TLR2和TLR4在胰腺癌中的表达及其意义

目的探讨Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)在胰腺癌中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR检测30例新鲜胰腺癌及相应癌旁组织标本中TLR2及TLR4 mRNA的水平;应用免疫组化检测TLR2和TLR4蛋白在65例胰腺癌及相应38例癌旁组织中的表达;分析它们与临床病理特征的关系。应用Kaplan-Meier法分析TLR2和TLR4蛋白表达对患者生存时间的影响。结果PCR结果显示胰腺癌组织中的TLR2和TLR4 mRNA相对水平分别为0.84±0.17和0.81±0.10,显著高于癌旁组织的0.70±0.13和0.70±0.16(P0.05);免疫组化结果显示TLR2和TLR4在胰腺癌中的表达率分别为63.10%和69.2%,显著高于癌旁组织的34.20%和39.5%(P0.05),TLR2,TLR4的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位及分化程度无关,而与肿瘤大小、淋巴结转移、血管侵犯及临床分期有关,上述4指标的分组间差异均有显著性。TLR2或TLR4阴性组患者的生存时间分别为18.4个月和19.4个月,显著长于TLR2或TLR4阳性组(均为12.4个月,P0.05)。结论TLR2及TLR4在胰腺癌中高表达;TLRs信号通路可能促进了胰腺癌的恶性进展。     

肝移植治疗暴发性肝功能衰竭

fulminant liver failure(FLF)is a rapid onset life-threatening emerency in which liver dysfunction,liver failure and hepatic encephalopathy occur within 8 weeks in previouslv norillal person.It has been confirmed by available clinical experience and literatures during the past decades that FLF patients are ideal recipients of liver transplantation.However,the prognosis of the FLF patients who accepted liver transplantation differed greatly according to the available reports because of the differences of supportive treatment during waiting period,the criterion for recipient assessment,the determination of operation chance,the use of critical techniques during operation and postoperative management between different transplantation centers.We probe the standardized clinical use of the aspects above mentioned in liver transplantation for FLF,particularly discuss the treatment of complications resulting from coagulopathy,determination of operation chance,significance of standardized etiological treatment and the indication of the use of veno-venous bypass technique during transplantation to provide better treatment strategy and improve the prognosis of FLF patients.     

活体肝移植治疗HBV相关性急性亚急性肝功能衰竭

目的 探讨活体肝移植(living donor liver transplantation,LDLT)HBV感染导致的急性肝功能衰竭(acute liver failure,ALF)和亚急性肝功能衰竭(subacute liver failure,SALF)患者的可行性,并评价其疗效.方法 回顾性分析2000年11月至2007年10月完成的10例LDLT治疗ALF、SALF患者的临床资料.10例LDLT的供、受者均为成人,切取右半肝为移植物,8例含肝中静脉(middle hepatic vein,MHV).10例供者的评估均在确定实施LDLT的24 h内完成,供、受者手术均在确定供者后的12 h内完成.移植物质量与受者体质量比为(1.03±0.17)%(0.86%～1.22%),移植物体积与受者标准肝体积比为(52.2±11.8)%(47.6%～70.1%).结果 10例受者中,2例分别于术后7、28 d时因肺部感染、十二指肠球部溃疡穿孔腹腔感染死亡.1例胆管吻合口胆漏,经十二指肠镜下置入鼻胆管引流治愈.2例术后1周出现轻度急性排斥反应,增强免疫抑制强度后肝功能恢复正常.8例中位随访期9.6个月(2～84个月),生存质量优良.10例供者中,1例出现急性门静脉高压症导致脾脏破裂,行脾脏切除术,其后出现胆管断端胆漏,经鼻胆管引流结合经皮穿刺腹腔引流治愈.其余9例无并发症发生.结论 LDLT适宜治疗HBV感染导致的ALF、SALF,而且能获得较好的中、远期疗效.     

TLR4信号转导通路活化在皮瓣缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)在皮瓣缺血再灌注(ischmeia-reperfusion,I/R)损伤中的意义.方法 将50只雄性SD大鼠进行编号,盲视下随机分为:假手术组(10只)、I/R组(20只)、TLR4抑制剂组(20只).制备右下腹岛状皮瓣I/R模型.TLR4抑制剂组处理组于再灌注前静脉注射E5564(5 mg/kg),分别于缺血再灌注后1、2、4和6h,采用免疫组化学法检测TLR4在皮瓣组织中的表达及分布,并行组织学观察.于术后7d,应用图像分析软件计算皮瓣存活比例.应用SPSS 18.0进行统计分析,两组间比较采用F检验.结果 免疫组织化学法显示I/R组比TLR4抑制组TLR4表达明显增强,且阳性部位主要是血管壁细胞及中性粒细胞.TLR4抑制剂组再灌注后TLR4活性受到抑制,中性粒细胞浸润及组织水肿程度较I/R组明显改善.术后7 d I/R组皮瓣存活比例为(51.70 ±7.62)％,TLR4抑制剂组皮瓣存活比例明显增高,达(80.31±11.63)％,与I/R组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后,皮瓣组织TLR4的表达上调中性粒细胞浸润增多.E5564能通过抑制TLR4活化,减少中性粒细胞浸润,减轻皮瓣I/R损伤.     

肝功能衰竭伴肝肺综合征的患者在肝移植中的肺功能保护

目的　探讨肝功能衰竭伴肝肺综合征的患者在肝移植中的肺功能保护及治疗策略。方法　对3年间52例肝移植中8例肝功能衰竭伴肝肺综合征的患者采用以促进移植肝功能恢复为核心的治疗;同时通过对肾功能的保护及利尿剂的应用减轻肺水肿;通过合理选择抗生素和应用微生态制剂保护和增强黏膜免疫功能;采取低潮气量加呼吸末正压通气(PEEP)及高、低氧浓度交替呼吸支持等综合治疗措施促进肝肺功能的恢复,观察肝肺综合征的逆转和肺功能的恢复情况。结果　8 例肝功能衰竭伴肝肺综合征的患者在术后2~6 周肺功能均得到明显改善。2 个月内肺功能恢复率达100%,1年生存率达75%,长期存活者均显示了良好的肺功能。结论　肝功能衰竭伴肝肺综合征是肝移植的适应证,通过围手术期的综合治疗措施,肺功能可获得逆转,患者长期存活,不留有肺部后遗症。     

原位肝移植治疗急性肝功能衰竭21例临床分析

目的探讨原位肝移植治疗急性肝功能衰竭的临床疗效。方法回顾性分析天津市第一中心医院21例因急性肝功能衰竭行原位肝脏移植术病人的临床资料，总结急性肝衰竭实施肝移植的经验。结果21例病人随访时间为3～60个月，中位随访时间为25个月。生存时间为1—1530d，中位生存时间为517d。病人的围手术期存活率为66．7％，1年存活率为66．7％，2年存活率为66．7％。死亡原因包括多脏器功能衰竭、颅内出血、上消化道出血、急性成人呼吸窘迫综合征、移植物原发性无功能。14例的远期性生存病人中，13例移植前合并乙型肝炎（乙肝），其中有1例（1／13）在术后1年出现乙肝复发。结论肝移植术是治疗急性肝功能衰竭最有效的方法，严格把握适应证、合理选择手术时机是提高疗效的关键。     

肠胶质细胞在维持肠道屏障功能中的作用及机制

肠胶质细胞（enteric glial cells, EGCs）是肠神经系统的重要组成部分,是聚居在肠壁中维持肠道稳态的细胞群。文章阐述了EGCs、肠道屏障功能以及二者的相互关系。EGCs在肠道全层都有广泛分布,但主要聚居在肌间和黏膜下的神经丛中。EGCs通过包裹神经元的胞体、轴突以及微血管从黏膜下层延伸至肠黏膜层。黏...     

肝硬变肝功能衰竭患者行肝移植时

目的探讨肝功能衰竭患者行同种原位肝移植（OLT）时术前准备的原则和方案。方法回顾性比较分析7例因肝硬变肝功能衰竭行OLT和3例因非硬变性肝病行OLT术前凝血功能、一般状况、内环境状况、术中出血量与术后过程的关系。结果7例肝硬变患者血小板计数均下降,凝血功能差,而3例因非硬变性肝病者血小板下降不明显;7例肝硬变患者术前均进行了利尿和保肝支持治疗,而3例因非硬变性肝病者除2例进行了保肝支持、输少量全血和人白蛋白外,未输注凝血因子和血浆,也未进行利尿治疗。术中7例肝硬变患者平均出血8455ml,除补充相应量的血以外,还平均输注人白蛋白88.5g和血浆957.1ml,但术毕血白蛋白仅26.1g/L,术后48h内内环境紊乱较明显,术后1个月内5例发生真菌感染,3例发生腹腔内出血,而3例非硬变肝病患者平均出血2660ml,术中仅输很少人白蛋白,术毕血白蛋白30.7g/L,内环境紊乱不明显,术后1月内无感染和腹腔内出血发生。结论肝硬变肝功能衰竭患者行肝移植术前完全纠正凝血功能障碍、低蛋白血症、贫血和内环境紊乱是保证手术和术后顺利的重要因素。     

TLR4 对缺血再灌注损伤作用机理的研究进展

Toll 样受体 (TLRs) 属于模式识别受体 (PRRs) 家族，识别高度保守的微生物组分 - 病原相关分子模式 (PAMPS)。关于缺血再灌注损伤的具体机理，至今尚未明确。越来越多的研究提出，与先天免疫的重要组成部分 TLRs 相关， 其中对 TLR4 在缺血再灌注损伤中所起作用的研究最为普遍。     

肠道屏障功能临床评估方法

1 概述 研究已证实肠道是体内最大的"细菌库",当在创伤、手术、严重感染等条件下,肠道的微生物、内毒素通过肠黏膜侵入肠外组织,肠道菌群易位,导致全身炎症反应综合征(SIRS)甚至多脏器功能不全综合征(MODS).     

Results of liver transplantation in acute liver failure caused by viral hepatitis

Abstract Fulminant liver failure due to acute viral hepatitis is the most common emergency indication for liver transplantation. The postoperative course is highly correlated with the type and duration of infection. The complication rate is lowest in fulminant hepatitis B patients and highest in subacute hepatitis C/NANB patients.     

早期肠内营养对肝移植术后肠屏障及细菌移位的影响

目的探讨早期肠内营养对肝移植术后病人肠屏障功能和细菌移位的影响。方法40名肝移植病人被随机分成早期肠内营养（EN）组、胃肠外营养（PN）组。术前、术后第1天及术后第8天检测血浆内毒素水平、D-乳酸水平及二胺氧化酶（DAO）水平，术前及术后第1～7天每日行外周血细菌聚合酶链反应（PCR）检测及血细菌培养。结果（1）术后第8天EN组内毒素、D-乳酸及DAO水平显著低于PN组（P〈0．01）。（2）术后第1天两组内毒素、D-乳酸及DAO水平显著高于术前（P〈0．05），两组之间无统计学差异。术后第8天EN组内毒素、D-乳酸及DAO水平显著低于术后第1天水平（P〈0．05），低于术前水平（P〈0．05）。PN组内毒素、D-乳酸及DAO水平显著高于术前水平（P〈0．05），和术后第1天水平无统计学差异（P〉0．05）。（3）40例肝移植病人PCR检测外周血细菌DNA片段阳性总数为25例，阳性率62．5％，术后第4天起两组有显著差异。（4）PCR大肠杆菌检出占所有细菌检出的60％。（5）40名肝移植病人27例出现全身炎症反应综合征（SIRS），其中EN组12例，PN组15例，PCR阳性组SIRS发生率为96％，PCR阴性组SIRS发生率为20％，SIRS发生组PCR阳性率为88．89％，SIRS阴性组PCR阳性率为7．69％。（6）术后血细菌培养阳性率27．5％，显著低于PCR的62．5％（P〈0．01）；培养阳性者，PCR均呈阳性。（7）PCR阳性组感染并发症发生率为64％（16／25），阴性组均未发生感染（0／15），二者差异有显著性（P〈0．01）。结论肝移植术后施行早期肠内营养能有效的维护肠黏膜屏障功能、防止细菌及内毒素移位，减少术后感染的发生。     

Glycine attenuates endotoxin-induced liver injury by downregulating TLR4 signaling in Kupffer cells

BACKGROUND: Several experimental studies have observed better outcomes after glycine treatment in patients with endotoxin-induced liver injuries, but its molecular mechanism is not yet fully understood. The purpose of this study was to evaluate the hypothesis that glycine attenuates endotoxin-induced liver injury by affecting endotoxin signal transduction in liver macrophages. METHODS: An animal model of endotoxin-induced liver injury was established by intraperitoneally injecting mice with 10 mg/kg body weight endotoxin fed a pretreatment diet with or without 5% (w/w) glycine. Blood and liver samples were obtained for analysis of liver morphology and to determine concentrations of alanine aminotransferase, endotoxin receptor Toll-like receptor 4 (TLR4), tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and interleukin (IL)-10 at various time points after injection. To investigate the effect of glycine on liver macrophages, Kupffer cells (KCs) were isolated and challenged by LPS (100 ng/mL), with or without glycine (4 mmol/l) pretreatment, and the expressions of TLR4, IL-10, and TNF-alpha were assayed at mRNA and protein levels. DNA-binding activity of nuclear factor-kappa B (NF-kappaB) was also analyzed using enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: Dietary glycine significantly improved the survival rate of endotoxemic mice (P < .05), whereas serum alanine aminotransferase and TNF-alpha levels were significantly decreased at different time points (P < .05); IL-10 levels were increased (P < .05). Concurrently, LPS-induced hepatic tissue injury was attenuated as indicated by morphologic analysis; secretion of IL-10 in liver tissue (P < .05) was enhanced; and expression of TLR4 and TNF-alpha in liver tissue was downregulated (P < .05). Consistent with these in vivo experiments, enhanced secretion of IL-10 and inhibited expression of TLR4 and TNF-alpha caused by glycine pretreatment were also observed in LPS-stimulated KCs. NF-kappaB DNA-binding activity was also significantly inhibited by glycine (P < .05, respectively). CONCLUSIONS: Dietary glycine improved survival rates and liver function in endotoxemic mice by regulating the production of proinflammatory or anti-inflammatory cytokines in liver. It attenuated liver injury by deactivating KCs through inhibiting TNF-alpha secretion and increasing IL-10 production. The downregulative effect of glycine on the endotoxin signaling pathway and TLR4/NF-kappaB/TNF-alpha may be a novel potential mechanism by which glycine inhibits KC activity.     

原位肝移植加人工肝支持疗法治疗暴发性肝功能衰竭

目的 探讨原位肝移植加入人工肝支持疗法对暴发性肝功能衰竭的疗效及非生物型人工肝支持系统在暴发性肝功能衰竭肝移植术前准备中的作用。方法 本组7例暴发性肝功能衰竭患者,均有不同程度的肝昏迷,黄疸,腹水,肝功能损害,出血倾向,在等待供肝的过程中分别接受2-20次非生物型人工肝支持疗法,供肝到达后行原位肝移植术,结果 人工肝支持治疗后患者血清胆红素明显下降,腹水明显减少,部分病人肝性脑病有所好转,7例均顺利行肝移植,5例存活3-290个月,其中3例已存活1年半以上,并已恢复正常工作,2例术前有肝肾综合征者,术后3d死亡,其中1例并发急性重症胰腺炎。结论 原位肝移植加入工肝支持疗法是暴发性肝功能衰竭的有效方法,术前人工肝支持可作为暴发性肝功能衰竭等待供肝期间的桥梁,并可改善病情减少肝移植的危险因素。     

肝功能衰竭患者肝移植后并发肺炎的危险因素分析

目的 探讨和分析肝功能衰竭患者肝移植后并发肺炎的危险因素.方法 回顾性分析2004年9月至2006年12月80例肝功能衰竭肝移植患者的临床资料.将80例患者分为肺炎组和对照组,应用多因素分析寻找肝功能衰竭患者肝移植后并发肺炎的独立危险因素.结果 肺炎组27例,死亡13例,对照组53例,死亡5例.多因素分析显示肝移植后发生肺炎与患者死亡密切相关(OR=14.857,95%的可信区间为3.703～59.612,P=0.0001).与发牛肺炎密切相关的因素有:年龄(OR=1.976,95%的可信区间为1.090～3.582,P=0.0249)、肝肾综合征(OR=5.266,95%的可信区间为0.912～30.414,P=0.0634)以及移植肝功能不良(OR=91.997,95%的可信区间为19.000～445.440,P=0.0001).肺炎的发生与术前Ⅲ级以上肝性脑病无相关性.结论 肝功能衰竭患者肝移植术后发生肺炎是导致其死亡的主要原因之一;年龄、肝肾综合征和移植肝功能不良是肝移植后发生肺炎的独立危险因素.     

急诊肝移植治疗暴发性肝功能衰竭四例

目的总结暴发性肝功能衰竭实施紧急肝移植的经验。方法回顾性分析4例接受紧急肝移植的暴发性肝功能衰竭患者的临床资料。结果4例患者于术后12～48h神志恢复清醒,无手术并发症,术后有2例各发生急性排斥反应1次,经治疗逆转。4例患者均存活至今,肝功能良好,患者分别存活38、17、11及7个月,3例恢复工作。结论紧急肝移植是治疗暴发性肝功能衰竭的有效手段;围手术期的正确处理及手术时机的选择是提高紧急肝移植成功率的关键之一。     

评估非肿瘤性肝功能衰竭患者肝移植标准的数学模型

目的 建立评估非肿瘤性肝功能衰竭患者肝移植标准(LTS)的数学模型.方法 分析200例非肿瘤性肝功能衰竭患者的临床资料,初步筛选出28项可能与肝功能衰竭预后有关的因素,应用单因素和多因素Cox风险比例回归模型分析出独立危险因素,建立LTS数学模型.另选择51例非肿瘤性肝功能衰竭患者验证LTS数学模型的预测能力,并与终末期肝病评分标准(MELD)进行比较.结果 影响肝功能衰竭预后的独立危险因素有4项:凝血酶原时间的国际标准化比值(INR)、血清肌酐(Cr)、肝性脑病(HE)和消化道出血(ATH),由此建立非肿瘤性肝功能衰竭患者LTS的数学模型,LTS评分=[4.96 x LnINR+7.16×LnCr(μmol/L)+9.62×HE+6.82×ATH].经51例独立样本的验证,LTS评分的ROC曲线下的面积(AUC)为0.804,敏感度为78.26%,特异度为92.85%,阳性预测值为90%,阴性预测值为83.87%,Youden指数为71.11%;LTS评分的AUC和Youden指数均优于MELD评分(AUC和Youden指数分别为0.750和43.48%).所有251例患者的LTS评分最小为30分,最大为87分,平均(48±11)分;在90 d观察期内,存活96例,死亡155例,存活患者与死亡患者的LTS评分分别为(40±5)分和(53±11)分,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).将LTS评分分别为＜40、40～45、46～53和＞53分的患者分为4组,4组间死亡率和存活时间的比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 LTS的数学模型能准确预测肝功能衰竭患者的近期预后,可为非肿瘤性肝功能衰竭患者肝移植时机的选择提供依据.     

肠黏膜屏障损害致肠源性内毒素血症

目的　研究肠黏膜屏障损害与内毒素血症的相互关系。方法　采用兔做动物模型,在常温无菌条件下机械性阻断肝十二指肠韧带造成肠道缺血、缺氧、肠黏膜屏障损害,肠道内大量内毒素穿过肠壁进入门静脉,造成内毒素血症。于对照组及实验组阻断前和阻断后不同时间,分别采血测血内毒素值,并作肠黏膜的病理检查。结果　肝门阻断后,门静脉血内毒素值明显高于阻断前和对照组（ Ｐ ＜ ０－０１）,肠黏膜病理改变也随时间延长,损害逐渐加重。结论　肠道缺血缺氧是肠黏膜屏障损害的直接原因,内毒素与肠黏膜损害形成恶性循环,加重屏障损害。预防和减少肠源性内毒素的产生对指导临床工作有利无弊。