色氨酸酶的催化功能及其在L-色氨酸酶法合成中的应用

色氨酸酶是一种依赖磷酸吡哆醛的多功能酶,由相同的4个亚基组成,每个亚基含有一个磷酸吡哆醛结合位点,催化活性需要NH4+或K+存在。它不仅能催化L-色氨酸的分解,而且能催化一系列α,β-消去反应和β-取代反应。其催化机制主要包括外部醛亚胺的形成和醌型中间物的生成。在高浓度底物条件下,色氨酸酶能催化丙酮酸、吲哚和氨合成L-色氨酸。通过β-取代反应,色氨酸酶催化L-丝氨酸、L-半胱氨酸合成L-色氨酸,这为酶法工业化生产L-色氨酸提供了重要途径。此外,色氨酸酶在制备硫醇类香料化合物中也发挥重要作用。     

吃对了才能睡得好

<正>对于很多晚睡的人来说,睡前不吃点东西总觉得肚子空空的,睡不着,但是睡前吃东西又怕发胖。今天小编就给大家介绍几种适合睡前吃的食物,好吃不发胖。温牛奶睡前喝杯温奶有助于睡眠,这时候因为牛奶中含有一种色氨酸,它有镇静安神的功效。而且睡前喝牛奶不但不会发胖,还可以补充身体里的钙。蜂蜜往你的温牛奶中或香草茶中放入少量蜂蜜,一些葡萄糖能促使你的大脑     

α-硫辛酸衍生物的合成及其抗癌活性研究

目的设计合成α-硫辛酸衍生物,并测定其体外对肿瘤细胞的抑制活性。方法首先,以邻硝基氟苯为起始原料,经亲电取代和氧化反应合成抗肿瘤药替拉扎明,同时以色氨酸为起始物合成L-色氨酸甲酯盐酸盐;然后将替拉扎明和色氨酸甲酯盐酸盐分别与外消旋的或光学纯的硫辛酸进行酰胺缩合制得目标化合物。采用MTT法考察目标化合物对肿瘤细胞株ES-2、K562、PC-3、MDA-MB-231和A549的体外抑瘤活性。结果与结论合成了4个未见文献报道的新硫辛酸衍生物,其结构经1H-NMR、MS谱确证。目标化合物对实验的肿瘤细胞均具有一定的抑制活性,其中,化合物Ⅱ的活性最好,其IC50值在10μmol·L-1以内。     

L-色氨酸的安眠、镇痛作用及其发展

L色氨酸过去只把它当作一种营养剂,以补充水解蛋白注射中色氨酸之不足;或用作癞皮病的防治剂。但是,近年来的研究发现L-色氨酸在人体内可经下列途径变为5-羟色胺(5HT)。 5-羟色胺经过血液循环进入脑部,使脑髓中的5-羟色胺量增加,从而产生明显的催眠作用,可使人提前进入安静睡眠期     

海洋放线菌Kocuria sp.次级代谢产物的研究

目的 研究海洋放线菌Kocuria sp.的次级代谢产物。方法 菌株摇瓶发酵,采用现代色谱学方法(硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备HPLC),对发酵产物进行分离,利用现代波谱学技术对化合物进行结构鉴定。结果 从海洋放线菌Kocuria sp.发酵液的乙酸乙酯萃取部分分离得到16个单体化合物：环(L-苯丙氨酸-L-脯氨酸)2 (1)、环(L-色氨酸-L-脯氨酸) (2)、环(L-色氨酸-D-脯氨酸) (3)、环(L-苯丙氨酸-D-脯氨酸) (4)、环(L-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸) (5)、环(D-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸) (6)、环(L-羟脯氨酸-L-酪氨酸) (7)、环(L-异亮氨酸-D-脯氨酸) (8)、环(L-亮氨酸-D-脯氨酸) (9)、环(L-亮氨酸-L-脯氨酸) (10)、环(L-苯丙氨酸-L-酪氨酸) (11)、环(L-亮氨酸-D-酪氨酸) (12)、环(L-亮氨酸-L-苯丙氨酸) (13)、环(D-缬氨酸-L-苯丙氨酸) (14)、环(D-亮氨酸-甘氨酸) (15)、环(D-异亮氨酸-甘氨酸) (16)。结论 海洋放线菌Kocuria sp.可产生结构丰富多样的环肽类化合物,所有化合物均首次从Kocuria属放线菌中分离得到。     

L-色氨酸鉴定会在武汉召开

<正> L-色氨酸是人体必须的八种氨基酸之一,在医药方面主要用于配制复方氨基酸输液等营养制剂,也可单独应用于治疗抑郁症等疾患,在食品工业和饲料工业领域大量用于要素饮食及饲料的添加剂。此外,L-色氨酸还是合成多肽药物的基本原料,它的应用日益广泛,前景广阔。目前世界上L-色氨酸年产量约200吨,预计今后将有大幅度增长。目前国内所需的L-色氨酸几乎全部依赖进口。武汉制药厂为改变我同进口L-色氨酸的局面,利用本厂氯霉素生产原料对硝基乙苯的副产物——邻硝基乙苯为起始原料,经还原、闭环、     

重组大肠杆菌高密度发酵生产L一色氨酸

为提高重组大肠杆菌生产L-色氨酸的产量,减少乙酸和色素的生成,考察了比生长速率的梯度控制和溶氧的分阶段控制对生产L-色氨酸的影响.在确定了合适的工艺控制后,L-色氨酸的产量提高为41.8g/L,比工艺优化前提高了30％.     

N-乙酰基色胺的异源生物合成和抑藻活性研究

目的 用Streptomyces lividans GX28异源合成N-乙酰基色胺,并研究N-乙酰基色胺的抗赤潮藻活性。方法 前期研究发现Bacillus atrophaeus C89芳香族氨基酸脱羧酶(aromatic l-amino acid decarboxylase, AADC)能将L-色氨酸脱羧成L-色胺。氨基酸多序列比对发现S. lividans GX28基因组中存在使色胺乙酰化的酶。通过克隆、重组将aadc基因转入S. lividans GX28中构建重组菌株,HPLC检测目标产物,NMR鉴定化合物的结构。检测化合物对3种赤潮微藻的毒性。结果 S. lividans GX28中的蛋白WP_015609847.1含有芳烷基胺N-乙酰转移酶(alkyl amine N-acetyltransferase, AANAT)的底物结合位点(P64和F188)和催化位点(Y168),推测其为AANAT。宿主的发酵产物中分离得到N-乙酰基色胺。N-乙酰基色胺对墨西哥原甲藻的生长具有较强的抑制作用(IC50=9.56mg/L)。结论 推测aadc基因在链霉菌中异源表达。重组链霉菌中检测到N-乙酰基色胺,并对N-乙酰基色胺的生物合成途径进行推测。N-乙酰基色胺对P. mexicanum的生长具有显著的抑制作用。本研究为抑藻化合物的生物合成研究奠定了基础。     

抗抑郁药α-甲基色氨酸

α-甲基色氨酸（α-methltryptophan）是一种合成的氨基酸，自1953年以来已对其进行了生物化学方面的研究，1968年起进行药理学的研究，1990年起进行了放射生物学的研究。本品优良的生化特性为该化合物有模拟天然色氨酸L-色氨酸诱导哺乳动物肝内色氨酸吡咯酶的合成的能力，已知该酶在肾上腺切除动物中能起作用。由于本品不是该酶的底物，不易发生代谢，长期服用本药会增加肝内吡咯酶的含量，导致（虽然暂时的）组织和血浆的色氨酸浓度的降低。由于色氨酸是5-羟色胺（5－HT）的前体，脑内合成该胺取决于在那个器官周围色氨酸的浓度，结果减…     

吃掉“高考病”

情绪易波动 情绪经常不好的高三学生,不妨多吃一些全谷物食品,如全谷物面包。全谷物食品中氨基酸含量丰富,特别是色氨酸。色氨酸具有镇静作用,可以使人保持镇静,能调节大脑的精神活动,使情绪保持稳定。     

同步导数荧光法测定复合氨基酸注射液中L-苯丙氨酸和L-色氨酸的含量

国内曾有报道紫外微分法测定复合氨基酸注射液中L-苯丙氨酸和L-色氨酸的含量,但杂峰多,影响测定的因素亦多。还有采用离子选择性电极法、荧光法等测定方法,但均不够理想。本文采用同步导数荧光法测定11种复合氨基酸注射液中L-苯丙氨酸和L-色氨酸含量,结果良好,现介绍如下。     

从L-色氨酸制备D-色氨酸

L-色氨酸在碱性条件下消旋制得DL-色氨酸,以D-樟脑磺酸为手性拆分剂生成D-色氨酸樟脑磺酸盐,最后经水解制得D-色氨酸,总收率约40％.     

D-色氨酸修饰电极测定盐酸氨溴索的研究

目的：研究聚D-色氨酸修饰玻碳电极的制备条件及该修饰电极的应用。方法：在含有2．50&#215;10-3mol&#183;L-1D-色氨酸的磷酸盐缓冲溶液（PBS）中，用循环伏安法，研究了聚合D-色氨酸的最佳条件；用示差脉冲伏安法测定盐酸氨溴索。结果：在玻碳电极上修饰D-色氨酸的最佳条件是：在2．5&#215;10-3mol&#183;L-1D-色氨酸的PBS（pH=4．0）中用循环伏安法修饰16圈。于PBS（pH=8．0）中测定盐酸氨溴索，测定的线性范围为：7．20&#215;10-7—1．68&#215;10-5mol&#183;L-1 ，检出限为2．4&#215;10-7mol&#183;L-1 。结论：制得的聚D-色氨酸修饰电极具有较好的稳定性和重现性，且制作方法简便，用于盐酸氨溴索的测定具有较宽的线性范围和较低的检出限，建立了一种测定药物的新方法。     

1株发光杆菌Photorhabdus asymbiotica的次级代谢产物研究

摘要：目的 研究1株发光杆菌Photorhabdus asymbiotica抗革兰阴性菌的活性次级代谢产物。方法 以抗革兰阴性菌活性为导向,采用大孔吸附树脂、MCI柱色谱,以及反相高效液相色谱等多种分离纯化技术,利用HR-ESIMS和NMR等波谱学方法,分离Photorhabdus asymbiotica发酵液中的化合物并鉴定其结构。结果 从菌株Photorhabdus asymbiotica中获得3个次级代谢产物,并鉴定为darobactin(1)、环(L-色氨酸-L-脯氨酸)(2)和环(L-脯氨酸-L-苯丙氨酸)(3)。其中化合物1对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌均具有显著的抗菌活性。结论 化合物1为发光杆菌Photorhabdus asymbiotica中主要的抗革兰阴性菌活性化学成分。     

Notoamide E 的全合成

目的 对海洋真菌来源的notoamide E 进行全合成研究。方法 通过吲哚C-6位的高选择性溴化反应,Miyaura硼化反应,oxa-[3+3]环加成等关键反应步骤,完成目标化合物的合成。结果 以廉价易得的L-色氨酸甲酯盐酸盐为原料,经九步反应,以9.5%的总收率实现Notoamide E的全合成。     

导数光谱同时快速测定合成肽中色氨酸和酪氨酸

本文报道一种同时快速测定合成肽中色氨酸和酪氨酸含量的二阶导数光谱法,本法不需要水解或衍生化反应程序。试剂光谱分析用的L-色氨酸和L-酪氨酸为分析纯。紫外光谱分析采用Hewlett-Packard8452A型分光光度计二阶导数光谱法记录吸收度值。将合成肽溶解在0.1NNaOH溶液中,制成约200nmol/ml浓度的溶液,分别以0.1NNaOH配制相同浓度的色氨酸和酪氨酸标准溶液为对照进行扫描。     

紫外分光光度法测定复合氨基酸注射液中L-色氨酸含量

复合氨基酸注射液中L-色氨酸的含量测定现采用比色法(上海、天津、湖北复合氨基酸注射液质量标准)。其显色时间和测定周期较长,操作亦较烦琐。本文利用本注射液中L-色氨酸在278.4 nm波长有最大吸收峰,在287.4 nm有肩峰,而其它成分无干扰的特点,直接取样以水稀释,采用紫外分光光度法测定其含量,得到较满意结果。实验表明,本法有较好的回收率和较低的变异系数,较好的稳定性和重现性,可用于复合氨基酸注射液(规格有含总氨基酸9.12％和8.33％两种)中L-色氨酸的快速定量。     

海洋细菌Roseobacter sp.发酵液中化学成分的研究

目的对海洋细菌Roseobacter sp.发酵液的乙酸乙酯萃取部分进行化学成分的研究。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱等手段,利用理化和波谱分析方法,对海洋细菌Roseobacter sp.发酵液中的化合物进行分离鉴定。结果与结论从细菌Roseobacter sp.发酵液中分离得到8个含色氨酸的环二肽,分别鉴定为环[色氨酸-缬氨酸](Ⅰ),环[色氨酸-异亮氨酸](Ⅱ),环[色氨酸-脯氨酸](Ⅲ),环[色氨酸-丙氨酸](Ⅳ),环[色氨酸-苯丙氨酸](Ⅴ),环[色氨酸-天门冬酰胺](Ⅵ),环[色氨酸-丝氨酸](Ⅶ),环[色氨酸-甘氨酸](Ⅷ)。其中化合物(Ⅵ)为新的天然产物。     

用梯度HPLC荧光检测器测定L-色氨酸中的1,1’-亚乙基双(L-色氨酸)

L一色氨酸中的杂质──1，1’－亚乙基双L-色氨酸）（简称二聚体杂质）可引起嗜曙红肌痛综合征（EMS），使病人受到损害，或致死。此杂质可能在发酵过程中引入。含有0．01％即可致EMS。因此需特别灵敏的测定方法。1仪器HPLC系统I包括PhilipsPU4100液相色谱仪，GilsonModel231进样器，带有50μlRheodyne环，Perkin－Elmerls30荧光分光光度检测器，Sllima－dzuc－R3A色谱积分仪。系统11包括Shim－adzuk－gA泵，SParkH0lland自动进样器，LDC分析分光监测器3100紫外检测器，Anac5em烘箱和Shimadzuc－R3A积分仪。系统D仅供比较荧…     

以L—半胱氨酸和吲哚为底物酶合成L—色氨酸

目的：以L－半胱氨酸和吲哚为底物,利用色氨酸酶基因工程菌WW－11酶法合成L－色氨酸。方法：以IPTG诱导基因工程菌色氨酸酶表达,将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源,通过纸层析和氨基酸自动分析仪分析并测定转化液中L－色氨酸的含量,结果：80mL反应液（L－半胱氨酸0．75g,吲哚75g)37℃反应48h,可积累L－色氨酸1．18g,L-半腕氨酸转化率为93．2％,吲哚转化率为90．1％,经分离纯化所得的L－色氨酸晶体,在熔点,旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致,结论：色氨酸酶基因工程菌能有效地催化L－半胱氨酸和吲哚合成L－色氨酸,这种酶合成法是工业化生产L－色氨酸较为有效的方法之一。