人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法研究

为寻求一种简易、快速，成批发测定人血清载脂蛋白Ｂ１００的方法，作者采用自制羊抗人ａｐｏＢ１００血清，以免疫浊度测定法测定了血清ａｐｏＢ１００。此法灵敏，特异，易自动化操作，最小检测量为３．１μｇ，标准曲线测定范围为０．３４￣１．７０ｇ／Ｌ，批内及批间重复变异系数分别为１．１３％￣３．４８％及２．９１％￣４．４８％，测定１００例正常成人血清ａｐｏＢ１００的含量为０．８２１±０．１６５ｇ／Ｌ。文内还对     

人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法研究

为寻求一种简易、快速、成批地测定人血清载脂蛋白Ｂ１００（ａｐｏＢ１００）的方法，作者采用自制羊抗人ａｐｏＢ１００血清，以免疫浊度测定法测定人血清ａｐｏＢ１００。此法灵敏、特异、易自动化操作，最小检测量为３．１μｇ，标准曲线测定范围为０．３４～１．７０ｇ／Ｌ，批内及批间重复变异系数分别为１．１３％～３．４８％及２．９１％～４．４８％。测定１００例正常成人血清ａｐｏＢ１００的含量（ｘ±ｓ）为０．８２１±０．１６５ｇ／Ｌ。文内还对影响测定的有关因素进行了讨论。     

血清载脂蛋白A及B100的自动化检测及其应用

载脂蛋白(Apo)是维持脂蛋白结构和功能的主要成份,而且血清中的ApoA_1、ApoB_(100)分别是高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)中的主要蛋白质,也是血清中含量最高的载脂蛋白。对其含量的测定不仅可以了解脂质的运输和代谢速度的快慢,而且对于了解心血管疾病的发生、发展及预后有非常重要的价值。目前检测载脂蛋白的方法已有多种,包括放射免疫分析法(RIA)、免疫电泳法(EIA)、单面圆周免疫扩散法(RID)、免疫浊度法(INA)、酶联免疫吸附法(ELISA)以及HPLC法,上述方法各有其优缺点。免疫浊度法(INA)是近几年才在国内采用的新方法,该法具有准确、灵敏的优点,且方法简单,试剂便宜,抗血清消耗少(只及EIA的1/3)。但因需要特殊仪器(如激光散射浊度仪),故不易推广。本文还对市售免疫浊度法试剂盒加以改进,使之能在全自动生化分析仪上快速、准确地进行测定,尤其适用于大批量检测。     

人血清载脂蛋白AⅡ免疫圆周扩散测定法研究

本文介绍人血清载脂蛋白AⅡ(apoAⅡ)免疫圆周扩散法。用纯化的人apoAⅡ免疫山羊制备抗血清。琼脂糖抗apoAⅡ抗体凝胶板,每孔加待测或稀释参考标准血清5μl,25℃扩散48小时,测量免疫反应沉淀环直径。结果:最小检测量58ng,测定范围17.3～69.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为1.5～4.6％和5.6％,样品回收率为96.6±4.3％。用本法测得我国成都地区成人apoAⅡ含量为:男26.7±4.4mg/dl(n=45),女26.6±4.6mg/dl(n=31)。     

成都地区438例男性中老年人血清载脂蛋白AI及AⅡ含量分析

采用该室建立的免疫浊度测定法（ａｐｏＡⅠ）及免疫测定法（ａｐｏＡⅡ）对成都地区４３８例４０－７０岁男性空腹１２小时血清的ａｐｏＡⅠ及ａｐｏＡⅡ进行了分析。结果表明成都地区４０－７０岁男性中老年人血清ａｐｏＡⅠ含量为１３．０±２２．０ｍｇ／ｄｌ，ａｐｏＡⅢ 为２９．９±４．９０ｍｇ／ｄｌ。ａｐｏＡⅡ一基本呈正态分布，ａｐｏＡⅡ一呈正偏态分布，与年龄增长无关。     

肝病血清载脂蛋白A1和B100检测的临床价值

肝脏是合成载脂蛋白Ａ1(ＡｐｏＡ1)和Ｂ10 0(ＡｐｏＢ10 0 )的主要器官 ,许多数据表明 ,各种原因引起的肝损害都伴有脂蛋白合成及代谢异常 ,本文通过对各种肝病ＡｐｏＡ1、ＡｐｏＢ10 0 和有关肝功指标检测分析探讨 ,证明它们在肝病诊断及预后判断中的意义 ,现将报告分析如下。资料与方法1　病例选择　各种肝病患者 1 1 0例 ,其中急性黄疸型肝炎 2 2例 ,急性无黄疸性肝炎 1 3例 ,慢性活动型肝炎 1 4例 ,慢性迁延性肝炎 2 1例 ,重症肝炎 3例 ,梗阻性黄疸 7例 ,肝硬化 1 8例 ,原发性肝癌 1 2例。对照组为 :44例健康体检者。经查胆固醇、甘油三…     

人血清载脂蛋白AⅡ酶联免疫测定法研究

本文介绍测定人血清载脂蛋白ＡⅡ（ａｐｏＡⅡ）的酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）。特异抗人ａｐｏＡⅡ血清由免疫山羊获得，按过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白交联物。用羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白（２０μｇ／ｍｌ）包被聚苯乙烯酶标板。结果表明：ａｐｏＡⅡ抗血清与ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣｓ，ａｎｏＢ１００（ＬＤＬ）以及人血清白蛋白无交叉反应，最小检测量为５０Ｏｎｇ，标准曲线工作范围为０．２５～８．００ｍｇ／ｄｌ，板内及板间变异系数分别为５．０％～９．２％及６．８％～１１．７％，回收率１０６．０±２．１％（ｎ＝４）。应用本法测得４１例血脂正常者ａｐｏＡⅡ含量为２４．４±５．９ｍｇ／ｄｌ，与用ＲＩＤ法测得的结果２６．７±４．６ｍｇ／ｄｌ相比（ｒ＝０．８０００，Ｐ＜０．００１），无显著性差异。本法特异性强，灵敏度高，简便快速。     

人血清载脂蛋白AI免疫圆周扩散测定法的研究

介绍一种人血清apoAⅠ免疫圆周扩散测定法。用纯化人apoAⅠ免疫山羊制备抗血清。制成0.8％琼?糖抗体凝胶板,点样5μl,25℃扩散48h测量结果。方法简便可靠,特异性、重复性好,无需特殊仪器。最小检测量125ng, 测定范围27.5～220.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为2.2～4.8％和6.3％,样品回收率98.9～110.0％,测得血脂正常的成年人血清apoAⅠ含量为男120.8±17.6mg/dl(n=40),女123.6±15.9mg/dl(n=19)。     

人血清载脂蛋白E酶联免疫测定法的研究

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的双抗体夹心酶联免疫测定法。采用羊抗人apoE—IgG 包被的聚苯乙烯板及过碘酸钠法交联的辣根过氧化物酶—羊抗人 apoE IgG交联物。载脂蛋白CⅠ、CⅡ、CⅢ、AⅠ、B及人血清白蛋白不干扰测定。最低检测量为 11ng,测定范围0.45～29mg/dl,板内及板间重复的CV分别为7.4％和6.7～14.9％;回收率为108±5.5％(n=8);测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE含量为3.57±1.24mg/dl(n=42)。     

酶联免疫定量检测人血清载脂蛋白B_(100)的研究

本文介绍一种简便,灵敏、特异测定人血清载脂蛋白(apo)B_(100)的双抗体夹心酶免疫试验。测定采用抗apoB_(100)-IgG包被的聚苯乙烯板及酶-抗apoB_(100)-IgG交联物,交联物由辣根过氧化物酶用戊二醛二步法制备。本法最小检测量为30ng;标准曲线的测定范围为30～400mg％;回收率为101.6～102.2％;批内和批间变异系数分别为5.5及4.7～8.4％。本法测定26例健康成人,血apoB_(100)含量为101.9±18.9mg％;与单向免疫扩散法(RID)测定的相关系数r=0.883。     

应用COBAS-FARA生化自动分析仪免疫比浊测定血清载脂蛋白A_Ⅰ及B含量的研究

在国内首次应用COBAS-FARA生化自动分析仪以免疫比浊法测定血清载脂蛋白AI及B的含量。本法批内变异为1.30%～2.02%,日间变异为2.29%～2.44%;回收率为96.05%～105.39%;载脂蛋白AI及B的检测分别在0.3g～3.0 g/L及0.1g～2.0g/L范围内呈良好的线性关系;与手工比浊法及火箭电泳法对比,其相关系数在0.9002～0.9426之间。     

人血清载脂蛋白B_(100)火箭免疫电泳测定法

利用顺序超速离心法从正常人血浆分离密度为1.030～1.050g/ml 的低密度脂蛋白免疫家兔获得单价抗载脂蛋白B_(100)血清,在国内建立了人血清载脂蛋白B_(100)火箭免疫电泳测定法。本法灵敏、特异,重复性好。测定载脂蛋白B_(100)的范围为100～880ng。批间重复及批内重复变异系数分别为 2.1～2.4％及1.2～2.7％。回收率为103.4±3.4％。     

人血清载脂蛋白E火箭电泳测定法

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的火箭免疫电泳测定法。本法用自制的羊抗人apoE血清及1.5％的琼脂糖凝胶制成抗体凝胶板,血清apoE含量在1.1～8.9mg/dl范围内,在一定条件下电泳,其火箭峰高与抗原浓度成比例。最低检测量为5.5ng,板内及板间变异系数分别为2.6％和5.2％;回收率为94.0±3.9％(n=6);用此法测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE的含量为4.7±1.2mg/dl(n=50)。     

成都地区624例健康成年人血清载脂蛋白B_(100)含量测定

作者报道用免疫圆周扩散测定法测定成都地区624例健康成年人血清载脂蛋白B_(100)的含量。结果显示:624例健康成人血清载脂蛋白B_(100)含量为87.3±14.3mg/dl(M±SD),且发现有随年龄上升而增高的趋势,其中304例男性为 87.9±14.4mg/dl,320例女性为86.7±14.4mg/dl,男女之间未见明显差异。作者并对所得结果作了讨论。     

冠心病患者血清载脂蛋白AI和B的临床研究

本文采用免疫比浊法测定42例冠心病患者和20例健康人血清载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)、载脂蛋白B(ApoB)含量,同时比较血清脂类和载脂蛋白对冠心病的辨别力,并对血脂和载脂蛋白的相关性进行分析。结果表明:42例冠心病患者血清ApoA-Ⅰ水平明显低于对照组,ApoB水平明显高于对照组。血脂和载脂蛋白单项指标及比值对冠心病的辨别力,最好的指标是ApoA-Ⅰ,其次是ApoB/ApoA-Ⅰ比值。ApoA-Ⅰ和ApoB对冠心病的正确辨别符合率明显优于现用的血脂指标。提示:测定冠心病患者血清ApoA-Ⅰ和ApoB含量有重要的临床实用价值。     

人血浆载脂蛋白E的分离及纯化

本文建立了一种快速、简便、较大量分离载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）方法。其优点：①选用高脂血症病人血浆，因ＡｐｏＥ的含量高，来源方便，故克服了分离提纯ＡｐｏＥ时因含量少，不易分离提纯的困难；②采用不连续密度梯度直立头超速离心法，此法只需加两种不同密度的溶液，比经典地超速离心法减少两种不同密度的溶液，故操作方便，且离心时间比经典方法（２４小时）缩短了十分之九；③获得极低密度脂蛋白中的载脂蛋白（ＡｐｏＶＬＤＬ），用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析（１．１×１００ｃｍ）分离提纯得到的ＡｐｏＥ，即是纯的ＡｐｏＥ，且避免了柱太长、不便操作的麻烦。纯化了的ＡｐｏＥ在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中显示一条带，测得分子量为３．８ｋＤａ。     

一种新的测定内毒素显色基质堂试验法

报道一种新型显色基质Boc-Leu-Gly-Arg-DEAA的合成和应用该基质建立的鲎试验法.测定游离显色基质DEAA与1-萘酚-2-磺酸缩合后形成的蓝色物质的吸收度与内毒素浓度的关系.实验表明,蓝色物质在675nm波长处的吸收度与内毒素的浓度在一定范围内呈线性关系.该法比凝胶鲎试验法的灵敏度高10倍,一般能检测0.006EU/ml的内毒素,若延长保温反应时间可检测含量低至0.002EU/ml的内毒素.测定样品的组内误差为4.8%,组间误差为6.8%.在测定病人血浆中的内毒素时不受任何病人血浆色泽的干扰,故特别适用于临床.