分化型甲状腺癌组织中脆性组氨酸三联体基因外显子5、8纯合性缺失及突变检测

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中脆性组氨酸三联体 (FHIT)基因外显子5、8(E5、E8)纯合性缺失及突变情况.方法:分别采用外显子特异PCR及PCR-SSCP技术检测65例DTC组织及其相应非癌上皮(NCE)组织中FHIT基因E5、E8纯合性缺失及点突变.结果:甲状腺NCE组织中,E5、E8纯合性缺失率均为0;DTC中,E5纯合性缺失率为30.8%(20/65),且与患者淋巴结转移有关(P<0.05);E8纯合性缺失率为29.2%(19/65),且与患者TNM分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05).DTC组织中,FHIT基因E5、E8纯合性缺失的发生相关(χ2=23.212,P<0.01).所有标本未检测到E5、E8点突变.结论:FHIT基因E5、E8纯合性缺失可作为检测DTC生物学行为的重要标志.点突变可能不是DTC组织中FHIT基因失活的主要机制.     

鼻咽癌组织中脆性组氨酸三联体基因的表达及意义

目的探讨鼻咽癌组织中脆性组氨酸三联体（fragile histidine triad，FHIT）基因的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP（Streptavidin peroxidase）法，检测FHIT在37例鼻咽癌组织及12例癌旁组织中的表达。结果鼻咽癌组FHIT蛋白阳性表达率43．2％（16／37）显著低于癌旁组100％（12／12）（均P〈0．01）；高中分化组与低分化组之间FHIT蛋白阳性表达率（50．0％ vs 36．4％）差异有统计学意义（P〈0．05）；淋巴结转移组FHIT蛋白阳性率为38．5％（10／26），无淋巴结转移组为54．5％（6／11），差异有显著性（P〈0．05）；根据临床病理分期，Ⅰ＋Ⅱ期组与Ⅲ＋Ⅳ期组之间FHIT蛋白阳性表达率（58．3％vs 36．0％）差异有统计学意义（P〈0．05）。另外。FHIT蛋白阳性表达与患者年龄、性别、病理类型无关（P〉0．05）。结论FHIT基因在鼻咽癌的发生、发展中起重要作用。对其蛋白的检测可能是判定鼻咽癌发生及转移能力的一项客观指标。     

乳癌组织中脆性组氨酸三联体蛋白检测

目的:检测乳癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学SP法,检测53例乳癌组织(Ⅰ期6例,Ⅱ期13例,Ⅲ期25例,Ⅳ期9例;有淋巴结转移38例,无淋巴结转移15例;高中分化31例,低分化22例)及14例癌旁正常组织中FHIT的表达.结果:①乳癌组织中FHIT蛋白阳性表达率(49.1%,26/53)明显低于正常乳腺组织(92.9%,13/14),P＜0.05.②53例乳癌组织中,中高分化组与低分化组间(54.8% vs40.9%),淋巴结转移组与无淋巴结转移组间(44.7%vs 60.0%),Ⅰ Ⅱ期组与Ⅲ Ⅳ期组间(57.9% vs 44.1%)FHIT蛋白阳性表达率差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:FHIT基因与乳癌的发生、发展有关,可作为判定乳癌发生及转移能力的一项客观指标.     

脆性组氨酸三联体基因在胆囊癌的表达

目的:探讨胆囊癌中脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因的表达状况及其与胆囊癌临床病理指标和预后的可能关系.方法:采用免疫组化S-P法,对51例原发性胆囊癌、15例胆囊腺瘤和12例慢性胆囊炎组织中FHIT表达进行检测.结果:FHIT在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中阳性表达率分别为47.1%、66.7%和91.7%,三者差异有统计学意义(P＜0.005).FHIT表达水平与胆囊癌患者年龄、性别、组织学类型、Nevin临床分期以及是否伴有结石等因素均无明显关系(P＞0.05),但FHIT表达缺失与胆囊癌的高分级、淋巴结或远处转移以及术后生存时间减少有明显关系(P＜0.05).结论:FHIT基因是胆囊癌的一个候选抑癌基因.FHIT表达缺失在胆囊癌的发生和演化中起重要作用,其有可能作为临床评估胆囊癌生物学行为和预后的一项新指标.     

口腔癌及癌前病变中脆性组氨酸三联体基因的表达及其意义

目的 检测抑癌基因脆性组氩酸三联体基因(FHIT)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)及癌前病变中的表达情况，并探讨其在口腔癌发生过程中的作用及其意义。方法 采用SP免疫组化方法检测64例OSCC、39例口腔癌前病变、12例正常粘膜中FHIT蛋白情况的表达。结果 正常粘膜的FHIT蛋白100％(12／12)高表达；癌前病变组中均为中度和高表达，与正常组相比无统计学差异；64例OSCC中，3例为阴性表达、8例低表达、43例中度和高度表达：OSCC中FHIT蛋白缺乏或减少的比率为17％(11／64)，与正常组，癌前病变组相比有显著差异，而与OSCC的分化程度无关。结论 FHIT在口腔鳞癌的发生过程中起着一定的作用。     

食管鳞癌组织中脆性组氨酸三联体蛋白的表达

目的:检测食管鳞癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的表达.方法:应用免疫组织化学SP法检测39例正常食管黏膜组织、23例不典型增生组织及39例食管鳞癌组织中FHIT蛋白的表达.结果:癌旁不典型增生组织和食管鳞癌组织中FHIT蛋白的阳性表达率分别为52.17%和28.21%,均低于正常食管黏膜组织的89.74%(P均＜0.01).FHIT蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度及淋巴结转移有关,而与浸润深度无关.结论:FHIT蛋白的缺失与食管鳞癌的发生密切相关.     

肝细胞癌组织中脆性组氨酸三联体和Survivin蛋白的表达

目的:探讨肝细胞癌(HCC)组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)和Survivin蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测48例HCC组织、25例癌旁组织和15例正常肝组织中FHIT蛋白和Survivin蛋白的表达,并分析2者的表达与HCC临床病理特征的关系.结果:HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中FHIT的阳性表达率分别为45.8%、88.0%及93.3%,差异有统计学意义(P<0.05);FHIT蛋白的表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),与肿瘤大小、有无包膜、是否有门静脉癌栓、甲胎蛋白的含量、是否感染乙肝无关(P>0.05).HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中Survivin的阳性表达率分别为72.9%,16.0%及20.0%,差异有统计学意义(P<0.05);Survivin阳性表达率与HCC患者的肿瘤大小有关(P<0.05),与其他临床病理特征无关(P>0.05).HCC组织中FHIT与Survivin的表达呈负相关(r=-0.341,P=0.018).结论:FHIT的表达缺失和Survivin的过表达可能共同参与了HCC的发生和发展.     

脆性组氨酸三联体基因与喉癌研究进展

肿瘤的发生、发展受多种基因调控。脆性组氨酸三联体基因(FHIT)是近几年发现的抑癌基因,目前大量研究证实,脆性组氨酸三联体基因定位于3p14.2,其抑癌作用可能与调控细胞周期、诱导细胞凋亡、二腺苷三磷酸水解酶、微管蛋白、泛素结合酶等有关。文章就FHIT基因的结构、抑制肿瘤的作用、机制及其在喉癌中缺失及异常的相关研究近况予以综述。     

脆性组氨酸三联体基因蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的　探讨胆囊癌中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因蛋白表达状况及其与临床病理指标的可能关系。方法　采用兔抗人FHIT蛋白抗体和枸橼酸微波SP免疫组化方法检测53 例原发性胆囊癌、18 例胆囊腺瘤性息肉和25 例慢性胆囊炎中FHIT表达状况,并结合临床病理指标进行分析。结果　FHIT基因蛋白在原发性胆囊癌中的阳性表达率为28.3%(15/53),而在胆囊腺瘤性息肉和慢性胆囊炎中的表达分别为55.6%(10/18)和88.0%(22/25),其差异有统计学意义(P<0.05)。胆囊癌组织中FHIT基因蛋白表达与肿瘤分化程度有关,在低分化癌中表达低,与高中分化癌比较有显著性差异(P<0.05);同时研究表明其表达与预后有关(P<0.01)。结论　FHIT基因可能参与了胆囊癌的发生、发展过程,可作为判断原发性胆囊癌分化程度和预后的指标。     

散发性大肠癌脆性组氨酸三联体基因与错配修复基因蛋白表达关系的研究

目的探讨散发性大肠癌(Sporadic Colorectal Carcinoma,SCC)组织中脆性组氨酸三联体基因(Fragile Histidine Triad,FHIT)与错配修复基因(human DNA Mismatch Repair gene,hMMR)蛋白的表达之间有无相关性,以进一步研究大肠癌的发病机制。方法采用免疫组织化学的方法,检测了50例散发性大肠癌组织中的FHIT、hMLH1、hMSH2蛋白表达。结果(1)所有正常/非瘤组织中FHIT、hMLH1和hMSH2蛋白均为阳性表达。(2)FHIT蛋白表达的缺失癌在高、中和低分化癌中分别为3/10、11/29和9/11,低分化癌中FHIT表达的缺失癌与高、中分化癌比较,差异有显著性(P&lt;0.01)。FHIT蛋白低表达癌在不同Duke’s分期癌中的分布为A和B期癌中总共为12/36,Duke’sC期癌中为11/14。已伴淋巴结转移的C期癌与未转移组的A和B期癌比较,差异有显著性(P&lt;0.01)。(3)散发性大肠癌中主要发生突变的错配修复基因是hMLH1。hMLH1和(或)hMSH2蛋白低表达癌在高、中和低分化癌中分别为2/10、6/29和7/11,...     

胰腺癌组织中XAF1基因启动子区甲基化状态及XAF1蛋白的表达

目的:探讨胰腺癌组织中X染色体连锁凋亡抑制因子相关因子1(XAF1)基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)及免疫组化SP法检测胰腺癌组织(48例)、胰腺良性疾病组织(26例)和正常胰腺组织(15例)中XAF1基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达。结果:胰腺癌、胰腺良性疾病及正常胰腺组织中,XAF1基因启动子区甲基化率分别为31.3%、7.7%和0%,XAF1蛋白的阳性表达率分别为52.1%、84.6%及88.9%,3组比较差异均有统计学意义(P=0.005;χ2=11.169,P=0.004)。XAF1基因启动子区甲基化状态及蛋白的表达均与胰腺癌的TNM分期、分化程度及淋巴结转移关系密切(P<0.05)。胰腺癌组织中XAF1基因启动子区甲基化状态与蛋白表达呈负关联(rP=-0.463,P<0.001)。结论:XAF1基因启动子区甲基化是该基因失活的重要机制之一,XAF1甲基化修饰水平在胰腺癌的发生、发展中起重要作用。     

大肠癌DAPK、FHIT基因启动子区的甲基化水平研究

目的:评价DAPK、FHIT基因启动子区甲基化状态在大肠癌发生发展中的作用和临床意义。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测23例大肠癌及相应癌旁正常组织的DAPK、FHIT基因启动子区甲基化状态。结果:大肠癌组织的DAPK、FHIT基因甲基化率分别为60.86%(14/23)、52.17%(12/23),高于癌旁正常组织的13.04%(3/23)、8.69%(2/23),组间差异均有统计学意义(P<0.05),DAPK、FHIT基因甲基化状态与分化程度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤部位、Dukes分期无相关性(P>0.05)。结论:DAPK基因和FHIT基因启动子区的高甲基化可能与大肠癌的发生、发展、预后有关。     

大肠癌FHIT和CHFR基因甲基化状态分析

目的:分析大肠癌组织中FHIT和CHFR基因启动子区甲基化水平及其临床意义。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)技术检测46例大肠癌及癌旁正常组织的FHIT和CHFR基因启动子区甲基化状态。结果:大肠癌组织的FHIT和CHFR基因甲基化率分别为54.35%、49.15%,高于癌旁组织13.04%、8.69%,组间差异均有统计学意义(P<0.05),FHIT和CHFR基因甲基化状态与分化程度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤部位、Dukes分期无相关性(P>0.05)。结论:FHIT和CHFR基因启动子区的甲基化可能与大肠癌的发生、发展及预后相关。     

子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其mRNA表达

目的研究子宫内膜癌中SFRP1基因启动子甲基化及其对SFRP1 mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性PCR技术检测36例子宫内膜癌组织和对应癌旁组织中SFRP1基因启动子甲基化状态,RT-PCR方法检测上述样本的mRNA表达水平,并对结果进行统计学分析。结果子宫内膜癌组织中SFRP1基因启动子甲基化的阳性率为47.2%,癌旁组织中为11.1%,两者比较差异有统计学意义(P=0.001)。14例存在启动子甲基化和5例无启动子甲基化的子宫内膜癌组织中缺乏SFRP1 mRNA表达或表达较癌旁组织明显下降。结论SFRP1基因启动子甲基化在子宫内膜癌中常见,部分成为其表达下降的原因。     

Parkin基因甲基化在鼻咽癌发生发展中的作用

目的探讨Parkin基因甲基化在鼻咽癌发生发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR技术对5个鼻咽癌细胞株（CNE1、CNE2、TW03、HONE1、C666）和1个正常鼻咽上皮细胞株（NP69）、54例鼻咽癌组织和16例正常鼻咽上皮组织的Parkin基因启动子区甲基化状态进行检测,并分析鼻咽癌组织中Parkin基因甲基化与临床特征的关系;应用RT-PCR检测加入甲基转移酶抑制剂（5-氮-2-脱氧胞苷）后CNE1、CNE2中Parkin基因转录表达,分析去甲基化对Parkin基因转录表达的影响。结果1个正常鼻咽上皮细胞株和16例正常鼻咽上皮组织中均未检测到Parkin基因甲基化;5个鼻咽癌细胞株和54例鼻咽癌组织中Parkin基因甲基化频率分别为60.00%和62.96%;54例鼻咽癌患者中Parkin基因甲基化状态与临床因素均无关（均P＞0.05）。经过5-氮-2-脱氧胞苷处理后,Parkin基因在CNE1、CNE2中转录表达增加,分别从0提高至3.65和2.15。结论鼻咽癌中Parkin基因甲基化与转录表达密切相关,是基因表达调节的一种重要方式;可能成为鼻咽癌早期分子生物学辅助诊断的标志物和去甲基化基因治疗的靶点。     

分化型甲状腺癌组织中促甲状腺激素受体的表达

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法对43例DTC(39例乳头状癌,4例滤泡状癌)、30例甲状腺腺瘤及16例正常甲状腺组织进行TSHR的测定。结果:正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和DTC组织TSHR均有不同程度表达,甲状腺腺瘤组织的表达与正常甲状腺组织相似,而DTC中有88.37%(38/43)的表达与正常组织相似,11.63%(5/43)的表达低于正常甲状腺组织。DTC组织中TSHR的表达与肿瘤病理分期、有无淋巴结转移、年龄有关(P<0.05);与性别、肿瘤大小、病灶多少无关(P>0.05)。结论:DTC可能为TSHR依赖性肿瘤,TSHR检测有助于提高DTC的诊疗水平。     

FHIT基因在胃癌中的异常甲基化及其表达

目的:检测FHIT基因在胃癌中的异常甲基化及表达,探讨其在胃癌发生中的作用.方法:收集胃癌新鲜组织标本共88例,采用甲基化特异性PCR和免疫组织化学方法检测FHIT基因的异常甲基化和蛋白表达.结果:88例胃癌组织中,有35例发生了FHIT基因甲基化,阳性率为40%.55例表达FHIT蛋白,阳性率为63%.不同组织学分级的胃癌组织中甲基化率FHIT蛋白表达程度均有显著差异;淋巴结转移组织甲基化率、FHIT蛋白表达程度显著高于无转移者(P＜0.05).FHIT基因的异常甲基化和蛋白表达呈负相关(P＜0.01).结论:FHIT基因的异常甲基化和蛋白失表达是胃癌发生、发展过程中的频发事件,FHIT基因的异常甲基化可能是引起FHIT基因失活并导致胃癌发生的重要机制.     

鼻咽癌中PCDH17基因启动子甲基化状态的研究

目的:探讨鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞株中PCDH17基因启动子区甲基化状态及其对转录表达的影响.探讨PCDH17在NPC中发挥的功能.方法:运用半定量反转录PCR和甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)检测5株NPC细胞株,人喉鳞癌细胞株(Fadu),正常鼻咽上皮永生细胞系(NP69)中PCDH17mRNA的表达情况及PCDH17的甲基化情况.去甲基化药物处理细胞株后PCDH17的表达及甲基化的变化.应用细胞克隆形成实验及划痕实验检测PCDH17在NPC中的功能.结果:5株NPC细胞株中无PCDH17mRNA表     

乳腺癌组织中p16基因的甲基化状态研究

目的:探讨乳腺癌组织中p16基因启动子区域的甲基化状态。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测82例乳腺癌组织及30例乳腺良性病变的甲基化状态。结果:乳腺癌组织p16基因启动子甲基化阳性率为30.5%。乳腺癌患者癌组织p16基因启动子区域甲基化状态与肿瘤分期、肿块的大小、病理类型、月经状况、淋巴结转移、激素受体和家族史均无明显关系(P>0.05)。结论:p16基因启动子区域甲基化参与了乳腺癌的发生,是一个早期事件,有可能作为乳腺癌的早期诊断和筛查的一个分子生物学指标。