-20 ℃不结冰抗冻液保存人体皮的实验研究

目的 对研制的－20℃不结冰的抗冻液－20℃保存人体皮的效果进行探讨。方法 测定皮肤琥珀酸脱氢酶（SDH）、皮肤组织块培养生长年、人－鼠皮肤移植成活率及成活期、表皮细胞与淋巴细胞混合培养、HLA－DR及CD86抗原测定等方法，对该抗冻液保存人体皮的保存效果、抗原性变化进行研究。结果 该抗冻液保存人体皮（－20℃条件下）2月内皮肤质量仍较好。冷冻皮肤免疫原性下降，但HLA－DR表达没有显著变化，而CD86表达显著降低。结论 ①该方法可保存人体皮2月。②冻存皮肤的抗原性下降的原因与CD86抗原分子减少有关。     

人表皮细胞培养及同种移植方法的研究

目的：为解决大面积烧伤及其它创伤性皮肤缺损创面覆盖问题，我们对人表皮细胞培养法及同种移植进行了研究。方法：采用细胞悬液培养及组织块培养方法对人表皮细胞进行了培养并对其临床同种移植进行了探讨。结果：组织块培养法皮片形成率为５４．１７％，细胞悬液培养法皮片成活率为４９．０５％，皮片形成率虽然不够理想，但我们的细胞悬液培养法皮片成活率比以前的方法大大提高。临床同种移植皮片共５２片，成活２３片。随访最长者达１５个月，皮片仍存活且无排异现象。结论：两种表皮细胞培养法简便、可行，提高了皮片形成率。表皮细胞皮片同种移植组织能在体内继续生存     

人脐静脉内皮细胞的分离培养和冻存

目的研究体外分离、培养、冻存人脐静脉内皮细胞的有效方法以获得大量人脐静脉内皮细胞，为构建含血管的组织工程皮肤提供种子细胞。方法新鲜脐带内灌注胶原酶消化，获得内皮细胞，用含20％胎牛血清的M199液进行培养。倒置显微镜观察细胞形态，结合Ⅷ因子免疫组化鉴定细胞来源。内皮细胞加入10％甘油的冻存液，分别置于渡氮保存1周和4周，复苏后血球计数板计数，绘制生长曲线。结果脐静脉内灌注胶原酶法可获取高纯度的内皮细胞，与未冻存细胞相比，复苏的细胞活力保持在80％以上，复苏后生长曲线与未冻存细胞相似。结论脐静脉灌注酶消化法可获取大量高纯度的内皮细胞。冻存的内皮细胞复苏后仍保持较高的体外增殖能力，可作为制备含血管的组织工程皮肤的种子细胞来源。     

人表皮细胞的体外培养

目的：对表皮细胞在不同的培养方法、不同的培养液及不同底物中的生长情况进行３方面的探讨，以便选出较好的一种组合进行表皮细胞培养，为改善烧伤皮源不足的问题打下基础。方法：①采用人包皮或体皮制成皮块、皮粒、表皮细胞悬液进行液体培养，比较３种方法中表皮细胞生长情况；②应用纯表皮细胞悬液进行空气液体界面培养，平铺平皿培养及培养瓶液体培养，比较表皮细胞贴壁、生长情况；③另将表皮细胞悬液接种于３种不同的培养液，即ＲＰＭＩ１６４０，ＲＰＭＩ１６４０＋ＭＥＭ及ＭＥＭ比较细胞生长差异。结果：①在适当的条件下，离体的皮肤皮块、皮粒及表皮细胞悬液经培养皆能生长和分化，而表皮细胞悬液生长速度较快，纤维母细胞污染机会最少；②以Ｂｉｏｆｉｌ为底物的空气液体界面法，细胞生长速度最快，培养出的单层表皮细胞膜片易取出，不收缩；③表皮细胞在ＭＥＭ，ＲＰＭＩ１６４０及ＲＰＭＩ１６４０＋ＭＥＭ３种培养基中的生长情况基本一致。结论：以Ｂｉｏｆｉｌ为底物的空气液体界面培养法应得到推广应用，它不仅加快了表皮细胞的生长速度，减少了纤维母细胞的污染，易于移植，同时解决了以往各种人工敷料仅针对Ⅱ度烧伤创面的治疗及暂时覆盖Ⅲ度创面的局限     

冻存人体皮肤抗原性的实验研究

目的 探讨冷冻保存对人体皮肤抗原性的影响。方法 将－２０℃和液氮中保存１月的人体皮复温后，用酶消化法分离皮肤表皮细胞，在体外进行表皮细胞刺激异体淋巴细胞增殖实验，并用免疫组织化学及图像分析测定皮肤表皮细胞ＨＬＡ－ＤＲ和ＣＤ８６抗原的表达。以新鲜皮肤为对照。结果：－２０℃和注氮中保存的冻存皮肤刺激异体淋巴细胞增殖能力显著低于正常皮肤，冻存皮肤与正常皮肤之间的ＨＬＡ－ＤＲ表达没有显著变化，而冻存皮肤Ｃ     

人胚细胞的体外培养

目的：为医学研究长期提供培养的人胚细胞。方法：体外培养人胚细胞，观察其生长特性、染色体数目以及冻存和复苏的条件。结果：培养的人胚肺、皮肤、肾、脾及脑组织中，肺和皮肤细胞在冻存前后增长速度较快而稳定，染色体数目为２ｎ＝４６，占８７％￣９１％；肾、脾细胞扩增缓慢；脑组织几乎不能扩增。结论：人胚肺和皮肤细胞可长期培养，可为医学研究提供二倍体细胞实验对象。     

胎儿垂体细胞离体培养的研究

本文采用机械法制备胎儿垂体细胞悬液后进行了冻存前、后的离体培养。经生长激素(GH)测定、细胞染色及计算机图像分析,证明胎儿垂体细胞冻存前、后经体外培养均有活性。本方法成本低廉、简便易行。为垂体的适时移植增加了供体来来。     

人皮肤成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定

目的：探索和建立一种新的、适宜于人皮肤成纤维细胞（Fbs）的体外分离、培养及鉴定方法。方法：采用冷胰蛋白酶和胶原酶联合消化法对人皮肤Fbs的进行体外培养，通过生物化学、免疫细胞化学及ELISA实验技术，对人皮肤Fbs的活力检测、生长曲线、羟脯氨酸（HYP）含量及Ⅰ型胶原含量指标进行研究。结果：人皮肤Fbs原代培养时间较大鼠长。人皮肤Fbs冻存复苏后所得生长曲线与冻存前所得曲线基本相似；人皮肤Fbs培养液中，3～5 d的HYP含量与1 d相比有显著增加（P<0.01）；2～6 d Ⅰ型胶原含量与1 d相比有显著增加（P<0.01）。结论：培养的人皮肤Fbs增殖能力强、适应性强、易培养且性状稳定，可为人类凹陷性瘢痕修复和美容除皱提供可靠的细胞来源。     

贴壁培养细胞直接用培养瓶置-80℃冻存

目的：探讨贴壁培养细胞直接用培养瓶置4℃、-20℃,最后置-80℃低温冰箱冻存的可行性.方法：采用培养瓶常规培养贴壁细胞L929,去上清后,加冻存液覆盖细胞.-80℃低温冰箱冻存,然后,每2个月复苏1次,计数活细胞,观察细胞传代效果.结果：L929细胞置-80℃低温冰箱冻存1年,复苏良好,随着冻存时间延长,存活细胞逐渐减少,复苏耗时延长.结论：贴壁培养细胞直接用培养瓶置-80℃低温冰箱冻存1年,复苏良好.     

人脐静脉血管内皮细胞培养、冻存、复苏与鉴定

目的：探讨人脐静脉血管内皮细胞（humanumbicicalveinendothelialcell,HUVEC）体外分离、培养、冻存、复苏与鉴定的可靠方法。方法：采用改良的胶原酶灌注消化法对HUVEC进行分离、培养与鉴定,并遵循”慢冻快复”的原则进行冻存与复苏,同时使用Ⅷ因子相关抗原染色法进行鉴定。结果：分离的HUVEC生长良好,细胞总数可达I-3×10^2。Ⅷ因子相关抗原染色鉴定结果为95％以上阳性,冻存后复苏的细胞活性超过90％。结论：HUVEC可以从脐带获得并通过原代培养成为细胞系,获得了人脐静脉血管内皮细胞体外培养、冻存、复苏与鉴定的可靠方法。     

马来西亚华人文化与中医药文化传承

考察中医药文化在马来西亚传播的文化背景.梳理马来西亚中医药文化发展的三大途径,认为马来西亚华人文化与中医药文化之间是双向的互动关系,前者为后者提供了发展的土壤,后者则进一步丰富了前者的内涵.     

绿色网络文化传播与和谐校园文化建设

通过对网络时代网络文化的兴起及网络文化与校园文化之间关系的分析,阐述高校校园网络文化存在的合理性以及隐忧。然而,在绿色网络文化传播与和谐校园文化建设的感召和推动下,网络文化和校园文化正以新的特色呈现出来,它们将在冲突与整合中共同发展,成为高校校园文化建设和发展的主流。     

创新校园文化建设必须与企业文化相对接——对中职学生实习中出现问题的反思和对策

中职教育的目标定位是培养服务于生产一线的初、中级技能人才.这要求中职教育更贴近社会,贴近企业.过去学校的校园文化建设缺乏与企业文化的交融和对接,这使不少学生在第三年实习期间因不习惯企业的管理方式与方法,在实习岗位上出现了一系列问题.怎样通过校园文化建设使中职学生适应就业的要求,已经成为我们不得不思考的重要课题.因此,我们在创新校园文化建设过程中注重营造校内企业管理环境,培养学生的良好职业素养及企业实用的实践技能,让学生在走上实习岗位时就熟悉医院及医药行业的管理制度,在走上实习岗位的同时就迈出"零距离就业"的第一步.     

文化反弹与当代世界文化格局的发展趋势

世界文化力量的对比已经严重失衡 ,欧美文化圈开始破裂 ,世界文化格局的总体发展趋势将朝着终极文化的多元化及其个性化和宗教文化的宽容性及其世俗化的方向发展。无论对于“强势文化” ,还是对于“弱势文化”而言 ,多元化只能指传统价值的多元化 ,而非保证平等沟通的合理化规则可以随意更改或取消。宗教文化的“本土化”及其“处境化” ,无论表层的“文化披戴”或深层的“文化融入”都将在认同和宽容的历史过程中寻求发展。“文化反弹”及其“文化民族主义”也将在宽容的世俗化的历史过程中趋向淡化     

细菌培养标本细菌型与L型同步培养及药敏分析

目的：通过对245例送检标本同时做细菌培养和L型细菌培养和药敏分析，了解L型菌的培养意义和耐药情况，为临床用药提供参考。方法：对245例标本采用常规培养和鼍型细菌培养，对检出的L型细菌做药敏试验并返祖后进行生化鉴定。结果：245例标本中常规细菌培养检出率为45．13％，L型细菌检出率为65．48％。其中前五位细菌分别是大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌属。结论：L型细菌培养可明显提高病原菌的检出率，L型菌耐药率和普通型一样有增加的趋势，应引起临床重视。     

试论大学与文化的关系及大学文化建设的定位

文化不仅其现象丰富多彩,而且内部的结构层次复杂。面对千姿百态的文化现象和多层次的内部结构,应该怎样进行大学文化建设?笔者认为首先必须充分认识大学与文化的关系,其次,在大学文化建设过程中要有明确的定位。     

文化圈理论视域下的医学院校校园文化研究

运用文化圈理论的相关观点,阐述高校校园文化圈的内涵(包含精神、物质、制度和行为等各种文化形态)、结构及其特征,提出构建医学院校校园文化圈的对策和建议:构建富有学校特色的医学精神文化,培育共性与个性相统一的文化特质;构建承载医学精神的校园物质文化,并为校园行为文化建设提供物质基础;构建体现核心价值的校园制度文化,保障医学精神文化的群体认同;构建全方位多角度的校园行为文化,为医学精神文化提供有效实现途径.     

成人破骨细胞的体外培养

目的 建立成人破骨细胞体外培养的方法，观察成骨细胞对破骨细胞分化、增殖和功能的影响，为进一步研究补肾中药防治骨溶解和骨质疏松症提供基础。材料和方法 从成人骨髓中提取单核细胞，以1，25—(OH)2D3作为刺激因子，分3组培养：单核细胞与成骨细胞共同培养，单核细胞单独培养，单核细胞与成骨细胞条件培养液培养。生物显微镜下观察细胞的分化过程，HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(Trap)染色方法作组织化学观察，扫描电镜(SEM)观察骨吸收功能。结果 在单核细胞与成骨细胞共同培养组，可见单核细胞逐步融合成多核细胞；HE染色和Trap染色可见阳性多核细胞；扫描电镜观察可见骨片上有骨吸收陷窝形成。其他两组则未得到上述结果。结论 成人骨髓单核细胞在一定培养条件下能分化成熟为具有典型的破骨细胞表型的多核细胞：Trap染色阳性，具有骨吸收功能。与成骨细胞的直接接触是破骨细胞分化、增殖和发挥功能的必不可少的条件。     

中国药文化研究会

中国药文化研究会，系经中华人民共和国民政部社证字第4514号批准登记注册，由国务院国有资产监督管理委员会主管的全国性、学术性社会团体法人组织。     

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