雌激素受体α免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病病人海马中分布的改变

目的 :观察雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)病人组和老年对照组海马中的分布变化。 方法 :采用免疫荧光细胞化学双标方法和激光共聚焦扫描显微镜。结果 :ERα免疫阳性星形胶质细胞主要分布在齿状回的门和海马的分子层、放射层及始层。GFAP (glialfibrillaryacidicprotein)免疫阳性细胞、ERα胞核染色的和ERα胞质染色的星形胶质细胞 (number/mm2 )在AD组的CA1均显著增加 (P分别小于 0 .0 0 1,0 .0 5 ,0 .0 5 ) ,但其ERα核着色或质着色的星形胶质细胞占GFAP免疫阳性星形胶质细胞的百分数 ,在对照组 (2 .5 6 %,n =13;16 .6 8%,n =13)和AD病人组 (2 .15 %,n =13;2 6 .0 0 %,n=13)之间无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :这些结果表明 ,在AD的发病过程中雌激素可能通过ERα介导对海马星形胶质细胞的作用。     

雌激素受体α免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病病人海马中分布的改变

目的:观察雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)病人组和老年对照组海马中的分布变化.方法:采用免疫荧光细胞化学双标方法和激光共聚焦扫描显微镜.结果:ERα免疫阳性星形胶质细胞主要分布在齿状回的门和海马的分子层、放射层及始层.GFAP(glial fibrillary acidic protein)免疫阳性细胞、ERα胞核染色的和ERα胞质染色的星形胶质细胞(number/mm2)在AD组的CA1均显著增加(P分别小于0.001,0.05,0.05),但其ERα核着色或质着色的星形胶质细胞占GFAP免疫阳性星形胶质细胞的百分数,在对照组(2.56%,n=13;16.68%,n=13)和AD病人组(2.15%,n=13;26.00%,n=13)之间无显著差异(P＞0.05).结论:这些结果表明,在AD的发病过程中雌激素可能通过ERα介导对海马星形胶质细胞的作用.     

2004/大鼠心内神经节雌激素受体和神经生长因子的共存

用免疫细胞化学双重标记技术研究雌激素受体（ER）和神经生长因子（NGF）的表达，证实它们在心内神经节共存的可能性。结果显示切片上观察到 3种细胞：(1) ER单标细胞，胞核呈棕褐色；(2 ) NGF单标细胞，胞浆呈红色；(3) ER / NGF双标细胞，胞核棕褐色，胞浆为红色。双标细胞占全部阳性标记细胞的 30%～40%。　这些结果提示ER和NGF可共存于同一大鼠心内神经节细胞，提示雌激素和NGF在维持心内神经节的结构和功能方面存在复杂的交互作用。     

雌激素受体β对阿尔茨海默病大鼠海马内炎症反应及淀粉样β蛋白的沉积的影响

目的研究雌激素受体β(ERβ)对阿尔茨海默病大鼠海马内炎症反应及淀粉样β蛋白沉积的影响,并探讨其可能的机制。方法β淀粉样蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型,并将模型分为对照组、ERβ组和shRNA组。对照组不做任何处理,ERβ组和shRNA组大鼠分别通过脑室内注射载有雌激素受体β基因或shRNA的慢病毒质粒。通过Morris水迷宫检测各组大鼠行为学,Western blot检测各组大鼠脑组织内Akt及β淀粉样蛋白表达水平,qRT-PCR检测TNF-α和IL-1βmRNA表达,并通过免疫荧光染色检测Aβ的表达。结果ERβ组大鼠记忆能力明显高于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05),ERβ组大鼠海马内Akt含量明显高于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05),并且ERβ组大鼠海马内IL-1和TNF-αmRNA以及β淀粉样蛋白含量明显低于对照组和shRNA组大鼠(P<0.05)。结论过表达ERβ在不依赖雌激素的情况下可减轻AD大鼠海马内炎症反应和β淀粉样蛋白的沉积,改善AD大鼠行为学的变化,其神经保护作用可能是通过激活Akt途径实现。     

阿尔茨海默病海马CA1区p75NTR和磷酸化tau蛋白神经元的定量观察

目的观察阿尔茨海默病(AD)海马CA1区p5NTR的表达与磷酸化tau蛋白的关系.方法利用组织化学和免疫细胞化学方法分析由荷兰脑库提供的10例女性AD患者及年龄、性别等与之匹配的10例健康意外死亡对照者的脑组织标本海马CA1区神经元总数、p75NTR神经元数目的差异及AD患者p75NTR和Alz-50共存.结果AD患者海马CA1区神经元总数明显低于对照组,但p75NTR神经元占总神经元的百分比明显高于对照组(P值分别为0.0002、0.001);AD海马CA1区Alz-50阳性神经元(个/mm2)为87.5±29.2,p75NTR和Alz-50双标神经元为76.4±26.6,后者占前者的百分比为86.6%±5.0%,二者在CA1区的分布呈正相关(r=0.79、P=0.006).结论AD患者海马CA1区p75NTR主要产生死亡信号,参与AD神经病理的形成.     

血栓素A_2受体在正常大鼠脑内的分布定位

目的探讨血栓素A2受体(TP)在正常大鼠脑内的表达分布特点。方法正常成年SD大鼠脑组织冰冻切片,TP免疫荧光染色,TP/神经核蛋白(Neu N),TP/胶质纤维酸性蛋白(GFAP),TP/谷氨酸脱羧酶67(GAD67)免疫荧光双标染色,观察TP在脑内分布表达情况。结果 TP免疫阳性产物主要分布在扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘和小脑的浦肯野细胞层;免疫荧光双标结果显示TP与神经元胞核特异性标记物Neu N共存,但不与星形胶质细胞标记物GFAP共存;同时,所有TP阳性神经元表达γ氨基丁酸(GABA)能神经元标记物GAD67。结论 TP表达于大鼠扣带回皮质、皮层Ⅲ~V层、下丘脑和小脑的浦肯野细胞层,主要分布于GABA能神经元,提示TP可能参与了大鼠大脑GABA能神经元的功能调节和病变过程。     

一种稳定阿尔茨海默病细胞模型的建立方法

目的旨在应用不同浓度Aβ_(1-42)诱导新生SD大鼠海马神经元,建立稳定阿尔茨海默病细胞模型。方法分离并培养新生24 h内SD大鼠原代海马神经细胞;分别加入不同浓度Aβ_(1-42)诱导,诱导后采用MTT法观察细胞活力,选取理想Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞作为阿尔茨海默病细胞模型;通过免疫荧光技术(IF)鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)在海马神经元细胞的表达。结果 Aβ_(1-42)诱导后的海马神经细胞存活率下降,可导致海马神经元细胞胞体变形、收缩和细胞膜完整性破坏,胞间网络结构消失或断裂,细胞外基质乱不清,神经元大量凋亡;Aβ_(1-42)诱导后的海马神经细胞存活率下降与Aβ_(1-42)浓度成线性关系;加入不同浓度Aβ_(1-42)(0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L)后实验各组细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(98.55±1.42)%、(90.37±3.25)%,(66.34±2.76)%、(53.23±3.41)%和(41.55±2.37)%,其中20μmol/L组与0μmol/L组相比P<0.05,30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L组与对照组相比P<0.01。结论 Aβ_(1-42)可导致海马神经元大量凋亡;Aβ_(1-42)浓度为20μmol/L诱导的SD大鼠海马神经元可作为理想的阿尔茨海默病细胞模型。     

雌激素对海人藻酸致大鼠皮层和海马雌激素β受体表达的影响

目的观察添加雌激素后海人藻酸(Kainicacid,KA)致癎大鼠皮层和海马的雌激素β受体(ER-β)的变化。方法用荧光免疫组化法。结果ER-β免疫阳性细胞广泛分布于大鼠的皮层、海马、下丘脑以及杏仁核区域,主要位于细胞核。单纯添力加雌激素(17-βestradiol,E2)组、海人藻酸致癎(KA)组、添加雌激素后海人藻酸致癎(E2加KA)组海马的ER—β免疫阳性细胞数较对照组(OIL组)明显减少(P<0．05),以DG(齿状回DentateGyrus)区的变化最明显；皮层(Conex)的ER—β免疫阳性细胞表达变化不显著。E2+KA组的ER—β免疫阳性细胞与KA组相比减少,(P<0．05)。结论大剂量雌激素下调ER—β免疫阳性细胞的表达,且此作用有区域性。添加雌激素后致癎,ER—β免疫阳性细胞下调更显著,雌激素可能是通过下调DG区ER—β的表达加重癫癎的发作。     

核转录因子-κB在局部脑缺血及再灌注损伤后大鼠脑细胞中的表达及N-乙酰半胱氨酸的干预作用

目的　研究核转录因子- κB(nuclearfactorkappaB, NF -κB)在局部脑缺血及再灌注中的作用及N -乙酰半胱氨酸(NAC)预处理的影响。方法　采用大鼠大脑中动脉线栓模型,分为假手术组、6h及24h缺血再灌注组、相应NAC干预组。应用免疫组化法观测NF -κB的表达情况,红四氯氮唑染色测定各组脑梗死体积,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果　(1)缺血及再灌注后NF- κBp65明显从胞质转移到胞核。NAC干预组[缺血6h及24h再灌注组p65阳性细胞率分别为( 0 .462% ±0 .022% )和( 0 .452% ±0 .015% ) ]较相应生理盐水组[ (0. 563%±0 .028% )和(0 .554%±0 .013% ) ]p65核表达减少(P<0 .01)。(2)缺血6h及24h再灌注NAC干预组梗死体积百分比分别为(8 .39%±2 .54% )和(24. 54%±6 .02% )。相应生理盐水组为(15 .50%±4 .18% )和(32. 22%±3 .99% )。缺血24h组较缺血6h组梗死灶增大,使用NAC各组较注射生理盐水组梗死体积明显缩小(P<0. 01)。(3)NAC预处理组较生理盐水组凋亡细胞减少(P<0 .01)。结论　局灶脑缺血及再灌注能使NF- κBp65活化,参与脑缺血及再灌注损伤。NAC可抑制p65表达,减轻神经损伤,具有脑保护作用。     

不同形式Aβ对老年痴呆细胞模型中炎性因子和神经型尼古丁乙酰胆碱受体表达的影响

目的 研究Aβ寡聚体(Amyloid-beta oligomers,Aβoligomers,AβOs)在阿尔茨海默氏病(Alzheimer Disease,AD)患者中的表达情况,用不同聚集形式的Aβ处理拟老年痴呆细胞模型中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosjs factor-α,TNF-α)、炎性趋化因子单核细胞趋化蛋白1(Monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1/CCL-2),巨噬细胞炎性蛋白-1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α/CCL-3)及神经型尼古丁乙酰胆碱受体(Neuronal nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)的表达.探讨炎性因子及nAChRs与Aβ寡聚体在阿尔茨海默氏病发病机制中的作用.方法 应用免疫组织化学方法检测AD患者(海马结构、颞叶及额叶皮质)Aβ寡聚体的表达.Elisa检测拟老年痴呆细胞模型中各组细胞TNF-α、MCP-1、MIP-lα的表达.Western blotting检测拟老年痴呆细胞模型中各组细胞α3、α7nAChRs的表达.结果 AβOs主要在神经细胞内表达,齿状回颗粒细胞、海马CA1-CA4锥体细胞及内嗅区皮质各层神经元胞体及突起内均见棕黄色粒状阳性表达,此外,小血管壁也见AβOs阳性表达.与老龄对照者相比,AD患者海马各区锥体细胞及内嗅区皮质各层神经元AβOs表达明显增强,半定量分析显示平均灰度值显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).采用1mol/L浓度的Aβ1-42单体、纤丝体及寡聚体处理SH-SY5Y细胞48h后与对照组相比,Aβ寡聚体处理组α3、α7nAChRs蛋白表达水平明显降低,炎性因子明显升高(P＜0.05).结论 Aβ寡聚体能升高TNF-α、MCP-I、MIP-Iα,加速Aβ沉积,形成恶性循环的慢性炎症过程,降低神经型尼古丁乙酰胆碱受体α3、α7nAChRs的表达,说明AD发病机制中可溶性、呈寡聚状态的AβOs可能是引起AD神经元功能失调的主要神经毒性形式.     

Aβ_(1-40)海马注射对大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)在 β淀粉样蛋白 (Aβ)神经毒性及阿尔茨海默病 (AD)病理机制中的作用。方法　应用免疫组化方法 ,观察大鼠海马齿状回Aβ1 4 0 注射后神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)和诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)表达变化。结果　正常大鼠海马齿状回区含nNOS神经元计数为 8 96± 0 35个 /视野 ;生理盐水注射后局部含nNOS神经元无明显变化 (8 97± 0 2 9个 /视野 ) ;Aβ1 4 0 注射后 ,注射区周围含nNOS神经元数目显著减少 (2 98± 0 2 4个 /视野 )。正常及生理盐水注射组脑内未见iNOS表达 ;Aβ1 4 0 注射后 2d、10d和 30d ,注射区持续出现大量含iNOS的胶质细胞 (主要为星形胶质细胞 ) ,反应面积分别为 0 90 5± 0 0 82、0 96 2± 0 16 1、0 935± 0 12 5mm2 。结论　Aβ1 4 0 海马注射可损伤局部含nNOS神经元及诱导胶质细胞iNOS表达 ,NOS在Aβ神经毒性和AD发病中有重要作用。     

烟碱型乙酰胆碱受体在离体海马小胶质细胞上的表达与定位

目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)在体外培养海马小胶质细胞上的表达和定位.方法 取新生SD大鼠的海马组织,进行胶质细胞的混合培养,然后分离纯化小胶质细胞,采用免疫荧光染色检测CD11b/c进行小胶质细胞的鉴定;采用RT-PCR和免疫荧光双标分别检测α7-nAChR在小胶质细胞中的表达和定位.结果 免疫荧光染色显示分离纯化的细胞表达小胶质细胞特异性抗体CD11b/c;RT-PCR能扩增出长度为450 bp的α7-nAChR目的 条带,免疫荧光双标检测显示小胶质细胞CD11b/c和α7-nAChR染色阳性,分别呈红色和绿色荧光,叠加后呈棕黄色,且细胞膜荧光信号较强.结论 α7-nAChR在体外培养的海马小胶质细胞中能正常表达,定位在细胞膜的功能性α7-nAChR较丰富.     

脑缺血对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响及其机制探讨

目的 探讨脑缺血对阿尔茨海默病(AD)病程进展的影响及其机制.方法 采用大鼠海马注射凝聚态β-淀粉样蛋白(Aβ)1-40建立AD模型,再于海马内注射ET-1建立脑缺血条件,观察脑缺血后AD样大鼠认知功能以及海马内Aβ沉积、神经元丢失和异常磷酸化tau表达的变化;采用免疫组化、原位杂交和RT-PCR法检测海马内星形胶质细胞数量和IL-1、TNF-α表达的变化.结果 脑缺血后AD样大鼠的认知功能明显下降,海马内Aβ沉积增加,神经元丢失增加,异常磷酸化tau表达增加.星形胶质细胞的数量以及IL-1和TNF-α的表达显著增加(均P＜0.01).结论 脑缺血加重了AD样大鼠的认知功能障碍和海马病理损伤,显著增加的星形胶质细胞及IL-1和TNF-α的表达参与了这一过程.防治脑缺血和抗炎治疗可能成为减缓AD进展的新途径.     

GABA_A受体激动剂对AD模型配体门控氯通道的作用

目的观察并分析GABA_A受体激动剂蝇蕈醇对GABA激活的配体门控氯通道的作用,为寻找新的抗阿尔茨海默病(AD)药物提供实验依据。方法 Aβ_(1-42)诱导海马神经细胞作为AD细胞模型;通过膜片钳(Patch clamp)技术在大鼠海马神经元上记录配体门控氯通道瞬时外向电流,采用非特异性氯通道阻断剂(NFA)和无GABA的细胞外液确定该电流成份为瞬时外向氯电流;通过膜片钳技术观察GABA_A受体激动剂蝇蕈醇对于在大鼠海马神经元上记录瞬时外向电流的作用;向AD细胞模型中加入GABA_A受体激动剂,采用MTT观察各组细胞活力。结果加入GABA_A受体激动剂蝇蕈醇后GABA激活氯电流强度增加;加入浓度为1 mmol/L蝇蕈醇的AD模型细胞组存活率为(91.32±3.73)%,略高于未加入蝇蕈醇的模型细胞组,两组对比P0.05。结论 GABA_A受体激动剂蝇蕈醇对于AD细胞模型具有保护作用。     

重症肌无力患者糖皮质激素疗效与其受体α和β表达水平的关系

目的分析重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMC)胞质和胞核中糖皮质激素受体(GR)α和β表达与糖皮质激素(GC)疗效的关系,并探讨GC治疗MG疗效不同的机制。方法 收集24例MG患者和8名健康对照,根据GC疗效将MG患者分为GC敏感组、GC依赖组和GC抵抗组,每组各8例,应用Westernblot法检测MG患者GC治疗前后PBMC胞质和胞核蛋白GRtα和GRβ表达水平,并分析其与GC疗效的关系。结果正常情况下GRα主要表达于PBMC胞质中,GRβ主要表达于PBMC胞核中;GC抵抗组MG患者PBMC胞质中GRα表达水平降低(P0.05),而GC依赖组MG患者PMBC胞核中GRβ表达增高(P0.01)。GC治疗后,GC依赖组MG患者GRα的核移位率明显低于GC敏感组和GC抵抗组(P0.01)。结论 GC抵抗型MG与其PBMC胞质中GRα低表达相关,GC依赖型MG与其PBMC胞核GRβ高表达相关,并可能与由此所致的GRα核转位降低有关。     

大鼠免疫细胞及器官的固有胆碱能系统

目的探讨大鼠免疫细胞及免疫器官“固有胆碱能系统”的存在状态。方法用免疫荧光双标记、流式细胞技术及免疫组织化学技术,检测烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位(nAChRα7)和胆碱乙酰转移酶(ChAT),乙酰胆碱酯酶(AChE)在健康大鼠外周血CD4+T细胞、腹腔巨噬细胞、关节滑膜巨噬细胞及腹腔淋巴结的表达状态。结果nAChRα7、ChAT及AChE在大鼠免疫细胞及免疫器官均有阳性表达。腹腔巨噬细胞、淋巴结中的巨噬细胞和关节滑膜巨噬细胞表达最丰富,而腹腔淋巴结中的淋巴细胞仅有微弱表达;外周血CD4+T细胞有部分表达(nAChRα7 15.88%±0.753%,ChAT 23.09%±0.671%)。结论免疫活性细胞及免疫器官普遍存在“固有胆碱能系统”,淋巴细胞与巨噬细胞在机体固有胆碱能系统中扮演不同角色。     

阿尔茨海默病患者皮肤基底细胞微管的初步观察

目的　观察阿尔茨海默病 (Alzheimer′sdisease ,AD)患者皮肤基底细胞微管结构的变化。方法　用透射电镜对 7例AD患者背部皮肤组织的超微结构进行观察 ,并进行定量分析。结果　对照组基底细胞的胞核大 ,卵圆形 ,占细胞的大部分 ,胞质内含有丰富的游离核糖体 ,线粒体较多无肿胀 ,粗面内质网较少 ,高尔基复合体不发达 ,胞质中有较多的黑素颗粒 ,可见较丰富的微管 ,其横切面为中空的圆形或椭圆形结构 ,纵切面为中空而无分支的圆柱状结构 ,常分布于胞核周围 ,并呈放射状伸向细胞质。AD组微管较对照组减少 ,每个基底细胞可观察到 0～ 3个横切微管 ,纵切微管和微丝少见 ,微管偶有肿胀 ;细胞内核糖体、线粒体数量减少 ,线粒体肿胀。定量分析结果显示 ,对照组皮肤基底细胞微管的数量为 (3.6 2± 0 .6 7)个 /细胞 ,而AD组为 (1.0 6± 0 .98)个 /细胞 ,差异显著 (P <0 .0 1)。结论　AD患者皮肤基底细胞的微管存在结构的破坏 ,其数量明显减少 ,这种改变可能间接反映神经组织的病理改变 ,并有助于AD的诊断。     

不同底物对Sombati癫癎细胞模型整合素α2表达的影响

目的探讨不同底物对经体外培养的Sombati癫癎细胞模型海马神经元整合素α2表达水平的影响及意义。方法以层黏连蛋白和多聚L-赖氨酸作为底物于体外培养新生小鼠海马神经元,至第7天时行神经元纯度鉴定;无镁细胞外液继续培养3h后制备Sombati癫癎细胞模型,逆转录-聚合酶链反应检测不同处理组海马神经元整合素α2mRNA相对表达变化。结果模型制备前,经体外培养至第5天的层黏连蛋白组神经元胞体增大、饱满,突起连接紧密,神经网络形成,多聚L-赖氨酸组则体外培养至第7天时方出现上述表现;模型制备后24h,不同处理组神经元均可见迁移现象和神经网络“网格”样改变,但不同处理组神经元形态无明显差异。以整合素α2与β肌动蛋白光密度值之比值代表整合素α2mRNA相对表达量,多聚L．赖氨酸组、层黏连蛋白组和多聚L-赖氨酸＋层黏连蛋白组分别为0．25±0．03、0．37±0．05和0．48±0．09,后两组整合素α2mRNA表达水平高于多聚L-赖氨酸组,且差异有统计学意义（P=0．005,0．000）。结论与多聚L-赖氨酸组相比,层黏连蛋白对经体外培养的原代神经元贴壁及轴突连接具有较强的促进作用。添加外源性层黏连蛋白可诱导Sombati癫癎细胞模型海马神经元整合素α-mRNA表达上调。     

钙／钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ-α在Alzheimer病老年斑的表达

目的　 探讨钙 /钙调素依赖的蛋白激酶Ⅱ (CaMKⅡ ) α在Alzheimer病 (AD)老年斑形成中的作用。方法　 选择 10例女性AD患者及 10例年龄、性别等匹配的正常老年人的海马切片 ,进行CaMKⅡ α免疫组织化学和CaMKⅡ α与β 淀粉样蛋白 (Aβ)或胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)双标免疫荧光组织化学研究。 结果　CaMKⅡ α正常分布于神经元胞质、轴突 ,但在AD患者的海马 ,CaMKⅡ α沉积于神经元外并形成大小不等的斑块样结构。其中 ,大部分CaMKⅡ α斑块样沉积存在于主要由Aβ组成的老年斑中 ,只有那些很小的CaMKⅡ α沉积斑不含Aβ。在弥散型斑块中 ,CaMKⅡ α沉积撒落在未融合的Aβ沉积中。在经典型斑块中 ,交互出现的CaMKⅡ α和Aβ沉积围绕着均质融合的Aβ核心。老年斑周围反应增生性星形胶质细胞不过度表达CaMKⅡ α ,且与CaMKⅡ α沉积间无明确关联。结论　CaMKⅡ α沉积可能参与了AD患者老年斑形成 ,星形胶质细胞可能不参与CaMKⅡ α沉积。     

阿尔茨海默病脑海马凋亡神经元发生率增高

通过对阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)和老年对照患者死后脑海马凋亡神经元的检测 ,探讨AD脑神经元丢失的可能机制。使用TUNEL(terminaltransferase mediateddUTP biotinnickendlabeling)法对 7例确诊的AD和 9例老年对照患者死后海马组织中的凋亡神经元进行标记 ,用生物图像分析系统对结果进行定量分析。AD和对照组间TUNEL阳性细胞数无显著性差异 ;AD组海马CA1和CA4区正常神经元数减少 ,其中CA1区减少具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;AD组海马CA1和CA4区凋亡神经元发生率高于对照组 ,其中CA1区具有显著性差异 (P <0 .0 5 )。AD组海马组织中凋亡神经元发生率明显增高 ,说明细胞凋亡可能参与了AD海马神经元退行性变的过程。