西红花苷对Aβ_(25-35)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响

目的研究西红花苷对Aβ_(25-35)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的影响。方法体外培养的PC12细胞,分为5组:正常对照组、阿尔茨海默病(AD)模型组、西红花苷(低、中、高)剂量组。CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst 33258检测细胞凋亡状况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3的表达。结果与模型组比较,西红花苷各剂量组细胞的存活率均明显升高(q值分别为3.455、6.975、7.078,P值分别0.05、0.01、0.01),凋亡率显著性下降(q值分别为4.609、13.460、13.679,P值均0.01),Bcl-2蛋白表达增加(q值分别为7.642、14.577、16.983,P值均0.01),Caspase-3表达减少(q值分别为4.236、8.210、7.555,P值分别0.05、0.01、0.01)。与西红花苷低剂量组比较,西红花苷中、高剂量组细胞存活率均升高(q值分别为3.544、5.462,P值均0.05),细胞凋亡率呈显著性减低(q值分别为8.849、9.064,P值均0.01),但中、高剂量组之间无统计学差异。结论西红花苷对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其机制可能与增加Bcl-2的表达、抑制Caspase-3依赖性凋亡信号通路有关。     

硒、锌对Aβ_(25-35)诱发胚鼠神经元细胞损伤和神经毒性的影响

目的研究硒、锌对β淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))诱导胚鼠神经元细胞神经毒性的保护作用。方法将胚鼠神经元细胞用10mol/L Aβ_(25-35)处理,建立体外老年痴呆模型。采用细胞形态学方法、噻唑蓝比色法(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)检测法、微量丙二醛(MDA)检测法、过氧化氢(H_2O_2)含量检测法、一氧化氮(NO)含量检测法、蛋白印迹法检测糖原合成酶激酶-3(GSK-3β)、磷酸化Tau蛋白(ph-Tau)水平。结果 Aβ_(25-35)损伤组与对照组比较MTT代谢率下降,LDH释放量增多,MDA含量增高,H_2O_2含量增高,NO含量增高,GSK-3β、ph-Tau水平增高,硒、锌和硒锌联合处理组均不同程度地减少Aβ_(25-35)的细胞毒性,硒保护作用差异显著。结论微量元素硒、锌对Aβ_(25-35)处理胚鼠神经元细胞损伤和毒性具有一定的保护作用,硒比锌的保护效果好。     

西红花酸对Aβ25-35诱导海马神经元损伤的神经保护作用

目的 探讨西红花酸对Aβ25-35诱导的SD大鼠海马神经元损伤的神经保护作用.方法 常规培养SD大鼠海马神经元,分为对照组、0.1μM西红花酸组、10μmol/L Aβ25-35组、0.01 μM西红花酸+10μmol/L Aβ25-35组、0.1μM西红花酸+10μmol/L Aβ25-35组、1μM西红花酸+10μmol/L Aβ25-35组;MTT检测细胞活力变化情况;荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平变化情况.结果 10μmol/L Aβ25-35显著降低细胞的活性和升高海马神经元ROS水平(P＜0.01);不同浓度西红花酸(0.01、0.1和1μM)预处理后,细胞活性分别比0A25-35组提高了39.2％、56.1％和76.4％,差异有显著性意义(P＜0.05),培养10天和25天海马神经元的ROS水平与Aβ25-35组比较均显著降低(P ＜0.01).结论 西红花酸对Aβ25-35诱导海马神经元的损伤具有保护作用,能显著降低Aβ25-35引起的海马神经元ROS水平的升高.     

益智聪明汤对Aβ_(25-35)致阿尔茨海默病小鼠模型Tau蛋白影响

目的探讨益智聪明汤对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)致阿尔茨海默病模型(AD)小鼠Tau蛋白磷酸化位点的影响。方法 60只昆明种小鼠,随机分为假手术组,模型组,益智聪明汤低、中、高剂量组及多奈哌齐组,小鼠脑海马内注射Aβ25-35制作小鼠AD模型,小鼠按相应剂量灌胃给药,连续15 d,1次/d;末次给药后,Western blot测定小鼠脑海马tau蛋白磷酸化位点的表达,苏木素-伊红染色检测小鼠脑海马神经元形态学变化。结果与假手术组比较,模型组小鼠脑海马tau蛋白磷酸化位点Ser 404、Thr 231、Thr 181、Ser 396蛋白表达水平[分别为(1.800±0.172)、(2.321±0.140)、(2.109±0.145)、(2.761±0.250)]均增加(P均0.05);与模型组比较,高剂量(26.0 g/kg)益智聪明汤组小鼠海马Ser 404、Thr 231、Thr 181、Ser 396蛋白表达水平[分别为(1.006±0.158)、(1.384±0.122)、(1.164±0.125)、(0.978±0.122)]均降低(均P0.05);益智聪明汤可改善小鼠海马区神经元细胞排列紊乱、水肿等现象,并减少神经元死亡。结论益智聪明汤可通过降低AD模型小鼠tau蛋白磷酸化水平,减少神经元的损伤。     

黄芪提取物对Aβ_(25-35)诱导的海马神经细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨黄芪提取物(EA)对Aβ_(25-35)所致海马神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法分离孕18 d的胎鼠的海马神经细胞进行体外培养,实验分为3组:对照组、模型组和黄芪组。对照组:只加入无B27神经生长因子的神经基础培养基(NB)原液培养24 h;模型组:加入无B27神经生长因子的NB原液,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养24 h;黄芪组:加入无B27神经生长因子的NB原液,先加入终浓度为黄芪提取物20 mg/L培养4 h,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养20 h。在倒置显微镜下观察各组海马神经细胞形态学变化;采用乳酸脱氢酶(LDH)法和3-(4,5-甲基噻唑-2)-2,5-苯基的氮唑溴盐(MTT)法检测细胞活性;Western blot检测各组海马神经细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果模型组的海马神经细胞活性明显下降,细胞出现凋亡的典型的形态学特征,Bcl-2蛋白的表达水平下降而Bax蛋白的表达水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。黄芪组海马神经细胞活性提高、凋亡的细胞数减少,Bcl-2蛋白的表达水平升高而Bax蛋白的表达水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪提取物对Aβ_(25-35)所诱导的海马神经元损伤具有一定的保护作用,可能与其降低海马神经细胞Bcl-2蛋白的表达水平升高Bax蛋白的表达水平有关。     

雌激素对Aβ25-35致PC12细胞膜流动性改变的影响(英文)

目的观察可溶性Aβ25—35作用下PC12细胞膜流动性的改变及17βE_2对此改变的影响。方法培养的PC12细胞分为空白对照组,Aβ损伤组及雌激素干预组,根据浓度梯度雌激素干预组再分为五个剂量亚组,采用荧光偏振法动态检测不同组PC12细胞不同时间膜流动性的改变。结果Aβ损伤组在加入5μM可溶性Aβ25-35后各时间点,与空白对照组相比,其微粘度η值均明显升高(P<0.01);17βE_2干预组在10~(-10)M浓度下各时间点其η值与Aβ损伤组比较均没有显著性差异(P>0.05);而在10~(-9)-10~(-6)M浓度下各时间点η值与Aβ损伤组比较均显著降低(P<0.01或P<0.05),且这种作用具有剂量依赖性,17βE2 10~(-9)、10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)M干预组与Aβ损伤组相比,在24h时PC12细胞微粘度η分别降低了36.4%、49.6%、60%、68.4%。结论5μM可溶性Aβ25—35使PC12细胞微粘度明显升高,膜流动性明显下降;雌激素具有改善膜流动性的神经元保护作用,且这种作用具有剂量依赖性。     

金属对SH-SY5Y细胞氧化应激及A蛋白沉积影响

目的 探讨铜、铁、锌、铝金属对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的氧化应激及β淀粉样蛋白（Aβ）沉积影响,为预防老年性痴呆提供依据。方法 采用不同剂量的铜、铁、锌、铝分别作用于SH-SY5Y细胞,通过噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长活性,黄嘌呤氧化酶法检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力,硫代巴比妥酸法检测脂质过氧化产物丙二醛含量,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）探针法检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶联免疫（ELISA）试剂盒法测定细胞内Aβ_1-42蛋白含量。结果 铜、铁、锌、铝呈剂量依赖性地抑制细胞活性,50、200、400 μmol/L CuSO₄组SH-SY5Y细胞存活率分别为90.47%、74.81%、64.97%,1、2、4 mmol/L FeSO₄、AlCl₃组SH-SY5Y细胞存活率分别为93.08%、78.28%、56.10%和92.21%、85.30%、62.72%,50、100、200 μmol/L ZnSO₄组SH-SY5Y细胞存活率分别为91.76%、76.51%、61.27%;与对照组比较,各剂量金属组SH-SY5Y细胞存活率均明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,各剂量铜、铁、锌、铝组SH-SY5Y细胞抗氧化酶SOD、GSH-Px活性明显下降,ROS水平和丙二醛、Aβ_1-42含量明显增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 铜、铁、锌、铝可致神经细胞毒性作用和Aβ蛋白沉积,其机制可能与金属诱导细胞内ROS产生并导致氧化损伤有关。     

黑米花色苷对血管内皮细胞过氧化损伤的保护作用

目的:探讨黑米花色苷对ox-LDL引起的血管内皮细胞损伤的保护作用。方法:分别在4种黑米花色苷预孵保护作用下用ox-LDL过氧化处理EVC304细胞株,通过加载GIF滤光片的倒置显微镜观察细胞形态;通过MTT实验,荧光分光光度法和2’,7’-二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)荧光探针分别检测细胞活力及体内丙二醛和自由基变化;用流式细胞仪分析细胞周期。结果:四种黑米花色苷能明显减轻ox-LDL对内皮细胞形态的损伤,降低ox-LDL对细胞增殖的抑制作用,显著减少细胞内丙二醛增加量;其中,矢车菊素-3-葡萄糖苷还能显著降低ox-LDL所致自由基的生成量,促进细胞由G1期进入S期,促进细胞增殖,减少细胞凋亡。结论:黑米花色苷对ox-LDL引起的血管内皮细胞过氧化损伤有明显保护作用。     

β淀粉样肽31-35和25-35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用

目的 比较β淀粉样肽(AB)25-35和31-35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用及其途径的差异,以进一步证明Aβ31-35是诱发神经细胞毒作用的有效较短片段.方法 将新生Wistar大鼠大脑皮质神经细胞分离、培养48 h后,按照完全随机设计的方法分对照组、Aβ25-35(25 μmol/L)和Aβ31-35(25 μmol/L)处理组,24 h后收集细胞.通过四甲基偶氮唑蓝比色法测定细胞的活性、激光扫描共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化、单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤情况、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测神经细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax和p53)mRNA的表达.每个实验重复3次.结果 与对照组[吸光度值(A值)为1.038±0.125,荧光强度差值为4.280±0.358]相比,Aβ25_35和Aβ31-35处理组细胞的A值(分别为0.746±0.071和0.811±0.083)和荧光强度差值(分别为3.050±0.240和2.806±0.203)均显著降低(t_A值分别为4.023、5.401,t_(荧光强度差值)分别为9.524,7.589,P值均<0.01);Aβ25-35和Aβ31-35处理组彗星细胞的拖尾率分别为59.0%及48.5%,尾长分别为(57.3±4.7)μm及(54.2±6.8)μm,与对照组[拖尾率为4.5%,尾长为(5.2±1.1)μm]相比均显著增加,差异有统计学意义(χ_(拖尾率)~2值分别为99.397和137.071,t_(尾长)值分别为19.058和29.173,P值均<0.01);Aβ25-35和Aβ31-35处理组Bax/Bcl-2分别为1.2774±0.0762和1.0330±0.0683,显著高于对照组(0.2090±0.0991)(t值分别为2.429和2.356,P值均<0.05);p53/β-actin分别为2.0284±0.2223和1.9505±0.2725,高于对照组(1.6560±0.0853)(t值分别为2.366和2.503,P值均<0.05).结论 Aβ31-35同Aβ25-35一样均可引起新生大鼠大脑皮质神经细胞的损伤,其作用机制可能与AB的直接细胞毒性及其介导的细胞凋亡作用有关.     

蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏损伤保护作用

目的 观察蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏毒性的保护作用,并探讨其作用机制。方法 雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、环磷酰胺组和蓝莓花色苷20、80 mg/kg组,连续灌胃14 d后,处死动物,其中第8天环磷酰胺组及蓝莓花色苷组大鼠腹腔注射环磷酰胺 100 mg/kg;观察心肌组织病理学改变,采用自动生化分析仪测定大鼠血清酶学指标,采用试剂盒法检测心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot检测心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果 环磷酰胺组大鼠心脏出现心肌细胞肥大、变性坏死、凋亡及炎性细胞浸润等病理变化,而蓝莓花色苷组大鼠心脏病理变化不同程度减轻;与对照组比较,环磷酰胺组大鼠心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、肌酸激酶活性[分别为(314.7±9.2)、(772.5±18.3)、(501.5±13.6)U/L]明显升高,心肌组织SOD活性[(21.2±1.4)U/mg prot]下降,MDA含量[(171.2±12.4)μg/gprot]升高;与环磷酰胺组比较,蓝莓花色苷80 mg/kg组大鼠心肌细胞LDH、AST、肌酸激酶活性[分别为(127.7±7.4)、(411.5±10.3)、(268.6±8.4)U/L]明显下降,心肌组织SOD活性[(26.9±1.3) U/mg prot]升高,MDA含量[(144.9±12.8)μg/g prot]下降。结论 蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏毒性具有一定保护作用,作用机制可能与抗氧化有关。     

锰化合物对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y脂质过氧化的作用

[目的 ]通过锰染毒神经母细胞瘤细胞 (SH SY5Y) ,观察脂质过氧化及其相关酶水平的改变 ,探讨锰对SH SY5Y的脂质过氧化及相关酶活性的影响 ,为进一步研究锰神经毒作用的机制提供科学依据。 [方法 ]采用浓度为 0 .2 5、0 .5 0、0 .75mmol/L的二价锰和三价锰 ,分别对体外培养的SH -SY5Y细胞染毒 2 4h ,测定超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽 (GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)和过氧化氢酶 (CAT)的活性。 [结果 ]二价锰和三价锰均可引起SOD、MDA、GSH、GSH Px和CAT活性的改变 ,其中SOD、GSH、GSH Px和CAT活性与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,且存在剂量 效应关系。而MDA含量则较对照组升高 (P <0 .0 1) ,且随染毒浓度增高而上升。 [结论 ]一定浓度的锰化合物可使SH SY5Y细胞脂质过氧化反应增强 ,引起相关酶活性的改变。提示这种变化很可能是锰对神经细胞发挥毒作用的重要途径之一。     

不同价态锰对SH-SY5Y细胞凋亡作用的影响

[目的] 探讨不同价态锰对SH-SY5Y细胞凋亡的作用.[方法] 采用流式细胞技术和透射电镜技术,选用多巴胺能神经细胞SH-SY5Y细胞作为体外测试体系,观察Mn2+和Mn3+(0.5～2 mmol/L)对细胞凋亡的诱导作用及对多巴胺(DA)含量的影响.[结果] Mn2+与细胞作用48和72 h后,可见明显的凋亡峰;而Mn3+作用24 h后,便可出现明显的凋亡峰.电镜下可观察到细胞质空泡化,胞浆内质网扩张;Mn3+对细胞结构的破坏程度较Mn2+的大.Mn3+,Mn2+均可降低SH-SY5Y细胞的DA含量,Mn3+组降低的程度更为明显.[结论] Mn3+对SH-SY5Y细胞的毒性高于Mn2+.     

miR-138-5p在锰致SH-SY5Y细胞自噬中的作用

[目的]探讨miR-138-5p在氯化锰(MnCl_2)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬中的作用及其机制。[方法]以生理盐水处理组作为对照,0.125、0.25、0.5、1 mmol/L MnCl_2染毒SH-SY5Y细胞6 h后,利用MTT法检测细胞活力;0.25和0.5 mmol/L MnCl_2处理细胞6 h后,采用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达;MnCl_2染毒6 h后,使用反转录PCR和Western blot检测miR-138-5p和组蛋白脱乙酰酶SIRT1 mRNA以及蛋白表达的变化;使用miRNA模拟物转染细胞实现miR-138-5p过表达,然后0.25 mmol/L MnCl_2染毒6 h,检测SIRT1 mRNA和蛋白的表达以及自噬相关蛋白LC3和Beclin1的变化。[结果]MnCl_2可剂量依赖性地降低SH-SY5Y细胞活力(趋势χ~2=12.42,P0.05)。与对照组相比,0.25、0.5 mmol/L MnCl_2染毒后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值和Beclin1表达水平明显增加(P0.05);miR-138-5p表达下调,SIRT1 mRNA及蛋白表达上调(均P0.05)。miR-138-5p过表达后,相比未过表达的MnCl_2染毒组,SIRT1 mRNA及蛋白表达均出现下调,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值及Beclin1蛋白表达也相应下调(P0.05)。[结论]miR-138-5p过表达可通过调节SIRT1的表达抑制锰诱导的SH-SY5Y细胞自噬。     

矢车菊-3-O-葡萄糖苷对β淀粉样蛋白25-35致海马神经细胞损伤的干预研究

目的探讨矢车菊-3-O-葡萄糖苷(Cy-3G)的神经保护作用。方法原代培养乳鼠海马神经细胞,免疫荧光法检测细胞纯度。5μmol/Lβ淀粉样蛋白(Aβ)25-35处理细胞3 h,Cy-3G不同方式干预后,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞上清液中LDH漏出率,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,罗丹明123试剂盒检测细胞线粒体膜电位。结果与对照组比,5μmol/L Aβ25-35组细胞存活率显著降低(P0.05),而40μmol/L Cy-3G共孵育3 h可有效提高细胞存活率,还可显著降低细胞上清液中LDH漏出率、升高细胞线粒体膜电位、降低细胞ROS水平(P0.05)。结论 40μmol/L Cy-3G共孵育3 h对Aβ25-35损伤的原代海马神经细胞有保护作用。     

鱼藤酮对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响

[目的]探讨环境毒素鱼藤酮对人多巴胺能神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞线粒体膜电位的影响以及线粒体ATP敏感性钾通道(MitochondrialATP-sensitivepotassiumchannel,mKATPchannel)在其中的作用。[方法]先用0、5、20、100nmol/L浓度的鱼藤酮单独处理SH-SY5Y细胞,观察鱼藤酮与线粒体膜电位下降的量效关系;然后在此4组中分别按加和不加mKATP通道抑制剂5-羟葵酸(5-Hydroxydecanoate,5-HD)0.5mmol/L和(或)激活剂二氮嗪(Diazoxide,DZX)1.0mmol/L与不同浓度鱼藤酮共同作用,观察细胞线粒体膜电位的变化。细胞线粒体膜电位的检测采用罗丹明绿色荧光负载、流式细胞仪测量荧光强度的方法。[结果]5、20和100nmol/L鱼藤酮作用24h分别导致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降至对照组的91.76%、71.21%和49.65%,膜电位下降程度与鱼藤酮剂量相关;DZX单独作用使线粒体膜电位下降了13.45%,DZX与5和20nmol/L鱼藤酮共同作用分别下降至对照组的75.32%和66.06%,比同浓度鱼藤酮单独作用更加明显;5-HD可抵消DZX的上述作用,5-HD与5nmol/L鱼藤酮共同作用时可减轻鱼藤酮引起的细胞膜电位下降。[结论]鱼藤酮可以引起SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降;小剂量鱼藤酮(5和20nmol/L)能开放mKATP通道,该作用可被5-HD逆转;与DZX相比,小剂量鱼藤酮只能激活某一类型的mKATP通道,这是它导致线粒体膜电位下降的机制之一。大剂量鱼藤酮降低线粒体膜电位的机制中mKATP通道的作用较小。     

维吾尔族正常眼压性青光眼患者房水中Aβ(1-40)及Aβ_(1-42)含量研究的意义

目的分析维吾尔族正常眼压性青光眼患者房水中β淀粉样蛋白(Aβ)1-40及Aβ1-42与同族白内障对照组及汉族正常眼压性青光眼对照组含量上有无差异,从而对正常眼压性青光眼的发病机制进行探讨。方法维吾尔族正常眼压性青光眼患者37例,维吾尔族白内障对照组患者40例,汉族正常眼压性青光眼对照组患者40例。3组年龄、性别差异无统计学意义。采用放射免疫分析法(R IA)分别测量房水中Aβ1-40和Aβ1-42的含量。结果维吾尔族正常眼压性青光眼组房水中Aβ1-40和Aβ1-42含量分别为(3.044±1.326)pg.m l-1和(3.302±1.087)pg.m l-1,维吾尔族白内障对照组含量为(5.214±2.355)pg.m l-1和(2.541±1.129)pg.m l-1。汉族正常眼压性青光眼对照组含量为(2.975±1.168)pg.m l-1和(3.136±1.452)pg.m l-1。维吾尔族2组Aβ1-40和Aβ1-42差异均有统计学意义(P<0.05),维汉2组正常眼压性青光眼的Aβ1-40和Aβ1-42差异均无统计学意义(P>0.05)。结论维吾尔族正常眼压性青光眼患者房水中Aβ1-40和Aβ1-42含量高于同族白内障对照组,但维汉两组正常眼压性青光眼患者房水中Aβ1-40和Aβ1-42含量在种族因素上无明显差异,提示神经变性性疾病可能在正常眼压性青光眼发病机制中起着一定的作用。     

大气细颗粒物对SH-SY5Y细胞能量代谢的影响

[目的]研究大气细颗粒物(PM_(2.5))对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞能量代谢的影响。[方法]用不同质量浓度(下称浓度)PM2.50、20、40、80、160、320mg/L)染毒SH-SY5Y细胞24h,MTT法检测细胞存活率,丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA的含量,XFp细胞能量代谢分析仪检测细胞线粒体呼吸功能及糖酵解功能。[结果]PM_(2.5)各浓度组SH-SY5Y细胞存活率均低于对照组(均P0.05);80、160、320mg/LPM_(2.5)组细胞内MDA含量高于对照组(均P0.05)。PM_(2.5)各浓度组细胞基础耗氧率、ATP偶联的有氧呼吸速率低于对照组(P0.05),分别下降了13.8%、19.7%、25.1%、35.8%、45.2%和17.0%、21.9%、28.3%、39.2%、47.9%;40、80、160、320mg/LPM_(2.5)组细胞有氧呼吸最大值较对照组下降了19.0%、24.2%、28.5%、40.7%(均P0.05)。80、160、320mg/LPM_(2.5)组细胞糖酵解水平和糖酵解最大值低于对照组(均P0.05),分别下降了15.9%、22.1%、26.1%和16.5%、19.6%、21.5%。SH-SY5Y细胞基础耗氧率、ATP偶联的有氧呼吸速率、质子漏耗氧速率、有氧呼吸最大值、糖酵解水平及糖酵解最大值与细胞存活率呈正相关(r在0.65~0.86之间,P0.01),与MDA值呈负相关(r为-0.53~-0.86,P0.05或P0.01)。[结论]PM_(2.5)可引起SH-SY5Y细胞的氧化损伤,降低细胞线粒体呼吸功能及糖酵解功能。     

花色苷对体外培养大鼠心肌细胞损伤的拮抗效应

目的观察花色苷对心肌细胞损伤的拮抗效应。方法设置3个实验组,即正常对照组,药物损伤组,花色苷组。选取出生1～3d的SD大鼠30只,将培养48h的心肌细胞制备成24瓶进行实验,随机分成3组。正常对照组不加任何药物,药物损伤组加入阿霉素ADM5mg／ml一共培养,花色苷组加入阿霉素60rain后加入10mg／L的花色苷。心肌细胞传代培养,测定各相关生化指标。结果与正常对照组比较,药物损伤组心肌肌钙蛋白T（cTnT）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶（CK—MB）明显增高,药物损伤组总超氧化歧化酶（SOD）、CuZn一超氧化歧化酶（CuZn．SOD）和Mn一超氧化歧化酶（Mn—sot））水平均明显下降（P〈0．叭）;药物损伤组丙二醛（MDA）和NO含量明显增高（P〈0．01）;而花色苷组上述指标均有改善（P〈0．01）,与正常对照组比较无统计学意义。结论花色苷对阿霉素造成的心肌损伤具有保护作用。     

氯化甲基汞蓄积对成年大鼠脑组织中Aβ_(1-42)的影响

目的探讨不同剂量氯化甲基汞蓄积时长差异对成年大鼠记忆力及脑组织中Aβ1-42的影响。方法通过灌胃给予大鼠不同剂量的氯化甲基汞,采用水迷宫观察大鼠记忆力变化,采用免疫组织化学方法观察不同时间点各组大鼠脑组织中Aβ1-42的变化。结果氯化甲基汞明显增加学习及记忆潜伏期,并增加了脑组织内β淀粉样蛋白沉积,大剂量组与其他各组比较,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01),且与汞蓄积量明显相关。结论氯化甲基汞促进Aβ1-42在脑组织中沉积是引起认知损害的机制之一。     

莱菔硫烷对Aβ处理的SH-SY5Y细胞活力、组蛋白乙酰化水平及TrkA表达的影响

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)处理的神经细胞的保护作用及其机制,为阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的防治提供理论依据。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),采用MTT法检测SFN(终浓度为2μmol/L)对Aβ染毒(终浓度分别为10、20、40、80μmol/L)的SH-SY5Y细胞活力的影响,并以Real time PCR、Western blot法分析SFN预处理后的Aβ染毒(终浓度为20μmol/L)细胞TrkA mRNA及其蛋白表达以及组蛋白乙酰化水平(Ace-H3K9、Ace-H4K12)的时相分布变化。结果细胞活力随着Aβ染毒剂量的增加而逐渐降低,其中40、80μmol/L Aβ染毒的细胞活力与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01或P0.001);SFN预处理后的各组细胞活力未见统计学差异(P0.05)。与对照组比较,Aβ处理后12、24 h时,细胞TrkA mRNA水平降低,24 h时TrkA蛋白表达水平降低,6、12、24 h时Ace-H3K9、Ace-H4K12水平降低,差异均有统计学意义(P0.01);与Aβ染毒细胞比较,SFN预处理后的Aβ染毒细胞12、24 h时TrkA mRNA水平升高,24 h时TrkA蛋白表达水平升高,12、24 h时Ace-H3K9以及6、12、24 h时Ace-H4K12水平升高,差异均有统计学意义(P0.001)。结论 Aβ可使细胞活力下降、TrkA mRNA及其蛋白表达水平降低以及Ace-H3K9、Ace-H4K12水平的升高,SFN对Aβ诱导的上述改变均具有抑制作用。