转化生长因子β1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨转化生长因子β1(TGF—β1)与喉鳞状细胞癌患者的病理分级、临床分期问的相互关系，研究TGF-β1在喉鳞状细胞癌发病机制中的作用。方法：分别提取21例喉鳞状细胞癌组织,15例喉正常组织的总RNA，采用逆转录聚合酶链反应技术，检测TGF-β1 mRNA的水平。结果：21例喉鳞状细胞癌组织中10例(47．62％)TGF-β1 mRNA表达阳性。TGF-β1 mRNA与喉鳞状细胞癌病理分级和临床分期有一定关系。结论：TGF-β1可作为评定喉鳞状细胞癌的进展、浸润的指标。     

喉鳞状细胞癌组织中IL-17的表达及其临床意义

目的:检测喉鳞状细胞癌组织中IL-17的表达情况,评价IL-17的表达在喉鳞状细胞癌生物学行为和预后中的价值。方法:采用免疫组化SP法检测71例喉鳞状细胞癌及21例癌旁组织中IL-17的表达。结果:喉鳞状细胞癌组织中IL-17的表达率为54.9%(39/71),与癌旁组织(28.6%)对比差异有统计学意义(P<0.05);IL-17的表达与喉癌的分期、肿瘤分化、区域淋巴结转移、远处转移及复发有关(均P<0.05);Log-rank检验显示患者预后与肿瘤原发灶部位、原发灶分期、区域淋巴结转移、远处转移、IL-17的表达有关(P<0.05),多因素Cox回归分析发现IL-17不是影响患者预后的独立危险因素。结论:IL-17与喉鳞状细胞癌的发生、发展以及预后关系密切,是喉鳞状细胞癌患者的不良预后因素,可为喉鳞状细胞癌的抗肿瘤免疫治疗提供一定的理论依据。     

喉鳞状细胞癌组织中p63表达的临床意义

目的：探讨p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法：用免疫组织化学法检测63例喉鳞状细胞癌（喉癌组）及其45例癌旁组织（癌旁组）、24例转移淋巴结（转移淋巴结组）、40例未转移淋巴结（未转移淋巴结组）及25例喉非癌组织（非喉癌组）中p63基因的表达。结果：p63基因在喉鳞状细胞癌组织中均为细胞核阳性表达,喉癌组及转移淋巴结组的中、强阳性率为95．2％（60／63）和83．3％（20／24）;癌旁组及未转移淋巴结组中无中、强阳性表达;非喉癌组中1例乳头状瘤为弱阳性表达,其余均为上皮细胞或基底细胞核弱阳性表达。结论：p63可作为喉鳞状细胞癌有特异性的标记物,对喉鳞状细胞癌的早期诊断和鉴别诊断有重要意义。p63可能主动参与了调控喉鳞状细胞癌的发生过程,但在喉鳞状细胞癌的发展过程中处于被激活状态,可能在发展过程中发挥负反馈的作用。     

喉鳞状细胞癌组织中骨桥蛋白和p53的表达及其临床意义

目的 研究人喉鳞状细胞癌（LSCC）及其癌旁相对正常组织中骨桥蛋白 (OPN)和p53表达水平,并探讨两者的相互关系及其临床病理学意义。方法 采用免疫组织化学SP法,对44例LSCC及癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,检测OPN和p53的表达,结合喉癌患者的临床病理学特征进行分析。结果 ①44例喉癌组织中OPN和p53表达阳性率分别为75.0%（33例）和65.9%（29例）,癌旁相对正常组织中分别为13.6%（6例）和2.3%（1例）;②OPN的表达与颈部淋巴结转移、临床分期、病理组织学分级有关,与性别、年龄、原发部位无相关性;③OPN和p53的表达呈显著正相关（r＝0. 360,P＝0.016）。结论 OPN在喉癌组织中的表达高于癌旁相对正常组织,可能参与了喉癌的发生、发展和转移,有可能成为判断预后的重要生物学标记物。     

喉鳞状细胞癌Paxillin表达的临床意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌Paxillin蛋白表达的临床意义。方法 运用免疫组化S-P法检测石蜡包埋喉鳞癌标本74例，以及癌旁正常组织70例，癌旁轻度、中度、重度不典型增生黏膜上皮组织65、69、72例，分析比较Paxillin蛋白表达水平与患者各类临床资料的相关性及其临床意义。结果 喉鳞癌组织Paxillin阳性率明显高于正常组织标本（P〈0．05），不同分化程度癌组织的Paxillin阳性率也存在显著性差异，低分化者阳性率明显高于高和中分化组（P=0．001），伴有颈部淋巴结转移者阳性率明显高于无转移者（P=0．000），而且临床Ⅳ期病例阳性率又明显高于其他各期患者（P=0．000）。结论 Paxillin的阳性表达水平与喉鳞状细胞癌的分化程度、颈淋巴结转移、临床分期有明显相关性，对其病理过程具有一定影响。     

喉鳞状细胞癌中生存蛋白的表达及临床意义

研究显示，生存蛋白(Survivin)是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因子，其高表达能抑制多种因子如p53、caspase等诱导的细胞凋亡。Survivin在宫颈癌、肺癌、直肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤中的表达均有报道，而其在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义国内鲜见报道，我们检测了39例喉鳞状细胞癌     

喉鳞状细胞癌组织FLIP和PTEN蛋白的表达及其临床意义

目的：研究FLIP和PTEN在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨FLIP在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用及与PTEN的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测45例喉癌组织以及15例癌旁组织中的FLIP和PTEN的表达。结果：FLIP在喉癌中的表达阳性率（77．8％）高于癌旁组织（33．3％）（P〈0．05）,FLIP的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期及颈淋巴结转移和预后均有关。PTEN在喉癌中的表达阳性率（65．0％）高于癌旁组织（0）,（P〈0．01）,PTEN的表达与喉鳞状细胞癌的肿瘤临床分期及分化程度、颈淋巴结转移和预后有关。FLIP与PTEN在喉鳞状细胞癌中的表达呈负相关。结论：FLIP可能是喉鳞状细胞癌的一个重要的预后标记物。PTEN的表达与肿瘤临床分期、肿瘤分化和淋巴结转移有关,也可能是判断预后的一个有意义的指标。     

喉鳞状细胞癌中Survivin和PTEN基因的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制基因Survivin和抑癌基因PTEN在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学Envision法检测71例LSCC标本中Survivin、PTEN蛋白的表达，并以10例声带息肉组织为对照。结果：Survivin蛋白在声带息肉中不表达；在71例LSCC中，53例（74．6％）表达阳性；Survivin阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小均无相关性（均P〉0．05），均与肿瘤发生部位、临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。PTEN蛋白在声带息肉中强表达（100%）；在71例LSCC中，33例（46．5％）表达阳性；PTEN阳性表达率与LSCC患者的年龄、性别、肿瘤大小、发生部位均无相关性（均P〉0．05），均与临床分期、病理分级、淋巴结转移、预后有关（均P〈0．05）。在LSCC组织中Survivin与PTEN的表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin、PTEN基凼的异常表达与LSCC的发生、发展及预后有关，可作为评价LSCC生物学行为的重要参考指标。二者在LSCC的发生、发展中起协同作用。     

喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体基因过表达的研究

目的：研究喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体（EGFR）基因的异常表达与喉鳞状细胞癌发生的相关性.方法：应用RT-PCR方法检测50例喉鳞状细胞癌患者组织标本和喉癌Hep-2细胞系中EGFR基因mRNA表达水平.结果：在60%（30/50）喉鳞状细胞癌及喉癌Hep-2细胞系中检测到EGFR基因的过表达.结论：EGFR基因的过表达与喉癌发生及发展有关.     

p63基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

p63基因是由Osada于1998年发现的另一个p53基因家族成员，定位于3q27-3q29。p63与p53蛋白具有非常相似的结构和功能，目前已被认为是一个候选抑癌基因。我们应用原位杂交方法分别检测喉鳞状细胞癌、癌旁增生组织、非典型增生组织和声带息肉中的p63基因表达程度，藉以探讨     

内皮抑制素和血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨内皮抑制素（endostatin）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子-2（fibroblast growth factor basic-2，FGF-2）在喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织中的表达和临床意义。方法采用流式细胞术检测50例喉鳞癌、40例癌旁组织、10例正常组织中Endostatin、VEGF及FGF-2的表达。结果Endostatin、VEGF、FGF-2在喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率与癌旁组织和正常喉黏膜组织相比差异有统计学意义（P值均〈0．05）；喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率均高于癌旁组织及正常喉黏膜组织，癌旁组织与正常喉黏膜组织之间的表达量及阳性表达率差异无统计学意义（P值均〉0．05）。Endostatin、VEGF、FGF-2在喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率与淋巴结及临床分期有关，与临床分型、患者年龄及性别无关。结论Endostatin、VEGF及FGF-2与喉鳞癌的发生、发展密切相关，并可能影响预后。     

基质金属蛋白酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP）-2在喉鳞状细胞癌（LSCC）中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测了63例LSCC及其中20例癌旁安全缘正常组织（ASM）和18例声带息肉（VCP）中MMP2的表达。结果：MMP2在LSCC、VCP和ASM中的阳性率分别是66．7％、33．3％、15．0％，3者之间均差异有统计学意义（均P〈0．05）；在I．SCC不同病理分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级间表达存在差异（均P〈0．05）；在LSCC淋巴结转移与非转移者间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；在不同临床分期及不同年龄组间的表达差异无统计学意义。结论：MMP-2可能只在LSCC发生及发展中起重要作用，而与LSCC的转移无关。     

Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

喉鳞状细胞癌和喉乳头状瘤中Survivin表达的意义

目的：探讨Survivin蛋白在喉鳞状细胞癌和成人喉乳头状瘤中的表达及其意义。方法：应用免疫组化方法对46例喉鳞状细胞癌、24例癌旁组织和20例喉乳头状瘤以及16例正常喉粘膜标本中Survivin的表达进行检测。结果：Survivin蛋白在喉癌组织、癌旁组织和喉乳头状瘤中的阳性表达率分别为71.74%（33/46）、33.33%（8/24）和40.0%（8/20）,在正常黏膜组织中没有表达,喉癌组中的阳性表达率分别显著高于正常组织、癌旁组织及喉乳头状瘤中的表达率（均P〈0.01）。且发生恶变的喉乳头状瘤Survivin蛋白均为阳性表达。但Sur-vivin阳性表达与喉癌的发生部位、分级、分期、淋巴结转移以及病理分级没有关联。结论：Survivin在喉癌组织中过度表达,参与了喉癌的形成,是喉癌形成的一个早期事件,可望成为预测成人喉乳头状瘤恶变的一个诊断方法。     

在喉鳞状细胞癌中的表达

目的:研究癌基因STK15在喉鳞状细胞癌中的表达，探讨STK15与喉鳞状细胞癌的相关性。方法：应用SP免疫组织化学法检测40例喉鳞状细胞癌及30例声带息肉中STK15的蛋白表达。结果：STK15在喉鳞状细胞癌和声带息肉中的阳性率分别为67.5%（27/40）、33.3%（10/30），二者之间差异有统计学意义（P＜0.05）。STK15蛋白表达与喉鳞状细胞癌的TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05），与喉鳞状细胞癌病理学分级、原发部位及患者的性别、年龄无关（P＞0.05）,且STK15蛋白阳性表达强度与喉鳞癌患者的TNM分期有关（P＜0.05）。结论：STK15在喉鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用，可能成为喉鳞状细胞癌基因治疗的新靶点。     

高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

生长相关性癌基因-1在喉癌中的表达及其与VEGF的相关性

目的：探讨生长相关性癌基因-1（GRO-1）在喉癌组织中的表达及其与喉癌部分临床生物学特性的相关性。方法：采用RT-PCR方法检测GRO-1在30例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）和10例正常喉黏膜组织（对照组）中的表达;免疫组织化学染色方法检测60例喉癌组织中GRO-1和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：RT-PCR结果显示,GRO-1在喉癌组中的表达与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组织化学染色结果显示,GRO-1在有淋巴结转移的喉癌中的表达相对无淋巴结转移者差异有统计学意义（P〈0．05）;GRO-1表达与喉癌分化程度无关（P〉0.05）;GRO-1在不同年龄、性别、病变部位和不同T分期中的表达均无统计学意义（均P〉0.05）。GRO-1和VEGF的表达存在正相关关系（P〈0.05）。结论：GRO-1能够通过多种作用影响喉癌的发生、发展和转移,其中,在微血管形成方面与VEGF的高表达紧密关联。     

靶向血管内皮生长因子的siRNA表达框架对喉癌细胞株Hep-2细胞生长的抑制作用

目的研究培养Hep-2细胞中，靶向血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的小干扰RNA表达框架（small interference RNA expression cassettes，SECs）对肿瘤细胞生长的影响，检测VEGF基因表达的情况，筛选最佳干扰序列，探讨RNAi技术在肿瘤基因治疗中的应用前景。方法根据siRNA靶序列设计原则，设计出VEGF4个位点的干扰序列，然后进行合成，即为siRNA表达框架的下游引物。由于干扰试剂盒中采用RNA介导的u6聚合酶Ⅲ启动子和改良的终止序列，从而在靶细胞内可以高水平及精确地表达siRNA。我们将4个位点的PCR产物分别转染指数生长期的Hep-2细胞，48h开始观察和检测所产生的RNA干扰的效果。结果形态学检测：转染后的1366位点的细胞可见皱缩、变圆并开始脱落，而其他三个位点的细胞形态学上未见明显的改变；逆转录-聚合酶链反应产物进行琼脂糖凝胶电泳，与对照组相比，1366位点细胞VEGF mRNA明显被抑制，吸光度为0．05，而其他三个位点的抑制效果不显著，吸光度分别是0．25、0．30和0．18。Western blot分析表明：与其他三个位点相比，1366位点的VEGF蛋白表达明显减弱；流式细胞仪检测表明：1366位点转染细胞的凋亡率为43％，而其他三个位点转染细胞的凋亡率改变不明显，分别为8．9％、6．5％和11．2％；本实验重复性强，同样的实验重复三次结果一致。结论研究表明靶向VEGF的1366位点的siRNA表达框架能高效抑制喉癌细胞株Hep-2细胞的生长。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的：了解细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在喉鳞状细胞癌(LSCC)及喉癌前病变的表达情况,探讨其与LSCC浸润和转移的关系。方法：用免疫组织化学SP法对42例LSCC、28例喉癌前病变和20例正常喉组织中的EMMPRIN表达情况进行检测。结果：EMMPRIN在LSCC和喉癌前病变的阳性表达率分别为88．1％和57．1％,明显高于正常喉组织的5．0％,Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织的强阳性表达率为76．0％,高于Ⅰ～Ⅱ期的强阳性表达率17．6％。伴有颈淋巴结转移的LSCC组织的EMMPRIN强阳性表达率高于无淋巴结转移组。结论：EMMPRIN在LSCC有较高的阳性表达。EMMPRIN的表达与LSCC的分期和是否存在淋巴结转移有关。LSCC组织EMMPRIN的表达影响LSCC的浸润和转移。