卡瓦胡椒对c-DNA已表达的细胞色素P450酶及低温贮存的人肝细胞的影响

有研究显示卡瓦胡椒Piper methysticum Forster f．中的几种化合物对P450酶显示强抑制作用，并可能通过其活性代谢物的生成产生致死性肝毒性。作者研究了该植物根乙醇提取物及3种卡瓦内酯类成分醉人素（methysticin）、去甲氧基麻醉椒素（desmethoxyyangonin）和麻醉椒素（yangonin）体外对在杆状病毒／昆虫细胞系（重组CYPs）和低温保存的人肝细胞中已表达的P450酶活性的抑制作用。     

人参属植物Panax vietnamensis防止CCl_4引起的小鼠肝毒性而不影响CYP2E1基因的表达

体内、外实验曾证实,人参、三七和竹节参根的皂苷可防止CCl_4引起的肝毒性,这种肝保护活性主要与其抑制细胞色素P450,特别是CYP2E1的催化活性有关。P.vietna-mensis Ha et Grush.是1973年在越南中部发现的一新的人参属植物,在越南民间用于     

苯巴比妥钠诱导细胞色素P450对内毒素所致鼠毒性的保护作用

 目的蜒究苯巴比妥钠诱导细胞色素P450(P450)对内毒素所致鼠毒性的保护作用。方法 紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体P450含量;鲎试剂法测定血浆内毒素含量;应用组织形态学方法（光镜和电镜）,观察苯巴比妥钠对内毒素所致大鼠肝线粒体以及肝细胞、肝小叶结构、肺泡、肺间质、肺支气管、肾曲管细胞等病理改变的影响。结果苯巴比妥钠可明显降低血浆内毒素含量;延长内毒素休克小鼠的平均生存时间,降低其死亡率;诱导大鼠肝微粒体P450的产生;对内毒素大鼠肝线粒体以及肝细胞、肝小叶结构、肺泡、肺间质、肺支气管、肾曲管细胞等损害具保护作用。结论苯巴比妥钠诱导细胞色素P450对内毒素所致鼠毒性具有保护作用。     

吴茱萸中的不可逆性CYP3A4抑制成分

在探讨83种生药对细胞色素P450（CYP）的作用时，发现多种生药可抑制CYP3A4或者CYP2D6活性，其中吴茱萸对人肝微粒体（HLM）CYP3A4的抑制作用，在NADPH存在下预培养后被显著增强。本次对其抑制活性成分进行了筛选。     

山茱萸对老龄小鼠肝微粒体细胞色素P450部分亚型的影响

目的:探讨山茱萸对老龄小鼠肝微粒体细胞色素P450部分亚型的影响。方法:对12月龄小鼠给予含山茱萸不同剂量的药物鼠粮,连续给药3个月后,以6月龄小鼠为成年对照组,采用荧光定量PCR法检测小鼠肝脏组织CYP1A1、CYP2A4、CYP2A5、CYP3A41等P450亚型基因mRNA的表达。结果:模型组小鼠肝脏组织CYP1A1、CYP2A4、CYP2A5、CYP3A41等基因mRNA的表达量显著低于正常组小鼠;不同剂量山茱萸给药组肝脏CYP1A1、CYP2A4、CYP2A5、CYP3A41等基因mRNA的表达量均显著高于模型组,且山茱萸高剂量组作用优于低剂量组。结论:衰老可导致细胞色素P450亚型基因表达减少,山茱萸对老龄小鼠肝微粒体CYP1A1、CYP2A4、CYP2A5、CYP3A41等基因具有诱导作用。     

药用植物中细胞色素P450基因的研究进展

细胞色素P450(cytochrome P450)广泛存在于动物、植物、细菌、真菌等细胞内。是一类与内质网、线粒体、质体高尔基体等细胞器结合的以血红素为辅基的B族细胞色素超基因家族蛋白酶,该酶在植物体内担当着相当重要的功能,在植物体中催化着多种初级代谢反应和次级代谢反应,对黄酮类、香豆素、异黄酮类氰苷、生物碱、萜类等的合成以及降解外源化学药物毒性等方面有重要作用。本文通过介绍该基因在药用植物刺五加、北柴胡、蓖麻、茶树、黄花蒿等植物的克隆和表达以及表达量的测定实验技术,为从其他植物中克隆P450基因提供方法和依据,并对后续研究提供参考。     

川楝子对大鼠肝细胞色素P450诱导作用的研究

目的:考察川楝子对大鼠肝细胞色素P450 1A2、2E1、3A1活性的影响。方法:大鼠分组,连续灌胃给予150g生药/kg的川楝子7天;苯巴比妥组腹腔注射0.08g/kg的苯巴比妥3次。高效液相色谱法对肝细胞色素P450 1A2、2E1、3A1代谢能力进行测定。结果:连续给予川楝子7天后,对肝细胞色素P450 1A2代谢能力影响不明显,但可使大鼠肝微粒体酶蛋白含量增加,使肝细胞色素P450 1A2总代谢能力增强;对大鼠大鼠肝细胞色素P450 2E1活性及代谢能力均无明显影响;川楝子可诱导雌性大鼠大鼠肝细胞色素P450 3A1,使6-OH睾酮代谢生成速率及肝脏总代谢睾酮的能力增强;对雄性大鼠肝细胞色素P450 3A1有诱导的趋势,使6-OH睾酮代谢生成速率及肝脏总代谢睾酮的能力有增强的趋势,但与对照组比较差异无显著意义。结论:川楝子对大鼠肝细胞色素P450 3A1活性具有诱导作用。     

卡瓦胡椒的安全性遭受质疑

继广防己和关木通导致肾毒案之后,卡瓦胡椒的安全问题再次引起了世界的关注。数十例肝毒性报告导致欧美很多国家政府采取了断然措施,或暂停销售或干脆取缔,尽管权威科学家们认为卡瓦胡椒与肝毒性间的因果关系证据不足。本文将这一事件的起因、各国政府的对策和权威专家的观点呈献给读者,旨在引起国内消费者、生产者、药品监督管理部门和医生的关注或采取应对措施。     

保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素P450影响的研究

目的 通过保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织细胞色素P450影响的研究,探讨保肝消脂颗粒治疗NAFLD的机理.方法 高脂饲料制备SD大鼠脂肪肝模型,将模型大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组和保肝消脂颗粒高、中、低剂量组,并设空白组.治疗8周后,观察大鼠的一般情况,记录肝指数,和肝组织病理学检测,采用酶联免疫法测定肝匀浆中细胞色素P450水平.结果 与正常对照组相比,造模组肝指数、肝组织中的细胞色素P450水平显著升高(P<0.05),经保肝消脂颗粒治疗后,肝指数、肝匀浆组织中细胞色素P450水平明显下降,其中保肝消脂颗粒中、高剂量组与模型组差异具显著性.结论 保肝消脂颗粒可有效地降低肝组织匀浆细胞色素P450水平,该作用可能是其治疗非酒精性脂肪肝的作用机理之一.     

枳椇子醋酸乙酯提取物对大鼠肝P450同工酶的影响

目的：观察枳椇子醋酸乙酯提取物对大鼠肝P450同工酶的影响。方法：大鼠分别灌胃给予枳椇子醋酸乙酯提取物相当于生药量0.14,0.17,0.2 g·kg^-1,连续10 d,采用紫外分光光度法测定细胞色素P450与NADPH-细胞色素C(P-450)还原酶含量及苯胺羟化酶(ANH)、氨基比林N-脱甲基酶(ADM)、红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性。采用RT-PCR技术检测大鼠肝脏CYP1A1,CYP2C11,CYP2E1,CYP3A1基因的水平。结果：枳椇子醋酸乙酯提取物对细胞色素P450及NADPH-细胞色素C(P-450)还原酶含量无显著影响；可抑制苯胺羟化酶(ANH)活性,抑制率可达31.5%；可增加氨基比林N-脱甲基酶(ADM)活性,可达42.4%；而对红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性没有明显变化。在mRNA水平上,CYP2E1基因的表达水平没有变化；CYP1A1,CYP2C11和CYP3A1基因表达水平则明显增加。结论：枳椇子醋酸乙酯提取物对大鼠肝P450同工酶的影响表现出特异性,对不同的P450同工酶作用不同。     

丹参酚酸A对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响

目的:研究丹参酚酸A对大鼠肝微粒体细胞色素P450和细胞色素b_5含量以及CYP1A2和CYP2E1活性的影响.方法:将大鼠分成溶剂对照组和丹参酚酸A给药组,每组10只,雌雄各半,丹参酚酸A给药组尾静脉注射给予丹参酚酸A 20 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续给药5 d;溶剂对照组给予相同剂量的溶剂,紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450和细胞色素b_5含量;探针底物法评价CYP1A2和CYP2E1的活性.结果:丹参酚酸A尾静脉注射连续给药5 d后,大鼠细胞色素P450和细胞色素b_5含量与对照组比较均无显著性差异;CYP1A2和CYP2E1的活性与对照组比较也无显著性差异.结论:丹参酚酸A对CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用,与经过CYP1A2和CYP2E1代谢的药物发生相互作用的可能性较小.     

卡瓦胡椒在均相细胞试验中未显示代谢毒性[美]／Zou L…／／Planta Med

自1999年来有报道称，德国和瑞士某些人发生的致死性肝中毒可能与服用含卡瓦胡椒的草药制品有关，部分国家因此禁售。作者研究了卡瓦胡椒中3种内酯，即去甲氧基醉椒素(desmethoxyyangonin)、麻醉椒苦素(methysticin)、醉椒素(yangonin)和该植物根乙醇提取物在药物代谢酶作用下是否存在肝毒性。     

保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠抵抗素、细胞色素P450影响的研究

目的：通过保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝组织抵抗素、细胞色素P450影响的研究,探讨保肝消脂颗粒治疗NAFLD的机理。方法：高脂饲料制备SD大鼠脂肪肝模型,将模型大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组和保肝消脂颗粒高、中、低剂量组,并设空白组。治疗8周后,采用酶联免疫法测定肝组织匀浆中抵抗素、细胞色素P450水平。结果：与正常对照组相比,造模组肝组织中的抵抗素、细胞色素P450水平显著升高（P〈0.05）,经保肝消脂颗粒治疗后,肝组织匀浆中抵抗素、细胞色素P450水平明显下降,其中保肝消脂颗粒中、高剂量组与模型组差异显著。结论：保肝消脂颗粒可有效地降低肝组织匀浆抵抗素、细胞色素P450水平,可能是其治疗非酒精性脂肪肝的作用机理之一。     

细胞色素P450同工酶对马兜铃酸所致的细胞毒性的影响

目的：探讨细胞色素P450同工酶(cytochrome P450 isozymes)对马兜铃酸(aristolochic acid，AA)致肾小管上皮细胞毒性的影响。方法：采用体外培养的人类肾小管上皮细胞(HK-2细胞)，AA与α-萘黄酮(CYP450 1A1和1A2的抑制剂)、酮康唑(CYP4503A4的抑制剂)、二乙基二硫代氨基甲酸钠(CYP450 2A6和2E1的抑制剂)、奎尼丁(CYP450 2D的抑制剂)、α-硫辛酸 (NADPH，P450 还原酶的抑制剂)、磺胺苯吡唑(CYP450 2C 的抑制剂)等抑制剂在有或无CYP450存在的条件下进行体外联合用药，采用四甲基偶氮唑(MTT)法测定细胞增殖抑制率以及连续监测法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果：AA可抑制细胞增殖和促进LDH释放，在12.5～100 mg·L^-1呈剂量依赖性，随浓度的升高，细胞毒性更明显。在培养体系中加入S9可使AA的细胞毒性降低，细胞增殖抑制作用减轻，LDH释放减少(加与不加S9相比P<0.05)。在无S9存在时，酮康唑或α-萘黄酮对AA的细胞毒性无明显影响，而在S9存在的条件下，加入酮康唑或α-萘黄酮对AA的细胞毒性作用增强。其他抑制剂所形成的CYP450亚型抑制效应对AA的细胞毒性影响不明显。结论：微粒体混合酶对AA的细胞毒性有影响，能够降低AA细胞毒性，其中CYP450 3A和CYP450 1A可能是影响AA细胞毒性的主要同工酶。     

慈姑多糖对异烟肼和利福平联用致HepG2细胞肝损伤CYP2E1和CYP3A4的影响

目的:研究慈姑多糖(Sagittaria sagittifolin polysaccharide,SSP)对异烟肼(Isoniazid,INH)和利福平(Rifampicin,RFP)联用致HepG2细胞肝损伤中细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)亚型CYP2E1和CYP3A4酶含量、基因及蛋白表达影响。方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定HepG2细胞中CYP2E1和CYP3A4酶含量,采用RT-PCR技术检测HepG2细胞中CYP2E1和CYP3A4的mRNA的表达,采用Western-blot法检测HepG2细胞中CYP2E1和CYP3A4蛋白的表达。结果:与正常对照组相比,INH和RFP联用诱导的肝损伤模型组CYP2E1和CYP3A4酶含量、基因及蛋白表达均显著升高(P0.05);与模型组相比,SSP保护组的CYP2E1和CYP3A4酶含量、基因及蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论:SSP可能通过抑制肝HepG2细胞中CYP2E1和CYP3A4酶的含量、基因及蛋白的表达,发挥其对INH和RFP联用致肝损伤的保护作用。     

364 78种生药提取物对人肝脏微粒体 CYP3A4和CYP2D6的抑制作用

探讨了78种生药提取物对人肝脏微粒体的药物代谢酶细胞色素P450（CYP）CYP3A4和CYP2D6的抑制作用。     

银杏内酯对大鼠肝细胞色素P450基因表达的影响

目的:观察银杏内酯对大鼠肝细胞色素P-450基因表达的影响。方法:银杏内酯100mg·kg^-1,大鼠灌胃给药,1日1次,连续4d,取肝组织,用竞争法反转录-聚合酶链式反应(competitiveRT-PCR)检测给药后细胞色素P-450基因表达的变化。结果:反转录反应体系不含目的RNA时,用参考模板竞争RNA反转录后用CYP和看家基因Cyclophilin引物进行PCR,CYP1A1,CYP1A2,CYP281/B2,CYP2C11,CYP2E1,CYP3A1,CYP4A1,Cyclophilin均出现了其预期的特异性片段,无其他非特异性带出现,表明参考模板竞争RNA对CYP和看家基因Cyclophilin引物具有特异性竞争能力。给银杏内酯后,对照组和给药组大鼠肝组织的CYP1A1mRNA均检测不到。CYP2C11和CYP2E1的基因表达水平没有变化;CYP1A2和CYP2B1/B2的基因表达水平下降;CYP3A1和CYP4A1的基因表达水平则明显增加。结论:银杏内酯对大鼠肝组织的细胞色素P-450基因表达水平的影响表现出特异性,对不同的细胞色素P-450成员的作用不同。     

基于肝脏药物代谢酶研究附子配伍干地黄的减毒机制

测定大鼠肝微粒体中CYP1A2和CYP3A4酶活性,并从蛋白和转录水平上阐明附子配伍干地黄对CYP450酶蛋白和基因表达的影响,探索附子配伍干地黄对其减毒的分子机制。采用"Cocktail"探针药物法进行CYP450酶活性测定;采用CO还原差示法测定肝微粒体中CYP450酶含量并采用RT-PCR测定大鼠肝脏CYP1A2和CYP3A4 mRNA表达量。结果显示,与空白组比较,附子干地黄组CYP1A2和CYP3A4酶活性及mRNA表达显著升高(P0.05);附子组CYP450含量显著降低(P0.01);干地黄组、附子干地黄组CYP450含量显著升高(P0.05)。因此,附子配伍干地黄能够诱导CYP1A2和CYP3A4酶活性,增加CYP450酶含量,加快附子毒性成分的代谢,达到附子减毒作用。     

复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响

目的：探讨复方丹参滴丸对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量的影响。方法：利用细胞色素P450在铁蛋白的铁原子被还原与一氧化碳形成复合物时出现一特异性吸收峰的特性，测定复方丹参滴丸对实验大鼠肝微粒体细胞色素P450活性的影响，同时测定其肝指数的变化。结果：复方丹参滴丸能诱导大鼠肝微粒体细胞色素P450的活性，且其作用随给药时间的延长而增强。结论：复方丹参滴丸虽然作为OCT药品，但在长期服用或配伍应用时亦应当慎重。     

黄药子与甘草配伍对大鼠肝CYP450酶活性及mRNA表达的影响

目的:研究甘草减轻黄药子肝损伤对CYP450酶活性及基因表达的影响。方法:采用紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450、细胞色素b5含量及氨基比林N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶活性,采用RT-PCR技术检测大鼠肝脏CYP2E1、CYP3A4的mRNA的表达。结果:黄药子甘草1∶2配伍组能显著减轻黄药子致大鼠肝损害,与黄药子甘草1∶2配伍组(27 g/kg)比较,黄药子组(9 g/kg)肝微粒体蛋白浓度、P450含量、b5含量均明显下降;氨基比林N-脱甲基酶活性、红霉素N-脱甲基酶活性亦明显下降。在mRNA水平上,黄药子组9 g/kg显著诱导CYP2E1、CYP3A4基因的表达,与甘草1∶2配伍后(27 g/kg)表达显著降低。结论:甘草可能通过提高CYP450酶活性,抑制CYP2E1、CYP3A4的mRNA表达,对黄药子致肝损伤具有一定的保护作用。