软骨细胞的细胞骨架研究

细胞骨架不仅在维持细胞形态，保持细胞内部结构的有序性中起重要作用，而且与细胞运动、物质运输、信息传递、细胞分裂、基因表达、细胞分化等密切相关。本文就软骨细胞的细胞骨架研究作一综述。     

下颌髁突软骨细胞凋亡的研究

近年来,有关软骨发育和软骨疾病中软骨细胞凋亡及各种调节因素逐渐受到人们重视。本文对下颌髁突软骨及其病变中的细胞凋亡及调节因素作一综述。     

软骨细胞外泌体在大鼠颞下颌关节骨关节炎软骨异常钙化中的作用研究

目的 探索软骨细胞外泌体在大鼠颞下颌关节（temporomandibular joint,TMJ）骨关节炎（osteoarthritis,OA）退变软骨异常钙化中的作用。方法 选取48只6周龄雌性SD大鼠,根据实验时间点（2、4、8周）随机分为三大组,每大组再随机分为对照组与单侧前牙反牙合（unilateral anterior crossbite,UAC）实验组,每组8只大鼠。对UAC实验组大鼠施加UAC刺激诱导TMJ OA,于2、4、8周后分别处死各组大鼠,对TMJ髁突软骨进行CD63、基质羧基谷氨酸蛋白（matrix gla protein,MGP）的免疫组化染色和mRNA含量检测,同时透射电镜观察软骨中钙化痕迹及外泌体结构。提取大鼠TMJ髁突软骨细胞体外培养并施加流体剪切力刺激,茜素红染色检测钙化结节形成情况,对软骨细胞和外泌体蛋白进行Western Blot检测。结果 UAC实验组大鼠TMJ髁突软骨内CD63分子高表达,同时在钙化痕迹周围存在大量外泌体样结构,而MGP含量则在4周和8周时显著减少。流体剪切力可显著促进TMJ髁突软骨细胞钙化结节形成,同时外泌体数目增多,但外泌体中MGP蛋白含量显著降低。对正常培养的软骨细胞施加外泌体后可显著促进钙化结节的生成。结论 大鼠TMJ OA软骨中外泌体数目增加,同时外泌体内MGP含量降低,两方面共同促进软骨异常钙化的发生。     

负荷改变对髁突软骨细胞合成蛋白多糖的影响

目的：研究负荷变化对髁突软骨细胞蛋白多糖合成的影响。方法：拔除成年家兔左下磨牙,分别于术后2周、1月和3月取双侧颞颌关节,进行阿辛兰和甲苯胺兰等组织化学染色和免疫组化染色。结果：酸性粘多糖和蛋白多糖术后量均降低,以非拔牙侧更显著,随着缺牙时间的延长这些变化而更显著。结论：异常负荷可导致软骨细胞蛋白多糖合成的减少及其构成的变化,从而使髁突纤维软骨的粘弹性降低。     

体外rhIL—1β诱导髁状突软骨细胞HSP70的表达及其意义

目的 明确热休克蛋白70（HSP70）在人重组白细胞介素－1（rhIL-1β）刺激下对下颌骨髁状突软骨细胞的保护作用。方法 通过原代细胞培养获得兔髁状突软骨细胞,在生长良好的第三代软骨细胞中分别加入不同浓度的rhIL-1β,并利用原位杂交及免疫组织化学技术检测rhIL-1β处理软骨细胞后HSP70的表达变化。结果 正常髁状突软骨细胞胞浆内有HSP70蛋白弱表达,rhIL-1β（10ng/ml）作用12h后HSP70出现表达升高,部分细胞核内也可见表达,48h后信号开始减弱。HSP70mRNA的表达与蛋白表达基本一致。结论 一定浓度的rhIL-1β刺激髁状突软骨细胞可诱导HSP70的转录及蛋白合成,提示HSP70可能在骨关节炎症损伤中对软骨细胞起到保护作用。     

兔颞颌下关节盘前移位后关节软骨细胞的凋亡及其意义

目的：观察颞下颌关节盘前位动物模型的关节软骨细胞凋亡动态改变，探讨软骨细胞凋亡的意义。方法：日本大白兔26只，实验组20只行手术，在不打开颞下颌关节囊的情况下制成关节盘前移位动物模型，采用原位末端标记法（TUNEL）观察术后不同时期关节区组织学的改变和软骨细胞凋亡的情况。结果：术后1－2周为髁状软骨细胞凋亡的高峰期，集中于功能区的肥大层和增殖层。4－6周进入关节改建期。结论：关节盘前移位后可激活软骨细胞的凋亡机制，启动关节软骨的适应性改建。     

内镜下软骨细胞移植修复颞下颌关节软骨缺的实验研究

探讨经关节镜植入软骨细胞修复颞下颌关节软骨缺损的可行性和修复组织的质量。方法 经关节镜对12只猕猴的髁突和（或）关节结节进行钻孔,造成骨软骨缺损模型;将软骨细胞悬液与人工基质材料PluronicF127混合形成复合物,经关节镜注入颞下颌关节面缺损区;4周、8周、12周和24周后经大体形态观察、组织学观察、免疫组织学染色评价修复情况。结果 软骨细胞移植术后,关节面缺损均得到了修复,修复组织内为分化良好的软骨细胞,并随时间推移排列逐渐有序;免疫组化染色发现修复组织Ⅱ型胶原染色明显。结论 关节镜导向下的细胞移植术是切实可行的。软骨细胞移植能修复关节面骨软骨缺损,修复组织接近正常的关节软骨组织。     

颞下颌关节骨关节病髁突软骨细胞及基质合成代谢特性的研究

目的 探讨颞下颌关节骨关节病(TMJOA)软骨细胞的细胞生物学特性。方法 通过手术切除部分关节盘的方法,制造TMJOA的兔动物模型;从模型动物处于骨关节病病变增殖修复期的髁突软骨组织中获取细胞体外培养,并采用RT-PCR法比较病变软骨细胞与正常对照细胞对软骨基质蛋白、基质胶原酶和内源性生长因子的表达差异。结果 从TMJOA模型的髁突软骨组织中获得细胞经体外培养、鉴定,确认为软骨细胞;骨关节病髁突软骨细胞对软骨基质蛋白的表达不平衡,对内源性基质胶原酶的表达水平和内源性生长因子TGF-β1、IGF-1的表达明显增强。结论 本研究从细胞生物学角度证实了骨关节病早期关节软骨内出现合成代谢活跃的组织学特点,并发现该阶段组织细胞的修复代偿反应可致软骨基质成分合成的不平衡,最终可导致软骨基质环境改变。     

髁突软骨细胞分离及体外快速扩增

目的 探索在短期内获得大量成活率高、分化良好的下颌髁突软骨（ｍａｎｄｉｂｕｌａｒ ｃｏｎｄｙｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ,ＭＣＣ）方法 采用细胞工程技术进行兔ＭＣＣ细胞的Ｃｙｔｏｄｅｘ－３微载体培养,应用先进的环境挪描电镜技术对培养ＭＣＣ细胞在微载体地面的生长方式进行了动态观察。结果 ＭＣＣ细胞可快速贴附于Ｃｙｔｏｄｅｘ－３微载体表面,但其 展相对较慢。细胞 展后生长加速,到培养后期,细胞密度可达最     

生长分化因子11对小鼠颞下颌关节骨关节炎髁突软骨细胞脂肪化的影响

目的 观察生长分化因子11(GDF11)对小鼠颞下颌关节(TMJ)骨关节炎(OA)髁突软骨细胞脂肪化的影响.方法 对雌性6周龄C57小鼠施加单侧前牙反(牙合)(UAC)刺激并局部注射GDF11.取TMJ髁突软骨进行番红O染色;GDF11、脂联素(Adiponectin)免疫组织化学染色;实时定量聚合酶链式反应(real...     

颞下颌关节髁突软骨细胞体外培养中去分化现象研究

目的　研究去分化髁状突软骨细胞的细胞生物学特性。方法　连续在体外贴壁条件下培养传代正常乳兔髁突软骨细胞至第 2 0代 ,观察培养细胞的形态变化 ,免疫组化法和RT -PCR法对传代过程中的数代细胞对II型胶原与蛋白多糖聚糖体的表达情况进行连续检测 ,观察细胞软骨基质蛋白表达分泌的变化以及发生明显去分化软骨细胞的超微结构特点。结果　在贴壁培养条件下 ,髁状突软骨细胞去分化现象于细胞传代第 3代后逐渐显著 ,第 6代后培养的软骨细胞几乎完全去分化。去分化细胞胞体拉长 ,呈“成纤维细胞”样外观。去分化过程中 ,细胞对软骨基质蛋白的表达水平逐渐降低 ,细胞增殖速度增强。透射电镜观察显示 ,去分化软骨细胞细胞核明显呈分叶状 ,表现出异型核。结论　髁突软骨细胞在体外贴壁培养传代过程中会发生去分化现象 ,丧失软骨细胞特征性细胞表型。     

异常咬合对小鼠髁突软骨细胞内质网应激性凋亡的影响研究

目的探讨异常咬合对小鼠髁突软骨细胞内质网应激性凋亡的影响。方法选取6周龄雌性C57BL/6J小鼠54只,随机分为4组,分别饲养1、3、7、11周,其中饲养1、3、7周的小鼠(各12只)再随机分为对照组和单侧前牙反(unilateral anterior crossbite,UAC)组,饲养11周的小鼠(18只)再随机分为对照组、UAC组和去冠组(UAC刺激7周后去除UAC刺激继续饲养至11周),每组小鼠均为6只。各组小鼠处死取材后对髁突软骨进行HE染色、糖相关蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,Caspase12)免疫组织化学染色以及TUNEL染色。结果(1)HE染色结果显示:各饲养期对照组小鼠髁突软骨细胞层次鲜明,软骨内细胞排列整齐;UAC组小鼠髁突软骨内软骨细胞数目减少,排列紊乱,随着时间延长这些变化逐渐加重。与同饲养期对照组相比,UAC组小鼠髁突软骨细胞密度、软骨厚度均显著减小(均P<0.05);去冠组小鼠髁突软骨细胞分层情况明显改善,软骨细胞密度、软骨厚度较UAC组有显著增加(均P<0.05),而与同饲养期对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)免疫组织化学染色、TUNEL染色结果显示:各饲养期对照组小鼠髁突软骨中GRP78阳性细胞在软骨浅层和深层均有分布,Caspase12阳性细胞主要分布在软骨深层,但数量均很少;UAC组小鼠髁突软骨中出现大量GRP78和Caspase12阳性细胞。UAC组小鼠髁突软骨GRP78、Caspase12和TUNEL阳性细胞率均高于同饲养期对照组(均P<0.05);去冠组小鼠髁突软骨GRP78、Caspase12和TUNEL阳性细胞率均显著低于UAC组(均P<0.05),而与同饲养期对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论异常咬合促进髁突软骨细胞内质网应激性凋亡,从而加重髁突软骨的退行性变。     

软骨细胞凋亡及其对颞下颌关节的生理、病理作用

软骨细胞凋亡与颞下颌关节的发育、骨关节病的发病机制有密切的关系，对软骨细胞凋亡的深入研究有可能为治疗或改善骨关节病提供新的思路和方法。作者就软骨细胞凋亡的途径、关节应力对其影响、软骨细胞凋亡与颞下颌关节的发育和颞下颌关节疾病的关系作一综述。     

滑液干细胞对关节盘软骨细胞的作用研究

目的:初步探讨人颞下颌关节滑液来源的间充质干细胞条件培养基对大鼠关节盘软骨细胞的作用。方法:临床收取颞下颌关节紊乱病患者的滑液干细胞进行细胞培养,三向分化验证其细胞干性。激光共聚焦显微镜下观察获取的大鼠关节盘软骨细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原免疫荧光表达,确认细胞属性。收集滑液干细胞培养24h的上清液制作条件培养基,设置空白对照组分别培养大鼠关节盘软骨细胞,CCK-8检测大鼠关节盘软骨细胞增殖情况,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测培养7天、14天大鼠关节盘软骨细胞相关基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型胶原表达变化。结果:获取的滑液干细胞具有成脂、成骨、成软骨三向分化潜能;大鼠关节盘软骨细胞表达Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原;CCK-8结果显示条件培养基组48h后细胞增殖速度较对照组明显加快(P<0.05);第7天、14天实时荧光定量PCR显示条件培养基组Ⅹ型胶原表达明显低于对照组。结论:人颞下颌关节滑液来源的间充质干细胞条件培养基促进大鼠关节盘软骨细胞增殖,抑制关节盘软骨细胞Ⅹ型胶原表达。     

颞下颌关节骨关节炎与关节内紊乱关系的研究

目的 :探讨颞颌关节骨关节炎 (TMJOA)与颞颌关节内紊乱 (TMJID)的关系。方法 :利用MRI金标准 ,对 44例颞颌关节紊乱病患者 88侧关节完成开闭口T1加权成像 ,观察盘突关系和骨改变。结果 :88个关节中40 .9% ( 3 6/88)表现为TMJID ,13 .6% ( 12 /88)表现为TMJOA ,骨改变的分布情况 :正常盘突关系 (NDCR)关节中 2个 ,破坏和骨赘各 1个 ;可复性关节盘前移位 (ADDR)关节中 3个全部表现为骨破坏 ;不可复性关节盘前移位 (AD DWR)关节中 7个 ,表现为髁状突变平 3个 ;表现为破坏、骨赘、硬化和短小各 1个 ,统计学分析发现TMJOA与TMJID具有显著相关性。结论 :TMJOA的发生与关节结构紊乱显著相关。由于TMJOA可独立于TMJID之外而单独存在 ,目前将TMJOA看作是与TMJID密切相关的另一类疾病较为合适。     

滑膜细胞及软骨细胞释放HMGB1流体力学阈值的研究

目的 探究流体流动剪切力(fluid flow shear stress,FFSS)下,滑膜细胞及软骨细胞释放高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)时流体力学的阈值;阐明异常机械力刺激下,滑膜细胞及软骨细胞破坏的先后顺序,为了解颞下颌关节骨关节炎的发病机制及病理研究提供实验基础。方法 获得医院动物实验伦理委员会的审批,于SD大鼠膝关节获取滑膜组织及软骨组织块,消化培养获得滑膜细胞及软骨细胞,取3～4代滑膜细胞及软骨细胞,通过流体剪切力学装置对软骨及滑膜细胞施加FFSS,根据不同大小的FFSS值分组,分别采用1、3、5、10 dyn/cm²的FFSS刺激滑膜细胞1 h,采用4、8、12、16 dyn/cm²的FFSS刺激软骨细胞1 h,静息培养(0 dyn/cm²)作为对照组,观察细胞的形态学变化、免疫组化检测HMGB1及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的细胞表达分布,ELISA检测上清液中HMGB1与IL-1β的水平;Western blot检测细胞...     

颞下颌关节骨关节炎治疗的临床疗效比较

目的:探讨比较关节腔注射治疗、超短波物理治疗、药物口服治疗对颞下颌关节骨关节炎的临床疗效。方法 :选取初期骨关节炎患者60例,随机分为3组,分别采用透明质酸钠(Sodium hyaluronate,SH)关节上腔注射法、超短波物理治疗法、双氯芬酸钠(diclofenac sodium)联合盐酸氨基葡萄糖(glucosamine hydrochloride)口服法进行治疗。利用颞下颌关节功能障碍指数(dysfunction index,DI)及疼痛直观模拟标尺(visual analog variables,VAS)对比各组治疗后1周、1个月、3个月及6个月的疗效。结果:治疗后1周各组疗效无差异(P>0.05);治疗后1个月注射组及超短波组疗效优于药物组(P<0.05);治疗后3个月及6个月注射组疗效显著优于短波组及药物组(P<0.05)。结论:药物口服及超短波物理治疗疗效稳定性较差。透明质酸钠关节腔内注射法的疗效稳定性值得肯定。     

细胞凋亡在颞下颌关节中的研究进展

颞下颌关节是人体中最复杂的关节之一,是实现各种口腔功能的重要器官。近年来对颞下颌关节的发育和常见的颞下颌关节疾病等生理病理过程与细胞凋亡关系逐渐引起学者们的关注。本文对颞下颌关节的发育及其常见疾病中的细胞凋亡及凋亡因素作一综述。     

颞下颌关节骨关节炎动物模型的建立方法

骨关节炎是颞下颌关节紊乱病的重要类型之一,建立动物模型是颞下颌关节骨关节炎研究中的一个重要方面.日前常用的建模方法主要有外科手术、化学试剂注射、被动过度大张口、基因敲除和制造咬合紊乱等。本文对骨关节炎的主要病理变化及以上几种建模方法的优缺点进行综述。