心痛宁对大鼠缺血心肌细胞游离钙浓度的影响

目的 :研究心痛宁煎剂对大鼠缺血心肌细胞游离钙离子浓度的影响。方法 :肾上腺素皮下注射加冰水刺激造成大鼠急性心肌缺血 (寒凝血瘀证 )模型 ,以 Fura- 2 / AM为荧光探针 ,检测大鼠心肌细胞游离钙离子浓度。结果 :心痛宁能拮抗大鼠缺血心肌细胞游离钙离子浓度的升高。结论 :心痛宁的钙拮抗样作用是其防治不稳定性心绞痛的部分机制     

心痛泰干预心肌缺血大鼠心肌中Notch1、Dll4蛋白表达的研究

目的:通过构建急性心肌缺血模型,探讨心痛泰对急性心肌缺血大鼠新生血管密度、缺血心肌中Notch1、Dll4蛋白表达的影响。方法:100只SD大鼠,除假手术组10只外,其余大鼠予以结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血损伤模型,成模大鼠随机分为模型组,心痛泰低、中、高剂量组及麝香保心丸组。分别给以蒸馏水,心痛泰低、中、高剂量及麝香保心丸进行灌胃2周后,采用免疫组化法测新生微血管密度及缺血区心肌组织Notch1、Dll4蛋白的表达情况。结果:模型组大鼠的缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、Dll4蛋白表达均高于假手术组(P0.05);心痛泰各剂量组及麝香保心丸组大鼠缺血心肌微血管密度、缺血心肌中的Notch1、Dll4蛋白表达均高于模型组(P0.05)。结论:心痛泰具有保护缺血心肌的作用,这可能与其能激活Notch信号通路,上调Notch1、Dll4蛋白在缺血区的表达,促进血管新生有关。     

心痛方对心肌缺血大鼠黏附分子表达的干预作用

目的:探讨心痛方对心肌缺血大鼠心肌梗死面积的影响及黏附分子ICAM-1、VCAM-1表达的干预作用。方法:80只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、心痛方组、欣康对照组,采用结扎法制备心肌缺血模型,NBT染色法测定心肌梗死面积,免疫组化法检测黏附分子在缺血心肌的表达。结果:心痛方和欣康均能缩小心肌梗死面积,心痛方呈现出优于欣康的趋势。与假手术组相比,心痛方组、欣康组、模型组缺血心肌ICAM-1、VCAM-1表达的AOD均明显增高(P<0.01);与模型组相比,心痛方组、欣康组ICAM-1、VCAM-1表达的AOD均明显降低(P<0.01);心痛方与欣康在抑制ICAM-1表达方面作用相近,在抑制VCAM-1表达上较欣康略显优势。结论:心痛方能缩小大鼠心肌梗死面积,抑制缺血心肌ICAM-1、VCAM-1的表达。     

蓝萼香茶菜对大鼠全心缺血-再灌注时心肌c-fos基因表达的影响

目的 :研究蓝萼香茶菜对大鼠全心缺血 再灌注时心肌c fos基因表达的影响。方法 :采用Langen dorff离体全心缺血 再灌注损伤模型 ,Wistar大鼠 40只 ,随机分为 5组 ,每组 8只。N组为单纯K H液灌注对照组 ;CN组为缺血 再灌注对照组 ,(高XH ,中XM ,低XL浓度 )蓝萼香茶菜灌注 3组 (浓度分别为 5 % ,1 % ,0 .2 % )。采用免疫组化SP法 ,用相应的c fos抗体检测心肌细胞中c fos基因表达情况。用计算机图像分析系统分析c fos基因表达情况。结果 :与N组相比 ,CN ,XH ,XM ,XL组c fos基因表达水平明显提高 (P <0 .0 1 )。与CN组相比XH ,XM ,XL组c fos基因表达水平明显降低 (P <0 .0 5)。XM ,XL组较XH组c fos基因表达水平明显降低 (P <0 .0 1 )、XM较XL组相比c fos基因表达下降 (P <0 .0 5)。结论 :蓝萼香茶菜能显著抑制心肌c fos基因的表达 ,它保护缺血 再灌注心肌损伤可能部分与其抑制、下调c fos基因的蛋白表达有关。蓝萼香茶菜具有与剂量相关的心肌保护作用 ,但并非浓度越大越有效。     

心痛泰对急性心肌缺血大鼠血管新生及血管内皮活性物质影响的研究

目的:探讨心痛泰对急性心肌缺血大鼠新生微血管密度及血管内皮活性物质的影响。方法:将SD大鼠随机分成假手术组,模型组,心痛泰低、中、高剂量组,麝香保心丸组。除假手术组外,其余组大鼠均予以结扎冠状动脉左前降支制备成急性心肌缺血损伤模型,成模后分别给予蒸馏水,心痛泰低、中、高剂量药液及麝香保心丸进行灌胃治疗2周。HE染色光镜观察心肌形态结构改变;ELISA试剂盒检测血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、内皮素1(ET-1)含量;免疫组化法测定新生微血管密度。结果:与假手术组相比,模型组血清中NO、NOS表达减少(P0.01),ET-1表达增加(P0.01),缺血心肌微血管密度表达增加(P0.05);与模型组相比,各用药组均可升高血清中NO、NOS含量(P0.01),降低ET-1含量(P0.01),促进缺血区微血管密度的表达(P0.05)。结论:心痛泰具有保护缺血心肌之效,这可能与其提高血清中NO、NOS含量、减少ET-1的含量、促进缺血区新生血管生成相关。     

牛磺酸对舒张性心力衰竭大鼠心肌细胞 钙超载的拮抗作用

目的:观察牛磺酸(Tau)对舒张性心力衰竭(DHF)大鼠心肌细胞内钙离子浓度[Ca~(2+)]_i和心肌细胞膜上ATP酶活性的影响.方法:采用腹主动脉缩窄法建立DHF模型,术后4周随机分为模型组,Tau高、中、低剂量组(400,200,100mg·kg~(-1)·d~(-1))4组(n=10),另有假手术组10只.连续给药4周,酶解法分离DHF大鼠心肌细胞,以Fluo-3AM荧光指示剂负载,应用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)技术检测心肌细胞内[Ca~(2+)]_i变化,[Ca~(2+)]_i用荧光强度(FI)表示;通过ATP酶试剂盒,采用酶促反应定磷比色法测定心肌细胞膜上ATP酶活性.结果:与假手术组相比,模型组大鼠心肌细胞内Ca~(2+)浓度明显上升,心肌细胞膜上ATP酶活性明显下降.与模型组比较,Tau高剂量组显著降低心肌细胞内荧光值,明显升高ATP酶活性;Tau中剂量组明显降低心肌细胞内荧光值和ATP酶活性;Tau低剂量组明显升高心肌细胞内荧光值,显著降低ATP酶活性.结论:大剂量的Tau可以明显提高DHF大鼠心肌细胞膜ATP酶活性,改善DHF大鼠心肌细胞内[Ca~(2+)]_i拮抗钙超载.     

电针对不同时间段局灶性脑缺血大鼠缺血区皮层突触素P38和GAP-43表达的影响

目的 :探讨针刺对缺血性脑损伤保护作用的生化机制。方法 :采用热凝闭大鼠大脑中动脉致局灶性脑缺血模型 ,研究缺血 2周和 5周后缺血区皮层突触素P3 8和GAP 43的变化规律和针刺对其影响。结果 :脑缺血 2周及 5周组大鼠脑缺血区P3 8表达比假手术组显著下降 (P <0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组与缺血 2周组相比突触素P3 8表达并无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组与缺血 +电针 2周组和脑缺血 5周组相比 ,突触素P3 8表达明显增加 (P <0 .0 5) ;但仍明显低于假手术 5周组 (P <0 .0 5)。缺血 2周组大鼠在缺血区周围GAP 43表达与假手术组相比增加明显 (P <0 .0 5) ,而缺血 5周组与假手术组相比无显著性差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 2周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术组相比显著增加 (P <0 .0 5) ,而与缺血 2周组相比无差异 (P >0 .0 5) ;缺血 +电针 5周组大鼠脑片GAP 43表达与假手术 5周组相比有显著性差异 (P <0 .0 5)。结论 :针刺可以通过提高突触素和GAP 43在缺血中心区周围皮层的表达 ,保护缺血性脑损伤 ,并可能与大脑可塑性的形成有一定的关系     

紫苏叶油对结肠平滑肌细胞钙离子和膜电位的作用

目的 观察紫苏叶油对肢体缺血再灌注模型大鼠结肠平滑肌细胞游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i)和细胞膜电位的影响,并探讨其作用机制。方法 建立肢体缺血再灌注大鼠模型,酶解法分离结肠平滑肌细胞,分别用荧光探针Fluo-3AM和DiBAC4(3)负载细胞,应用激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内钙离子荧光强度(FI)和膜电位变化;定磷法检测结肠平滑肌细胞Ca~(2+)-ATPase变化;荧光偏振法检测细胞膜流动性。结果 模型组大鼠结肠平滑肌细胞[Ca~(2+)]_i显著下降,Ca~(2+)-ATPase活性升高,细胞膜流动性下降。紫苏叶油可动态调节模型大鼠结肠平滑肌细胞[Ca~(2+)]_i和膜电位;紫苏叶油可使结肠平滑肌细胞Ca~(2+)-ATPase活性明显下降,细胞膜流动性显著增加。结论 紫苏叶油通过调节细胞[Ca~(2+)]_i及膜电位,参与结肠平滑肌细胞收缩活动。其作用机制可能与抑制细胞内钙泵活性和增加细胞膜流动性相关。     

大鼠缺血再灌注心肌间质胶原含量和形态学变化的定量研究

目的　研究大鼠心肌缺血再灌注后心肌间质胶原含量及形态学的变化。方法　将Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )和缺血再灌组 ,后者按缺血时间 (15 ,30 ,6 0min)又分为B ,C ,D 3组。观察各组大鼠心肌羟脯氨酸含量变化 ,心肌间质胶原线密度、光密度、体密度及面积。结果　C组和D组心肌羟脯氨酸含量及间质光密度和胶原线密度均低于A组 (P <0 .0 1) ,间质体密度高于A组 (P <0 .0 1)。B组与A组比较无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,且心肌间质形态正常。结论　心肌缺血再灌可导致心肌间质损伤 ,缺血 15min内再灌注造成的心肌间质损害较轻。     

丹芪心血宁抗心肌缺血的药效学初步研究

目的:观察丹芪心血宁胶囊対大鼠的抗心肌缺血作用及对自由基损伤的影响。方法:対大鼠结扎左冠状动脉前降支引起的缺血再灌注性心肌损伤试验,观察丹芪心血宁胶囊对大鼠血清心肌酶、血浆自由基损伤等指标的影响。结果:丹芪心血宁胶囊中剂量组(0.74g/kg)、低剂量组(0.37g/kg)组能够明显降低血清心肌酶CK、LDH及AST的活性,二者与模型组比较均有显著性差异(P0.01);丹芪心血宁胶囊中剂量组(0.74g/kg)、低剂量组(0.37g/kg)组能降低MDA含量,提高SOD和GSH-Px的活性,与模型组比较均有显著性差异(P0.05)。结论:丹芪心血宁胶囊抗心肌缺血的作用初步表明通过影响心肌酶及抗自由基来实现的。     

红花注射液对大鼠局灶性脑缺血后细胞凋亡的影响

目的 :探讨红花注射液对急性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法 :将SD大鼠分为缺血对照组、红花大剂量组、红花中剂量组、红花小剂量组 ,采用大鼠大脑中动脉栓塞模型和流式细胞术 ,观察再灌注 2 2h后脑缺血症状及脑细胞凋亡率。结果 :各给药组大鼠神经功能评分低于缺血对照组 ,有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;给药组大鼠脑细胞凋亡率低于缺血对照组 ,亦有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论 :红花注射液可抑制脑缺血再灌注损伤后的细胞凋亡。     

保心降压康对压力负荷增加大鼠心肌间质胶原的影响

目的 :探讨压力负荷增加大鼠心肌胶原网络的重塑及保心降压康对压力负荷增加大鼠心肌间质胶原影响。方法 :腹主动脉部分结扎建立压力负荷增加大鼠心肌肥厚模型 ,观察左室质量指数(LVMI) ,采用免疫组织化学染色方法观察心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变及其保心降压康的治疗作用。结果 :模型组大鼠LVMI明显高于假手术组 (P <0 0 1) ,保心降压康组大鼠较模型组明显下降 (P <0 0 1) ;模型组Ⅰ型胶原较假手术组明显升高 (P <0 0 1) ,保心降压康组较模型组显著降低 (P <0 0 5 ) ;模型组Ⅲ型胶原较假手术组明显升高 (P <0 0 1) ,保心降压康较模型组显著降低 (P <0 0 1)。结论 :压力负荷增加大鼠心肌肥厚时伴有心肌胶原网络重构 ,保心降压康可逆转压力负荷增加大鼠心肌间质胶原重塑 ,从而逆制其心肌纤维化。     

电针远近部位穴位对暂时性脑缺血大鼠脑组织、血清一氧化氮含量影响的比较研究

目的 :比较不同部位穴位对实验性脑缺血疗效的影响。方法 :采用大鼠大脑中动脉暂时性缺血模型 ,比较电针头部的“百会”、“水沟”穴和远离头部的“环跳”、“昆仑”穴 ,对脑组织、血清NO含量的影响。结果 :缺血模型组与假缺血组比脑组织、血清NO含量显著增加 (P <0 .0 5) ;与缺血模型组比较 ,头部穴位组明显降低 (P <0 .0 1 ) ,肢体部穴位组降低无显著性意义 (P >0 .0 5) ;两穴位组之间比较 ,脑组织NO含量无显著性差异 ,血清NO含量有显著性差异 (P <0 .0 1 )。结论 :尚不能认为远近部位穴位的作用有差别     

红景天苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨红景天苷对大鼠心肌缺血 -再灌注损伤的保护作用。方法 :结扎大鼠冠状动脉左前降支血管 ,3 0min后松开结扎线再灌注 60min ,制备缺血再灌注损伤模型。实验分为四组 :假手术组、缺血再灌注组、红景天苷治疗组和丹参治疗组。观察各组大鼠缺血再灌部位的心肌组织匀浆及血清中SOD、NO、MDA及LDH含量的变化。结果 :①红景天苷治疗组再灌注心肌组织中NO、MDA的含量比缺血再灌注组明显降低 (P <0 . 0 1) ,与丹参治疗组和假手术组接近 ;②红景天苷治疗组SOD的活力明显高于缺血再灌注组 ,P <0 . 0 1;③红景天苷治疗组心肌组织中LDH的活性明显高于缺血再灌注组 (P <0 . 0 1) ,血清中LDH的活性与心肌组织中的变化呈负相关。结论 :红景天苷对大鼠心肌缺血 -再灌注损伤有一定的保护作用 ,其机制可能是通过提高机体的抗氧化应激反应而实现的。     

川芎嗪对大鼠心肌缺血损伤的拮抗作用

目的 :研究川芎嗪对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血损伤的保护作用。方法 :采用皮下注射异丙肾上腺素 (ISP ,5mg·kg-1) ,2 4h后再注射同剂量一次 ,造成心肌缺血损伤模型。观测心肌线粒体中Ca2 + ATP酶、Ca2 + Mg2 + ATP酶活力以及Ca2 + 含量的变化。采用免疫组化法检测Bcl 2和Bax蛋白水平的变化。结果 :川芎嗪保护组心肌线粒体Ca2 + ATP酶、Ca2 + Mg2 + ATP酶活力较缺血组均有显著性升高 (P <0 .0 1) ,川芎嗪可稳定心肌线粒体Ca2 + 含量 ,增加缺血心肌组织中Bcl 2的表达 (P <0 .0 1) ,对Bax的表达影响不大 (P >0 .0 5 )。结论 :川芎嗪对大鼠心肌缺血损伤具有保护作用 ,该作用可能与提高心肌线粒体Ca2 + ATP酶、Ca2 + Mg2 + ATP酶活力及调控Bcl 2基因的表达有关。     

活血化瘀、软坚散结法对子宫内膜异位症自然杀伤细胞活性影响的实验研究

目的　观察活血化瘀、软坚散结法 (代表方为妇痛宁颗粒 )对大鼠子宫内膜异位症模型自然杀伤 (NK)细胞活性的影响 ,分析其获效机制。方法　采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型。实验共分 6组 ,即正常对照组、模型对照组和妇痛宁高、中、低剂量组及丹那唑组 ,每组 1 0只 ,观察 6组脾脏NK细胞活性。结果　模型对照组大鼠脾脏NK细胞活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。妇痛宁高、中、低剂量组能够明显提高模型大鼠的脾脏NK细胞活性 ,与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其中中剂量组疗效明显优于高剂量组 (P <0 .0 5 )。结论　子宫内膜异位症大鼠模型存在NK细胞功能异常。活血化瘀、软坚散结法的代表方妇痛宁颗粒冲剂对子宫内膜异位症模型大鼠脾脏NK细胞活性具有显著的调整作用 ,提示可能通过提高NK细胞活性达到治疗子宫内膜异位症的目的。     

心痛方对急性心肌梗死大鼠NCX mRNA表达及Ca2+浓度的影响

目的:探究心痛方对心肌梗死大鼠心肌组织内钠钙交换蛋白(NCX mRNA)的表达及钙离子(Ca~(2+))浓度的影响。方法:将50只SD大鼠分为假手术组、模型组、心痛方高剂量组、心痛方低剂量组、硫氮卓酮组,采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死大鼠模型。运用RT-PCR法检测各组大鼠心肌细胞内NCX mRNA的表达,激光扫描共聚显微镜法检测大鼠心肌组织中的Ca~(2+)浓度,HE染色法测定大鼠心肌梗死面积。结果:在下调NCX mRNA表达方面,心痛方高、低剂量组与假手术组、模型组、硫氮卓酮组比较,差异有统计学意义(P0.01);在降低MFI方面,心痛方高、低剂量组与假手术组、模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),且心痛方高剂量组在降低MFI方面还优于硫氮卓酮组(P0.01);在减少心肌梗死面积方面,心痛方高、低剂量组与模型组、硫氮卓酮组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:心痛方能下调急性心肌梗死大鼠NCX mRNA的表达,降低胞内Ca~(2+)的浓度,从而抑制钙超载对心肌细胞的损害,减少心肌梗死面积。     

温阳通脉方预处理对心肌再灌注大鼠CK—MB LDH的影响

目的:观察温阳通脉方预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型CK-MB、LDH含量的影响,探讨温阳通脉方对大鼠再灌注心肌的保护机制.方法:采用结扎大鼠冠状动脉左前降支,缺血30min,再灌120min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型;缺血5min,再灌5min,反复3次后缺血30 min,再灌注120 min建立心肌缺血预适应模型.检测大鼠灌胃14天后温阳通脉方组、心肌缺血预适应组(IP组)、再灌注损伤组(IR组)、假性处理组血清CK-MB、LDH含量.结果:温阳通脉方组、IP组CK-MB、LDH含量低于再灌注损伤组(P＜0.05),温阳通脉方组CK-MB、LDH与IP组比较.无显著性差异(P＞0.05).结论:温阳通脉方预处理后,能降低大鼠心肌缺血再灌注损伤模型CK-MB、LDH的含量.能够减轻大鼠急性心肌缺血所致心肌损伤,其机制可能是通过模拟心肌缺血预适应参与心肌保护作用.     

舒血宁注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的:探讨舒血宁注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、舒血宁注射液高、中、低剂量组。按文献方法除假手术组左冠脉前降支下只穿线不结扎外,另4组均结扎左冠脉前降支,结扎30min后剪断结扎线再灌注60 min。在结扎前5 min,假手术组和模型组分别腹腔注射生理盐水1 mL/kg;舒血宁注射液高、中、低剂量组分别腹腔注射舒血宁注射液2 mL/kg、1 mL/kg、0.5 mL/kg。再灌注结束后,从大鼠颈动脉取血3 mL,离心制备血清,检测CK、LDH活性;取血后各组均立即取出心脏,制成匀浆,检测SOD、GSH-Px活性及MDA含量。结果:与模型组相比,舒血宁注射液高、中、低剂量组CK、LDH活性显著降低(P0.01);MDA含量显著降低(P0.01)。结论:舒血宁注射液对大鼠缺血再灌注损伤心肌有保护作用,可能与舒血宁注射液能够提高缺血再灌注大鼠心肌的抗氧化能力有关。     

心痛方对急性心肌梗死大鼠MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达的影响

目的通过观察心痛方对大鼠急性心肌梗死(AMI)后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达及对心肌形态学的影响,探讨心痛方治疗AMI的疗效机制。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、心痛方组、双抗组(阿司匹林+氯吡格雷),冠脉结扎法制备AMI模型,灌胃给药7 d后处死大鼠,运用RT-PCR法测定心肌组织MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA表达,心肌细胞HE染色观察形态学改变。结果心痛方能使AMI大鼠心肌内MMP-9 mRNA表达减少(P0.01);TIMP-1mRNA表达升高(P0.01);MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值降低(P0.01);心肌损伤程度及心梗面积与MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值呈正直线相关。结论心痛方对AMI缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与增加TIMP-1 mRNA表达,降低MMP-9 mRNA表达,从而调节MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA的平衡有关。