一株黏液型沙门菌的鉴定与分析

目的对住院患者血液分离的一株黏液型沙门菌进行多种方法的鉴定及血清凝集试验,以期将该菌准确鉴定到种。方法采用多种鉴定方法,如西门子Micro Scan Walk Away 96 plus全自动细菌鉴定/药敏分析仪,API 20E,VI-TEK MS,16S r RNA测序法对该菌进行鉴定。结果多种鉴定方法结果均为沙门菌属,但血清凝集试验一直为阴性。结合本菌菌落呈黏液型可能凝集反应不典型的特点,采用多次传代恢复到非黏液型菌落后出现凝集反应,最后鉴定为猪霍乱沙门菌。结论黏液型沙门菌表面黏液状的物质会极大的干扰血清凝集试验,可能会导致临床鉴定错误,有条件实验室最好用16S r RNA进行更加准确的菌株鉴定。     

从粪便中检出一株基桑加尼沙门菌

<正>2007年10月,我室从一例腹痛患者的粪便中分离出一株基桑加尼沙门菌,该菌经形态、生化、血清学证实为基桑加尼沙门菌(Salmonella Kisangani)。     

96株沙门菌血清学鉴定和药敏试验结果

目的对沙门菌进行血清学鉴定,并总结分析沙门菌对不同抗菌药物的药敏试验结果及耐药情况。方法对我地区2008年12月至2010年2月分离的96株沙门菌进行血清学鉴定,并对其对不同抗菌药物药敏试验结果及耐药性进行数据处理。结果通过位相变异法12株菌株第2相H抗原凝集均呈阳性,分别鉴定出山夫登堡沙门菌33株、鼠伤寒沙门菌12株、德尔卑沙门菌25株、猪霍乱沙门菌8株、阿贡纳沙门菌2株、汤卜逊沙门菌2株和伦敦沙门菌1株、科鲍尔沙门氏菌、吉韦沙门氏菌和戈尔查沙门氏菌各1株。沙门菌对头孢噻肟的耐药率为0,而对环丙沙星、氨曲南耐药率仅仅为6.25%、9.37%,但对链霉素的耐药率最高,达63.54%,应引起重视。结论须提高对医院感染的监测,及时掌握细菌耐药的最新动态,以避免抗菌药物的滥用,为合理使用抗生素提供依据。     

沙门菌食物中毒论述

引起食物中毒的沙门菌属主要是鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌和猪霍乱沙门菌。此外，还有纽波特沙门菌、病牛沙门菌、都柏林沙门菌、山夫顿堡沙门菌、汤卜逊沙门菌、凯桑盖沙门菌、德尔卑沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、斯坦利沙门菌、鸭沙门菌、幕尼黑沙门菌等；，沙门菌在温度20～37℃繁殖最快，在水中可生存2—3周，在粪便中可生存1—2个月，在尘埃中可生存80天，在冰冻土壤中可过冬，     

从骨髓标本中分离出一株布里丹沙门菌的报告

本地区首次从骨髓标本中分离出一株布里丹沙门菌，疑患者为无症状携带者或院内感染，提示基层医疗机构的医护人员应严格按照无菌技术操作，尽可能避免一切可能引起感染的机会；基层医疗单位应加强区域间，内合作，发挥优势。更好地为人民群众的健康服务。     

沙门菌基因突变株的构建方法研究

目的研究沙门菌基因突变株构建的方法,为利用基因工程技术对细菌进行遗传性状改造,深入研究沙门菌防治手段提供工具。方法选用不同感受态细菌培养时间、培养基、感受态细胞浓度和电击参数等条件,以小分子质粒pMDT—GFP电转化受试菌,通过计算转化效率确定优化的电转条件。在此基础上用大分子质粒pGBM15l—spvB电转化受试菌,再以蔗糖诱导同源重组,筛选突变株。结果以含15g／LNaCl的高渗LB培养基培养细菌至A600为0．3,制备浓度为1010cfu／ml的感受态细胞,在参数为2．5kV、400Q、50txF条件下,小质粒pMDT—GFP电转鼠伤寒沙门菌可获得高转化效率。以往难以转化的大质粒pGBM151-spvB在该条件下成功获得转化子,进而成功构建突变株。结论上述方法能用于高效构建沙门菌基因突变株。     

112株甲型副伤寒沙门菌药敏分析

目的了解本地区甲型副伤寒沙门菌对抗生素的药敏情况,以进一步指导临床医生合理用药,提高甲型副伤寒防治水平。方法对2002年8月至2004年8月我院分离112株甲型副伤寒沙门菌药敏结果进行回顾性分析。结果112株甲型副伤寒沙门菌中检出耐药菌株101株(90.1%),大多数菌株呈多重耐药。耐2种~4种抗生素有68株(67.3%),耐5种及5种以上抗生素有24株(23.8%)。甲型副伤寒沙门菌对环丙沙星的耐药率为4.5%,对亚胺培南和美罗培南的敏感率均为100%。结论2年内甲型副伤寒沙门菌耐药率呈上升趋势,建议临床医生在药敏检测结果指导下用药。氟喹诺酮类抗生素可作为本地区治疗甲型副伤寒沙门菌首选药物。     

192株志贺菌属和76株沙门菌属菌群菌型分布及耐药性分析

目的:了解我院志贺菌属、沙门菌属流行菌株类型和药物敏感性特点.方法:应用SS和XLD培养基对我院2007年肠道门诊急性腹泻患者粪便标本进行志贺菌属、沙门菌属分离培养,可疑菌株进行生化和血清学鉴定,并采用K-B纸片法对分离菌株进行药物敏感试验.结果:2007年从约1600份标本中分离出192株志贺菌属.其中福氏志贺菌29株(15%),宋内志贺菌163株(占85%);沙门菌属76株,其中D群54株(71%),优势血清型为杜伯林沙门菌;沙门菌对左氧氟沙星、头孢曲松、氯霉素的敏感性较高,敏感率≥195%,复方新诺明、氨苄西林次之.宋内志贺菌和福氏志贺菌对美国医学实验室抗菌药物敏感试验执行标准(CLSI)[1]中推荐的3种药物中的复方新诺明、氨苄西林敏感率均较低(6.7%～25.8%),而对左氧氟沙星的药敏结果差别也较大:宋内志贺菌的敏感率较高(≥95.7%),而福氏志贺菌的敏感率仅为79.4%.结论:我院2007年肠道门诊就诊患者中,分离志贺菌属以宋内志贺菌为主,福氏志贺菌次之.沙门菌属以D群为优势菌群,优势血清型为杜伯林沙门菌.宋内志贺菌和福氏志贺菌对抗菌药物的药敏结果差别较大,临床医师应根据菌群选择抗菌药物.     

肉鸡胴体中沙门氏菌的分离鉴定及多重耐药谱研究

目的:为了解肉鸡胴体中沙门氏菌的污染状况?多重耐药状况及耐药程度,对样品中的沙门氏菌进行分离鉴定和药敏试验研究?方法:根据GB/T 4789—2008对沙门氏菌进行分离鉴定,采用微量肉汤稀释法测定分离株的耐药性?结果:肉鸡胴体沙门氏菌的检出率高达34.8%;样品中分离的沙门氏菌血清型主要为奥尔巴尼型(29.6%)和印第安纳型(50.7%);药敏试验显示,大多数沙门氏菌至少对3种以上的抗生素产生耐药,耐3~7种药物的有24株(33.8%),耐8~12种药物的有19株(26.8%),耐13~16种药物的有26株(36.6%);分离株对抗生素的耐药情况是:萘啶酸(100%)?磺胺嘧啶(98.6%)?氨苄青霉素(97.2%)?复方磺胺甲恶唑(85.9%)?四环素(85.9%)和阿莫西林/克拉维酸(84.5%)?结论:肉鸡胴体中沙门氏菌的污染现象严重,沙门氏菌耐药或多重耐药现象十分普遍,未来应加强对鸡胴体中沙门氏菌感染及耐药的监测?     

表达幽门螺杆菌过氧化氢酶的无抗性减毒鼠伤寒沙门氏菌株的构建

目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)过氧化氢酶的无抗性减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗。方法采用缺失腺苷酸环化酶(△cya)、环腺苷酸受体蛋白(△crp)及天门冬氨酸β-半醛脱氢酶(△asd)的鼠伤寒沙门菌(X4072)作为宿主,将编码过氧化氢酶的基因CAT插入Asd 的组成型表达载体pYA248,通过两次转化引入宿主菌,构建表达过氧化氢酶基因平衡致死的减毒鼠伤寒沙门重组菌X4072(pYA248-CAT)。采用桥联法ELISA测定X4072(pYA248-CAT)培养上清液和裂解上清液中过氧化氢酶的抗原性,参照Meacock的方法及重组菌生长曲线的测定来确定重组菌株的稳定性,通过C57BL/6小鼠口服测定半致死量来确定重组菌的安全性。结果成功构建了表达过氧化氢酶的减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株X4072(pYA248-CAT)。桥联法ELISA测定表明重组菌X4072(pYA248-CAT)培养上清中过氧化氢酶的含量高于菌体裂解液;重组菌pYA248-CAT在没有选择压力的情况下培养25代,随机挑选的重组菌全部都能生长,且在ELISA测定过氧化氢酶抗原时均显阳性;重组菌的生长曲线测定表明,X4072(pYA248)和X4072(pYA248-CAT)的生长状态基本一致。口服重组菌株X4072(pYA248-CAT) 1.0×1010 cfu,30 d后C57BL/6存活率仍为100%。结论成功构建了表达过氧化氢酶的无抗性的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗X4072(pYA248-CA     

沙门菌质粒对细菌生物膜形式的影响

目的研究伤寒沙门菌质粒pRST98对生物膜形成的影响。方法将携带pRST98的野生型伤寒沙门菌于30℃和37℃培养3 d,用半定量法确定生物膜形成的适宜温度。将稀释的菌液于30℃分别培养12 h、1 d、2 d、3 d、4 d和5 d,用半定量法确定生物膜成熟的时间。分别用携带pRST98的野生型伤寒沙门菌,消除pRST98的突变株及pRST98的回补株建立生物膜模型,用结晶紫染色法,半定量法和扫描电镜观察三种株受试菌形成生物膜的能力。结果在30℃培养时细菌生物膜形成能力高于37℃,此温度为沙门菌生物膜形成的适宜温度;3 d时生物膜趋于成熟;野生株和回补株形成生物膜的能力显著高于突变株。结论伤寒沙门菌质粒pRST98与该菌生物膜形成密切相关。     

实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌方法的建立和应用

目的建立丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,用于沙门菌属内的分型鉴定。方法根据GenBank公布的丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR检测方法。结果检测体系灵敏度高,纯DNA和菌液的最低检出限分别可达10fg和20CFU/反应体系;特异性好,对71株细菌的检测符合率达100%。20株沙门菌采取盲号模拟血培养标本进行血培养检测及鉴定,检出5株丙型副伤寒沙门菌和4株猪霍乱沙门菌,与试验的菌株相符。70份食品中用实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌均为阴性,而用传统方法分离培养未检出。结论建立的实时PCR检测方法可以快速、特异、灵敏地检测出丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌。     

2005-2009年贵州省伤寒和副伤寒沙门菌耐药性分析

目的分析贵州省伤寒和甲型副伤寒沙门菌的耐药状况,为临床用药及防控提供依据。方法采用改良K-B法对伤寒、甲型副伤寒沙门菌株进行药物敏感试验。结果贵州省9个市(州、地)26个县(区)的113株伤寒沙门菌和518株甲型副伤寒沙门菌对10种抗生素进行药物敏感性测定。其中伤寒沙门菌除对C IP不耐药,对其余9种抗生素均有不同程度的耐药,甲副沙门菌仅对CFT、NAL、SMZ有不同程度耐药,耐药率达0.88%~95.95%,个别地区出现了对第三代头孢类药的多重耐药株。结论贵州省伤寒、甲副沙门菌耐药情况已较为严重,尤其是多重耐药菌可能会造成伤寒和甲型副伤寒的流行或暴发。加强耐药性监测,指导临床合理用药,对预防控制伤寒和甲型副伤寒具有重要意义。     

都柏林沙门菌肝脓肿1例报告

1 病例资料患者,男性,58岁,因主诉"间断乏力12年,发现肝占位1个月"入院.患者于2000年开始感觉全身乏力,诊断为病毒性肝炎(活动性乙肝).2006年再次入院,查CT示肝硬化,腹水.给予保肝利尿等对症治疗后,患者好转出院.2010年患者在当地医院查腹部CT,结果示:肝S2、S5占位,疑为肝癌.后于我院查腹部MRI:肝右叶前上段以及肝左叶外上段占位,考虑肝癌、腹水、脾大.     

南通市沙门菌毒力基因分布特征的初步研究

目的对南通市分离的沙门菌进行毒力基因检测,了解其携带毒力基因的情况,探索毒力基因用于沙门菌分型的可能性。方法运用生物化学、血清凝集等实验对实验菌株进行鉴定,使用多重引物PCR方法对经鉴定的沙门菌进行毒力基因检测。结果11个被检测的毒力基因invA、orgA、prgH、spaN、tolC、sipB、sitC、pagC、msgA、spiA及iroN在所有菌株中都存在;另5个基因,在菌株中的存在情况不同,lpfC和sifA基因在阿贡纳和德尔卑中存在更广泛（80%、90%和73%、77%）;cdtB、pefA和spvB基因在实验菌株中的检测阳性率不高,并且只存在于少数几个血清型（埃森和德尔卑）。结论南通市分离的沙门菌携带多种毒力基因,且菌株之间有一定差异,毒力基因用于基因分型有待于进一步探讨。     

一起由两种型别沙门菌混合感染引起暴发疫情的病原特征

目的 对一起由科瓦利斯沙门菌和鼠伤寒沙门菌混合感染引起的食源性暴发的病原体进行耐药分析和分子分型。方法 参照 GB4789.4-2010标准对可疑菌落进行生化鉴定、血清学分型及药敏试验后,进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型。结果 从两份暴发病例粪便样品中同时检出科瓦利斯沙门菌（8,20∶z4,z23∶-）2株和鼠伤寒沙门菌（4,5,12∶i∶1,2）2株。选择13种常用的抗生素进行药敏试验, 4株沙门菌均对阿米卡星和庆大霉素耐药,其中2株科瓦利斯沙门菌还同时表现出对莫西沙星和四环素耐药。2株科瓦利斯沙门菌和2株鼠伤寒沙门菌的PFGE指纹图谱分别完全一致。结论 这是一起由科瓦利斯沙门菌和鼠伤寒沙门菌混合感染所致的食源性暴发,PFGE分子分型可有效应用于食物中毒的溯源分析。