衰老模型小鼠心肌线粒体酶活性与茜草的影响

目的：探讨衰老小鼠心肌线粒体酶活性的变化及茜草的保护作用。方法：实验于2003-03／06在佳木斯大学医学院生化实验室完成。将36只昆明种小鼠随机分为对照组，衰老模型组和茜草组，每组12只．用D-半乳糖诱导衰老模型，30d后测定心肌线粒体超氧化物歧化酶，钠-钾-三磷酸腺苷酶和钙-三磷酸腺苷酶的活性。结果：衰老模型组超氧化物歧化酶，钠-钾-三磷酸腺苷酶和钙-三磷酸腺苷酶的活性均明显降低；茜草可升高衰老模型组超氧化物歧化酶，钠-钾-三磷酸腺苷酶和钙-三磷酸腺苷酶活性。结论：茜草对衰老模型小鼠心肌线粒体有保护作用，为中医药抗癌衰老研究提供实验依据。     

硫酸镁对脊髓损伤后钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶活性和丙二醛浓度与含水量的影响

目的:硫酸镁用于脑损伤的治疗已取得了较满意的疗效,探讨硫酸镁对脊髓损伤后Na+-K+-ATP酶活性、丙二醛浓度与含水量的影响。方法:改良Allen's法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型,随机分损伤组和硫酸镁治疗组(脊髓损伤后30min一次性腹腔注射300mg/kg硫酸镁),在伤后6,12和24h检测伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力、脊髓组织含水量及丙二醛浓度,与正常对照组(n=8)比较。结果:损伤组与对照组比较,Na+-K+-ATP酶活力降低,丙二醛浓度与脊髓含水量升高,差异有非常显著性意义(P<0.01);治疗组与损伤组比较,Na+-K+-ATP酶活力增加、丙二醛浓度及含水量降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:硫酸镁能提高大鼠急性脊髓损伤后伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力,降低丙二醛浓度及含水量,对脊髓损伤有保护作用。     

低氧习服过程中肺组织一氧化氮水平及钠-钾-ATP酶活性的变化

目的:探讨低氧习服过程肺组织一氧化氮水平和Na-K-ATP酶活性++的变化及其对模拟高原低氧性肺水肿的影响。方法:将32只3月龄Wistar大鼠随机分成常氧对照组、急性低氧组、3000m低氧习服组、5000m低氧习服组,习服完成后,置于模拟海拔6000m急性低氧24h,检测动物肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP++酶活性的变化及肺超微结构的变化。结果:急性低氧组肺组织超微结构出现明显的间质性肺水肿,而经过低氧习服后间质性肺水肿则明显减轻;急性低氧组大鼠肺组织一氧化氮水平犤(17.09±3.62)μmol/L犦显著低于常氧对照组犤(60.55±4.27)μmol/L犦(q=31.642,P<0.01),经过3000m和5000m低氧习服后肺组织一氧化氮水平逐渐接近于常氧对照组,明显高于急性低氧组(q=25.540,43.625,P<0.01);急性低氧组肺组织Na-K++-ATP酶活性明显低于常氧对照组q=15.347,P<0.01),经过3000m(和5000m低氧习服后Na-K-ATP酶活性显著高于常氧对照组(q++=8.290,28.563,P<0.01)。结论:低氧习服后肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP酶活性的提高有++利于减轻大鼠低氧性肺水肿。     

高渗盐水对大鼠缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的 探讨高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响.方法 56只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和高渗盐水处理组(H组).肾缺血再灌注损伤模型的建立:左侧肾蒂夹闭45 min后松开,分别于再灌注4 h、6 h、12 h,测定左肾系数、血清肌酐(Cr)、左肾组织Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 H组左肾系数、血清肌酐和丙二醛明显低于IR组,而左肾组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于IR组.结论 高渗盐水预处理对实验SD大鼠缺血再灌注肾损伤有保护作用.     

线粒体酶活性及线粒体肿胀与不同运动强度的关系

背景：关于不同运动强度对机体的影响早有研究,并且取得了不少有价值的成果。但是对于不同运动强度对线粒体Na＋,K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性以及线粒体肿胀程度影响的研究较少。目的：观察不同运动强度对大鼠骨骼肌线粒体Na＋,K＋-ATP酶和Ca2＋-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法：将24只SD大鼠随机分为正常对照组,中等强度运动组和高强度运动组。正常对照组大鼠正常笼内生活,不运动。另2组游泳训练方式,分别建立中强度和高强度运动模型,进行相应的运动锻炼,训练4周。结果与结论：中强度运动组线粒体Na＋,K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性与正常对照组相比均增高（P〈0.05）,线粒体肿胀程度降低（P〈0.05）;而高强度运动组线粒体Na＋,K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性与正常对照组相比均降低（P〈0.05）,线粒体肿胀程度增大（P〈0.05）。实验结果表明中强度运动可以保护线粒体Na＋,K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶的活性,提高线粒体功能;而高强度运动则降低了线粒体的功能。     

脾阴虚证衰老模型大鼠心肌和脑组织线粒体DNA缺失情况

目的：观察脾阴虚证衰老模型大鼠心肌、脑组织线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的变化。方法：实验于2002-07／2004-05在辽宁中医学院实验动物中心完成。①选用健康3月龄SD大白鼠20只为青年对照组，雌雄各半。选用40只21月龄SD大白鼠（雌雄各半），将其按随机抽签法分为2组：老年对照组和模型组，每组20只。②模型组先对老年大鼠施以饮食不节加劳倦过度造成脾气虚证模型，然后在其基础上，每日增加伤阴药（附子、吴茱萸，按1：1比例，购于辽宁中医学院附属医院）10mL／kg胃饲。老年对照组和青年对照组予同体积的生理盐水灌胃。③动物造模实验第90天，用Tanon GIS凝胶图像处理系统对全部PCR扩增产物电泳后条带进行吸光度（A值）扫描，检测心肌、脑组织线粒体DNA缺失产物A值。参照伍期专等的方法测定心肌、脑组织线粒体呼吸链酶复合体活力。④两组间均数比较采用t检验；多组间均数比较采用单因素方差分析。结果：脾阴虚证造模时，死亡11只，模型评估后，为了便于统计，最终纳入分析为每组7只，共21只。①大鼠心肌、脑组织线粒体呼吸链酶复合体活力：老年对照组和模型组明显低于青年对照组（P〈0.05-0．01），模型组明显低于老年对照组（P〈0．05-0．01）。②大鼠心肌、脑组织线粒体DNA缺失产物A值：老年对照组和模型组明显高于青年对照组（心肌：81．29&;#177;16．65．178．71&;#177;9．98，0．14&;#177;0．38；脑组织：90．85&;#177;6．82，163．29&;#177;11．63，1．85&;#177;4．49，P〈0．01），模型组明显高于老年对照组（P〈0．01）。结论：脾阴虚衰老机体细胞线粒体DNA缺失明显增多，线粒体呼吸链酶复合体活力明显下降。     

脾阴虚证衰老模型大鼠心肌和脑组织线粒体DNA缺失情况

目的:观察脾阴虚证衰老模型大鼠心肌、脑组织线粒体DNA缺失及线粒体呼吸链酶复合体活力的变化。方法:实验于2002-07/2004-05在辽宁中医学院实验动物中心完成。①选用健康3月龄SD大白鼠20只为青年对照组,雌雄各半。选用40只21月龄SD大白鼠(雌雄各半),将其按随机抽签法分为2组:老年对照组和模型组,每组20只。②模型组先对老年大鼠施以饮食不节加劳倦过度造成脾气虚证模型,然后在其基础上,每日增加伤阴药(附子、吴茱萸,按1∶1比例,购于辽宁中医学院附属医院)10mL/kg胃饲。老年对照组和青年对照组予同体积的生理盐水灌胃。③动物造模实验第90天,用TanonGIS凝胶图像处理系统对全部PCR扩增产物电泳后条带进行吸光度(A值)扫描,检测心肌、脑组织线粒体DNA缺失产物A值。参照伍期专等的方法测定心肌、脑组织线粒体呼吸链酶复合体活力。④两组间均数比较采用t检验;多组间均数比较采用单因素方差分析。结果:脾阴虚证造模时,死亡11只,模型评估后,为了便于统计,最终纳入分析为每组7只,共21只。①大鼠心肌、脑组织线粒体呼吸链酶复合体活力:老年对照组和模型组明显低于青年对照组(P<0.05～0.01),模型组明显低于老年对照组(P<0.05～0.01)。②大鼠心肌、脑组织线粒体DNA缺失产物A值:老年对照组和模型组明显高于青年对照组(心肌:81.29±16.65,178.71±9.98,0.14±0.38鸦脑组织:90.85±6.82,163.29±11.63,1.85±4.49,P<0.01),模型组明显高于老年对照组(P<0.01)。结论:脾阴虚衰老机体细胞线粒体DNA缺失明显增多,线粒体呼吸链酶复合体活力明显下降。     

硫酸镁对脊髓损伤后钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶活性和丙二醛浓度与含水量的影响

目的：硫酸镁用于脑损伤的治疗已取得了较满意的疗效，探讨硫酸镁对脊髓损伤后Na^ -K^ -ATP酶活性、丙二醛浓度与含水量的影响。方法：改良Allen’s法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型，随机分损伤组和硫酸镁治疗组(脊髓损伤后30min-次性腹腔注射300mg／b硫酸镁)，在伤后6，12和24h检测伤段脊髓Na^ -K^ -ATP酶活力、脊髓组织含水量及丙二醛浓度，与正常对照组(n=8)比较。结果：损伤组与对照组比较，Na^ -K^ -ATP酶活力降低，丙二醛浓度与脊髓含水量升高，差异有非常显性意义(P＜0．01)；治疗组与损伤组     

衰老小鼠线粒体DNA缺失突变的研究

目的测定不同年龄组及D-半乳糖诱导的衰老小鼠线粒体DNA(mtDNA)缺失突变,探讨mtDNA缺失突变与衰老的关系。方法用聚合酶链反应技术和琼脂糖凝胶电泳检测mtDNA缺失片段,用密度扫描技术对扩增片段进行相对定量。缺失片段构建质粒后,直接测序进行鉴定。结果全部小鼠的肝、脑与海马组织内均存在4239bp的mtDNA缺失片段。老年鼠肝、脑与海马组织内mtDNA缺失的比例较青幼年鼠明显增加(P<均0.01)。衰老模型鼠不同组织mtDNA缺失的相对百分含量均明显高于实验对照组(P均<0.01),肝组织中mtDNA缺失的比例较大脑皮层和海马组织更高。结论4239bp的mtDNA缺失片段普遍存在于小鼠中,与增龄和衰老相关,可作为衰老的一种分子生物标志。     

马齿苋水提液对D-半乳糖致衰老模型小鼠心肌线粒体的保护作用

背景:线粒体是细胞内主要耗氧部位,是产生自由基的主要场所,也是内源性自由基攻击的靶部位,其结构和功能会随着年龄的增加而改变,逐步导致全身性生理功能下降。马齿苋(Portulaca oleraceaL.)有长寿菜之称,营养丰富,又有抗自由基作用,其抗衰老作用是否与心肌线粒体的保护有关值得探讨。目的:观察马齿苋水提液对衰老模型小鼠心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和呼吸链酶活性的影响,分析其心肌保护作用途径。设计:完全随机分组设计,对照动物实验。单位:佳木斯大学基础医学院生化教研室。材料:①于2004-01/08在佳木斯大学实验动物中心完成动物饲养和实验,在生物化学教研室完成动物的处死、心脏取材、线粒体的制备,在生物化学教研室、大学实验中心、化学与药学院完成指标的测定。选用成年纯系昆明种健康小白鼠30只,雌雄不拘。②按随机摸球法分为3组:青年对照组8只,衰老模型组和模型给药组各11只。③马齿苋由佳木斯市中医药研究所提供,本校生药教研室鉴定,制成含生药浓度1kg/L水提液。心磷脂标准品由美国Sigma公司提供;丙二醛、Ca2 -ATP酶活性测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。方法:①衰老模型组每日颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg;马齿苋多糖组除注射D-半乳糖外,同时按含生药13g/(kg·d)灌服马齿苋水提液;青年对照组每日皮下注射等容量的生理盐水。连续给药30d,于最后一次给药次日处死,迅速取心脏,备用。②参考南京建成生物工程研究所提供的方法制备线粒体。按试剂盒说明测定线粒体内丙二醛含量及Ca2 -ATP酶活性;采用高效液相色谱法测定线粒体膜磷脂中心磷脂相对含量;采用伍期专的方法测定复合体Ⅰ及复合体Ⅱ Ⅲ活性。③计量资料差异比较采用方差分析和t检验。主要观察指标:各组小鼠心肌线粒体膜磷脂组成、线粒体丙二醛含量及复合体Ⅰ、复合体Ⅱ Ⅲ和Ca2 -ATP酶活性比较。结果:小鼠30只均进入结果分析。①心肌线粒体内丙二醛含量:衰老模型组为(8.827±0.873)μmol/g,高于青年对照组和马齿苋组[(5.194±0.674),(5.901±0.743)μmol/g,t=7.48,7.22,P<0.01]。②心肌线粒体内心磷脂相对含量及Ca2 -ATP酶活性:衰老模型组分别为(0.156±0.012)mg/g,(1.267±0.167)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[心磷脂:(0.190±0.022),(0.184±0.021)mg/g;Ca2 -ATP酶:(1.870±0.254),(1.780±0.237)μkat/g,t=3.23,5.61,P<0.05～0.01]。③心肌线粒体内复合体Ⅰ和复合体Ⅱ Ⅲ活性:衰老模型组分别为(3.517±0.383),(20.217±2.200)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[复合体Ⅰ:(6.817±0.600),(6.067±0.750)μkat/g;复合体Ⅱ Ⅲ:(56.400±4.933),(51.800±4.217)μkat/g,t=5.74,9.86,P<0.01]。结论:马齿苋水提液可能通过抑制心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和改善呼吸链酶的活性而实现对线粒体的保护作用。     

牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体ATP酶及钙、镁离子的影响

目的：探讨牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体ATP酶及钙、镁离子的影响。方法：以力竭运动大鼠为模型，测定了心肌线粒体Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶的活性以及Ca^2 、Mg^2 含量。结果：大鼠力竭运动后，心肌线粒体Ca^2 -ATP酶和Mg^2 -ATP酶的活性显著下降，Ca^2 -含量显著增加，Mg^2 含量显著降低；而补充牛磺酸组大鼠力竭运动后未见心肌线粒体Ca^2 -ATP酶和Mg^2 -ATP酶的活性以及Ca^2 -、Mg^2 含量的显著变化。结论：牛磺酸能有效地拮抗力竭运动后大鼠心肌线粒体Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶活性的降低以及Ca^2 -、Mg^2 含量的显著变化，具有保护心肌线粒体的作用。     

Leukocyte adenosine triphosphatase activity in human bronchial asthma.

Changes in adenosine triphosphatase (ATPase) activity of the peripheral blood leukocytes were investigated in patients with bronchial asthma. Estimation of the leukocyte Mg++- and Ca++- dependent ATPases was carried out according to Hadden's method, incubating ATP with the membrane fraction of the leukocyte. The leukocyte ATPase activity was significantly elevated among asthmatic patients compared with control subjects. This elevated ATPase was seen in all asthmatics irrespective of acute attacks or the drug treatment. There was no clear correlation between the activity of ATPase and the percentage of leukocytes, neutrophils and eosinophils. There was no relationship between ATPase activity and adenyl cyclase activity of the same leukocytes from asthmatic patients.     

红景天对衰老小鼠脑过氧化脂质及线粒体超微结构的影响

背景衰老是生物体内各组织、器官的退行性改变,是诸多病理、生理过程综合作用的结果.红景天是一种天然药用植物,具有延缓机体衰老、防治老年病等功能,但是其确切机制仍不十分清楚.目的探讨藏药红景天提取物(诺迪康胶囊)抗衰老作用及其机制.设计以实验动物为研究对象,随机对照的实验研究.单位一所军医大学医院的神经内科.材料实验于2002-03/08在解放军第四军医大学药理学实验室完成.60只昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、诺迪康1,,4 g/kg3个剂量组、维生素E阳性对照组0.1 mg/kg,每组10只.干预模型组、诺迪康组、维生素E阳性对照组均将30 g/L D-半乳糖生理盐水溶液,按每日150mg/kg颈后部皮下注射,连续8周,同时,诺迪康组、维生素E阳性对照组灌胃给药,次/d,连续8周.主要观察指标诺迪康胶囊对衰老小鼠脑乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,DH)活性、过氧化脂质(lipidperoxides,PO)含量,脑过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,OD)活性、丙二醛(malondialdehyde,DA)含量以及海马神经元线粒体超微结构的影响.结果诺迪康胶囊1,,4 g/kg组均可降低脑组织LPO含量[(30.1±2.9),(27.8±3.1),26.9±1.9)nmol/g]和MDA含量[(110.2±13.5),(95.4±20.1),90.2±16.5)nmol/g],与模型组[(33.4±2.2),126.5±17.2)nmol/g]相比,差异均有显著性意义(P＜0.05);并明显升高LDH活性[(1.74±0.14),1.92±0.23),2.04±0.21)NU/g]和SOD活性[(119.1±2.2),121.3±0.9),126.4±2.0)NU/g],与模型组[(1.68±0.19),115.9±2.1)NU/g]相比,差异均有显著性意义(P＜0.05).电镜结果表明,诺迪康胶囊2, g/kg组对半乳糖引起的海马神经元线粒体退行性变具有明显的保护作用.结论诺迪康胶囊具有显著的抗衰老作用,此作用与其抗氧化损伤和保护神经元有关.     

Sodium-potassium-activated adenosine triphosphatase activity as a measure of neuronal membrane characteristics in ethanol-tolerant mice

(Na+-K+) activated adenosine triphosphatase of mouse synaptosomal membranes is inhibited by high concentrations of ethanol. When membranes were obtained from mice made tolerant to and physically dependent on ethanol by chronic exposure to an ethanol-containing liquid diet, the enzyme was resistant to the inhibitory effects of ethanol. Arrhenius plots of synaptosomal (Na+-K+) activated adenosine triphosphatase from control animals revealed that ethanol added in vitro lowered the transition temperature and altered the Arrhenius activation energies of this enzyme. Enzyme from ethanol-tolerant animals had a lower transition temperature than that from control animals, and ethanol added in vitro had no effect either on transition temperature or on activation energy of enzyme from ethanol-tolerant animals. The occurrence of lowered transition temperature and resistance to ethanol-induced alterations in transition temperature of the enzyme from ethanol-tolerant animals most likely reflects changes in membrane composition. Changes in Arrhenius plots correlated in time with resistance to the inhibitory effects of ethanol on (Na+-K+) activated adenosine triphosphatase activity and the time course of disappearance of these effects was similar to that of the disappearance of functional tolerance to ethanol. The resistance to the effects of ethanol on membrane function may be related to ethanol tolerance evidenced by behavioral and physiological measurements.     

佐剂性关节炎大鼠细胞因子和皮质醇水平与茜草总蒽醌的干预作用

目的:观察茜草总蒽醌对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用及其与细胞因子和皮质醇关系,并与地塞米松进行阳性对照。方法:实验于2001-10-01/12-15在潍坊医学院药理实验室完成。①取成年SD大鼠35只,随机分为5组(n=7):对照组,模型组,地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组。后4组大鼠于右足垫皮内注射弗氏完全佐剂0.05mL制备佐剂性关节炎大鼠模型。②造模后第17天开始,地塞米松组腹腔注射地塞米松2.5mg/(kg·d),总蒽醌60,120mg/(kg·d)组分别灌胃茜草总蒽醌60,120mg/(kg·d),对照组和模型组灌胃等容积的生理盐水,连用10d。③观察大鼠给药前后左足爪的肿胀度和全身病变评分,并用放射免疫法测定给药后血清中白细胞介素1,2,6及肿瘤坏死因子和皮质醇的水平。结果:35只大鼠进入结果分析。①地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组大鼠给药后左足爪的肿胀度、全身病变评分均低于模型组(P<0.01),地塞米松组效果优于其他两组(P<0.01)。②地塞米松组,总蒽醌60,120mg/(kg·d)组大鼠血清中白细胞介素1,2,6和肿瘤坏死因子水平均低于模型组(P<0.01),地塞米松组作用最明显,总蒽醌60mg/(kg·d)组作用最弱。各组皮质醇水平比较无差异(P>0.05)。结论:①茜草总蒽醌能显著减轻佐剂性关节炎大鼠的炎症反应,其作用可能与降低血清中白细胞介素1,2,6,和肿瘤坏死因子水平有关,而与垂体-肾上腺皮质轴无关。②茜草总蒽醌的效果比地塞米松弱。     

Effect of adenosine on myocardial oxygen balance.

The present study was designed to determine the effect of adenosine on oxyhemoglobin equilibrium (P-50) and myocardial oxygen consumption (MVO2) in the isolated supported dog heart preparation perfused at a constant coronary blood flow. Heart rate was controlled at 150 beats/min. A-3-minute intracoronary infusion of adenosine (10, 50 and 100 mug/min) produced significant decreases in MVO2, whereas coronary venous P-50 did not change. Adenosine-5'-monophosphate (5'-AMP) infusion (70 and 140 mug/min) did not produce a significant change in MVO2. Both adenosine and 5'-AMP caused equivalent decreases in coronary artery perfusion pressure and peak left ventricular systolic pressure. Furthermore, adenosine (50 and 100 mug/min) produced a significant decrease in MVO2 of the isolated supported fibrillating heart. These results suggest that the reduction in MVO2 observed with adenosine is not related to coronary vasodilation or to a negative inotropic or chronotropic action. Theophylline (2.5 mg/kg) partially blocked the hemodynamic effects of adenosine while completely abolishing the decrease in MVO2. Neither inosine nor hypoxanthine (50 and 100 mug/min) changed MVO2, P-50 or myocardial hemodynamics. Thus, in addition to its proposed role in coronary blood flow regulation, adenosine appears to exert important effects on myocardial metabolism.     

Effect of high salt intake on sodium, potassium-dependent adenosine triphosphatase activity in the erythrocytes of normotensive men

1. We measured ouabain-insensitive adenosine triphosphatase (ATPase), sodium, potassium-dependent adenosine triphosphatase (Na+,K+-ATPase) and intracellular Na+ and K+ in the erythrocytes of 19 healthy volunteers, before and after supplementation of their normal diet was 6.0-8.9 g of salt (102-137 mmol of NaCl) per day, for 5 days. 2. The subjects had a small but significant gain in weight. Mean plasma renin activity decreased from 1.57 to 0.73 pmol of angiotensin 1 h-1 ml-1 and plasma aldosterone from 0.46 to 0.24 nmol/l. 3. Total ATPase activity fell from 197.9 nmol of inorganic phosphate h-1 mg-1 during the control period to 173.5 during the high-salt period (P less than 0.0125). Na+, K+-ATPase activity fell from 162.2 to 141.4 nmol of inorganic phosphate h-1 mg-1 (P less than 0.05). Intracellular Na+ and intracellular K+ did not change. 4. These results are consistent with the hypothesis that salt-induced volume expansion causes the release of a factor inhibitory to the Na+ pump.