缺血预处理抗缺血再灌注心肌间质损伤的实验研究

目的：观察缺血预处理（ＩＰＣ） 对大鼠缺血再灌注心肌间质胶原及心肌功能结构关系的影响,以进一步探讨ＩＰＣ 对心肌的保护作用。方法：实验采用体重（２５０ ±３０）ｇ 雄性ＳＤ 大鼠２４ 只,分３ 组,每组８ 只,即假手术对照（ＳＣ）组;缺血再灌注（Ｉ／Ｒ） 组和缺血预处理（ＩＰＣ） 组。用超微结构立体计量及羟脯氨酸浓度测定观察心肌间质胶原变化,多道记录仪测量心功能指标,透射电镜观察心肌超微结构。结果：Ｉ／Ｒ 时心肌间质胶原浓度显著低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） ,心肌超微结构损伤严重,左室功能明显低于ＳＣ 组（ Ｐ＜ ０－０１） 。ＩＰＣ 组心肌超微结构破坏明显低于Ｉ／ Ｒ 组。同时,心肌间质胶原浓度、胶原纤维线密度及左室功能指标明显高于Ｉ／Ｒ 组（ Ｐ＜ ０－０５ ,Ｐ＜ ０－０１） 。结论：ＩＰＣ 的心肌保护作用不仅表现在对心肌细胞上,而且对心肌间质也有重要的保护作用。     

缺血预处理对大鼠肥大心脏缺血再灌注损伤的影响

本实验用一氧化氮合成抑制剂－左旋硝基精氨酸复制大鼠高血压心脏肥大模型并作缺血再灌注处理，以观察缺血预处理对高血压肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤的影响及ＮＯ在其中的作用。结果显示：ＩＰＣ能减轻大鼠高血压有肥大心脏Ｉ／Ｒ损伤，其程度与ＩＰＣ对正常心脏Ｉ／Ｒ损伤的保护相近，表明高血压肥大心脏同样具有ＩＰＣ保护现象，但ＮＯ在本模型中未起作用。     

脊髓缺血性再灌注损伤和预处理保护作用的实验研究

目的：探讨缺血预处理对家兔须缺血性损伤的保护作用。方法：家兔18只，随机分为Ⅰ组（假手术组）、Ⅱ组（缺血预处理组）和Ⅲ组（缺血再灌组），每组6只，Ⅰ组开腹后，在左肾动脉起点以下0．5cm处暴露并分离腹主动脉即关腹；Ⅲ组一次性阻断腹主动脉血流30min，松夹后关腹；Ⅱ组阻断腹主动脉血流5min，松夹后再灌注10min（如此反复2次），最后再持续夹闭腹主动脉30min，松夹后关腹。结果：Ⅰ组术后后肢运动功能全部正常，光镜和电镜检查显示组织结构变化甚微。Ⅲ组术后后肢运动功能发生严重障碍，脊髓组织严重损伤，与Ⅲ组比较，Ⅱ组术后后肢运动功能障碍较轻微，须组织损伤明显减轻，神经功能评价各组差异具有显著性（P12h=0.006和P36h=0.001)。结论：缺血预处理能够促进神经功能的恢复，减轻脊髓组织损伤，提示预处理对脊因再灌注损伤具有保护作用。     

低氧预处理骨髓间充质干细胞减轻脊髓缺血再灌注损伤的作用机制

脊髓缺血再灌注损伤是脊柱减压手术后常见的并发症,骨髓间充质干细胞椎管鞘内移植为治疗此损伤的有效方法之一。目前许多研究表明低氧预处理可促进骨髓间充质干细胞功能并减轻脊髓缺血再灌注损伤,因此本文拟就此作用的相关机制进行综述。     

肿瘤坏死因子-α预处理与缺血预处理在减轻肝脏缺血再灌注损伤的作用

目的研究采用肿效瘤坏死因子-α(TNF-α)预处理与采用缺血预处理两种方法对减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的作用效果,并探讨采用TNF-α预处理减轻大鼠肝脏IRI的机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(SO组)仅行开腹及游离肝十二指肠韧带;缺血再灌注组(IR组)采用Pringle’s法阻断肝门30 min,再灌注6 h;缺血预处理组(IPC组)采用Pringle’s法阻断肝门10 min,开放血流10 min,此后操作同IR组;TNF-α预处理组(TPC组),术前30 min给予TNF-α1μg/kg腹腔注射,此后操作同IR组。检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),采用免疫组织化学检测Bcl-2蛋白和NF-κB p65蛋白表达情况,以及肝细胞凋亡指数(AI)。结果 IPC组血清ALT、AST水平为(316.4±90.6)U/L、(316.4±90.6)U/L,TPC组为(336.8±79.4)U/L、(392.7±109.3)U/L,与IR组(642.8±149.3)U/L、(730.6±103.0)U/L比较明显降低,P0.05差异有统计学意义;肝细胞凋亡评分AI在IPC组(4.36+0.88)和TPC组(4.94+2.04)明显降低,与IR组(9.48+2.42)比较,P0.05差异有统计学意义;肝组织内Bcl-2蛋白阳性表达在IPC组(62.30+9.20)和TPC组(60.99+6.30)升高,与IR组(11.45+11.97)比较,有显著性差异(P0.05);NF-κB p65阳性表达在IPC组(31.56+4.85)和TPC组(32.80+5.30)明显降低,与IR组(68.33+6.07)比较,有显著性差异(P0.05)。上述各项指标在IPC组与TPC组间,差异无统计学意义(P0.05)。结论采用TNF-α预处理与缺血预处理对减轻大鼠肝脏IRI的效果一致,TNF-α预处理通过抑制NF-κB p65蛋白表达、激活凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达,减轻了大鼠肝脏IRI。     

晚期缺血预适应促进低氧诱导因子的表达减轻肾脏缺血再灌注损伤

目的: 探讨晚期缺血预适应对肾脏缺血再灌注损伤的作用,以及低氧诱导因子1α(HIF-1α)在其中的作用。方法: 将雄性C57/BL6N小鼠随机分为3组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR)和缺血预适应组(IPC)。采用夹闭双侧肾蒂30 min后恢复灌注的方法建立肾缺血再灌注小鼠模型;缺血预适应组4 d前给予肾脏15 min预缺血。观察缺血预处理对再灌注后不同时点血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾组织形态学和细胞凋亡的影响。采用免疫组化及Western印迹法,分析HIF-1α在肾组织的表达;采用实时定量RT-PCR法,检测血管内皮生长因子(VEGF)和葡萄糖转运子-1(Glut-1)的mRNA表达。结果: 再灌注24 h后,IPC组小管间质损伤程度较IR组显著减轻,Scr、BUN水平以及小管上皮细胞凋亡明显下降。IPC组的HIF-1α核内表达显著高于IR组,且HIF-1下游靶基因VEGF和Glut-1的mRNA表达亦显著增加。结论: 晚期缺血预适应能够显著改善缺血再灌注后肾脏的形态和功能,这种保护作用可能与促进低氧诱导因子高表达有关。     

脊髓缺血再灌注损伤对大鼠水通道蛋白4表达的影响

目的:在整体水平研究脊髓缺血再灌注损伤对大鼠水通道蛋白4表达水平的影响.方法:SD大鼠72只随机分为空白组、假手术组和SCⅡ组,每组24只.建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,并于1、3、5、7天四个时间点分别处死6只.BBB评分评价神经功能,Western blot和免疫荧光方法检测AQP4的表达情况.结果:空白对照组和假手术组在不同时间点的BBB评分均为21分,SCⅡ组的BBB评分在1天时最低,随时间推移逐渐增加,3天明显优于1天(P＜0.05),5天明显优于3天(P＜0.05),5天明显优于7天(P＜0.05).Western blot在34 kD及43 kD分子量处可见特异性条带,SCⅡ组早期AQP4的表达水平显著下降,即在1、3、5、7天四个时间点AQP4的表达显著低于空白对照组和假手术组,但呈逐渐增加趋势;在7天仍显著低于正常空白组和假手术组(P＜0.05).免疫荧光检测AQP4的表达变化趋势与Western blot的检测结果相似.结论:SCⅡ存在AQP4低表达,这可能是造成SCⅡ神经功能障碍的重要原因.     

热休克预处理对家兔肝缺血-再灌注损伤的影响

目的 :探讨热休克预处理对肝缺血 再灌注损伤的影响。方法 :随机将家兔分为对照组和热休克预处理组 ,复制肝脏缺血 再灌注模型 ,分别于缺血前、缺血 45min、再灌注 45min三次取血 ,赖氏法检测血清谷丙转氨酶 (ALT)活性。结果 :热休克预处理组缺血前的ALT活性稍高于对照组 ,但是缺血后及再灌注后显著低于对照组。结论 :热休克预处理对肝细胞有轻微的损伤作用 ,但是对缺血后和再灌注后损伤均有显著的保护作用。     

缺血预处理对糖尿病大鼠缺血/再灌注损伤性心肌超微结构的影响

目的:研究缺血预处理对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤性心肌超微结构的影响。方法:建立糖尿病大鼠、缺血再灌注和缺血预处理模型,随机分成6组,即非糖尿病和糖尿病的假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组,观察心肌酶和心肌超微结构变化。结果:非糖尿病的缺血预处理组心肌酶CK、CK-MB、LDH较缺血再灌注组明显降低,心肌超微结构损伤减轻;糖尿病缺血预处理组与缺血再灌注组相比心肌酶无降低,心肌超微结构损伤进一步加重。结论:缺血预处理对非糖尿病大鼠心肌具有保护作用,而对糖尿病大鼠心肌不具有同样的保护作用。     

缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤时Bax基因蛋白表达影响的实验研究

探讨缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的可能影响,特别是对Bax基因表达的影响.用免疫组化方法检测并观察大鼠后肢止血带缺血4 h后再灌注4、24、48 h后和先经预缺血处理后再灌注4、24 h后Bax基因蛋白在肌细胞中的表达情况.结果表明缺血4 h(A组)肌细胞出现Bax蛋白表达,24h后(B组)表达量显增加,48h后(C组)无表达.缺血预处理后再灌注4 h后(D组)肌细胞内无Bax蛋白表达,再灌注24 h后(E组)Bax蛋白表达量非常显著地低于B组.Bax基因参与了骨骼缺血再灌注损伤的病理过程,其蛋白表达量与组织损伤程度密切相关,经缺血预处理可以下调Bax基因蛋白的表达水平、或是抑制其合成,使肌细胞存活而发挥其保护作用.     

酸枣叶总黄酮通过调控HIF-1α表达减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的：观察酸枣叶总黄酮（FZSL）对大鼠缺血/再灌注（I/R）损伤心肌的影响,并探讨该作用是否由其调节低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达所介导。方法：60只Wistar大鼠随机分为6组：假手术（sham）组,I/R组,低、中、高剂量（50、100和200 mg/kg）FZSL组,以及HIF-1α抑制剂YC-1(20 mg/kg)+FZSL(200 mg/kg)组,每组10只。结扎大鼠冠状动脉左前降支,缺血30 min后再灌注3 h制备大鼠心肌I/R模型。采用TTC染色法测定大鼠心肌缺血面积和梗死面积;化学比色法检测大鼠血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）及心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）的活性;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6和TNF-α及心肌组织丙二醛（MDA）的含量;酶活性检测法测定心肌组织caspase-3的活性;Western blot检测心肌组织HIF-1α蛋白表达。结果：与sham组相比,I/R组大鼠心肌发生显著梗死,血清LDH和CK活性,血清IL-1β、IL-6和TNF-α含量,以及心肌组织MDA含量和caspase-3活性均显著增加（P<0.01...     

缺血预处理通过抑制铁死亡减轻大鼠肺缺血-再灌注损伤

目的：探讨铁死亡是否参与大鼠肺缺血-再灌注损伤（LIRI）,以及缺血预处理（I-pre-C）是否通过抑制铁死亡而减轻LIRI。方法：将SPF级雄性SD大鼠随机分成4组：对照组（control组）,缺血-再灌注（IR）30 min组（IR组）、铁死亡抑制剂去铁胺（DFO）组（IR+DFO组）和I-pre-C组,进行指标检测及肺脏病理观察。使用光镜、电镜和二氢乙啶（DHE）染色等评估大鼠肺组织的损伤程度;Western blot等方法检测缺血-再灌注肺组织铁死亡的相关指标。结果：与control组相比,IR组肺组织的活性氧（ROS）水平升高,丙二醛（MDA）和Fe水平升高,谷胱甘肽（GSH）水平下降,铁死亡相关蛋白酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)和转铁蛋白受体1(TFR1)水平升高,铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)下降（P<0.01）;与IR组相比,IR+DFO组肺组织的ROS水平显著下降,铁死亡的线粒体形态有所改善,MDA水平下降,GSH水平上升（P<0.01）;与IR组相比,I-pre-C明显改...     

NO对心脏缺血再灌注损伤的影响及其在缺血预处理中的作用

目的:明确NO对心脏缺血再灌注(IR)损伤的影响及其在缺血预处理(IP)保护机制中的作用,同时观察NO对缺血再灌注凋亡的影响。方法:使用在体大鼠心脏缺血再灌注模型,实验共分为6组:IR组,IR+L-arg组,IR+L-NAME组,IP组,IP+L-arg组,IP+L-NAME组,观察分析心功能、梗塞面积、中性粒细胞(PMN)计数、心肌髓过氧化物酶(MPO)活性、TUNEL阳性细胞计数等指标。结果:L-arg,L-NAME均明显减轻了IR引起的PMN浸润和心肌细胞凋亡。缺血预处理前给予NO前体L-arg增加NO生成或使用L-NAME阻断NO生成对缺血预处理保护作用无明显影响。结论:缺血前组予L-arg增加内源性NO生成可对心肌缺血再灌注发挥保护作用;组予L-NAME可能通过减少再灌注其ONOO^-的生成而减轻心肌损伤和凋亡。     

大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤局部缺血预处理及 肢体远程缺血预处理的影响对比

目的 对比局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理对大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤的影响。方法 选取广西医科大学动物实验中心提供的40只体质量在250~300 g的健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组、对照组,每组10只。用无损伤血管夹对肢体缺血预处理组大鼠右股动脉进行夹闭,对局部缺血预处理组大鼠胸背动脉进行夹闭,对缺血组大鼠的胸背动脉进行夹闭,对照组大鼠只在胸背动脉穿线,不结扎。运用ELISA法检测四组大鼠缺血前（T0）、缺血3 h（T1）、灌流恢复后1 h（T2）血清NO、ET水平。结果 肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于T0时,血清ET水平均高于T0时,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组、缺血组大鼠T1、T2时血清NO水平均低于对照组,血清ET水平均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;肢体缺血预处理组、局部缺血预处理组大鼠血清NO水平高于缺血组,血清ET水平低于缺血组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 大鼠背阔肌肌皮瓣缺血再灌注损伤在局部缺血预处理和肢体远程缺血预处理下均能够减轻,并保护肌皮瓣。     

去甲肾上腺素和缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌的作用

缺血预处理 (Ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ ,ＩＰ)的机理及其临床应用前景至今仍不清楚。目前肾上腺素能神经递质及其受体在ＩＰ的保护心脏作用中所起的作用日益受到重视。本试验通过大鼠缺血再灌注模型 ,并与ＩＰ保护作用相比较 ,探讨外源性去甲肾上腺素预     

短间隔高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB表达的影响

目的:探讨短间隔高压氧预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB表达的影响。方法:80只成年雄性Wistar大鼠,随机分为2组(每组n=40):对照组为常压空气组;HBO组为短间隔高压氧预处理组。采用肾下腹主动脉阻断法造成脊髓缺血再灌注损伤,观察两组再灌注后4 h、12 h、24 h、48 h时的后肢运动神经功能评分;再灌注48 h时取出腰段脊髓组织(L5-7)行石蜡包埋、切片,采用免疫组织化学法检测各组动物脊髓组织中NF-κB表达变化。结果:再灌注4 h、12 h、24 h、48 h时,HBO组神经功能学评分均明显优于对照组(P<0.05)。HBO组各时间点NF-κB阳性表达均明显低于对照组。HBO组和对照组后肢运动神经功能学评分与脊髓组织NF-κB表达呈正相关(r=0.72,0.65,P<0.05)。结论:高压氧预处理对缺血再灌注损伤的脊髓具有保护作用,且其所诱导的脊髓缺血耐受的机制与NF-κB有关。     

NO参与缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究缺血预处理(IPC)对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用及一氧化氮(NO)是否参与此保护作用。方法采用Wistar雌性大鼠,在左后肢跟部止血,同时使用血流监测仪测股四头肌的血流量,调整止血带的松紧程度,使血流量控制在上止血带前的30%。30只大鼠随机分成3组,分别为缺血再灌注组(n=10)、缺血预处理组(n=10)、缺血预处理+NAME组(n=10)。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶2+2+(NADH)染色,检测股四头肌各型肌纤维横截面积,钙-腺苷三磷酸酶(Ca-ATPase)染色,观察细胞膜CaATPase分布。透射电镜观测肌细胞的超微结构变化。结果缺血再灌注组出现明显肌纤维破裂溶解,许多白细胞浸润,电镜下线粒体中含有大量空泡变性、肌纤维断裂、溶解和Z线排列整齐膜脂质过氧化物的增加。与缺血再灌注组相比,缺血预处理组显示了轻微的损害,正常的纤维和血管变形少,股四头肌各型肌纤维横2+截面积降低,细胞膜Ca-ATPase数量增加。缺血预处理+NAME组与缺血再灌注组相比没有明显改变。结论缺血预处理对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤有明显保护作用,NO参与这一保护作用。     

尾加压素预处理对大鼠心脏缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨尾加压素(UII)预处理对于离体灌流大鼠心脏缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法:在离体灌流的SD大鼠心脏I/R模型上,以UII预灌注心脏,采用MFLLab200心功能软件监测心功能,以试剂盒测定心肌细胞ATP、总钙、丙二醛含量和乳酸脱氢酶(LDH)漏出,并观察其对于冠脉流出量(CPF)的影响。结果:UII预处理组与单纯I/R组比较,冠脉流出液中LDH低28%[(78.3±18.1)U/Lvs(10.93±23.9)U/L,P<0.05],心肌组织MDA和钙含量分别低24%和27%(P<0.05);ATP含量高73%(P<0.05)。与I/R组比较,UII预处理组CPF高42%[(5.4±0.7)mL/minvs(3.8±0.8)mL/min,P<0.05],LVEDP低20%(P<0.05),±dp/dtmax分别高25%和45%(P<0.05);冠脉流出液中NO₂^-/NO₃^-含量高63%(P<0.05)。结论:UII预处理可以减轻离体灌注大鼠心脏I/R所造成的损伤,其机制与NO介导的冠脉扩张效应有关。     

脑红蛋白在脊髓缺血再灌注损伤中的表达及其意义

目的:观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCI)过程中脑红蛋白(Ngb)的表达变化及其意义。方法:健康成年Wistar大鼠随机分为脊髓压迫缺血再灌注组和假手术对照组。运用原位杂交组织化学和免疫印迹法,检测压迫段脊髓组织中Ngb的表达变化。结果:再灌注2h后,Ngb在压迫段脊髓开始表达上调,24h较为明显,48h达峰值,72h表达减少,与假手术组相比较,具有显著性差异。免疫印迹法的结果和上述结果一致。结论:在脊髓缺血再灌注损伤中Ngb的表达变化与再灌注时间相关,其表达上调是机体内源性神经保护之一。