温胆汤改良方对Aβ25-35诱导AD细胞模型bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的：温胆汤改良方含药脑脊液及含药血清对AD细胞模型凋亡及凋亡．相关蛋白bcl-2、bax表达的影响。方法：温胆汤改良方含药脑脊液和含药血清分别作用于Aβ25-35诱导NG108-15细胞建立的AD细胞模型，镜下观察细胞生长状况，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫组化检测bcl-2、bax蛋白的表达。结果：与模型组比较，含药脑脊液组和含药血清组细胞凋亡率降低（p〈0．05），bcl-2表达无显著性差异（p〉0、05），bax蛋白表达减弱（p〈0．01），bcl-2／bax比值升高（p〈0．01）。结论：温胆汤改艮方能有效地抑制AD细胞模型凋亡，其作用机理可能与其干预凋亡相关基因bax的表达，升高bcl-2／bax比值有关。     

补肾益智方对AD细胞模型影响的研究

目的 :观察补肾益智方对由Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞老年性痴呆 (AD)模型的影响。方法 :利用细胞计数、MTT及流式细胞仪测定等方法观察补肾益智方含药血清处理由Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞存活率、形态学及细胞周期的改变。结果 :补肾益智方含药血清能增加Aβ片段毒性诱导的NG1 0 8- 1 5细胞存活率和细胞突起 ;细胞增殖周期分析显示 ,含药血清能增加S期细胞数。结论 :补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应 ,表明该方通过拮抗AD的病理发展而发挥对AD的治疗作用     

温胆汤改良方对Aβ25-35诱导AD细胞模型bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的:温胆汤改良方含药脑脊液及含药血清对AD细胞模型凋亡及凋亡相关蛋白bcl- 2、bax表达的影响。方法:温胆汤改良方含药脑脊液和含药血清分别作用于Aβ25-35诱导NG108-15 细胞建立的AD细胞模型,镜下观察细胞生长状况,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫组化检测bcl- 2、bax蛋白的表达。结果:与模型组比较,含药脑脊液组和含药血清组细胞凋亡率降低（p<0．05）, bel-2表达无显著性差异（p>0．05）,bax蛋白表达减弱（p<0．01）,bcl-2／bax比值升高（p<0．01）。结论:温胆汤改良方能有效地抑制AD细胞模型凋亡,其作用机理可能与其干预凋亡相关基因bax的表达,升高bcl-2／bax比值有关。     

温胆汤改良方对Alzheimer病细胞模型JNK、c-jun磷酸化水平的影响

目的:探讨温胆汤改良方含药血清对AD细胞模型JNK、c-jun磷酸化水平的影响。方法:经老化处理的Aβ25-35(终浓度为5μmol/L)与NG108-15细胞共同孵育24h建立AD细胞模型,运用中药血清药理学方法,以温胆汤改良方含药血清作用于AD细胞模型,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,SABC免疫组化法检测p-JNK、p-c-jun蛋白的表达。结果:温胆汤改良方能显著性降低NG108-15细胞JNK、c-jun的表达,降低细胞凋亡率。与模型组比较,抑制剂组和含药血清组JNK、c-jun的表达降低有显著性意义(P<0.05)。结论:温胆汤改良方保护由Aβ25-35引起的NG108-15细胞损伤作用,可能与其作用于JNK信号转导通路有着密切的关系。     

二苯乙烯苷对痴呆小鼠学习记忆及大脑炎性反应的影响

目的观察二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽致痴呆模型小鼠学习记忆及炎性反应的影响.方法向小鼠右侧脑室定向注射Aβ1-40建立痴呆模型,并以TSG灌胃预防给药,各组小鼠均作Morris水迷宫及避暗等行为学测试,然后采用放免法对脑皮层白介素-6(IL-6)含量进行测定.结果与对照组相比,模型组小鼠学习记忆能力明显降低,皮层IL-6含量明显升高;与模型组相比,TSG组小鼠学习记忆能力明显提高,皮层IL-6含量明显降低.结论 TSG能明显提高学习记忆能力,降低皮层IL-6含量,对AD的防治具有良好的应用前景.     

二苯乙烯苷对脂肪肝家鸭模型血脂的影响

目的：考查二苯乙烯苷对脂肪肝家鸭模型血脂的影响。方法：复制脂肪肝家鸭模型,以二苯乙烯苷进行干预,考查家鸭体重、血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、游离脂肪酸（FFA）的变化,并进行统计分析。结果：二苯乙烯苷具有降低脂肪肝家鸭模型体重、具有升高血清HDL趋势,具有明显降低血清TG、TC、LDL、FFA作用。不同剂量二苯乙烯苷干预脂肪肝效果有所差异,在剂量为13～52mg范围内随剂量递增,效果渐佳。结论：二苯乙烯苷具有降血脂作用,且呈剂量依赖性。     

何首乌有效成分二苯乙烯苷对Aβ_(25-31)诱导神经干细胞定向分化的影响

目的探讨何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样肽(Aβ25-31)诱导神经干细胞(NSCs)定向分化的影响。方法从孕14d昆明小鼠体外提取并培养NSCs,分别建立起两组分化系统可溶性Aβ25-31体外诱导NSCs损伤的阿尔茨海默病(AD)细胞模型:神经元细胞分化模型M1(Aβ25-312 5μmol/L)、星形胶质细胞分化模型M2(Aβ25-315μmol/L)。TSG低、中、高剂量组(TSG浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)分别干预模型M1和模型M2,采用WST-1细胞增殖及细胞毒性试剂盒检测各组NSCs细胞活性,采用免疫荧光法及蛋白印迹法观察各组GFAP、Tubulin阳性细胞率及其蛋白表达情况。结果模型M1组和模型M2组细胞活性A值较相应的对照组明显降低(P0.05);TSG中、高剂量组A值明显高于相应的模型组(P0.05)。与相应的对照组比较,模型M1组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显降低,模型M2组GFAP阳性细胞率及其蛋白相对丰度值明显升高(P0.05);与相应的模型组比较,TSG高剂量组Tubulin阳性细胞率及其蛋白相对丰度值均显著升高,GFAP阳性细胞率显著降低(P0.05)。结论高剂量的TSG具有促进Aβ25-31诱导的NSCs向神经元方向分化的趋势,抑制向星形胶质细胞的分化。     

补肾益智方对由A_β片段神经毒性诱导NG108-15细胞老年性痴呆模型神经递质释放影响的研究

目的:观察补肾益智方对由Aβ片段神经毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆(AD)模型神经递质释放的影响.方法:利用免疫印迹检查、免疫放射活性测定及电生理学测定方法,观察补肾益智方含药血清处理Aβ片段神经毒性诱导的NG108-15细胞后的胆碱乙酰基转移酶(ChAT)活性、突触素蛋白(synapsin)水平及功能性突触形成率.结果:补肾益智方含药血清组ChAT活性和突触素蛋白水平高于正常对照血清组;含药血清能调节递质释放能力和提高功能性突触形成.结论:补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应,表明该方能拮抗AD的病理发展,并通过提高神经递质释放能力发挥对AD的治疗作用.     

何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响

目的通过观察何首乌主要成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷对肝细胞、肝癌细胞的影响来探讨引发何首乌不良反应的物质基础,为规范中药合理应用提供理论依据。方法用MTT法观察何首乌主要有效成分大黄素、大黄酸和二苯乙烯苷在不同浓度下作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响。结果蒽醌类化合物大黄素、大黄酸在终浓度6.25~50μmol/L,随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的损伤加大、抑制率增加;二苯乙烯苷在终浓度5~400μmol/L,随着浓度的增加、作用时间的延长对L-02细胞和BEL细胞的影响不明显,无显著性差异。结论大黄素、大黄酸是何首乌引发不良反应—肝毒性的主要成分,在高浓度、长时间作用下有细胞毒作用,二苯乙烯苷在5~400μmol/L作用不同时间对肝细胞和肝癌细胞的影响不明显,无细胞毒作用。     

类叶升麻苷对冈田酸诱导的阿尔茨海默病细胞模型的保护作用研究

目的:研究类叶升麻苷(acteoside)对冈田酸(0A)诱导的SK-N-SH神经细胞损伤的影响.方法:以20 nmol·L-1的冈田酸处理SK-N-SH神经细胞,建立AD样细胞模型,并以5,10,20 mg·L-1的类叶升麻苷拮抗其作用.通过倒置显微镜观察细胞形态,采用MTT比色法检测细胞存活率,酶标法试剂盒测定LDH渗漏率,应用Western blot技术检测神经细胞磷酸化tau蛋白的表达情况.结果:类叶升麻苷可明显改善SK-N-SH的细胞形态,提高细胞的存活率,降低细胞LDH的漏出率,下调磷酸化tau蛋白在p-Ser 199/202,p-Ser 404位点的表达,上调非磷酸化tau蛋白在Ser 202,Ser 404位点的表达.结论:类叶升麻苷对冈田酸诱导的SK-N-SH神经细胞损伤具有明显保护作用.     

二苯乙烯苷、远志皂苷元及其合用抗Aβ25-35损伤PC12细胞作用的比较研究

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)、远志皂苷元(TEN)及二者合用对Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用及相关机制。方法 PC12细胞采用Aβ25-35诱导建立阿尔茨海默病的损伤模型。用析因设计,设立正常组、模型组(20μmol/L Aβ25-35)、TSG组(100μmol/L TSG)、TEN组(50μmol/L TEN)、TSG+TEN组(100μmol/L TSG+50μmol/L TEN),每组分设6个复孔。检测各组细胞存活率、乙酰胆碱酯酶(Ach E)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,统计各组细胞分化率。结果 TSG组、TEN组及TSG+TEN组细胞存活率、SOD活力及细胞分化率均明显高于模型组(P均<0.05),Ach E活力、MDA含量均明显低于模型组(P均<0.05)。且细胞存活率、细胞分化率从高到低依次为TSG+TEN组、TSG组、TEN组(P均<0.05),Ach E活力从低到高依次为TSG+TEN组、TSG组、TEN组(P均<0.05)。TSG组和TSG+TEN组Ach E活力和MDA含量均明显低于TEN组(P均<0.05),SOD活力均明显高于TEN组(P均<0.05),TSG+TEN组SOD活力和MDA含量与TSG组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 TSG与TEN合用抗Aβ25-35损伤PC12细胞具有明显协同作用,机制可能与明显改善神经胆碱能系统功能、保护神经细胞突触可塑性有关,而与对氧化应激系统的影响关系不显著;TSG对PC12细胞的保护作用优于TEN,机制可能与TSG改善神经胆碱能系统功能、神经细胞抗氧化应激功能及保护神经细胞突触可塑性的作用较TEN显著有关。     

三七总皂苷对Aβ25-35诱导的NG108-15细胞损伤的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对由Aβ25-35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型保护作用的影响.方法:利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变.结果:PNS能增加Aβ25-35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率、细胞突起率和细胞突起平均长度.结论:PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用,表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用.     

二苯乙烯苷对大鼠血栓形成及血液流变学的影响

目的 观察二苯乙烯苷对大鼠血栓形成及血液流变学的影响.方法 用动静脉旁路方法 建立大鼠体外血栓模型,用冰水冷刺激加肾上腺素应激法建立大鼠血栓模型,观察二苯乙烯苷静脉给药5,10,20 mg/kg对大鼠血栓和血液流变学影响.结果 二苯乙烯苷明显降低大鼠血液粘度,抑制血栓形成.结论 二苯乙烯苷可有效用于抗血栓,改善血液流变学指标.     

二苯乙烯苷调节ROS相关JNK通路对LPC诱导HUVECs损伤的作用

目的探讨从何首乌提取的二苯乙烯苷(TSG)对溶血卵磷脂(LPC)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养HUVECs,筛选溶血卵磷脂损伤内皮细胞的最适药物浓度,采用CCK-8检测细胞活力,透射电镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测和观察活性氧(ROS)水平,Western blot检测p-JNK蛋白的水平。结果 LPC能引起细胞损伤,并随质量浓度增加,细胞活力降低,其中10μg/mL LPC作用细胞后,与正常组比较细胞活力明显降低,细胞内空泡增多,线粒体肿胀,产生ROS的水平增高,p-JNK蛋白表达水平显著上调。经二苯乙烯苷预处理1 h后,二苯乙烯苷1.0μmol/L和10μmol/L组与溶血卵磷脂组比较,细胞活力增强,细胞内空泡减少,线粒体较完整,产生ROS水平降低,p-JNK蛋白表达量显著下调(P0.05)。结论二苯乙烯苷具有降低溶血卵磷脂所致HUVECs的细胞损伤作用,其机制可能与调节ROS相关JNK通路有关。     

二苯乙烯苷、远志皂苷元2∶1配伍抗Aβ_(25-35)损伤PC12细胞作用的最适浓度研究

目的:研究不同浓度下二苯乙烯苷(TSG)、远志皂苷元(TEN)2∶1配伍抗Aβ25-35损伤PC12细胞的作用,以筛选最适配伍浓度。方法:采用MTT比色法筛选Aβ25-35最适造模浓度,在所得最适Aβ25-35浓度基础上采用MTT比色法筛选TSG-TEN合用抗Aβ25-35损伤PC12细胞作用的最适浓度。结果:与正常组比较,模型组的细胞存活率明显降低(P0.01);与模型组比较,合用4组(100μmol/L TSG+50μmol/L TEN)的细胞存活率最高(P0.01)。结论:在本实验所选取的浓度范围内,TSG与TEN 2∶1配伍抗Aβ25-35损伤PC12细胞以"100μmol/L TSG+50μmol/L TEN"合用浓度为最佳。     

二苯乙烯苷对大鼠骨密度与骨强度的影响

目的：检测由何首乌中提取的有效成分2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷（二苯乙烯苷）,长期给药对大鼠骨密度及骨强度的影响。方法：大鼠分别按剂量150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg连续灌胃给药90 d,使用双能X线骨密度扫描仪测量大鼠骨密度后,处死取股骨测量骨9骼强度。结果：二苯乙烯苷各剂量组均能增加髂骨段的骨密度,增加髂骨段和肱骨段的骨矿重量和骨矿面积;显著增加骨折力与骨碎力。结论：二苯乙烯苷不仅能够增强骨密度,提高单位面积骨矿的含量及骨矿在组织中的含有面积,增强骨组织对于外力作用的抵抗能力,提高结构韧性与结构强度,为临床有效预防并改善骨质疏松症提供实验依据。     

二苯乙烯苷对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞外氨基酸, 细胞内钙离子浓度的影响

目的: 观察二苯乙烯苷(TSG)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨相关机制。 方法: 以SH-SY5Y细胞为研究对象,以100 μmol ·L^-1 6-OHDA建立SH-SY5Y细胞损伤模型,以浓度6.25,12.5,25,50,100,200 μmol ·L^-1 TSG作用损伤的SH-SY5Y细胞,另设空白组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,观察不同浓度的TSG对其的保护作用,激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子浓度的变化,高效液相-荧光法检测上清液中兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu),抑制性氨基酸γ-氨基丁酸(GABA)含量。 结果: 与空白组比较,模型组细胞存活率降低,游离钙明显增多(P<0.01),细胞外Glu及GABA浓度明显升高(P<0.01);与模型组比较,TSG预处理24 h可以改善6-OHDA造成的细胞存活率的下降,其中12.5 μmol ·L^-1的细胞保护作用最为明显(P<0.05),明显降低内游离钙含量,明显降低细胞外Glu及GABA浓度(P<0.05,P<0.01),TSG对其有明显的抑制作用。 结论: TSG可能通过减轻钙超载及兴奋性毒性对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞起到保护作用。     

二苯乙烯苷对脑缺血再灌注大鼠神经生长因子表达及神经细胞凋亡的影响

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对缺血再灌注大鼠的神经保护作用及分子机制。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,再灌注后6 h2、4 h4、8 h、7 d观察动物神经行为学变化并评分,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡;免疫组化法检测神经生长因子(NGF)蛋白表达。结果神经功能评分显示模型组各时间点均有明显的神经功能缺损症状,除6 h时间点外,两个剂量TSG治疗组其余各时间点神经功能评分明显低于模型组,差异显著(P0.05);与模型组相比,除7 d时间点外,两个剂量TSG组其余各时间点凋亡细胞数均减少,差异非常显著(P0.01);与模型组相比,两个剂量TSG组各时间点NGF表达均升高,差异非常显著(P0.01)。结论 TSG能够增加脑缺血再灌注大鼠缺血周边区NGF蛋白表达,拮抗神经细胞凋亡,改善神经功能。     

韦茎百合根茎中的1，2-二苯乙烯苷和2-芳基苯并呋喃苷

据报道,从生长于埃及西奈地区的百合科植物韦茎百合(Schoenocaulon officinale)中分离出的绿藜芦生物碱具有杀虫和抗高血压活性。本次从其根茎中分离出2个新的1,2-二苯乙烯苷(1、5)、1个新的2-芳基苯并呋喃苷(8)和5个已知化合物(2～4、6、7)。