TNF-α导致细胞骨架重排和当归的逆转作用

目的 :探讨ＴＮＦ α导致细胞骨架重排和当归的逆转作用。方法 :常规培养人脐静脉内皮细胞 ,分成下列各组 :①对照组 :常规培养 ;②当归组 :培养液中加入当归注射液2 0ｍｇ/ｍｌ;③ＴＮＦ α组 :培养液中加入ＴＮＦ α 10 0Ｕ/ｍｌ;④ＴＮＦ α 当归组 :培养液中同时加入ＴＮＦ α 10 0Ｕ/ｍｌ和当归 2 0ｍｇ/ｍｌ。4ｈ后用Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎｅｒｈｏｄａｍｉｎｅ标记骨架蛋白Ｆ ａｃｔｉｎ ,用ＯｌｙｍｐｕｓＬＸ70荧光显微镜 (ＣｅｌｌＳｃａｎ ,Ｓｃａｎａ ｌｙｔｉｃｓ Ｂｉｏｎｉｓ)检测细胞骨架分布。结果 :荧光显微镜下 ,在内皮…     

037 TNF-α导致细胞骨架重排和当归的逆转作用

目的: 探讨TNF-α导致细胞骨架重排和当归的逆转作用. 方法: 常规培养人脐静脉内皮细胞, 分成下列各组: ①对照组: 常规培养; ②当归组: 培养液中加入当归注射液20 mg/ml; ③ TNF-α组: 培养液中加入TNF-α 100 U/ml; ④ TNF-α+当归组: 培养液中同时加入TNF-α 100 U/ml和当归20 mg/ml. 4 h后用Phalloidine rhodamine标记骨架蛋白F-actin, 用Olympus LX70荧光显微镜(CellScan, Scanalytics-Bionis)检测细胞骨架分布. 结果: 荧光显微镜下, 在内皮细胞的每一个横切面, 对照组细胞骨架均排列在细胞周围, Factin分布均匀, 粗细匀称; 当归注射液不影响正常内皮细胞的细胞骨架排列, 但可见部分actin肌丝增粗; TNF-α作用后整个细胞腔面细胞骨架排列紊乱, 在细胞中部横切面, 增粗的actin肌丝横跨整个细胞; 将当归注射液与TNF-α共同作用于内皮细胞, 可见细胞骨架排列在细胞周围, 但与正常细胞状态略有不同. 结论: TNF-α可以导致细胞骨架重排, 这种重排与剪切力导致的重排相似. 当归能逆转TNF-α导致的细胞骨架重排, 使F-actin排列在细胞周围. 这种作用的意义及信号转号途径目前还不完全清楚. 本室的其他实际显示, 当归注射液可以降低氧化低密度脂蛋白导致的ICAM-1表达增加, 逆转TNF-α导致的ICAM-1重排. 当归抗动脉粥样硬化可能与这些作用有关.     

细胞骨架系统对TNF—α产生的影响

本文证实细胞微管聚合抑制剂秋水仙碱、长春花碱、长春新碱等均可明显抑制脂多糖刺激的大鼠腹腔巨噬细胞合成肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）。微管解聚抑制剂重水与Ｔａｘｏｌ亦可使ＴＮＦ－α产生轻度减少，提示微管的聚合与解聚对ＴＮＦ－α的正常产生都非常重要，其中聚合功能对ＴＮＦ－α合成的调节尤其重要。此外，微丝聚合抑制剂细胞松弛素Ｂ亦可轻度抑制ＴＮＦ－α的产生，说明微丝亦参与对ＴＮＦ－α合成的调节。     

细胞骨架系统对TNF－α产生的影响

本文证实细胞微管聚会抑制剂秋水仙碱、长春花碱、长春新碱等均可明显抑制脂多糖刺激的大鼠腹腔巨噬细胞合成肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）。微管解聚抑制剂重水与Ｔａｘｏｌ亦可使ＴＮＦ－α产生轻度减少，提示微管的聚合与解聚对ＴＮＦ－α的正常产生都非常重要，其中聚合功能对ＴＮＦ－α合成的调节尤其重要。此外，微丝聚合抑制剂细胞松弛素Ｂ亦可轻度抑制ＴＮＦ－α的产生，说明微丝亦参与对ＴＮＦ－α合成的调节。     

跨膜型和分泌型TNF—α对TNF受体作用的比较

用可溶性ＴＮＦＲ预先与ｍＴＮＦα或ｓＴＮＦα温育可明显抑制两型ＴＮＦ随后的胞毒效应；用ｓＴＮＦ封闭靶细胞的ＴＮＦＲ可抑制随后ｓＴＮＦ对之的胞毒效应，却不能影响ｍＴＮＦ的作用。提示ｍＴＮＦ与ｓＴＮＦ一样是依赖ＴＮＦＲ发挥作用的，但二者与ＴＮＦＲ结合位点不同。比较两型ＴＮＦ对表达不同类型ＴＮＦＲ靶细胞的胞毒效应，对ｓＴＮＦ敏感的靶细胞主要表达ＴＮＦＲＩ，而ｍＴＮＦ则对表达Ⅰ型和／或Ⅱ型ＴＮＦＲ的靶细胞均有杀伤作用。抗ＴＮＦＲ抗体与ｍＴＮＦ相似，可杀伤对ｓＴＮＦ耐受肿瘤细胞系；将其预先与靶细胞作用并不能封闭ｍＴＮＦ的杀瘤效应，提示二者与ＴＮＦＲ结合位点不同，但可能有相似的信号传导     

乳腺癌患者血清TNFα和TGFα的临床意义

肿瘤坏死因子α(TNFα)和转化因子α(TGFα)均为多肽类细胞因子,前者由巨噬细胞产生,具有多种生物效应;后者粘附在细胞膜上,具有自分泌和旁分泌刺激功能.二者与肿瘤的发生、发展及预后相关联.本文将探讨乳癌患者血清TNFα和TGFα的临床意义.     

TNFα在酒精性诱导肠黏膜损伤中的表达和作用

目的制备酒精灌胃诱导急性酒精性肠黏膜损伤模型,探讨TNFα在急性酒精摄入导致肠黏膜损伤的作用。方法雄性Wistar大鼠32只,随机分成4组,每组8只。正常组,酒精模型组,TNFα组,抗TNFα-Ig G抗体组。ELISA方法检测血清TNFα水平,Western blot方法检测小肠标本occludin的表达。结果酒精组与对照组比,TNFα明显升高(0.05),同时occludin的相对表达量明显下降(0.05);外源性TNFα预处理后,TNFα表达进一步升高,而occludin的相对表达量进一步下降;TNFα-Ig G抗体可抑制occludin表达量下降。结论酒精诱导大鼠肠黏膜损伤时TNFα过表达,TNFα可能成为治疗酒精诱导的肠黏膜损伤的新靶点。     

TNFα的中枢神经系统来源

ＴＮＦα是一个重要的细胞因子，有着广泛的生物学作用，主要来源于单核／巨噬细胞和Ｔ细胞。ＣＮＳ一直被认为是免疫豁免部位，这是部分因为血脑屏障的存在限制了免疫能细胞，细胞因子和免疫球蛋白的通过，部分因为ＣＮＳ的细胞缺乏免疫活性。     

TNFα的中枢神经系统来源

ＴＮＦα是一个重要的细胞因子,有着广泛的生物学作用,主要来源于单核／巨噬细胞和Ｔ 细胞。ＣＮＳ一直被认为是免疫豁免部位,这是部分因为血脑屏障的存在限制了免疫能细胞、细胞因子和免疫球蛋白的通过,部分因为ＣＮＳ的细胞缺乏免疫活性。目前后者受到越来越多的研究结果的冲击。ＴＮＦα不但可以在周围循环中产生,而且可以在ＣＮＳ内由小胶质细胞、星形细胞、神经细胞和血管内皮细胞产生,在ＣＮＳ免疫炎性反应中发挥着重要作用     

TNFα在胰岛素抵抗发生机制中的作用

肿瘤坏死因子α(TNFα)是一种具有多种生物学功能的细胞因子 ,可由免疫细胞及非免疫细胞分泌 ,近来研究证实在大多数肥胖啮龄动物模型中脂肪组织中的TNFα表达增加。随着研究的不断进展 ,发现TNFα与葡萄糖代谢及脂代谢关系密切 ,并且在胰岛素信号转导、葡萄糖转运和外周组织胰岛素抵抗等方面发挥作用。本文拟就有关内容作一综述。     

TNFα对培养的脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对脐静脉内皮细胞的损伤作用。方法 :将培养的内皮细胞分为对照组和实验组 ,实验组培养液中含有TNFα(4× 10 5U/L) ;通过普通光镜、扫描电镜、透射电镜观察TNFα对内皮细胞形态和超微结构的影响 ,并运用免疫组化染色来观察TNFα对内皮细胞表达细胞间粘附分子 (ICAM 1)的影响。结果 :(1)光镜、电镜观察结果显示 :实验组内皮细胞拉长 ,由原来的多边形变为成纤维状 ,细胞间距不均且变大 ;微绒毛变短甚至呈泡状 ,个别拉长 ,有些部位细胞膜有缺损以及内质网扩张、线粒体凝聚等改变。并且这些改变有时间依赖性。 (2 )实验组内皮细胞ICAM 1表达明显增强。结论 :TNFα(4× 10 5U/L)对内皮细胞有明显的损伤作用     

Rho GTPase在信号转导和细胞骨架中的作用

Rho GTPases参与多种重要的细胞生命活动,如肌动蛋白细胞骨架的重构、细胞黏附、细胞运动、囊泡运输、转录激活、基因表达和细胞周期的调控等。当Rho GTPase蛋白水平改变,活性状态改变,效应蛋白丰度改变后,出现异常的Rho 信号,从而影响细胞骨架重组使细胞迁移。调节这些生物信号的转导通路非常复杂, 因此,Rho GTPases已成为近年来的研究热点。     

098 TNFα在胰岛素抵抗发生机制中的作用

肿瘤坏死因子α(TNF α)是一种具有多种生物学功能的细胞因子，可由免疫细胞及非免疫细胞分泌，近来研究证实在大多数肥胖啮龄动物模型中脂肪组织中的TNF α表达增加。随着研究的不断进展，发现TNF α与葡萄糖代谢及脂代谢关系密切，并且在胰岛素信号转导、葡萄糖转运和外周组织胰岛素抵抗等方面发挥作用。本文拟就有关内容作一综述。     

TNFα对血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制

ＴＮＦα是一种重要的炎症介质。血管内皮细胞是ＴＮＦα作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多炎症性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｒｈＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起大血管内皮细胞（人脐静脉内皮细胞）和微血管内皮细胞（大鼠肺微血管内皮细胞）形态、功能、代谢的损伤以及其与内皮细胞中原癌基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。１－细胞增殖动力学：在体外培养的大血管内皮细胞（ＨＶＥＣ,第３～４代）中发现,加入ＴＮＦ（２０～４０ｎｇｍＬ）后…     

较高剪切应力致血管内皮细胞ICAM-1分布异常及当归的逆转作用

目的 :研究表明 ,一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要 ,但过高的剪切应力会导致血管内皮细胞ＩＣＡＭ - 1的分布和表达异常。当归是传统的活血化淤中药 ,对于某些血流动力学异常的心脑血管疾病具有肯定的疗效。本实验研究当归对高剪切应力作用下血管内皮细胞ＩＣＡＭ - 1异常分布的逆转作用。方法 :将ＥＣＶ30 4细胞常规培养在长方形的玻片上 ,然后分别置于剪切应力为 2 0ｄｙｎ/ｃｍ2 的流场中 (当归组 :在流场液体中加入当归提取液 2 0ｍｇ/ｍＬ) ,温度 37℃。 4ｈ后取出玻片 ,先用鼠抗人ＩＣＡＭ - 1单克隆抗体 ( 1…     

当归对高剪切应力致血管内皮细胞ICAM-1分布异常的逆转作用

目的 :一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要 ,但过高的剪切应力会导致血管内皮细胞ＩＣＡＭ 1的分布和表达异常。当归是传统的活血化瘀中药 ,对于某些血流动力学异常的心脑血管疾病具有肯定的疗效。本实验研究当归对高剪切应力作用下血管内皮细胞ＩＣＡＭ 1异常分布的逆转作用。方法 :将ＥＣＶ30 4细胞常规培养在长方形的玻片上 ,然后分别置于剪切应力为 2Ｐａ的流场中(当归组 :在流场液体中加入当归提取液 2 0ｍｇ/ｍｌ) ,温度37℃。4ｈ后取出玻片 ,先用鼠抗人ＩＣＡＭ 1单克隆抗体 (1∶2 0 )孵育 2 0ｍｉｎ ,ＰＢＳ冲…     

shRNA抑制淋巴细胞TNFα的表达

目的观察RNA干扰技术是否有效抑制原代培养的脾淋巴细胞肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达。方法体外合成针对TNFα基因序列的特异性发夹状双链RNA(shRNA)的表达载体,与L ipofectam ine2000结合后转染原代培养的由脂多糖(LPS)激活的脾淋巴细胞,用ELISA和RT-PCR法检测TNFα表达的变化。结果ELISA检测结果表明,特异性RNA干扰组TNFα蛋白表达较对照组下降34.2%,而非特异性干扰组TNFα表达与对照组无明显差异;RT-PCR检测结果表明,特异性RNA干扰组TNFαmRNA表达较对照组下降61.3%。结论RNA干扰可以有效抑制原代培养的淋巴细胞TNFα的表达,该过程具有严格的基因序列特异性,为TNFα相关疾病的基因治疗提供了新策略。     

CHD患者血清APN和TNF—α测定的临床意义

近些年来随着对动脉粥样硬化临床及病理生理研究的深入,细胞因子在动脉粥样硬化发生、发展中的作用13益受到关注。因肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF—α）可引起局部炎症反应和介导心肌细胞凋亡过程,而血清脂联素（adiponectin,APN）则具有抗炎、减缓动脉粥样硬化的作用,为探讨两者之间的关系及其在冠心病（CHD）诊疗中的价值,我们对108例疑诊为CHD患者进行冠状动脉造影和检测其血清中APN和TNF-α水平,并对结果进行分析,现报告如下。