常规粉碎与超微粉碎的丹参中丹酚酸B的比较

丹参为唇形科植物丹参S a lv ia m iltiorrh izaBunge的干燥根及根茎,具有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦的作用。其主要成分为脂溶性化合物如丹参酮ⅡA等,水溶性化合物如丹参素、总酚酸等。丹酚酸B为总酚酸的主要成分,约占总酚酸的70%[1],具有改善血流循环、抗血栓、抗氧化等作用[2],临床上广泛应用于治疗心血管系统疾病。有文献报道采用75%甲醇提取丹酚酸B,回流提取30 m in即可达到峰值[3],超声提取丹参中水溶性成分20 m in时最佳[4]。超微粉碎技术采用机械或流体动力的方式,将物料颗粒粉碎至粒径小于10μm的颗粒[5],使细胞内的有效成分直…     

丹参中丹酚酸B的提取工艺研究

丹参水溶性有效成分多具有酚酸性结构,主要由丹参素,丹酚酸A、B、C、D、E等含酚羟基的化合物构成,其中丹酚酸B的量最高,为3个分子丹参素与1个分子咖啡酸缩合而成,是丹参发挥疗效作用的主要物质之一。目前研究较多的有总丹酚酸(totalsalvianolic acid)、丹酚酸A(salvianolic acid A)和丹酚酸B(salvianolic acid B)[1]。本实验针对丹酚酸B对热的不稳定性,本实验比较了水提法、超声提取法和闪式破碎提取法处理丹参样品,为进一步优化丹酚酸B的提取条件提供参考。1仪器与试剂日本岛津LC—2010A高效液相色谱仪,KQ—300VDE超声提取器(昆山…     

HPLC法测定丹参益坤口服液中丹酚酸B的含量

目的:建立丹参益坤口服波的质量标准.方法:采用HPLC法对丹参益坤口服液中丹酚酸B的含量进行测定.结果:丹参益坤口服液中丹酚酸B的含量在0.0081 -0.1628 μg的范围内,有良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为99.08％,RSD为1.27％.结论:建立了丹参益坤口服液的质量标准,该方法操作易行,稳定可靠,用于丹参益坤口服液中丹酚酸B的含量测定,可以用于该制剂的质量控制.     

HPLC法测定加味丹参饮中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量

目的:测定加味丹参饮中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:(4.6 mm×250 mm,5μm);丹参酮ⅡA:流动相为甲醇-水(75∶25);流速:1 mL·min-1;柱温:30℃;λ=270 nm;丹酚酸B:流动相:甲醇乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59);流速:1 mL·min-1;柱温:30℃;λ=286 nm。进样量:10μL。结果:丹参酮ⅡA和丹酚酸B分别在0.016-0.32μg,0.14-2.8μg内呈良好的线性关系;平均回收率分别为101.2%(RSD%=2.47%,n=5),99.6%(RSD%=2.71%,n=6)。结论:该方法准确、可靠、重复性好,可用于加味丹参饮的质量控制。     

HPLC法同时测定丹参药材中丹酚酸B、丹参酮ⅡA含量

目的：建立HPLC法同时测定丹参药材中丹酚酸B、丹参酮ⅡA含量的方法.方法：采用Waters C18 色谱柱（150mm×3.9mm,5μm）,以0.3%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL/min,丹酚酸B、丹参酮ⅡA的检测波长分别为286nm、270nm.结果：丹酚酸B、丹参酮ⅡA分离良好,两成分质量浓度与峰面积在测定范围内线性关系良好,重现性好,平均加样回收率分别为100.54%和100.58%;8批不同产地丹参药材中丹酚酸B占药材量的平均含量为5.371 7%,丹参酮ⅡA占药材量的平均含量为0.403 2%.结论：本研究所建立的HPLC法稳定可靠,简便易行,可同时用于丹参中丹酚酸B、丹参酮ⅡA的测定,为丹参质量标准的提升提供了一定的理论依据.     

HPLC法测定丹参中原儿茶醛

丹参是临床上常用的活血化瘀的要药,为唇形科植物丹参SalviamiltiorrhizaBunge的根。丹参的活性成分主要分为脂溶性和水溶性两类。其脂溶性成分主要是丹参酮、隐丹参酮、丹参酮A等。然而中医传统用药方法是用其水煎剂,即丹参的水溶性部位。所以研究丹参的水溶性成分更有意义。丹参水溶性成分主要是丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸以及丹酚酸A、B、C、D、E、F、G等。《中国药典》2000年版中对丹参仅测定丹参酮A一种成分,在《中国药典》2005年版中增加了丹酚酸B的HPLC测定,但原儿茶醛一直未做要求,该成分在制剂(丹参注射液)中作为…     

HPLC测定复方丹参降浊丸中丹酚酸B的含量

目的建立复方丹参降浊丸中丹酚酸B的含量测定方法。方法采用HPLC法测定复方丹参降浊丸中丹酚酸B含量,色谱柱:Agilent TC-C18(2)(4.6×250mm);流动相:甲醇:乙腈:甲酸:水(30:10:59:1),检测波长:286nm,柱温:35℃,流速:1.0mL·min-1。结果复方丹参降浊丸中丹酚酸B在0.28～1.40μg范围内线性关系良好,R2=0.9999,平均回收率97.7%,RSD为1.41%。结论所建立的方法准确,重现性好,专属性强,分离效果好,能有效地控制复方丹参降浊丸的质量。     

丹参药材提取液中丹酚酸B稳定性影响因素的考察

丹参水溶性酚酸类包括丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、迷迭香酸、丹参素、原儿茶醛等。药理研究表明丹参酚酸类具有抗凝、抗氧化的活性[13],其中丹酚酸B是含量最高的活性成分,有文献提示丹酚酸B的稳定性较差,其制剂工艺过程中稳定性影响因素有待探讨[4]。本实验对丹参提取液施以不同影响因素,用HPLC测定丹酚酸B的含量,考察各种因素对其稳定性的影响。1仪器,试剂与样品DIONEXSUMMIT高效液相色谱仪;丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检....     

HPLC法测定心通滴丸中丹酚酸B的含量

目的:建立测定心通滴丸中丹酚酸B含量的HPLC。方法:C18柱(4.6mm×150mm,5μm),甲醇-1.7%甲酸(40∶60),流速为1mL.min-1,检测波长为286nm。结果:丹酚酸B的线性范围为0.323～1.939mg,加样回收率为98.10%。结论:该方法简便可行,结果可靠,可用于心通滴丸中丹酚酸B的含量测定。     

HPLC法测定丹参冻干粉针中丹酚酸B的含量

目的：建立丹参冻干粉针中丹酚酸B的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定丹酚酸B的含量。流动相为：甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59）;检测波长：286nm。结果：丹酚酸B在2.2～13.2μg范围内线性关系良好;加样回收率为97.24%,RSD=1.09%（n=6）。结论：本法可用于测定丹参冻干粉针中丹酚酸B的含量。     

霍山石斛及相似种的位点特异性PCR鉴别

目的设计出霍山石斛的位点特异性鉴别引物,仅通过PCR就能对霍山石斛的真伪进行准确鉴别。方法利用石斛属植物基因库中rDNA ITS序列数据库进行同源性比较,在与霍山石斛差异较大的区段设计1对特异性引物,然后对19份石斛属植物DNA模板进行PCR扩增,阳性者即为霍山石斛正品。结果发现在退火温度为60℃时,该引物能把霍山石斛的模板从19份石斛属植物中扩增出来,而其他的石斛属植物均为阴性。结论运用位点特异性鉴别引物成功地对霍山石斛进行PCR鉴别,该鉴别反应重现性好,能在霍山石斛鉴别时发挥重要的作用,与形态学、DNA测序等鉴别方法相比,该方法具有高效、准确、简便、省时等优点。     

不同薯蓣皂苷元的盾叶薯蓣遗传关系的RAPD分析

目的从DNA水平分析鉴定不同薯蓣皂苷元盾叶薯蓣的遗传关系。方法从40个10 bp随机引物中筛选出12个引物,进行RAPD分析,应用POPGENE 1.31软件对扩增结果进行聚类分析。结果共扩增出73条DNA片段,其中多态性片段64条,占87.67%,盾叶薯蓣类型间具有明显的多态性差异。结论DNA分子多样性差异与薯蓣皂苷元量差异具有相关性,说明盾叶薯蓣的遗传基础可能对薯蓣皂苷元的形成和积累有显著的影响。     

继代周期对霍山石斛试管苗生长及培养基成分的影响

目的研究继代周期对霍山石斛试管苗长势及培养基成分的影响,确定最佳的继代周期时间。方法测定不同继代周期试管苗的株高、分蘖数、鲜质量、叶绿素量及培养基pH、含水量、含糖量的变化,并计算石斛试管苗生长所需的培养基和其他的成本。结果继代周期为40d,试管苗的株高比继代前增加了282.86%,分蘖数比继代前增加了3.5倍,试管苗的鲜质量最大,叶绿素的量趋于最大值;培养基的含水量、可溶性糖的量最低;pH<4.75,已不适合石斛试管苗的生长,石斛苗生长所需成本较低。结论40d为霍山石斛试管苗生长的最佳继代周期。     

霍山石斛生理生化性质的研究进展

石斛属(D end robium Sw.)为兰科植物,约有1 500种。我国有80种,其中药用石斛有51种。在我国传统医学中,石斛为常用药材,现代药理研究证明石斛具有抗肿瘤、抗衰老、降血糖等作用。霍山石斛是安徽省特产的药用石斛,为石斛中的上品。综述了霍山石斛的生理生化、生物学特性、有效成分等方面的研究现状。     

金钗石斛的位点特异性PCR鉴别研究

目的建立一种简便、实用的金钗石斛的DNA分子鉴别方法。方法根据金钗石斛及其他黄草类、枫斗类石斛的rDNA ITS序列数据库,寻找金钗石斛特异性的序列位点,设计专用于金钗石斛鉴别的PCR引物,用该引物在不同条件下扩增石斛属植物的模板DNA,建立只有金钗石斛具有阳性扩增的PCR鉴别条件。结果在66℃、40 s的复性条件下进行鉴别PCR,金钗石斛的模板DNA扩增出约300 bp的阳性扩增带,而其他39种石斛的模板DNA在同样条件下无扩增产物。结论运用位点特异性PCR能有效地从其他石斛属植物中鉴别出金钗石斛,该方法具有高效、准确、简便、省时的特点,应用前景广泛。     

霍山石斛的生化特征及光合过程的研究进展

考察安徽特产的珍稀中药霍山石斛的生态环境特征,从不同生化因子对其光合过程的影响,霍山石斛的药效品质特性,以及其对光照和温度的需求规律等方面进行系统综述。提出其光合过程智能光声检测的研究思路,以及霍山石斛生化特征及光合过程最适化检测的研究重点和发展方向。     

霍山石斛种内遗传稳定性的RAPD初探

目的 研究霍山石斛荚果内遗传稳定性及荚果间的差异大小。方法 利用从20个随机引物筛选出来的3个稳定性较好的10碱基引物对来自5个不同荚果的霍山石斛种群进行RAPD检测。结果 5个荚果内遗传相似系数较大,在92.5926%-100.00%,其中H1、H9、H10、H14存在一定程度的变异,H23是一个较为稳定的群体;5个荚果间H1、H9、H10、H23的遗传距离较小,H14与其他4个荚果的遗传距离则较大。结论 建立霍山石斛稳定的无性快繁体系是切实可行的,同时说明霍山石斛种内存在一定的变异,H14与其他荚果的差异最大。     

HPAEC-PAD法测定霍山石斛中6种单糖

目的建立HPAEC-PAD法测定霍山石斛Dendrobium huoshanense C. Z. Tang et S. J. Cheng中甘露糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖的含有量。方法依次采用超声处理、水解和氮气吹干法制备供试品溶液。氢氧化钠/醋酸钠溶液梯度洗脱;温度30℃;电极材料Au;参比电极pH-Ag/AgCl;电位波形糖四电位;体积流量0.45 mL/min。结果甘露糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖在各自范围内线性关系良好(r>0.990 0),平均加样回收率分别为93.4%、92.3%、93.7%、106.1%、94.1%、103.7%,RSD分别为2.1%、1.7%、3.3%、1.2%、4.5%、1.7%。结论该方法稳定性好,灵敏度高,可用于霍山石斛的质量控制。     

霍山石斛细胞悬浮培养及条件优化

目的利用细胞悬浮培养技术生产霍山石斛单细胞,解决石斛药用植物资源短缺问题。方法以霍山石斛叶片等外植体为实验材料,通过不同的制备方法获得霍山石斛单细胞,研究霍山石斛细胞培养的多种影响因素,应用正交设计优化霍山石斛细胞悬浮培养的条件。结果在蔗糖35 g/L,NH4NO3 1.3 g/L,pH 5.6,激素IAA 0.4 mg/L,6-BA 1.0 mg/L,培养时间14～18 d,在此条件下培养的霍山石斛细胞数为9.42×105个/mL。结论经过4次继代培养后石斛细胞多为圆状或椭圆状,细胞碎片减少。应用优化的细胞悬浮培养条件,能获得较大量的霍山石斛细胞。     

霍山县3种石斛叶片光合特性及其对光强的响应

目的研究石斛的光合特性,了解其适宜栽种的光强。方法测定霍山县3种石斛(霍山石斛Dendrobiumhuoshanens,铁皮石斛D.candium,铜皮石斛D.moniliforme)的光合速率对光强响应曲线,不同光强处理时叶绿素荧光参数的变化及3.0×104lx瞬时光强下叶片荧光猝灭诱导。结果霍山县3种石斛属于阴生植物对光强的响应,光饱和点、光补偿点较低,净光合速率和表观量子效率都较低;大于4.0×104lx强光下石斛叶片受光抑制严重。结论霍山县3种石斛生长光强,一般为(0.2～2.0)×104lx;可以在(2.5～3.0)×104lx光强的环境中生长;不适宜在大于4.0×104lx光强的环境中生长。