不同光动力剂量对C6胶质瘤细胞内游离钙的影响

目的 :研究不同剂量光动力作用细胞内游离钙([Ｃａ2 ]ｉ)的变化 ,探讨钙超载在光动力诱导Ｃ6胶质瘤细胞坏死和凋亡过程中的作用。方法 :常规培养Ｃ6胶质瘤细胞 ,以不同光动力剂量处理对数生长期的实验组细胞后 ,应用Ｆｌｕｏ 3 ＡＭ为细胞内钙离子荧光指示剂 ,激光共聚焦显微镜测定各组Ｃ6胶质瘤细胞内游离钙的变化。结果 :光动力作用后Ｃ6胶质瘤细胞内游离钙明显升高 ,平均细胞内钙离子浓度随着光动力剂量增加而增大 ,两者呈正相关。结论 :光动力作用后Ｃ6细胞钙超载在光动力诱导肿瘤细胞坏死和凋亡过程中起重要作用不同光动力剂量对C6胶…     

激光在中国神经外科的应用

在激光光动力学疗法治疗神经系统肿瘤的研究中，我们通过光动力体外照射鼠胶质瘤C6细胞系，发现激光光动力学疗法可以有效抑制肿瘤细胞的生长，诱导肿瘤细胞凋亡，其中钙超载在该机制中发挥重要作用；肿瘤细胞死亡率与照光剂量呈正相关，照光剂量达到200J／cm^2时，肿瘤细胞死亡率不再随照光剂量的增加而增加。在对人脑胶质瘤U251细胞系的研究中，     

血卟啉甲醚-PDT诱导C6胶质瘤细胞凋亡机制的研究

目的探讨血卟啉甲醚-光动力学疗法（PDT）诱导C6胶质瘤细胞的凋亡机制。 方法常规传代培养C6胶质瘤细胞系,取处于对数生长期细胞按实验要求分组接种于96孔培养板上,应用光敏剂血卟啉甲醚,以不同照光剂量（40、80、120、160、200、240、280和320J/cm^2）处理C6胶质瘤细胞。MTT法检测不同照光剂量的细胞死亡率;电镜观察PDT后C6细胞形态学变化;以Fluo-3/AM为细胞内钙离子荧光指示剂,激光共聚焦显微镜测定不同照光剂量作用后C6胶质瘤细胞内[Ca^2＋]i。 结果PDT组对C6胶质瘤细胞死亡率影响显著,照光剂量与细胞死亡率正相关,随照光剂量增加,细胞死亡率逐渐增大,当达到能量密度大于200J/cm^2时,细胞死亡率不再明显增加。PDT作用后早期出现一定数量凋亡的C6胶质瘤细胞和多数线粒体、内质网等亚细胞结构肿胀。PDT作用晚期可见大量坏死细胞和部分凋亡细胞。PDT作用后C6胶质瘤细胞内游离钙明显升高。 结论血卟啉甲醚-PDT诱导C6胶质瘤细胞坏死和凋亡,钙超载在广泛超微结构损伤中起重要作用。     

不同光动力剂量对C6胶质瘤细胞胞内游离钙的影响

目的 研究不同剂量光动力作用后C6胶质瘤细胞内游离钙[Ca^2 ]i的变化，探讨钙超载在光动力诱导C6胶质瘤细胞坏死和凋亡过程中的作用。方法 常规培养C6胶质瘤细胞，以不同光动力剂量处理对数生长期的实验组细胞后，应用Fluo-3／AM为细胞内钙离子荧光指示剂，激光共聚焦显微镜测定各组C6胶质瘤细胞内游离钙的变化；MTT法检测各组细胞的死亡率。结果 光动力作用后C6胶质瘤细胞内游离钙明显升高，平均胞内钙离子浓度和细胞死亡率随着光动力剂量增加而增大。结论 光动力作用后C6细胞钙超载在光动力诱导肿瘤细胞坏死和凋亡过程中起重要作用。     

血啉甲醚对体外培养的类风湿关节炎滑膜细胞光动力杀伤作用的初步研究

探讨血啉甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)对体外培养的类风湿关节炎患者滑膜细胞的光动力杀伤作用。方法：用四唑盐化色法（MTT）检测了不同能量的铜蒸气激光,不同浓度的HMME对体外培养的类风湿关节炎滑膜细胞的杀伤效应,并与血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HpD)进行比较。结果：（1）单纯照光及单加HMME,HpD对细胞存活率均无明显抑制作用。（2）各种浓度的HMME在不同剂理的激光作用下对细胞均有杀伤作用,浓度越高其杀伤作用越明显;HMME浓度一定,随着照光剂量的增大杀伤作用增强;不同浓度HMME介导的光动力杀伤作用所能产生的最大抑制率不同,此时所需的光剂量也不同。（3）HMME介导的光动力效应对滑膜细胞的杀伤作用受照光前孵育时间的影响。（4）相同浓度的HMME介导的光动力杀伤效应较HpD更强。结论：HMME介导的光动力效应对滑膜细胞的杀伤作用受光敏剂的浓度及照光能量密度的影响,且明显强于HpD,临床应用于滑膜切除术可能具有更大的优势。     

癌光啉—光照体外净化人白血病细胞的研究

作采用体外集落培养法研究了新卟啉类光敏剂癌光啉加光照对人白血病细胞系的体外选择性杀伤作用。加癌光啉１０μｇ／ｍｌ，体外３３７℃孵育１．５ｈ，照光４ｍｉｎ对Ｕ９３７、ＨＩＭｅｇ和ＨＬ６０等白血病细胞系和ＨＬ６０细胞与正常人ＭＮＣ混合细胞中的ＨＬ６０细胞集落的杀伤均大于４个对数级（ｌｏｇ），而对正常ＣＦＵ－ＧＭ的杀伤仅为０．６３±０．５９ｌｏｇ。说明癌光啉加光照确能选择性杀死白血病细胞，可用于自身骨     

功率密度对激光诱导之VSMC凋亡率的影响

目的 :通过激光照射诱导体外培养血管平滑肌细胞(ＶＳＭＣ)凋亡 ,观察能量密度相同时功率密度与ＶＳＭＣ凋亡率的关系 ,为将激光诱导细胞凋亡的方法用于血管成形术后再狭窄的防治提供实验依据。材料与方法 :组织贴块法培养兔主动脉平滑肌细胞 ,透射电镜上观察ＶＳＭＣ胞浆内肌丝及密体 ,鉴定ＶＳＭＣ。实验采用第四代细胞。将能量密度确定为 10 0、2 0 0、30 0、40 0Ｊ/ｃｍ2 ,以功率密度分别为 10 0、2 0 0、30 0ｍＷ/ｃｍ2 予波长 5 10 6ｎｍ铜蒸气激光照射。照光后 2 4ｈ取材 ,制作细胞涂片 ,以ＤＮＡ末端标记法 (ＴＵＮＥＬ)标记ＴＵＮ…     

光动力学疗法与金丝桃素联合应用对C6胶质瘤细胞的作用

目的:探讨光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)与金丝桃素联合应用对C6胶质瘤细胞的作用。方法:用MTT法和电镜观察PDT联合金丝桃素对体外培养的C6胶质瘤细胞存活率的影响、检测凋亡、分析对细胞形态学的影响。同时考察其联合作用对C6胶质瘤细胞Bcl2和Bax蛋白表达的影响。结果:金丝桃素和PDT单独诱导C6胶质瘤细胞凋亡作用不显著     

光、声动力联合诱导大鼠C6胶质瘤细胞凋亡的研究

目的研究血卟啉单甲醚介导的光、声动力联合杀伤C6细胞的效应并对其机制进行初步分析。方法实验分为对照组、声动力组、单纯激光光照组、光动力组和光动力+声动力组。在光、声动力联合组中,首先采用强度为0.5 W/cm2、频率为1 MHz的超声照射,之后应用不同能量密度(40、80、120、160、200和240 J/cm2)的激光进行照射。应用MTT方法检测细胞死亡率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光分析仪检测细胞内活性氧水平的变化。结果超声剂量固定为0.5 W/cm2,频率1 MHz条件下,当激光能量密度小于200 J/cm2时,声、光动力联合组C6细胞的杀伤率明显高于任何单一模式。当激光能量密度为80 J/cm2时,声、光动力联合组所诱导的C6细胞凋亡率最高。声、光动力联合可明显增加细胞内活性氧的产量。结论光、声动力联合能明显增加C6细胞杀伤率。     

二氢卟吩e6光动力学疗法对人黑素瘤A-375细胞株的杀伤作用

目的探讨二氢卟吩e6(Ce6)光动力学疗法(Ce6-PDT)对体外培养人黑素瘤A-375细胞株的杀伤作用。方法将体外培养的人黑素瘤A-375细胞加入Ce6,浓度分别为2、4、7·5、15、30和60μmol/L,孵育12h,予波长652nm半导体激光照射,照射的功率密度为15·6mW/cm2,能量密度分别为2、5、10和20J/cm2,继续孵育12h,用四唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率。结果(1)Ce6与细胞共同培养而不受光照的条件下对细胞的毒性较小,其浓度小于15μmol/L时各浓度组间细胞存活率差异无显著意义(P>0·05);浓度较高(>15μmol/L)对细胞的存活率影响较大(P<0·01)。(2)Ce6-PDT能有效地杀伤体外培养的人黑素瘤A-375细胞,其杀伤作用与Ce6浓度及光照剂量成正相关(P<0·01)。结论Ce6-PDT能有效地杀伤体外培养的人黑素瘤A-375细胞;Ce6在较大浓度下对细胞有毒性。     

竹红菌乙素脂质体对鼠肺微血管内皮细胞光动力效应的研究

<正>目的:观察竹红菌乙素脂质体对体外培养的鼠肺微血管内皮细胞的光动力杀伤效应及无照光条件下的杀伤效应,为竹红菌素类光敏药物的开发提供研究依据。方法:照光组以不同浓度的竹红菌乙素脂质体分别孵育     

选择性环氧合酶-2抑制剂增强光动力学疗法杀伤胶质瘤细胞效应的研究

目的探讨选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)增强光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤C6胶质瘤细胞的效应.方法应用细胞存活曲线、透射电镜及流式细胞仪(FCM)方法检测光动力联合治疗组(塞米昔布 PDT)、PDT组、塞米昔布组及空白对照组杀伤C6胶质细胞的效应.结果存活曲线显示联合组对C6胶质瘤细胞的抑制作用优于PDT组,增敏比为1.34.电镜检查联合组的细胞凋亡明显多于其他组.FCM检测细胞凋亡联合组为64.3%,PDT组为4.5%,塞米昔布组为15.3%,联合治疗组细胞凋亡明显增加.结论塞米昔布联合光动力学疗法对C6胶质瘤细胞的抑制及诱导凋亡的作用明显地高平PDT组及塞米昔布组,塞米昔布具有增强光动力学疗法杀伤胶质瘤细胞的作用.     

光动力治疗联合拖拉塞米对大鼠脑胶质瘤瘤周水肿区MMP2和NKCC1表达的影响

正目的:通过检测大鼠脑胶质瘤周水肿区NKCC1和MMP2的表达,研究光动力联合托拉塞米治疗的效果及其分子机制。方法:体外培养C6胶质瘤细胞至对数生长期注入大鼠右侧尾状核区。经核磁证实荷瘤成功Wistar大鼠被随机均分成四组:A:空白对照组,B:光动力治疗组,C:托拉塞米治疗组,D:托拉塞米+光动力治疗组。应用免疫组化和West-     

球囊内灌注~(32)P致体外培养平滑肌细胞凋亡的研究

影响经皮冠状动脉成形术(ＰＴＣＡ)疗效的主要问题是再狭窄。其中血管壁平滑肌细胞(ＳＭＣｓ)增生过度是重要原因之一[1]。放疗在临床上可有效治疗良、恶性细胞增殖性疾病,据此,本研究用ＰＴＣＡ导管球囊灌注液相32Ｐ,对培养的兔髂动脉ＳＭＣｓ进行不同剂量单次照射,从细胞凋亡方面探讨射线对体外培养动脉ＳＭＣｓ的作用及量效关系。一、材料和方法1血管ＳＭＣｓ原代和传代细胞培养:取撕去外膜刮除内膜兔髂动脉一段,剪碎成组织块,移入培养瓶加小牛血清1640培养液培养。待细胞生长形成单层且60%～70%融合时,分装培养瓶传代培养。2放射源及照…     

血啉甲醚介导光动力辅助手术治疗脑胶质瘤临床初探

目的 :观察新型光敏剂血啉甲醚介导光动力辅助手术治疗脑胶质瘤的疗效。材料与方法 :1999年 7月至 2 0 0 0年 2月期间在收治的脑胶质瘤病人中 ,有 15例给予光动力治疗。激光光动力治疗仪功率 40 0ｍＷ ,照射距离 >1ｃｍ ,能量密度 2 0 0Ｊ/ｃｍ2 ,血啉甲醚 5ｍｇ/ｋｇ。术中暴露肿瘤的同时静脉推注光敏剂 ,显微镜下切除肿瘤后 ,激光照射肿瘤残腔 ,以杀伤残存肿瘤细胞。术后避光 3日 ,严格随访其术后效果。结果 :术后近期临床效果满意 ,全部病例达到有效或显效 ;无皮肤光敏反应 ;随访至今未见肿瘤复发。结论 :光动力疗法是一种有效的脑胶质瘤…     

光动力学疗法体外杀灭白血病细胞的初步实验研究

目的 研究酞菁锌(ZnPcS2P2)介导的光动力效应体外杀灭K562白血病细胞中光剂量以及光敏剂浓度对白血病细胞存活率的影响。方法 用17种不同光剂量(360、324、290、250、200、180、124、90、76、47、29、18、11、6.9、4.2、2．1和OJ／cm^2)的半导体激光分别辐照与7种不同光敏剂浓度[0(光照对照组)、0．0625、0．125、0．25、0．5、1．0和2．0μg／m1]ZnPcS2P2行体外培养的K562白血病细胞。辐照后将细胞置于37℃、5％CO2的培养箱中培养2d，用四唑盐(MTT)比色法测定白血病细胞的存活率。结果 单纯药物对K562白血病细胞没有影响，单纯光照在光剂量为360J／cm^2 时能引起细胞的损伤。与光敏剂共培养的各组白血病细胞均受到激光辐照的不同程度的影响，存活率随着光剂量以及光敏剂浓度的增加而减小。结论 光动力学疗法能够有效地杀灭白血病细胞，但是光剂量和光敏剂浓度的选择十分关键。ZnPcS2P2浓度1．0μg／ml、光剂量6．9J／cm^2是杀灭K562白血病细胞一组比较理想的搭配。     

光动力疗法与化疗药物合并应用对人舌鳞状细胞瘤细胞株影响…

为观察光动力疗法全并化疗的疗效及作用机制，体外培养舌鳞状细胞癌细胞株，分别加入小剂量平阳霉素，ＶＣＲ，５－ＦＵ，ＣＤＤＰ和ＭＣ，孵育２４小时，将细胞阻断于某一周期时相，经ＨｐＤ加红光处理后，明显增加疗效，产生协同作用。     

竹红菌乙素-PDT与血卟啉衍生物-PDT对人肺癌细胞杀伤效应的比较研究

目的　探讨竹红菌素 光动力疗法 (HB PDT)对肺癌细胞的杀伤效应 ,并与第一代光敏剂血卟啉衍生物 (HpD)进行比较。方法　以不同浓度的竹红菌乙素 (HB)及HpD孵育细胞 ,然后分别在铜蒸汽激光混合光饱和光剂量条件下进行照光处理 ,照光后置于 37℃、5 %CO2 的孵箱中继续孵育 2 4h ,用MTT法分别测定不同浓度下的细胞存活率 ,绘制杀伤曲线并拟合曲线方程 ,根据方程求出不同光敏剂对细胞的半数杀伤浓度 (IC50 )。结果　HB PDT对肺癌细胞株具有很强的杀伤效应 ,其IC50 为 33 82ng/ml,而HpD对肺癌细胞株的IC50 为 1316 88ng/ml,二者比较差异有统计学意义 (P <0 0 1)。结论　HB PDT对肺癌细胞株的杀伤效应明显优于HpD PDT ,是一种对肿瘤细胞杀伤所需浓度范围小、杀伤强度高的新一代光敏剂。     

五氮齿稀土配合物对小鼠腹水肝癌细胞及其实体瘤的光动力效应

目的　研究五氮齿稀土配合物（ＰＲＥＣ）光敏剂对昆明小鼠腹水肝癌ＡＨ 细胞株在体外及体内的光动力效应,为评价其作为一类第二代新型光动力治疗试剂提供实验依据。方法　选用五氮齿羧钆（ＰＧｄＣＯＯＨ）、五氮齿钆（ＰＧｄ）、五氮齿铕（ＰＥｕ）和五氮齿钐（ＰＳｍ） 四种自行合成的ＰＲＥＣ光敏剂,用ＭＴＴ法测定它们对ＡＨ细胞的暗毒性和在不同浓度、以波长７６０ ｎｍ 红光（ 功率密度１４ ｍＷ／ｃｍ２） 在不同照光时间条件下,对体外培养的小鼠腹水肝癌ＡＨ细胞的光动力效应;用流式细胞技术测定了ＰＧｄ 光敏作用对ＡＨ 细胞群体时相分布的影响;观察了荷ＡＨ实体瘤（ 平均体积为２２０ ｍｍ３）小鼠尾静脉注射ＰＧｄＣＯＯＨ、ＰＥｕ 或ＰＳｍ（ 剂量均为１２ ｍｇ／ｋｇ） 后２４ ｈ,用７３０～８００ ｎｍ 红光（ 功率密度为１０ ｍＷ／ｃｍ２） 照光,每次１ ｈ,每天１ 次,连续３ 天后肿瘤体积的变化,比较肿瘤长到照光前１０ 倍体积时所需时间的差别,并计算每组小鼠的平均生存寿命。另外还观察了ＰＧｄＣＯＯＨ、ＰＥｕ 和ＰＳｍ 对健康小鼠皮肤的光毒性作用。结果　ＰＲＥＣ的浓度低于１－０ μｍｏｌ／Ｌ时,ＡＨ细胞存活率高达９３％ 以上;水溶性较好的ＰＧｄＣＯＯＨ在浓度     

血卟啉单甲醚-PDT对骨髓基质细胞及K562白血病细胞杀伤效应的初步研究

目的:对比研究血卟啉单甲醚(HMME)-PDT对骨髓基质细胞及白血病K562细胞的杀伤效应。材料与方法:实验选用白血病K562细胞株及原代培养骨髓基质细胞,光敏剂为血卟啉单甲醚(HMME),KTP激光(532nm)作为照射光源,MTT法检测细胞杀伤效应。结果:在照光剂量为10J/cm2、HMME浓度为10μg/m