转录因子NF-E2相关因子2-氧化反应元件通路在抗心肌再灌注损伤中的作用

背景 转录因子NF-E2相关因子2(Nf-E2 related factor-2,Nrf2)抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)通路广泛分布于机体心血管系统中,激活后可上调内源性抗氧化系统减轻心肌的氧化损伤. 目的 阐述Nrf2-ARE通路作为抗心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)的潜在靶点,并探讨其可能的保护机制.内容 Nrf2-ARE通路处于氧化应激、炎症反应的中心地位,介导编码抗氧化蛋白和二项解毒酶基因的基础表达和诱导表达;多种外源性化合物可以激活Nrf2-ARE通路,在转录水平上调节抗氧化蛋白及二项解毒酶基因的表达,增强内源性抗氧化系统的能力从而在减少氧自由基产生、抗炎症反应、减轻钙超载、抗心肌细胞凋亡等方面减轻心肌I/RI.趋向 激活Nrf2-A RE通路可为临床抗I/RI提供新的策略.     

核因子E2相关因子2在肾缺血-再灌注损伤中的作用

肾缺血-再灌注损伤（RIRI）是导致急性肾损伤（AKI）最主要的原因,常见于外科手术、严重创伤、休克和药物性肾损伤中。目前仍然缺乏有效的治疗手段应对RIRI。氧化应激是RIRI主要的病理损伤机制,核因子E2相关因子2(Nrf2)是抗氧化应激反应的关键转录因子,可激活与氧化还原和解毒相关的各种细胞保护基因。近年来研究表明,Nrf2可通过调节氧化应激、炎症反应、细胞凋亡以及细胞自噬等途径,在RIRI的防治中发挥保护作用。因此,本文围绕Nrf2的结构及其生物学功能、Nrf2相关信号通路及Nrf2在RIRI发生发展中的作用及可能机制进行综述,以期为RIRI的预防和治疗提供新的思路。     

莱菔硫烷通过Nrf2-ARE通路减轻大鼠移植心脏冷缺血再灌注损伤

目的 探讨莱菔硫烷(SFN)是否通过核因子相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)通路对抗大鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤.方法 健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只随机分成3组:假手术组(Sham组,n=8),缺血再灌注组(I/R组,n=16),莱菔硫烷预处理组(I/R+ SFN组,n=16).建立大鼠异体异位心脏移植模型,将冷藏于4℃ HTK液9h的供心移植到I/R组和I/R+ SFN组受体大鼠腹腔,移植后24h取出移植心脏.Sham组开/关腹24 h后取出自体心脏.应用HE染色法、免疫组织化学法及western blot方法观察心肌组织学、核因子相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)的蛋白表达水平.结果 与I/R组比较,I/R+ SFN组心肌组织损伤减轻,心肌组织Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平显著升高(P＜0.01).与Sham组比较,I/R+ SFN组心肌组织学和心肌组织Nrf2核蛋白、Nrf2、HO-1和NQO1蛋白水平仍高于正常(P＜0.01).结论 莱菔硫烷通过激活Nrf2-ARE通路,上调下游蛋白HO-1、NQO1表达,提高心肌细胞对氧化应激的防御能力,对抗移植心脏冷缺血再灌注损伤.     

Wnt信号通路上游元素在肝癌发生发展中的作用

Wnt 信号通路与胚胎正常发育、细胞的增殖与分化密切相关.同时,Wnt 信号通路的失调在肿瘤的发生过程中也发挥重要作用.β-catnin 在细胞内的累积被认为是Wnt 信号通路激活的标志.研究发现约有33%~67%的肝癌组织中有β-catnin 的异常累积,然而仅在20%~30%的肝癌组织中发现APC 和β-catnin 基因的突变.这表明在肝癌发生发展的过程中Wnt 信号通路的调节机制起关键作用,而β-catnin 或其破坏复合体中蛋白基因的突变作用甚微,其中Wnt 信号通路中上游元素在其调节机制中具有重要作用.现对Wnt 信号通路中上游元素与肝癌发生发展之间的关系作一综述.     

自噬相关信号转导通路研究进展

越来越多研究证实自噬与多种骨病的发生密切相关.对参与自噬性细胞凋亡途径关键分子的成功鉴定,有助于进一步了解自噬的分子机制、生理功能及在病理过程中的作用,但目前对错综复杂的自噬相关信号转导通路之间相互影响及具体作用机制,尚不明确.该文就介导自噬的mTO R等主要信号转导通路研究进展作一综述.     

Nrf2-Keap1信号通路在急性肾损伤中的研究进展

急性肾损伤(AKI)是一组极具危害的临床综合征,表现为肾功能快速下降,伴高发病率、高致死率。氧化应激反应被大量研究证实是各种因素下促进AKI发生发展的共同通路,而核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)介导大量涉及氧化还原反应的基因表达,其活化是细胞的主要防御机制之一。本文将近年关于Nrf2-Keap1信号通路在AKI中的研究进展做一总结,并且对Nrf2激活剂在临床应用中的研究现状展开讨论,以期为AKI的防治提供依据。     

高糖诱发施万细胞损伤时自噬与Nrf2信号通路的关系

目的探讨高糖诱发施万细胞损伤时自噬与核因子E2相关受体2(Nrf2)信号通路的关系。方法将原代细胞株RSC96体外培养制成单细胞原液,分别接种于96孔板(1×104个/ml,200 μl/孔)或6孔板(1×106个/ml,2 ml/孔),培养48 h。采用随机数字表法分为3组(n=25):对照组(C组)、高糖组(H组)和高糖+自噬激动剂雷帕霉素组(H+RAP组)。C组在正常培养基中培养;H组培养基中加入50 mmol/L葡萄糖;H+RAP组培养基中加入50 mmol/L葡萄糖和5 μmol/L雷帕霉素。孵育48 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况,采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,Western blot法检测Nrf2、P62和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达水平。结果与C组比较,H组和H+RAP组细胞活力和SOD活性降低,细胞凋亡率和MDA含量升高,Nrf2、P62和LC3Ⅱ表达上调(P<0.05);与H组比较,H+RAP组细胞活力和SOD活性升高,细胞凋亡率和MDA含量降低,Nrf2和LC3...     

高糖诱发施万细胞损伤时自噬与Nrf2信号通路的关系

目的:探讨高糖诱发施万细胞损伤时自噬与核因子E2相关受体2(Nrf2)信号通路的关系。方法:将原代细胞株RSC96体外培养制成单细胞原液,分别接种于96孔板(1×10 4个/ml,200 μl/孔)或6孔板(1×10 6个/ml,2 ml/孔),培养48 h。采用随机数字表法分为3组( ...     

索拉非尼抑制肝癌细胞增殖中自噬的作用及其机制

目的：研究分子靶向药物索拉非尼在体外对人肝癌细胞株HepG_2增殖抑制过程中自噬的表达及作用,并探讨其可能机制。方法：以吖啶橙染色荧光显微镜对自噬进行定性观察;cell counting kit-8检测活性氧（reactiveoxygen species,ROS）抑制前后HepG_2细胞成活率的变化;RT-PCR检测自噬基因Beclin-1表达的变化。Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin-1的变化：荧光分光光度计检测胞内二氯荧光素DCF的荧光强度。结果：索拉非尼对肝癌细胞HepG_2具有显著的抑制作用;索拉非尼可诱导肝癌细胞HepG_2产生自噬及ROS,自噬在基因及蛋白水平表达均增加;抑制ROS的产生可减少索拉非尼诱导的肝癌细胞HepG_2自噬的表达量,自噬的抑制增强了索拉非尼对肝癌细胞的抑制作用。结论：ROS参与索拉非尼诱导肝癌细胞HepG_2的自噬表达,索拉非尼在抑制肝癌细胞自噬过程中自噬可能起到保护作用,抑制自噬可能为提高进展期肝癌病人索拉非尼分子靶向治疗敏感性提供新的思路。     

调节内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的研究进展

目的了解调节内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的研究进展。方法对国内外有关内质网应激反应抑制肿瘤细胞自噬的文献进行综述。结果在Ca2+释放及未折叠蛋白聚集而诱发的内质网应激反应中,自噬可被多种通路激活,并调节生理及病理过程。结论在肿瘤细胞内质网应激反应中,调节其反应通路因子进而抑制自噬的发生仍需进一步研究。     

膀胱移行细胞癌中Dab2／DOC-2与GRB2表达的相关性及临床意义

目的探讨Dab2、GRB2在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测Dab2、GRB2在64例膀胱移行细胞癌中的表达,采用卡方检验分析两者表达与膀胱移行细胞癌临床病理学特征之间的关系。结果膀胱移行细胞癌中Dab2和GRB2阳性表达率分别是43．8％和81．3％,表达呈负相关（r=-0．383,P=0．002）。Dab2表达水平与肿瘤病理学分期有关,GRB2表达与肿瘤的病理学分级有关。结论Dab2、GRB2蛋白表达可作为判断膀胱移行细胞癌生物学行为的重要指标。     

利用双向电泳技术分析正常大鼠肾小球蛋白质组方法的建立

目的：利用双向电泳技术分析大鼠肾小球蛋白质,以建立肾小球蛋白质组分析的方法。方法：选取体重约200g的雄性Wistar大鼠,分离肾小球并提取蛋白质。使用24cm、pH3-11的IPG胶条对蛋白质进行一相等电聚焦,采用12.5%聚丙烯酰胺凝胶进行二相分离。Decyder软件分析凝胶上的蛋白质点,切取1个蛋白质点,经过胰蛋白酶消化后,使用飞行质谱获取肽指纹谱,并用Mascot软件分析。结果：纯化的肾小球纯度在90%以上,在双向电泳的凝胶上,共发现1240个肾小球蛋白质;切取的蛋白质点经鉴定为CAPZA2蛋白质,Mascot得分为137分（阈值为61分）。结论：成功建立了双向电泳分析大鼠肾小球蛋白质组的方法。