早孕绒毛组织巨细胞病毒感染产前诊断研究

目的:建立简易快速的巨细胞病毒(CMV)宫内胚胎感染的产前诊断方法,以防治宫内CMV感染。方法:应用免疫组织化学PAP方法,检测早孕绒毛组织CMV感染病灶。结果:608例早孕绒毛组织中,CMV感染222例(36.5％)。感染分为点状感染,巢灶状感染及弥散状感染。随胎龄增加,巢状感染及弥散状感染增多,观察发现CMV侵入绒毛组织往往入霍夫保尔氏细胞。此方法简便有效可用于筛查CMV宫内感染。     

p-ERK1/2在急性髓系白血病的表达及意义

目的检测磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)在急性髓系白血病(AML)中的表达,分析其与外周血白细胞数的相关性,探讨p-ERK1/2在AML发生、发展和治疗中的意义。方法选取同期收治的AML初治组患者26例(其中治疗后完全缓解者20例,未缓解者6例)、复发组患者20例、正常对照组20例骨髓细胞为研究对象,应用流式细胞仪检测p-ERK1/2的表达。结果 AML初治组及复发组p-ERK1/2的表达水平均显著高于对照组及完全缓解组(P<0.01),而完全缓解组与对照组p-ERK1/2的表达水平无显著差异(P>0.05),相关性分析表明白细胞数与p-ERK1/2的表达密切相关(P<0.01)。结论 p-ERK1/2的表达在AML发生、发展中有重要意义。     

caveolin-1和pERK1/2在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的 探讨甲状腺乳头状癌中caveolin-1(cav-1)与pERK1/2的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学法,检测40例甲状腺乳头状癌、11例甲状腺腺瘤及10例癌旁正常甲状腺组织中cav-1和pERK1/2的表达,并分析表达情况与临床病理参数之间的关系.结果 cav-1在甲状腺腺瘤和癌旁甲状腺组织中为低表达或无表达,而在甲状腺乳头状癌中呈高表达(阳性率为60%),且与肿瘤的包膜浸润和淋巴结转移相关.pERK1/2在甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤和癌旁甲状腺组织中均见表达,三者差异无统计学意义.cav-1和pERK1/2两者之间的表达无相关性. 结论 cav-1高表达可能参与调控甲状腺乳头状痛的进展和转移,可作为预后不良的指标.     

胎盘生长因子及瘦素在早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义

妊娠滋养细胞疾病( gestational trophoblastic disease,GTD)是一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾病.根据滋养细胞的分化程度、绒毛间质多少及生物学行为,GTD可分为葡萄胎、侵蚀性葡萄胎(invasivemole)、绒毛膜癌(chorionic carcinoma)及胎盘部位滋养细胞肿瘤[1].本研究排除胎盘部位滋养细胞肿瘤.     

线粒体融合蛋白2在胚胎停止发育者绒毛组织中的表达

目的:测定线粒体融合蛋白2(Mitofusin 2,Mfn2)在正常早孕妇女和不明原因胚胎停止发育患者绒毛组织中的表达差异,探讨Mfn2在胚胎发育过程中的可能作用。方法:采用HE染色观察正常早孕妇女(正常早孕组,30例)和不明原因胚胎停止发育患者(胚胎停育组,35例)绒毛组织形态;采用免疫组织化学技术(SABC法)检测Mfn2在两组妇女绒毛组织中的定位表达和表达强度;同时采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术检测两组妇女绒毛组织中Mfn2的相对表达。结果:Mfn2在正常早孕组和胚胎停育组绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞中均有阳性表达,在细胞滋养细胞中表达尤为明显,而在间质细胞中无明显表达,且Mfn2阳性表达主要分布在细胞浆中。胚胎停育组的绒毛组织中Mfn2的相对表达量(0.006 8±0.003 2)显著低于正常早孕组(0.023 9±0.005 5),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Mfn2在不明原因胚胎停止发育患者绒毛组织中的表达水平下降,提示Mfn2可能与胚胎发育相关,绒毛滋养层细胞中Mfn2的正常表达可能对维持早期妊娠起到一定作用。     

两种人早孕绒毛滋养层细胞的原代培养方法

目的:比较两种不同方法进行人早孕绒毛滋养层细胞原代培养的异同。方法:分别用组织块培养法和3种酶联合消化法(Ⅳ型胶原酶、低浓度胰酶及DNaseⅠ)、Ficoll 400梯度密度离心法对人早孕绒毛滋养层细胞培养。结果:两种方法进行早孕滋养层细胞的培养均获得成功,其生长率比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:组织块培养法简单易行,但细胞数量少,生长缓慢,难以完成后续实验;3酶联合消化、Ficoll 400梯度密度离心法相比较而言,可获得数量更多的活力好、纯度较高的具有不同分化功能的滋养层细胞,为进一步研究其侵袭、增殖能力等生理、病理作用提供了坚实的基础。     

TFF3和ERK通路在甲状腺乳头状癌中的表达和意义

目的 探讨三叶因子3(Trefoil Factor 3,TFF3)、细胞外调节蛋白激酶2(Extracellular Regulated Protein Kinases 2,ERK2)及其磷酸化状态(p-ERK1/2)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达水平和临床意义。方法 采用Western Blot和免疫组织化学法检测60例甲状腺乳头状癌组织,30例甲状腺腺瘤组织(adenoma,A),30例瘤旁正常甲状腺组织(normal group,N)TFF3、ERK2、p-ERK1/2蛋白的表达情况,分析三种指标在甲状腺乳头癌中的表达阳性率与其临床病理特征的关系。结果 Western Blot结果显示TFF3、ERK2、p-ERK1/2蛋白在甲状腺乳头状癌组织表达水平均高于正常组和腺瘤组(P<0.05)。免疫组化结果显示TFF3、ERK2、p-ERK1/2阳性蛋白呈棕黄色颗粒,TFF3主要表达于胞浆,ERK2为胞浆(膜)阳性,p-ERK1/2以胞核阳性为主,部分细胞胞浆阳性。TFF3、ERK2、p-ERK1/2在甲状腺乳头状癌中阳性表达率分别为85.0%、81.7%、78.3%,明显高于腺瘤组和正常组(p<0.05),并与病理分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),TFF3与ERK2、p-ERK1/2的表达呈正相关(r=0.415,r=0.467,P<0.01)。〗结论 TFF3可能通过ERK通路促进了甲状腺乳头状癌的发展及转移。     

巨细胞病毒感染对人早孕绒毛及蜕膜组织的内分泌影响

目的:探讨人巨细胞病毒(humancytomegalovirusHCMV) 感染对人早孕绒毛及蜕膜组织的内分泌影响。方法: 采用体外培养早孕绒毛及蜕膜组织技术, 给予HCMV感染建立体外HCMV感染早孕绒毛及蜕膜模型, 采用放射免疫法检测HCMV感染后早孕绒毛及蜕膜组织培养上清液中hCG和PRL的水平。结果: ①正常早孕绒毛培养液中hCG分泌峰值在培养后第7天。给予高浓度HCMV干预后, hCG水平显著下降(P<0 .01 ), 给予中浓度HCMV干预后, hCG水平明显下降(P<0. 05 ),给予低度HCMV干预后, hCG水平于培养的第1~3天有所下降, 与正常对照组无显著差别(P>0 .05)。②正常蜕膜培养液中PRL分泌峰值在培养后第5天达峰值, 给予高浓度HCMV干预后, PRL水平显著下降(P<0 .001), 给予中浓度HCMV干预后,PRL水平明显下降(P<0 .01), 给予低度HCMV干预后, PRL水平于培养的第1~5天明显下降(P<0. 05) 后渐恢复至正常水平。结论: HCMV感染可影响早孕绒毛及蜕膜组织的hCG和PRL的分泌, 导致不良妊娠结局。     

早孕绒毛外细胞滋养细胞的体外培养方法

目的:探讨改良人早孕绒毛外细胞滋养细胞原代分离培养方法。方法:建立改良的复合酶消化梯度离心法,分离培养绒毛外细胞滋养细胞,通过免疫细胞化学、Giemsa染色和细胞侵袭实验检测细胞纯度、数量及生物学活性(侵袭性),并与低浓度胰蛋白酶消化方法进行比较。结果:低浓度胰蛋白酶消化方法和改良的复合酶消化梯度离心法所得贴壁细胞量分别为(11.69±1.26)×104和(17.21±0.51)×104,两者比较有统计学差异(P<0.05);绒毛外细胞滋养细胞纯度分别为(63.20±7.12)%和(92.10±5.11)%,两者比较有统计学差异(P<0.05),穿膜细胞数分别为(36.10±3.28)和(66.20±5.17),两者比较有统计学差异(P<0.05),提示该实验室改良的复合酶消化梯度离心法所得细胞总量、绒毛外细胞滋养细胞纯度及数量均显著高于低浓度胰蛋白酶消化方法。结论:该实验室改良的复合酶消化梯度离心法获得绒毛外细胞滋养细胞纯度和数量显著提高。     

绒毛膜绒毛活检在早孕诊断中的应用

绒毛膜绒毛活检是近二十年来国外开展较为广泛的一项产前诊断技术,主要用于胎儿染色体异常的早期产前诊断。本文主要对绒毛膜绒毛活检的准确性和安全性进行综述。     

Double immunoelectron microscopic labelings of human chorionic gonadotropin and human placental lactogen in human chorionic villi

Simultaneous immunoelectron microscopic localization of human chorionic gonadotropin (HCG) and human placental lactogen (HPL) was examined on the same ultrathin section of human chorionic villi by means of the double labeling technique. Using specific rabbit antisera against HCG and HPL followed by goat anti-rabbit IgG-coated colloidal gold of different sizes (15 nm and 5 nm), immunoreactions of HCG were concentrated on middle-sized secretory granules of 200-300 nm and large dense bodies of 500-1000 nm, while those of HPL were exclusively located on small secretory granules of 80-180 nm. The present experiment provides direct evidence for our previous data that HCG and HPL seem to be stored in different granular components in the syncytiotrophoblast.     

米非司酮药流时LIF、ICAM-1在绒毛组织中的表达及意义

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛组织中白血病抑制因子(LIF)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:采用免疫组化染色测定绒毛组织中LIF和ICAM-1的表达,其中正常早孕人工流产组20例,米非司酮药物流产组22例。结果:LIF在正常早孕绒毛组织中的阳性表达率为85%(17/20),在米非司酮药物流产组阳性表达率为50%(11/22);正常早孕绒毛组织中ICAI-1阳性表达率为80%(16/20),米非司酮药物流产绒毛组织中阳性表达率为45%(10/22),差异均有显著性(P<0.05)。结论:LIF和ICAM-1与胚胎着床及维持正常早孕有关。米非司酮可引起人早孕绒毛组织中LIF和ICAM-1的表达降低,可能是抗早孕终止妊娠机理之一。     

诊断剂量的超声辐射对人类早孕绒毛和蜕膜组织细胞的影响

目的:探讨不同辐射时间的诊断超声检查对早期妊娠绒毛和蜕膜细胞的影响。方法:将50例正常早期妊娠妇女随机平均分为对照组(0辐射)、Ⅰ组(5min辐射)、Ⅱ组(10min辐射)、Ⅲ组(20min辐射)和Ⅳ组(30min辐射),共5组,在超声辐射后24h取绒毛和蜕膜组织进行细胞凋亡状态检测。结果:持续20min以上的诊断剂量超声辐射使绒毛细胞凋亡水平上升,持续30min以上的诊断剂量超声辐射使蜕膜细胞凋亡水平上升(P<0.05)。结论:诊断剂量的超声辐射可以诱导早孕绒毛和蜕膜细胞凋亡,而且随着辐射时间的延长细胞凋亡水平不同程度的增高,从优生优育方面的考虑,早期妊娠超声诊断应在尽可能短的时间内完成。     

bcl-xL在浅表性膀胱肿瘤中的表达及意义

目的 探讨bcl-xL在浅表性膀胱肿瘤中的表达及其与预后的关系.方法 采用免疫组化二步法检测bcl-xL在80例浅表性膀胱肿瘤患者肿瘤组织中的表达,并且比较bcl-xL表达异常和正常患者的无瘤生存时间.结果 随访5～48个月,bcl-xL表达异常者的复发率为71.4%(30/42),高于表达正常者的50.0%(19/38)(P<0.05);且无瘤生存时间[(16.0±1.2)个月]短于表达正常者[(36.0±4.5)个月](P<0.05).结论 浅表性膀胱肿瘤bcl-xL表达异常者其术后复发时间早,无瘤生存时间短,bcl-xL可能成为判断膀胱肿瘤患者预后的指标.     

HLA-E在RSA人绒毛组织中的表达与临床意义

目的 研究人类白细胞抗原E(HLA-E)在反复自然流产(RSA)和正常流产人绒毛组织中的蛋白和mRNA表达,探讨HLA-E与不明原因RSA的相关性及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术和逆转录-聚合酶链反应技术检测35例RSA人绒毛组织和35例正常流产人绒毛组织中细胞学定位以及HLA-E在mRNA水平的表达.结果 免疫组织化学检测结果显示两组中均有HLA-E阳性表达,RSA组的HLA-E在人绒毛组织中阳性表达率低于正常流产组(χ2=131.125,P<0.05).逆转录-聚合酶链反应结果显示RSA组和正常流产组均有HLA-E表达,对比显示RSA组的HLA-E表达低于正常流产组(t=1.937,P<0.05).结论 RSA妊娠妇女早孕绒毛组织中HLA-E在组织细胞学蛋白和mRNA水平均较正常人工流产妊娠妇女早孕绒毛组织中降低,提示自然流产妊娠妇女存在HLA-E表达异常,HLA-E可能与RSA的发生关系密切.     

Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨Gal-4蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义。方法分别收集83例和31例石蜡包埋的大肠癌和正常大肠组织。免疫组化检测Gal-4蛋白在大肠癌及正常大肠组织中的表达。统计分析Gal-4蛋白表达变化与大肠癌临床参数之间的相关性。结果 Gal-4蛋白在大肠癌中的表达明显下调。此外,下调表达的Gal-4蛋白明显与大肠癌的分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及Duke分期相关。结论 Gal-4表达下调可能是大肠癌进展的一个恶性标志物。     

缺氧缺血新生大鼠海马ERK的变化及GM1的影响

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性(HI)脑损伤后脑细胞凋亡的情况,进一步研究HI脑损伤后海马细胞外信号调节激酶(ERK)的变化,探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对HI新生大鼠的脑保护作用。方法:选择新生7日龄Sprague-Dawley大鼠108只,随机分为3组:缺氧缺血组(HI组,36只),假手术对照组(Control组,36只),缺氧缺血+神经节苷脂组(GM1组,36只)。采用结扎右侧颈总动脉并吸入低氧混合气体制备HIBD模型,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测大脑海马CA1区p-ERK的表达。结果:新生大鼠HI后脑细胞存在凋亡,GM1治疗能减少细胞凋亡。HI组、Control组和GM1组凋亡细胞数分别为(8.41±1.27)、(39.25±2.02)和(11.10±1.79),HI组阳性细胞数明显高于Control组和GMl组(P<0.05),GM1组与Control组比较阳性细胞数无明显差异(P>0.05)。HI组和GMl组p-ERK表达皆为阳性,两组比较HI组表达更强(P<0.05),Control组未见有p-ERK表达。结论:GM1可减少HI脑损伤后脑细胞凋亡,影响p-ERK表达,对缺氧缺血(HI)新生大鼠的脑具有保护作用。     

人类白细胞抗原E在子宫腺肌病在位及异位内膜的表达

目的:通过检测AM患者在位及异位内膜的人类白细胞抗原E(HLA-E)的表达,探讨HLA-E在AM发病机制中的作用。方法:选取2008年12月~2009年10月因AM行子宫切除的标本62份作为病例组,同期因子宫肌瘤行子宫切除的标本20份作为对照。采用免疫组化SP法,检测两组中HLA-E的表达情况,比较检测的结果。结果:HLA-E在对照组内膜组织中低表达,在病例组在位内膜及异位内膜中表达的程度较对照组明显增强,差异有统计学意义(P<0.05),病例组在位内膜组织与异位病灶两者之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。细化分组,比较病例组增殖期组与分泌期组HLA-E的表达差异无统计学意义(P>0.05);比较病例组浅层组与深层组HLA-E的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:①高表达的HLA-E可能参与子宫腺肌病的发病机制;②HLA-E分子表达的强度与月经周期的不同时期及病灶浸润肌层的深度无关;③改善患者免疫状态,为临床治疗子宫腺肌病提供新思路。