（＋）及／或抗－ＨＢｓ（＋）不能代表ＨＢＶ复制停止或被清除，并且肝脏病变可仍然存在     

PCR检测献血员乙肝感染状况

目的对部分献血员中乙型肝炎感染状况进行调查．方法用ＰＣＲ法对检查合格的２９０份献血血样进行ＨＢＶ＿ＤＮＡ检测．结果本组２９０份血样中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ全部呈阴性．１６７例ＨＢＶＭ阳性；其中８０例单项抗ＨＢｓ阳性，５０例单项抗ＨＢｃ阳性，１９例抗ＨＢｓ和ＨＢｃ两项阳性，１２例抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ两项阳性；６例抗ＨＢｓ，抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ三项阳性，而ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性率在各组中分别为８８％（７／８０），２６０％（１３／５０），１０５％（２／１９），７５０％（９／１２），３３３％（２／６）．１２３例ＨＢＶＭ阴性，ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性率为１６％（２／１２３）．２９０例中ＨＢＶ－ＤＮＡ的总检出率为１２１％（３５／２９０）．结论合法献血员中存在着乙肝病毒感染者．     

有限稀释定量PCR检测血清HBV-DNA的临床应用及意义

探讨有限稀释定量ＰＣＲ用于临床检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，及其对干扰素抗病毒治疗的指导意义。利用有限稀释定量ＰＣＲ技术分别检测３８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性患者α－２ｂ干扰素治疗前后血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量，观察检测结果对治疗的指导意义。３８例患者干扰素治疗１２周ＨＢＶ－ＤＮＡ阴转７例（１８．４％）；治疗２４周阴转１１例（２８．９％）。其中病毒滴度〉２５０ｐｇ／ｍｌ者阴转１１．１％（１／９）；病毒滴     

肺结核合并HBV感染患者血清HBV－DNA的检测及其意义

采用分子斑点杂交和酶连免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法检测２６８例肺结核患者血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）及其它乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ），观察肺结核患者抗结核化疗中肝功能变化与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的关系。结果，２６８例肺结核患者血清ＨＢＶ－Ｍ阳性率为１９．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性２０例（７．５％）；化疗中，肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组、肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性其它ＨＢＶ－Ｍ阳性组、单纯肺结核组，肝功能受损率分别为９５％、１０％及５．１％。肺结核合并ＨＢＶ感染组、单纯ＨＢＶ－Ｍ携带者组、单纯肺结核组，肝功能受损率分别为４９％、１０％及５．１％。肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组死亡４例（１５％），且死亡与肝病直接相关（肝衰竭），３．５年后发生肝硬化２例。结果提示，检测肺结核患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ有重要意义。抗乙型肝炎病毒治疗对改善存在ＨＢＶ复制的肺结核患者的预后可能有重要作用，化疗前常规检查并有ＨＢＶ感染的肺结核患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，可指导用药。     

乙型肝炎患者血清中HBcAg与HBV复制指标的关系

目的探讨乙型肝炎患者血清ＨＢｃＡｇ与ＨＢＶ复制指标的关系及临床意义．方法对３１１例乙型肝炎患者进行了ＨＢｃＡｇ检测，并同时进行酶联法乙肝五项、地高辛法ＨＢＶＤＮＡ检测，其中２３７例进行乙肝ＤＮＡ聚合酶（ＤＮＡＰ）检测．结果ＨＢｃＡｇ阳性组的ＨＢＶＤＮＡ检出率（７７６％），明显高于ＨＢｃＡｇ阴性组（３５５％，Ｐ＜００１）；在ＨＢｃＡｇ阴性组中，抗ＨＢｅ阳性者仍能检出２９９％（４４／１４７）ＨＢＶＤＮＡ者阳性；ＨＢｅＡｇ，ＨＢｃＡｇ均阳性者其ＨＢＶＤＮＡ和ＤＮＡＰ的检出率高达８５９％；其他依次为ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ和ＨＢｃＡｇ均阳性者７１４％，抗ＨＢｅ，ＨＢｃＡｇ阳性者６９２％，ＨＢｅＡｇ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者６８４％，抗ＨＢｅ阳性，ＨＢｃＡｇ阴性者２７６％．结论血清ＨＢＶＤＮＡ，ＤＮＡＰ，ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ均是反映乙肝病毒复制的敏感指标，抗ＨＢｅ的出现并不表示病毒复制停止，应参考其他病毒复制指标情况．各种指标的不同组合可以清楚地反映出患者体内病毒复制状况．     

乙型肝炎病毒核心区DNA疫苗接种后H-2d小鼠的特异性免疫应答

目的观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心区ＤＮＡ疫苗接种后ＢＡＬＢ／ｃ（－２ｄ）小鼠的特异性免疫应答。方法构建ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗（ＰＪＷ４３０３／ＨＢｃ）;用基因枪法和肌肉注射祛将该ＤＮＡ疫苗接种ＢＡＬＢ／ｃ小鼠;ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清抗－ＨＢＣ（ＩｇＧ）及ＩｇＧ亚类（ＩｇＧ１,ＩｇＧ２ａ）;５１铬释放法检测小鼠脾细胞ＨＢｃＡｇ特异性ＣＴＬ活性。结果该ＤＮＡ疫苗在体外转染细胞中可良好表达ＨＢｃＡｇ。血清抗－ＨＢｃ终点滴度在ＤＮＡ疫苗基因枪组和肌肉注射接种组小鼠分别为１：３２８０５０和１：１０９３５０．两组小鼠的抗－ＨＢｃＩｇＧ亚类均以ＩｇＧ２ａ略占优势。两组小鼠的ＨＢＣＡｔｈｅ异性ＣＴＬ杀伤活性分别达到５１．１％和５５．２％。结论ＨＢＶ核心区ＤＮＡ疫苗在小鼠实验中具有良好的细胞免疫和体液免疫原性。     

孕妇HBV感染状态与垂直传播关系的研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＥＢ）技术,对ＨＢｓＡｇ阳性孕妇７８例（实验组）和ＨＢｓＡｇ阴性孕妇４３例（对照组）的血清、脐血和乳汁中的ＨＢＶ－ＤＮＡ进行检测,同时用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测两组孕妇血清ＨＢＶ标志物,结合孕妇感染状态做相关性分析。结果：实验组血清ＨＢＶＤＮＡ检出率为５１．３％,对照组未检出,两组有极显著性差异（Ｐ＜０．００１）。实验组乳汁、脐血中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为２９．５％、３９．７％,对照组未检出,两组有极显著性差异（Ｐ＜０．００１）。提示母婴ＨＢＶ垂直传播与孕妇ＨＢＶ感染状态和ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率有关     

抗—HEV免疫吸印法的建立及应用

应用ＨＥＶ基因结构区的重组融合蛋白，建立了免疫吸印法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＷＢ）检测抗－ＨＥＶＩｇＧ并与现行的酶联免疫试验（ＥＩＡ）进行了比较，结果表明，ＷＢ检出戊型肝炎暴发点急性肝为病人血清抗－ＨＥＶＩｇＧ的阳性率（６８／７３，９３．２％）高于现行的ＥＩＡ（５１／７３，７０．０％），对实验感染猕猴抗－ＨＥＶＩｇＧ检出率前者高于后（分别为７／７和５／７），且检出抗－ＨＥＶＩｇＧ时间较长，滴度也     

肺结核合并HBV感染患者血清HBV—DNA的检测及其意义

采用分子斑点杂交和酶连免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法检测２６８例肺结核患者血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）及其它乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ），观察肺结核患者抗结核化疗中肝功能变化与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的关系。结果，２６８例肺结核患者血清ＨＢＶ－Ｍ阳性率为１９．０％，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性２０例（７．５％）；化疗中，肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组、肺结核合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性其它ＨＢＶ－Ｍ阳性组、     

丙型肝炎患者血清中高变区1(HVR1)抗体的检测与分析

目的　了解丙型肝炎患者体内抗ＨＶＲ１ 的产生情况,并探讨其与病情发展及预后的关系．方法　用含ＨＶＲ１ 序列的合成肽对４５ 例急、慢性肝炎患者血清中抗ＨＶＲ１ 作了ＥＬＩＳＡ 检测,并对所有血清作ＨＣＶＲＮＡ 检测．结果　急性丙型肝炎患者血清中抗ＨＶＲ１ 阳性率为７０－６ ％ ,与慢性丙型肝炎患者早期血清（１２－５ ％ ） 相比差异显著性（ Ｐ＜ ０－０５） ,而且两者的平均抗体滴度相差亦非常显著（４－２ ±０－６ ｖｓ ２－８ ±０－７ ,Ｐ＜ ０－０１） ． 慢性丙型肝炎现症患者血清抗ＨＶＲ１ 的阳性率为７２－７ ％ ,其中抗ＨＶＲ１ 阳性血清中ＨＣＶＲＮＡ 的阳性率也很高（７５－０ ％ ） ．结论　ＨＣＶ 感染早期抗ＨＶＲ１ 的产生及其滴度的高低可能与疾病的转归有关;慢性丙型肝炎患者体内抗ＨＶＲ１ 的存在可能反映了ＨＶＲ１ 变异引起的免疫逃避．     

抗HBe(+)慢性乙型肝炎的重组干扰素治疗应答及其影响因素

目的探讨抗ＨＢｅ／ＨＢＶＤＮＡ（＋）慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）的干扰素治疗效果及其影响因素。方法对１５例ＨＢｅ（＋）和２５例ＨＢｅＡｇ（＋）ＣＨＢ患者用重组干扰素α－１ｂ治疗，治疗前、后和随访半年后检测ＨＢＶ及前Ｃ区Ａ１８９６终止变异。结果抗ＨＢｅ（＋）慢性乙型肝炎干扰素治疗近期应答率为７３％（１１／１５），与ＨＢｅＡｇ（＋）组比较差异无显著性（Ｐ＞００５）；治疗前抗ＨＢｅ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ含量明显低于ＨＢｅＡｇ（＋）组（Ｐ＜０００５）；但前Ｃ区Ａ１８９６变异检出率４７％（７／１５）显著高于ＨＢｅＡｇ（＋）组的１６％（４／２５），Ｐ＜００５；４例复发者都是Ａ１８９６变异感染。结论血清ＨＢＶＤＮＡ水平可能是影响其应答的重要因素，前Ｃ区Ａ１８９６变异并不影响干扰素的近期应答率，但可能是其复发的一个重要因素。     

慢性重型肝炎患者外周血单个核细胞内干扰素和白细胞介素的表达及意义

目的探讨慢性重型肝炎（ＣＳＨ）病人外用血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）及白细胞介素－４（ＩＬ－４）的表达及其临床意义。方法常规分离ＰＢＭＣ,在ＰＭＡ、Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、Ｍｏｎｅｎｓｉｎ的刺激下,采用流式细胞术（ＦＡＣＳ）,对１７例ＣＳＨ患者及１９例正常健康者ＣＤ４＋Ｔ细胞内ＩＦＮ－γ和ＩＬ－４的表达进行分析,并应用荧光定量聚合酶链反应检测ＨＢＶ ＤＮＡ含量。结果 ＣＤ４＋Ｔｈ１、 Ｔｈ２细胞在ＣＳＨ组分别为７．２％—２６．３％（平均１５％）和０、ｌ％—１０．９％（平均２．０％）,正常对照组则分别为２．２％—１１．９％（平均５．９％）和０．４％—３．９％（平均２．２％）;ＣＤ４＋Ｔｈ１细胞百分数两组间差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。荧光定量ＰＣＲ结果表明ＣＳＨ组中１３例ＨＢＶ　ＤＮＡ阳性,其ＨＢＶ ＤＮＡ的含量与ＩＦＮ－γ表达细胞百分数呈负相关。结论 Ｔｈ１细胞与肝脏的炎症活动明显相关,ＩＦＮ－γ的表达对ＨＢＶ复制可能具有一定的影响。