羊膜制品对宫腔粘连分离术后宫腔渗出液中细胞因子的影响及意义

目的探讨羊膜制品对宫腔粘连分离术(trans-cervical resection of adhesions,TCRA)后宫腔渗出液中与粘连有关细胞因子浓度变化的影响及意义。方法选择30例因重度宫腔粘连实施TCRA,随机分为研究组15例:宫腔内放置覆盖羊膜制品的Foley’s球囊导管;对照组15例:宫腔内仅放置Foley’s球囊导管。分别于术后3 h、6 h、9 h、12 h、24 h、48 h、72 h和4 d、5 d、6 d、7 d经球囊导管收集宫腔渗出液,测量肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的浓度,观察羊膜制品使用后子宫腔创面渗液量与上述细胞因子的变化。结果宫腔渗液量的变化:研究组总渗液量(30.6±18.2)ml,显著少于对照组(62.7±32.9)ml(t=-3.307,P=0.003);研究组术后48 h渗液量达峰值,中位数5.50 ml(0.50~13.00 ml),7 d时渗液量显著低于48 h水平(χ~2=15.691,P=0.000);对照组术后4 d渗液量达峰值,中位数11.50 ml(3.00~23.00 ml),7 d时渗液量显著低于4 d水平(χ~2=9.549,P=0.002);研究组术后7 d渗液量中位数1.00 ml(0.00~2.00 ml),显著少于对照组中位数6.50 ml(5.00~8.00 ml)(Z=-4.666,P=0.000)。3种粘连相关细胞因子:研究组术后48 h TNF-α达峰值浓度(279.35±29.52)ng/L,术后7 d降为(243.56±43.99)ng/L(q=3.990,P0.05);对照组TNF-α术后48 h达峰值浓度(309.18±35.20)ng/L,与术后7 d(285.06±38.20)ng/L无统计学差异(q=2.485,P0.05)。研究组VEGF术后72 h达峰值浓度(629.24±101.38)ng/L,术后7 d降为(428.16±104.35)ng/L(q=6.974,P0.05);对照组VEGF术后24 h达峰值浓度(713.47±110.20)ng/L,术后7 d降为(564.59±119.92)ng/L(q=5.169,P0.05)。研究组IL-1术后6 d达峰值浓度(84.41±16.31)ng/L,与术后7 d(80.62±14.77)ng/L相比无统计学差异(q=0.923,P0.05);对照组IL-1术后5 d达峰值浓度(101.35±19.53)ng/L,与术后7 d(89.89±13.83)ng/L相比无统计学差异(q=2.736,P0.05)。结论使用羊膜制品能够明显减少TCRA术后宫腔渗液量和渗液时间,在一定程度上降低渗出液中TNF-α、VEGF和IL-1粘连相关细胞因子的浓度,小样本数据表明TCRA术后使用羊膜制品有助于降低再粘连形成。     

大鼠肝脏缺血再灌注过程中信号转导与转录激活子1的表达变化及其意义

目的 观察JAK-STAT信号通路蛋白STAT1和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3在大鼠肝脏缺血再灌注不同时限的表达及丹参对两者表达的影响.方法 将80只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组和丹参组,建立肝缺血再灌注模型,采用免疫组织化学方法 检测STAT1及Caspase-3在肝缺血45 min再灌注0、3、12、24、72 h时的表达.结果 STAT1、Caspase-3在正常及假手术组中未见明显表达.缺血再灌注组STATI在再灌注0 h即有表达(PU=10.29±0.92),再灌注12～24 h表达最明显(PU=38.73±1.59～38.90±2.29),Caspase-3在再灌注0 h亦有表达(PU=8.18±0.95),峰值出现在再灌注24 h(PU=38.06±2.85).丹参组STAT1在各时限点均较同期缺血再灌注组低(P＜0.05),除再灌注72h外丹参组Caspase-3在各时限点均较同期缺血再灌注组低(P＜0.05).结论 STAT1在大鼠肝缺血再灌注损伤中被激活,丹参可能通过抑制STAT1的表达减轻缺血再灌注对肝的损伤.     

胆汁酸对胆管癌细胞株QBC939中IL-6表达与细胞活力的影响

目的 探讨不同胆汁酸对胆管癌细胞株QBC939中IL-6的表达和细胞活力的影响.方法 分别使用不同浓度的游离胆汁酸以及其对应的甘氨酸结合型胆汁酸作用于胆管癌细胞株QBC939,药物浓度分别为:胆酸(CA)800 μmol/L、脱氧胆酸(DCA)100 μmol/L、鹅脱氧胆酸(CDCA)100 μmol/L、甘氨胆酸(GCA)1200 μmol/L、甘氨脱氧月胆酸(GDCA)200 μmol/L以及甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)300 μmol/L.以MTT法检测不同胆汁酸刺激24、48、72 h后胆管癌细胞活力的变化,并以ELISA法检测肿瘤细胞中IL-6表达的改变.结果 DCA、CDCA、GCDCA作用48 h后,肿瘤细胞活力比值(A处理组/A对照组)分别为0.61、0.58和1.26;作用72 h后,CA、DCA、CDCA、GCA、GDCA和GCDCA各组肿瘤细胞活力比值分别为0.48、0.50、0.42、1.29、1.30和1.41;与对照组相比,以上各组细胞活力变化均具有统计学意义(P＜0.05).对照组肿瘤细胞培养48和72 h后,IL-6表达量分别为(198±32)ng/L和(323±34)ng/L,CA、DCA、CDCA、GCA、GDCA和GCDCA作用48 h后IL-6的表达量分别为(106±33)ng/L、(88±29)ng/L、(116±54)ng/L、(413±21)ng/L、(587±32)ng/L和(366±30)ng/L,作用72 h后IL-6表达量分别为(123±66)ng/L、(45±21)ng/L、(74±45)ng/L、(792±13)ng/L、(1310±22)ng/L和(845±18)ng/L;与对照组相比,以上各组IL-6表达量变化均具有统计学意义(P＜0.05).结论 游离胆汁酸CA、DCA和CDCA能减少胆管癌细胞IL-6的表达,并抑制细胞活力;而结合胆汁酸GCA、GDCA和GCDCA能增加胆管癌细胞IL-6的表达,并促进细胞活力.胆汁酸能通过IL-6途径改变胆管癌细胞活力.     

抑制信号转导和转录激活因子-3活化对恶性胶质瘤细胞LN229运动能力的影响

目的 观察抑制信号转导和转录激活因子-3( STAT3)的活化对调控人恶性胶质瘤LN229细胞运动能力的影响.方法 应用JAK/STAT3信号通路抑制剂AG490处理LN229细胞株,Westem blot检测STAT3、磷酸化STAT3( p-STAT3)的表达.噻唑蓝(MTr)比色法筛选能够阻断LN229细胞STAT3活化的最适AG490浓度;划痕实验和趋化实验检测AG490给药后,LN229细胞运动能力的变化;F-肌动蛋白( F-actin)实验检测AG490对LN229细胞肌动蛋白聚合能力的影响.结果 AG490可有效抑制LN229细胞STAT3的持续活化.50 μmol/L浓度的AG490在不影响LN229细胞存活时(t=1.862,P＞0.05),能够有效抑制STAT3的磷酸化,对照组和50μmol/L AG490处理组的p-STAT3/STAT3的密度比值分别为0.530±0.040和0.291±0.036(t =4.821,P＜0.01).伤口愈合实验可见50μmol/L AG490处理的LN229细胞非定向运动能力降低,24h时对照组运动的距离为(0.290±0.049) mm;实验组为(0.150±0.054) mm(P ＜0.05).体外趋化实验显示50 μmol/LAG490处理的LN229细胞定向运动能力降低(P＜0.01),表皮细胞生长因子(EGF)浓度为10 μg/L时对照组穿过膜的细胞数为93.92±9.52;实验组为24.52±3.04.50μmol/L浓度的AG490抑制LN229细胞肌动蛋白聚合能力(P＜0.05).结论 STAT3信号转导通路参与调控胶质母细胞瘤LN229的细胞运动过程,阻断STAT3的活化可以抑制恶性胶质瘤的运动能力.     

右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤时心肌组织高迁移率族蛋白B1的影响

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury,MFRI)时心肌组织高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)表达量的影响. 方法 健康雄性SD大鼠52只,体重250～300 g,按随机数字表法分为4组(每组13只):假手术组(S组)、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R组)、Dex+I/R组(D组)、Dex+育亨宾+I/R组(D/Y组).结扎左冠状动脉前降支30 min,恢复灌注120 min制备MI/RI模型.再灌120 min时采血ELISA法测定血清中IL-6、TNF-α浓度,随后处死大鼠摘取心脏,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法测定心肌梗死面积,Western blot法测定心肌组织HMGB1蛋白的表达量. 结果 与S组比较,I/R组血清中IL-6、TNF-α含量[(336±41)、(636±25) ng/L]均显著增高(P＜0.05),心肌梗死面积明显增大(P＜0.05),心肌组织HMGB1蛋白表达量明显升高(P＜0.05);与豫组比较,D组血清中IL-6、TNF-α含量[(153±10)、(233±9) ng/L]均明显降低(P＜0.05),心肌梗死面积明显减少(P＜0.05),心肌组织HMGB1蛋白表达量显著降低(P＜0.05);与D组比较,D/Y组血清中IL-6、TNF-α含量[(230±20)、(386±32) ng/L]均显著增高(P＜0.05),心肌梗死面积明显增大(P＜0.05),心肌组织HMGB1蛋白表达量明显升高(P＜0.05). 结论 Dex预处理减轻MI/RI心肌组织HMGB1的表达量,减轻I/R损伤的炎症反应.Dex通过α2受体发挥保护作用.     

IL-6/STAT3信号通路在脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达上调中的作用

目的 探讨白细胞介素6/信号转导及转录激活因子3(IL-6/STAT3),信号通路在脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达上调中的作用.方法 健康雄性Wistar大鼠90只,10～14周龄;体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=30):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和抗IL-6单克隆抗体组(IL-6组).采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型.IL-6组于术前1h时腹腔注射抗IL-6单克隆抗体0.5 mg/kg,S组和CLP组给予等容量生理盐水.于术后6、12、24、48、72 h时分别处死大鼠6只,取肺组织,分别采用酶联免疫吸附法和实时荧光定量聚合酶链反应法检测肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达;采用凝胶阻滞电泳分析技术检测肺组织STAT3 DNA结合活性.结果 与S组比较,CLP组和IL-6组肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达、STAT3DNA结合活性升高(P＜0.05);与CLP组比较,IL-6组肺组织HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达、STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05).结论 IL-6/STAT3信号通路参与了脓毒症大鼠肺组织HMGB1表达上调.     

磁导向下磁性化疗药物对肝、肾及骨髓的影响

目的探讨磁导向下磁性药物载体对肝、肾及骨髓的影响,为恶性脑肿瘤的磁导向化疗提供可靠的依据. 方法昆明小鼠50只,随机分为3组:①磁导向组(n=20),尾静脉注射磁性药物载体混悬液(含甲氨蝶呤 25 mg/kg),在头部一侧置聚焦磁场30 min;②甲氨蝶呤组(n=20),注射甲氨蝶呤 25 mg/kg;③对照组(n=10),注射生理盐水.给药前,给药后24 h,7、14、30、90 d断尾取血检测红细胞、白细胞、血小板、丙氨酸转氨酶、尿素氮. 结果与给药前相比,给药后24 h甲氨蝶呤组RBC显著下降[(9.34±0.36) T/L vs (8.32±0.82) T/L,q=6.263,P＜0.05];给药后14 d RBC下降至最低[(5.05±0.81) T/L,q=26.341,P＜0.05];给药后90 d RBC上升至给药前水平[(9.01±0.70) T/L,q=2.026,P＞0.05].磁导向组和对照组给药前后RBC无显著变化(F=0.46,P=0.802;F=0.09,P=0.993).WBC和PLT的变化与RBC相似.与给药前相比,给药后7 d甲氨蝶呤组ALT显著升高[(8.1±0.2) U/L vs (12.3±2.4) U/L,q=12.790, P＜0.05 ],14 d最高,30 d下降,但90 d未恢复到给药前水平[(10.0±0.5) U/L,q=5.786,P＜0.05].与给药前相比,磁导向组给药后14 d时ALT显著升高[(8.1±0.4) U/L vs (11.2±0.3) U/L,q=26.050,P＜0.05],90 d下降到给药前水平[(7.9±0.4) U/L,q=0.840,P＞0.05].对照组ALT给药前后无明显差别.与给药前相比,给药后7 d甲氨蝶呤组和磁导向组BUN均升高,与给药前比较相差显著[甲氨蝶呤组:(11.07±0.29) mmol/L vs (16.07±0.54) mmol/L,q=53.169, P＜0.05;磁导向组:(10.89±0.75) mmol/L vs( 12.14±0.61) mmol/L,q=11.164,P＜0.05)],90 d与给药前比仍相差显著[甲氨蝶呤组:(12.85±0.61) mmol/L,q=18.928,P＜0.05;磁导向组:(11.78±0.18) mmol/L,q=7.949,P＜0.05]. 结论磁导向下磁性药物载体定向分布于大脑内靶区,在肝、肾及骨髓的蓄积减少,减轻了对肝、肾及骨髓的损害作用.     

乌司他丁和地塞米松对脂多糖致大鼠急性肺损伤肺的保护

目的 研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)和地塞米松(dexamethasone,DXM)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)肺的保护作用及其可能机制. 方法 成年雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为4组:空白对照组(control group,Con组),LPS组,LPS+乌司他丁组(lipopolysaccharide plus ulinastatin group,UTI组),LPS+地塞米松(lipopolysaccharide plus dexamethasone group,DXM组),每组6只.在8h后放血处死大鼠,采用蛋白印迹分析(Westernblot)技术检测糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,实时荧光定量PCR检测GRmRNA的表达,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肺组织匀浆液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(interleukin,IL)-10的浓度,同时检测肺湿干比(wet/dry weight ratio,W/D)以及肺组织病理学的变化. 结果 GR蛋白的表达:LPS组大鼠肺组织中GR蛋白的表达量(0.418±0.018)较Con组(0.841±0.021)降低(P＜0.05),UTI组为(0.692±0.018),DXM组为(0.702±0.024),高于LPS组(P＜0.05),但二者比较差异无统计学意义(P＞0.05)；GRmRNA的表达:LPS组大鼠肺组织中GRmRNA的表达量较Con组降低,UTI组大鼠肺组织GRmRNA的表达量略高于LPS组,但差异无统计学意义(P＞0.05),DXM 组GRmRNA的表达量高于UTI组、LPS组、Con组(P＜0.05)；TNF-α的表达:LPS组中TNF-α的表达量(374±8) ng/L较Con组(102±6) ng/L升高(P＜0.05),UTI组为(343±6) ng/L,DXM组为(282±8) ng/L,较LPS组下降,其中DXM组下降更明显,但都高于Con组(P＜0.05); IL-10的表达:LPS组中IL-10的表达量(264±10)ng/L,较Con组(43±3) ng/L升高(P＜0.05),UTI组为(369±10) ng/L,较LPS组进一步升高(P＜0.05),DXM组为(180±7) ng/L,较LPS组下降(P＜0.05),但高于Con组(P＜0.05)；肺组织W/D:LPS组肺组织W/D(5.58-0.28)较Con组(4.33±0.27)升高(P＜0.05),UTI组为(5.15±0.18),DXM组为(4.79±0.21),均较LPS组下降(P＜0.05),DXM组肺组织W/D较UTI组更低(P＜0.05)；组织病理学检查显示:LPS组肺组织见肺泡结构破坏,炎性细胞浸润,肺泡间隔增宽、出血、水肿,UTI组肺组织病理损害较LPS组明显减轻,DXM组肺组织病理损害较UTI组进一步减轻.结论 UTI和DXM改善ALI的机制不完全相同,DXM改善ALI的效果优于UTI.     

H3K4m3和H3K9m3修饰对胰岛组织特异性基因表达的影响

目的 通过比较不同细胞类型之间胰腺十二指肠同源盒1(Pdx-1)、配对盒基因4(Pax4)、MafA(mast cell function associated antigen)和Nkx6.1等胰岛组织特异性基因其转录起始区的H3K4m3和H3K9m3修饰的差异,探讨H3K4m3和H3K9m3修饰对胰岛组织特异性基因表达的作用.方法 采用染色质免疫共沉淀一实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测小鼠胚胎干细胞(mES,1×10~7)、小鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞(1×10~7)和小鼠β细胞株NIT-1细胞(1×10~7)三者中的胰岛组织特异性基因、Oct4基因和MLH1基因转录起始区H3K4m3和H3K9m3修饰的状况.同时采用实时定量逆转录(RT)-PCR检测上述3种细胞各基因mRNA表达水平.分析H3K4m3和H3K9m3修饰改变与基因表达之间的关系.结果 NIT-1细胞中Pdx-1、Pax4、MafA、Nkx6.1等胰岛组织特异性基因转录起始区的H3K4m的修饰水平分别为:(4.84±0.05)%、(9.91±1.33)%、(10.64±0.87)%、(0.23±0.03)%,与mES细胞比较明显增高(P<0.05),基因表达;NIH3T3细胞中Pdx-1、Pax4、MafA、Nkx6.1等胰岛组织特异性基因转录起始区的H3K9m3的修饰水平分别为:(0.64±0.21)%、(7.04±1.29)%、(0.39±0.10)%、(2.35±0.81)%,与mES细胞比较明显增高(P<0.05),基因不表达.结论 H3K4m3与H3K9m3修饰能相互协调,共同调控胰岛组织特异性基因的表达.     

自体脂肪移植在颞部分层填充治疗的应用

目的 通过对颢部的解剖分析,强调在不同区域、不同层次,多点分布移植白体脂肪,以提高其术后的成活率.方法 采用3L3M(即低压抽吸、低速离心、多点、多隧道、多层次、少量注射移植的方法)的自体脂肪移植综合技术,对颞部凹陷的56例患者按不同区域进行移植.①颞区在颞浅筋膜和皮下层填充;②额区在额肌下和皮下层填充;③在眶外侧区皮下行少量的脂肪填充.结果 56例患者,术后随访3个月至3年,颞区填充效果自然,移植脂肪吸收率低,效果满意率＞85.7%.结论 通过颞部分区、分层、多点注射自体脂肪颗粒填充颞部凹陷,可以获得丰满、自然的效果.     

C3d3与hCGβ基因融合质粒对不同品系小鼠DNA免疫增强抗hCGβ体液免疫效应

目的通过分子佐剂C3d3增强人绒毛膜促性腺激素(hCG)β基因疫苗在不同品系小鼠的体液免疫效应。方法分别用pCMV4-hCG-βC3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4-hCGβ+pCMV4-C3d3联合免疫以辅助性T细胞(Th)2型优势的BALB/c小鼠和Th1型优势的C57BL/6小鼠,免疫剂量分别为5、10、50、100和500 pmol,同一剂量免疫两次、间隔3周。初次及加强免疫后每周采血,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清抗hCGβ抗体水平。硫氰酸钠洗脱法ELISA分析抗hCGβ抗血清亲和力。结果两种品系小鼠pCMV4-hCG-βC3d3免疫产生抗hCGβ抗体的时间和效价均显著早(高)于pC-MV4-hCGβ和联合免疫组。在50 pmol免疫剂量时,C3d3在两种品系小鼠呈现出最强的佐剂活性,分别使hCGβ的免疫原性增强了400倍(BALB/c)和251倍(C57BL/6)。pCMV4-hCG-βC3d3组两个品系小鼠亲和力成熟较快。结论在Th2型及Th1型免疫优势的不同品系小鼠,分子佐剂C3d3均能增强hCGβ基因疫苗体液免疫效应。     

大量培养表皮细胞方法的研究

利用小鼠3T3成纤维细胞具有促进人表皮细胞生长的特点,观察了无血清培养时3T3细胞对低密度接种的传代表皮细胞生长的影响。结果表明表皮细胞具有较高的生长能力,细胞融合时间明显缩短,传代比例和培养面积明显扩大,这对临床大面积烧伤病人的救治具有重要意义。     

Albert Wojciech Adamkiewicz: the discoverer of the variable vascularity of the spinal cord

The present article contains a brief biography as well as a discussion of the more significant contributions of Albert Wojciech Adamkiewicz, Head of General and Experimental Pathology at the Jagiellonian University in Cracow in the years 1879 to 1892, and who is now primarily remembered as the discoverer of the major radicular artery eponymically named "Adamkiewicz's artery." His work as an investigator of the variability of the vasculature of the spinal cord led to his major contributions to present clinical practice in such areas as vascular surgery, neurosurgery, pediatric surgery, and the surgery of the aorta, providing a permanent Polish eponymic accent in major textbooks in these specialties. This article also deals with Adamkiewicz's contributions in other fields, mostly involving the nervous system, such as the development of a new and original method for staining neuronal tissue (double staining of the spinal cord) and his extensive studies of spinal cord degeneration. The authors also present aspects of his career that brought ill fame to Adamkiewicz. These were his claims to have discovered the so-called nervous bodies and anticancer antitoxin, which were both severely criticized by his faculty peers at the Jagiellonian University. The biography is supplemented with an attempt at evaluating Adamkiewicz's entire scientific output, wherein unquestionable achievements and pointed discoveries prevail in comparison with failures.     

Critical role of physiologist John A. Johnson in the origins of Minnesota's billion dollar pacemaker industry

Complete heart block developed in more than 10% of C. Walton Lillehei's early patients undergoing closure of ventricular septal defects, and hospital mortality was 100% in this group of patients. This problem of early fatality from heart block was completely eliminated with the use of a myocardial electrode in combination with an external plug-in electric stimulator. This method of treatment, suggested by Dr John A. Johnson, a professor of physiology at the University of Minnesota, was first used by Dr Lillehei on January 30, 1957. The next 3 years would witness the development of a portable, external, battery-powered pacemaker, and then an implantable pacemaker available for thousands of patients susceptible to lethal Stokes-Adams attacks. Fifty years have passed, and in 2005, approximately 800,000 pacemakers were implanted worldwide.     

The evolution of cardiovascular surgery in China

The history of the development of cardiovascular surgery in China was little known to the West not only because the majority of the earlier reports were published almost exclusively in the Chinese language but also because China was essentially closed to the West before the 1980s. We present here an account of how some Chinese surgeons struggled to establish a new specialty in a country that makes up more than one fifth of the world population.     

The first successful repair of postinfarction ventricular septal defect: influence of good fortune, team work, and an inquisitive mind

Research in our institution identified the first case in which cardiopulmonary bypass was utilized. By happenstance, it turned out to be the presumed first repair of postinfarction ventricular septal defect. The circumstances of this interesting case are presented and discussed in the context of our surgical heritage.