罕见类孟买型OHm^B的鉴定

目的鉴定类孟买型OHm^B。方法检测患者ABO、H、Lewis血型。红细胞吸收放散试验，测定唾液中血型物质，PCR—SSP方法进行ABO基因分型。结果该患者为罕见的类盂买型OHm^B.血清中有抗-HI，基因定型为BO型。结论鉴定出罕见的类孟买型OHm^B，血清中有抗-HI。     

1例类孟买血型的血型鉴定及输血策略

目的 研究类孟买血型的血型鉴定方法和分子生物学特点。方法 用血清学方法对1例正反定型不符患者血样进行红细胞表型鉴定;用吸收放散试验确证红细胞上弱表达的ABO抗原;PCR扩增FUT1基因编码区序列,对PCR产物进行直接测序分析以进一步明确基因型。结果 盐水法鉴定患者血型正定型为O型,反定型患者血清与试剂红细胞Ac、Bc、Oc均凝集,不规则抗体筛查结果均为阳性,自身细胞阴性。红细胞吸收放散试验显示患者红细胞放散液与B型红细胞反应为2+,与A型红细胞和O型红细胞反应为阴性。患者红细胞与抗-H在盐水介质中反应无凝集,O型对照红细胞与抗-H反应凝集,患者血浆与人源类孟买细胞在盐水介质中反应无凝集,证实该患者为Bmh类孟买血型。FUT1基因测序发现第551位发生了腺嘌呤（A）和鸟嘌呤（G）2个碱基的缺失,存在基因突变,基因型为h1/h1,进一步证实患者为类孟买血型。结论 血清学结合分子生物学技术有助于类孟买血型的鉴定。     

羊水细胞ABO血型PCR-SSCP法基因定型研究

目的分析以羊水细胞进行胎儿ABO血型基因分型及其可行性分析。方法妊娠16周孕妇抽取羊水,从羊水细胞中提取DNA,采用PCR-SSCP技术,通过PCR反应,特异性扩增ABO基因片段,用凝胶电泳检测PCR产物,SSCP硝酸银染色,PCR产物直接测序等分子生物学方法,直接鉴定ABO血型基因型。结果15例高抗体效价的O型孕妇中丈夫A型的9例,B型5例,AB型1例,胎儿羊水细胞基因定型血型与末梢血血型吻合。结论通过羊水细胞,采用PCR-SSCP技术,进行胎儿ABO血型基因定型的方法是可行的。     

中国南方汉族人A及AB血型的基因亚型研究

目的 探讨中国南方汉族人A及AB血型的基因亚型分布,为实现跨ABO血型器官移植提供理论依据。方法取健康南方汉族成人体检者A型血330份,AB型血140份,提取DNA,采用序列特异引物聚合酶链反应（PCR—SSP）检测其基因亚型。将4种引物混合物同步扩增,根据PCR—SSP反应产生的特异性阳性条带判定相应的基因亚型。结果A型样本分型成功327份,AB型样本分型成功139份。A型血基因亚型以A／A201、A／O及A201／O较常见,占95％以上,而A201／A201及A／A不到5％;AB型血中A／B及A201／B基因亚型所占的比例较为接近,分别为54％和46％。结论中国南方汉族人A型血存在多种基因亚型,其特点明显不同于欧美白人,不同亚型之间的抗原性差异尚需要进一步研究。     

一例罕见AB类孟买血型的鉴定分析

目的：对一例AB类孟买血型的先证者进行血型血清学鉴定和分子生物学机制研究。方法：采用血型血清学技术分别对先证者红细胞上ABH抗原、唾液中ABH血型物质、红细胞上Lewis抗原及血浆中红细胞不规则抗体进行检测;采用PCR技术分别扩增先证者ABO 基因第6、第7外显子及FUT1、FUT2 基因全部编码区域,PCR产物纯化后直接测序,通过Chromas软件与人类红细胞血型基因数据库进行基因序列比对,查找突变位点。结果：血清学实验结果表明,先证者红细胞上检到弱A抗原、Leb抗原,未检到B抗原、H抗原及Lea抗原,唾液中检到A、B、H血型物质,血浆中检到IgM类抗HI抗体。DNA测序结果显示先证者ABO 基因型为*A1.02 /*B.01;FUT1 基因存在c.551_552delAG杂合缺失突变及c.881_882delTT杂合缺失突变,FUT2 基因存在c.357C＞T纯合多态性。结论：FUT1 基因双杂合缺失突变是导致先证者为AB类孟买血型的主要原因。     

B亚型血型9例血清学特征及鉴定方法

目的 探讨B亚型的血型血清学特征及鉴定方法.方法 B亚型无偿献血者血液标本9例,采用红细胞凝集试验检测红细胞上的A、B、H抗原和血清中的抗-A、抗-B抗体,用凝集抑制试验检测其唾液中的A、B、H血型物质,用吸收放散试验检测红细胞表面是否存在B抗原,用序列特异性引物多聚酶链式反应技术进行ABO血型基因分型.结果 血型血清学试验显示9例B亚型献血者中表型为Bx 4例、Bm 3例、Bel 2例,9例ABO血型基因分型均能检测到B基因.结论 采用血型血清学实验与血型基因分型相结合的办法是确保采供血机构正确鉴定B亚型的良好策略.     

血液病致ABO抗原减弱的血型基因定型研究

目的：探讨血清学定型出现ABO血型抗原减弱的血液病患者的基因分型,为临床输血提供血型依据。方法2012年7月至2013年6月对320例血液病患者,采用血型血清学方法进行ABO血型鉴定,并对ABO血型抗原减弱的标本采用聚合酶链反应-序列特异性引物法（PCR-SSP）进行基因分型。结果53例试管法正反定型相符,可确定ABO血型;210例反定型抗体减弱或异常;57例抗原减弱。57例抗原减弱患者中,急性髓细胞白血病（AML）35例,骨髓增生异常综合征（MDS）12例,再生障碍性贫血（AA）3例,慢性粒细胞白血病（CML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）各2例,慢性淋巴细胞白血病（CLL）、淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜（ITP）各1例。经基因分型,57例患者中A抗原减弱23例,确定A型血,B抗原减弱26例,确定B型血,A、B抗原均减弱8例,确定AB型血。结论 ABO血型抗原减弱最多见于AML和MDS患者,进行血型基因检测可明确ABO血型。ABO抗原减弱时经基因分型确定血型后,输血时可同型输血。     

3例疑难ABO血型鉴定及分析

目的:鉴定并分析3例疑难ABO血型红细胞抗原及血清抗体的特异性。方法:运用PCR-SSP方法对3例患者ABO血型抗原进行基因分型;运用血型血清学技术对造成ABO血型正反定型不符的原因进行分析。结果:3例患者ABO血型基因分型分别为A/O、O/O、O/O。结合血型血清学技术为患者提供了安全的血液制品。结论:ABO血型基因分型技术弥补了血型血清学方法的一些不足,运用血型基因分型技术可以解决血清学方法难以鉴定的血型抗原。     

HLA分型中罕见基因的分析报告

PCR—SSP技术是HIA分型常规采用的方法之一，具有简便、快捷等特点。笔者在使用PCR—SSP HIA基因分型试剂盒做HIA常规分型中遇到二份志愿供髓者的DNA样品，与GT公司的PCR—SSP HIA分型试剂产生特殊的反应格局。其中一份（以下称SZ1）在HIA—A座位上，与试剂盒鉴定HIA—A的A2、All，66等位基因的PCR引物呈阳性反应，而与鉴定HIA—A＊11以及HIA—A＊66基因的引物均呈阴性反应，这个特殊的反应格局提示该DNA样品可能是A＊1103／08／14或存在与A＊11基因相关的碱基突变，经DNA测序，结果是比较罕见的A＊1103基因。     

罕见类孟买型OBHm的鉴定

目的 鉴定类孟买型OBHm.方法 检测患者ABO、H、Lewis血型,红细胞吸收放散试验,测定唾液中血型物质,PCR-SSP方法进行ABO基因分型.结果 该患者为罕见的类孟买型OBHm,血清中有抗-HI,基因定型为BO型.结论 鉴定出罕见的类孟买型OBHm,血清中有抗-HI.     

复合PCR技术在ABO血型基因分型中的应用

目的 探讨复合PCR技术在ABO血型基因分型方法中的应用.方法 通过实验研究摸索复合PCR的条件和规律,采用单管同时扩增出ABO基因的第6、7外显子后,使用限制性内切酶对复合PCR产物进行酶切消化.结果 通过最佳实验反应条件的获得,可建立ABO血型基因分型方法.结论 复合PCR技术在建立ABO血型基因分型方法的应用中,具有其特殊性.     

ABO疑难血型基因分型研究

目的:研究ABO血型基因分型的意义。方法:采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)基因定型方法对ABO疑难血型进行检测。结果:本研究建立了稳定的PCR-SSP基因分型方法,对10例疑难标本准确进行了基因分型。结论:ABO型基因分型技术可以应用于ABO血型疑难样本检测。     

类孟买血型FUT1、FUT2基因突变及家系遗传分析

目的：分析1个罕见类孟买血型FUT1、FUT2 基因突变及家系遗传机制。方法：选取2019年12月22日就诊于苍南县人民医院的1例类孟买血型患者,采用试管凝集法鉴定ABO、H血型,采用吸收放散试验鉴定红细胞上ABO弱抗原,采用PCR-SBT法鉴定ABO血型基因型并对FUT1、FUT2 基因进行测序分析,同时抽取其妻子、女儿静脉血液待检。结果：先证者和女儿血型为Amh型、H抗原阴性,直接测序FUT1 c.551-552delAG,FUT2 c.357C＞T、c.385A＞T;其妻子血型为A型、H抗原阳性;ABO血型基因型3人均为ABO*A1 .02/O.01.02。结论：先证者FUT1、FUT2 基因遗传给其女儿。     

PCR-SSP对潜在输血需要住院患者ABO基因分型的检测效果与意义

【目的】 调查潜在输血需要住院患者的ABO血型基因,分析ABO表型相同输血中ABO基因型的错配输血几率。【方法】 对502例潜在输血需要的住院患者,采用血清学方法和聚合酶链反应-序列特异性扩增技术(PCR-SSP)检测ABO血型的表型及基因型。比较两种方法学对ABO血型表型的一致率;统计各ABO等位基因及各ABO基因型的频率;并分析潜在输血需要的住院患者在接受ABO血型表型相同的输血时,ABO基因错配输血几率。 【结果】 血清学与PCR-SSP对502例潜在输血需要的住院患者的ABO表型识别的一致率为100%。PCR-SSP技术检测出患者中常见ABO基因5个(O1、O2、A1、B1及A2)以及ABO基因型16个(O1O2、O1O1、B1O1、A1O1、A1O2、B1O2、O2O2、A1B1、A1A1、B1B1、A2O1、A2O2、A2B1和A1A2),而血清学仅能识别ABO表型。潜在输血需要住院的患者在接受ABO血型表型相同的随机输血中,与供者之间ABO基因型的错配率分别为:A型65.98%,B型57.39%,O型56.95%,AB型22.55%。 【结论】 PCR-SSP能识别ABO基因型,不仅可以作为血清学的有力补充,而且可能揭示输血治疗中不明原因的输血不良反应的临床原因,具有重要临床意义。     

ABO血型基因分型诊断方法的建立

目的 在北京地区建立一套稳定的ABO血型系统基因分型的诊断方法,为临床疑难血型定型工作提供技术保证和输血安全保障.方法 通过Multiplex-PCR-RFLP技术和PCR-SSP技术建立起ABO血型基因分型方法.结果 所建立的分型方法具有良好的重复性和稳定性,在各种分型检测中均取得了理想的试验结果.结论 建立一套较为完善和实用的基因分型方法,为进一步研究中国人ABO亚型的分子基础提供参考依据.     

20例ABO血型抗原表达异常样本的血型基因分析

目的 探讨20例样本ABO血型抗原表达减弱的分子生物学机制。方法 采用微柱凝集法及盐水试管法进行ABO血型血清学鉴定;对ABO基因第1-7外显子及其上游启动子区域PCR产物直接测序进行基因分型。结果 11例样本通过家系分析可以确定其基因型（1例ABO*A2.01/ABO*B.01,1例ABO*A2.01/ABO*O01.01,1例A1.02/B3.04,2例B3.04/O.01.01、2例B3.02/O.01.02,4例Bw.12/O.01.01）;3例样本在ABO基因启动子区域发生-35_-18位的碱基缺失,通过家系分析,提示该变异发生在B等位基因;1例样本在ABO基因启动子区域发生-119位C>T变异;1例样本发生第7外显子1054位点缺失碱基C;4例样本在ABO血型基因1-7外显子及其调控区域未发现变异。结论 启动子区域-119位C>T变异及Exon7 1054del变异可能是导致ABO血型抗原异常表达的新变异;部分ABO亚型可能与内含子异常或mRNA合成异常有关;本地区B亚型明显多于A亚型。     

类孟买血型OHmB的血型血清学及家系调查

目的：发现类孟买血型OHm^B先证者家系中其他表现型个体,为紧急输血时寻找相合供者．方法：对类孟买血型OHm^B先证者家系成员进行ABO血型正反定型、Lewis血型鉴定、吸收放散试验检测红细胞表面的ABH抗原及血清中抗-A、抗-B及抗-H,中和抑制试验检测唾液中血型物质．结果：类孟买血型OHm^B先证者及其2位同胞兄弟均被鉴定为类孟买血型OHm^B,其中2例检出抗-H抗体,1例未检出抗-H抗体,先证者及其兄弟的子女中均未发现类孟买血型OHm^B表现型个体．结论：类孟买血型符合隐性遗传规律,对于罕见的类孟买型个体的家系,尤其是同胞兄妹进行血型血清学调查,有发现新的相同表现型个体的可能,需输血时可互为供者．