肿瘤细胞表面血小板免疫相关抗原的表达及其意义

血小板与肿瘤细胞通过各自膜表面表达的糖蛋白受体及其配基的连接作用相互激活以影响肿瘤细胞的转移过程 ,但在这方面的研究较少。我们曾用ＣＤ41、ＣＤ61、ＣＤ42ａ、ＣＤ42ｂ、ＣＤ62、ＣＤ63、ＣＤ31、ＣＤ9、ＴＳＰ、ＣＤ36等血小板单克隆抗体检测11种人癌细胞系 ,发现它们共同表达ＣＤ9、ＣＤ42ａ、ＴＳＰ、ＣＤ63,人胃癌细胞系ＭＧＣ80 3还同时表达ＣＤ36[1] 。我们拟对上述肿瘤细胞表面表达的血小板免疫相关抗原的意义进行讨论。一、ＣＤ9　ＣＤ9是一个 2 4ｋｄ膜表面蛋白 ,属于ＴＭ 4ＳＦ(ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ 4ｓｕｐｅｒｆ…     

肿瘤患者与正常人血小板表面粘附蛋白表达异同的临床观察及意义

目的观察恶性肿瘤患者血小板粘附分子的表达和血小板激活状态,探讨血小板功能异常与肿瘤发展的规律,为临床治疗提供依据。方法采用流式细胞术对５０例健康志愿者和１８１例恶性肿瘤患者血小板表面抗原的表达进行检测,对比正常人与早、中晚期肿瘤患者血小板粘附分子表达和血小板激活状态的异同。结果与正常人相比,肿瘤患者血小板ＣＤ４２ａ的表达减少,ＴＳＰ和ＣＤ３６的表达增强,ＣＤ３６＋ＴＳＰ＋、ＣＤ３６＋ＴＳＰ－、ＣＤ９＋、ＣＤ３１＋、ＣＤ６２＋ＣＤ６３－、ＣＤ６２＋ＣＤ６３＋、ＣＤ６２－ＣＤ６３＋血小板的比例增加。中晚期与早期肿瘤患者间的上述差异很明显;早期肿瘤患者与正常人间的差异则不显著;肿瘤患者血小板ＣＤ４１的表达与正常人相比未显示不同。结论肿瘤患者尤其是中晚期肿瘤患者血小板粘附分子的表达和释放增加,处于激活状态     

CD44在胃癌中的表达及其临床意义

肿瘤的浸润转移是肿瘤细胞与宿主间复杂、多步骤相互作用的结果。Ｌｉｏｔｔａ［１］首先提出浸润转移的三步学说：即粘附、降解和移动。其中粘附是指肿瘤细胞通过自身细胞膜表面的粘附受体与细胞外基质成分间的相互作用。ＣＤ４４是近年来研究较多的一类粘附因子,为分布极为广泛的一组细胞表面跨膜糖蛋白,参与细胞与细胞,细胞与基质之间的特异性粘连。其转录子根据所含外显子可分为两种类型：标准型ＣＤ４４（ｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒｍＣＤ４４,ＣＤ４４ｓ）和变异型ＣＤ４４（ｖａｒｉａｎｃｅｆｏｒｍＣＤ４４,ＣＤ４４ｖ）。ＣＤ４…     

尿激酶受体与肿瘤

尿激酶受体（ｕ－ＰＡＲ,ＣＤ８７）是纤溶系统中的一个多功能受体,介导纤溶酶原的活化、信号传递及细胞的粘附等。它在肿瘤的生长、浸润和转移过程中也起着重要的作用,并和肿瘤的恶性程度相关。检测肿瘤细胞表面ｕ－ＰＡＲ或血浆中可溶性ｕ－ＰＡＲ（ｓｕ－ＰＡＲ）的水平,有助于了解肿瘤病人病情及预后。阻止尿激酶（ｕ－ＰＡ）与其受体的结合抑或调节肿瘤细胞表面ｕ－ＰＡＲ的表达,可以抑制肿瘤的浸润和转移,达到治疗肿瘤的     

整合素Ⅱb／Ⅲa抑制剂抗凝腺腺样囊性癌转移的实验研究

目的：探讨涎腺腺样囊性癌（ｓａｌｉｖａｒｙ ａｄｅｎｏｉｄ ｃｙｓｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＳＡＣＣ）。转移与ＳＡＣＣ细胞－血小板粘附的关系,观察整合素Ⅱｂ／Ⅲａ抑制剂抗ＳＡＣＣ转移的作用。方法：体外实验观察高转移潜能的ＳＡＣＣ－ＬＭ细胞、非高转移潜能的ＳＡＣＣ－８３细胞与血小板的粘附,阿斯匹林、阿期匹林镁、精氨酸－天冬氨酸（ａｒｇｉｎｉｎａ－ａｓｐａｒｔａｔｅ,ＲＤ）对ＳＡＣＣ－ＬＭ细胞与血小     

晚期非小细胞肺癌患者外周血程序性死亡受体１和程序性死亡受体配体１的表达及临床意义

目的：探讨晚期非小细胞肺癌（ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）患者外周血程序性死亡受体 １（ｐｒｏ ｇｒａｍｍｅｄｄｅａｔｈ１,ＰＤ １）和程序性死亡受体配体 １（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｄｅａｔｈ ｌｉｇａｎｄ１,ＰＤ Ｌ１）的表达及临床意义。方法：连续 收集 ２０２０年 １月至 ２０２１年 ２月遂宁市中心医院呼吸与重症医学科二病区收治的 ５６例晚期 ＮＳＣＬＣ为肺癌组,并按 照 １∶２的比例选择科室同期收治的性别、年龄相匹配的普通肺部疾病患者 １１２例为对照组,采用流式细胞学检测两 组外周血 Ｔ细胞亚群 ＰＤ １和单核细胞 ＰＤ Ｌ１表达水平;进一步对肺癌组中完成２～４个周期化疗后疗效评估为部分 缓解（ｐａｒｔｉａｌｒｅｓｐｏｎｓｅ,ＰＲ）和疾病进展（ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｄｉｓｅａｓｅ,ＰＤ）患者进行亚组分析,比较两组治疗前后外周血 ＰＤ １ 和 ＰＤ Ｌ１表达水平的差异。结果：ＮＳＣＬＣ组患者外周血 ＣＤ４＋Ｔ细胞、ＣＤ８＋Ｔ细胞 ＰＤ １表达率均明显高于对照组 （２７．８８％ ±６．６６％ ｖｓ２１．５４％ ±５．４８％）、（２０．１７％ ±８．１８％ ｖｓ１４．７８％ ±４．８３％）,差异有统计学意义（均 Ｐ＜ ０．０５）;ＮＳＣＬＣ组患者外周血 ＣＤ１４＋单核细胞表面 ＰＤ Ｌ１表达率明显高于对照组（３９．４２％ ±９．１１％ ｖｓ１５．２２％ ± ４．３４％）,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。临床疗效为 ＰＲ的 ＮＳＣＬＣ患者治疗后其外周血 ＣＤ４＋Ｔ细胞、ＣＤ８＋Ｔ细胞 ＰＤ １表达率及 ＣＤ１４＋单核细胞 ＰＤ Ｌ１表达率均较治疗前的基线水平明显下降（２２．０５％ ±５．８８％ ｖｓ２８．１３％ ± ６８９％）、（１６．８３％ ±５．１５％ ｖｓ２１．０４％ ±６．０２％）、（１８．２２％ ±７．１７％ ｖｓ３９．９８％ ±９．０２％）,差异均有统计学意义 （均 Ｐ＜０．０５）;ＰＤ组患者的 ＰＤ １、ＰＤ Ｌ１表达水平均较治疗前基线水平进一步上升（３４．５５％ ±７．１７％ ｖｓ２６．９７％ ± ６．５４％）、（２６．３３％ ±７．０９％ ｖｓ２０．５５％ ±６．１８％）、（４９．７７％ ±９．２５％ ｖｓ３８．８７％ ±８．７８％）,差异均有统计学意义 （均 Ｐ＜０．０５）。结论：晚期 ＮＳＣＬＣ患者外周血 Ｔ细胞和单核细胞存在 ＰＤ-１和 ＰＤ-Ｌ１表达的异常上调,提示可通过 检测免疫细胞表面 ＰＤ-１／ＰＤ-Ｌ１的表达水平来判断疾病严重程度和作为预后的辅助生物学预测指标。     

HSV-tk基因在人乳腺癌细胞中的表达及其诱导杀伤的特性研究

ＨＳＶ ｔｋ基因转移联合ＧＣＶ的方法已成为肿瘤基因治疗的重要策略之一[1] 。ＨＳＶ/ＴＫ ＧＣＶ系统通过直接作用或旁观者效应杀伤肿瘤细胞 ,被杀死的瘤细胞经抗原递呈细胞如ＤＣ处理后 ,递呈给Ｔ细胞 ,从而产生了肿瘤特异性免疫。自杀基因疗法在治疗肿瘤时 ,瘤细胞的接种作用和凋亡现象均能刺激机体免疫系统 ,通过免疫反应可能达到消灭肿瘤、保护宿主以防肿瘤复发和转移的长期作用[2 ] 。本研究利用逆转录病毒将Ｈｙ ｔｋ基因转入人乳腺癌细胞株ＭＣＦ 7中 ,经潮霉素筛选获得了稳定表达ｔｋ的ＭＣＦ 7/ＴＫ细胞克隆 ,在ＧＣＶ作用下 ,其…     

高聚金葡素活化淋巴细胞的抗胶质瘤效应

胶质瘤是神经系统发病率最高的肿瘤。由于肿瘤呈浸润性生长 ,手术难以完全切除 ,因此 ,其治疗成为神经外科最棘手的问题之一。目前 ,一般认为机体免疫功能下降可能是肿瘤形成的原因之一 ,而抗肿瘤免疫主要是细胞免疫 ,所以提高机体的细胞免疫以杀伤肿瘤细胞已成为肿瘤免疫治疗的热点。本文应用抗ＣＤ3,ＣＤ4 ,ＣＤ8单抗行ＡＰＡＡＰ法对淋巴细胞进行标记 ,从胶质瘤患者收集的外周血淋巴细胞检测结果可以看出 ,患者在用高聚金葡素前ＣＤ3 ,ＣＤ4 Ｔ淋巴细胞较正常值明显减少。应用高聚金葡素激活后 ,测定结果显示诱导活化的细胞主要是ＣＤ4 …     

TM4SF的生物学功能及肿瘤转移抑制作用

Ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ４Ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ（ＴＭ４ＳＦ）属于细胞膜糖蛋白的特殊家族，其结构特征是其成员具有４个高度保守的穿膜结构区。ＴＭ４ＳＦ参与细胞增生的调节，最近研究表明，ＴＭ４ＳＦ对肿瘤的转移也具有调节作用，ＴＭ４ＳＦ可与螯合素粘膜受体结合成复合体并可调节整合系的粘附功能，与转移抑制有关的ＴＭ４ＳＦ成员主要有ＫＡＩ１／ＣＤ８２，ＭＲＰ－１／ＣＤ９和ＭＥ４９１／ＣＤ６３。     

粘附分子CD44v6在乳腺癌中表达及意义

肿瘤的浸润、转移是肿瘤细胞之间以及肿瘤细胞与细胞间质之间复杂、多步骤作用的结果。其中粘附分子在此过程中起着重要的作用。ＣＤ4 4是近年来研究较多的一类粘附分子 ,为分布极为广泛的一组细胞表面跨膜糖蛋白 ,参与细胞与细胞、细胞与间质之间的特异性粘接 ,其转录分子根据所含外显子可分为两种类型 :标准型ＣＤ4 4 (ＳｔａｎｄａｒｄｆｏｒｍＣＤ4 4 ,ＣＤ4 4ｓ)和变异型ＣＤ4 4 (ＶａｒｉａｎｃｅｆｏｒｍＣＤ4 4 ,ＣＤ4 4ｖ)。ＣＤ4 4基因变异体表达与肿瘤转移有关 ,其中ＣＤ4 4ｖ6与乳腺癌转移有较强关联性。本文对ＣＤ4 4ｖ6基因定…     

肺癌组织中CD15表达与胸内淋巴结转移的关系

细胞粘附分子（Ｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍａｔｅｒｉａｌ，ＣＡＭ）是细胞之间及细胞与细胞外基质间的一类粘附物质，该物质的粘连与解粘连同肿瘤的侵袭、转移有关［１］。本文采用免疫组化ＳＰ法研究观察ＣＤ１５（ＣＡＭ中的一种）在正常肺组织和４７例原发性肺...     

CD44 粘附分子在鼻咽癌中的表达与转移的关系

本实验用抗生物素蛋白－生物素过氧化酶复合体方法（Ｓ－Ｐ）检测了３０例转移及非转移鼻咽癌组织中肿瘤细胞的ＣＤ４４表达，同时检测了将克隆株（ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５）裸鼠体内连续传代获得的裸鼠移植瘤组织和回复培养细胞ＣＤ４４粘附分子的表达。３０例鼻咽癌标本中有１８例表达阳性，ＣＤ４４表达与肿瘤的分化密切相关，在中等程度到低分化肿瘤组织的肿瘤细胞表达强阳性，肿瘤的侵袭和转移密切相关，其中转移组阳性表达明显高于非转移组（Ｐ＜０．０５）。不同代之间裸鼠移值瘤和回复培养的肿瘤细胞中ＣＤ４４粘附分子的表达有差异。其中第四代裸鼠移植瘤和回复培养的肿瘤细胞ＣＤ４４粘附分子的表达明显高于原代移植瘤及原代细胞（Ｐ＜０．０５）。裸鼠移植瘤中ＣＤ４４粘附分子的表达与肿瘤转移率成正相关关系。在鼻咽癌组织中ＣＤ４４强表达可能与肿瘤低分化和转移有关。ＣＤ４４粘附分子的表达与鼻咽癌裸鼠移植瘤转移关系密切。     

树突状细胞与肿瘤细胞融合后对肿瘤发生和生长的抑制作用

目的研究树突状细胞（ＤＣ）与肿瘤细胞（ＳＰ２／０）融合后在体内的抗肿瘤效应。方法体外分离诱导扩增ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓ＤＣ,然后与ＳＰ２／０细胞进行融合,将融合细胞接种于同基因小鼠皮下,观察肿瘤的生长及组织病理学特征。结果ＤＣ与ＳＰ２／０细胞融融后接种于小鼠能抑制肿瘤的生长,肿瘤的发生、生长速度及病理组织学改变的显示出ＤＣ－ＳＰ２／０融合细胞的抑制效应。结论ＤＣ与肿瘤细胞融合后在体内可产生抗肿瘤免疫     

树突状细胞诱导的细胞毒T淋巴细胞抑制移植瘤细胞增殖

目的　研究树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导的细胞免疫能否抑制裸鼠移植瘤肿瘤细胞增殖。方法　联合应用粒／巨细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ  Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）直接从肝癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ;以源于人肝癌细胞系 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ; Ｄ Ｃ 激活同源的 Ｔ 淋巴细胞产生细胞 毒性 Ｔ 淋 巴细胞 （ Ｃ Ｔ Ｌ）; 建立 人肝癌 细胞 系 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤模型; Ｃ Ｔ Ｌ 治疗人肝癌细胞系 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤;检测移植瘤标本肿瘤细胞 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 表达水平。结果　 Ｄ Ｃ诱导的 Ｃ Ｔ Ｌ抑制 Ｈｅｐ Ｇ２ 裸鼠移植瘤细胞增殖从而抑制移植瘤生长。结论　经肿瘤抗原激活的 Ｄ Ｃ 作为一新概念上的抗肿瘤疫苗有可能在肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

ＩＬ-６致非小细胞肺癌 ＰＤ-１抑制剂治疗抵抗的效应和机制研究

目的：通过回顾性分析晚期非小细胞肺癌（ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）患者外周血白细胞介素 ６（ｉｎ ｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６,ＩＬ ６）水平与程序性细胞死亡蛋白 １（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈｐｒｏｔｅｉｎ １,ＰＤ １）抑制剂疗效的相关性,初步探 讨 ＩＬ ６致 ＰＤ １抑制剂治疗抵抗的效应和机制。方法：纳入接受 ＰＤ １抑制剂治疗且有治疗前外周血 ＩＬ ６检测结果 的晚期 ＮＳＣＬＣ患者,分析 ＩＬ ６水平与客观缓解率（ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅｒａｔｅ,ＯＲＲ）、持续临床获益（ｄｕｒａｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｂｅｎｅ ｆｉｔ,ＤＣＢ）、无持续临床获益（ｎｏｎ ｄｕｒａｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｂｅｎｅｆｉｔ,ＮＤＢ）的相关性。通过 ＣＣＫ ８及 Ｋｉ６７实验检测 ＩＬ ６对 Ｔ细胞 杀伤肿瘤细胞效应的影响,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测目的蛋白的表达情况。结果：３０例晚期 ＮＳＣＬＣ患者中 ＤＣＢ组 ＩＬ ６水平 显著低于 ＮＤＢ组（中位值 ４．６０ｐｇ／ｍＬｖｓ１２．８８ｐｇ／ｍＬ,Ｐ＝０．００２）。低 ＩＬ ６组（＜７ｐｇ／ｍＬ,ｎ＝１０）与高 ＩＬ ６组（≥７ ｐｇ／ｍＬ,ｎ＝２０）相比,ＤＣＢ占比更大（１００％ ｖｓ５０％,Ｐ＝０．００２）,ＯＲＲ更高（６５％ ｖｓ２０％,Ｐ＝０．０２５）,中位无进展生存 期更长（未达到 ｖｓ８个月,Ｐ＝０．００７）。ＣＣＫ ８及 Ｋｉ６７检测结果示,外加 ＩＬ ６可显著抑制 Ｔ细胞对 Ｈ１２９９、Ａ５４９细胞 的杀伤效果。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现,外加 ＩＬ ６可显著上调 ｐ ＳＴＡＴ３、ｐ ＡＫＴ水平,并显著下调 ＳＴＩＮＧ和 ｐ-ＴＢＫ１表 达。结论：外周血 ＩＬ-６水平与晚期 ＮＳＣＬＣ患者 ＰＤ-１抑制剂治疗效果显著负相关。ＩＬ-６可能通过活化 ＳＴＡＴ３-ＡＫＴ 通路进而抑制 ＳＴＩＮＧ-ＴＢＫ１信号,减弱 Ｔ淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤。     

转移相关基因CD44V6在不同恶性肿瘤细胞系中的表达及意义

目的 寻找具有高转移潜能的肿瘤细胞系。方法 采用免疫组织化学染色ＳＰ法,检测ＣＤ４４Ｖ６在不同恶性肿瘤细胞系中表达。结果 仅有Ｃｏｌｏ－２０５细胞表达ＣＤ４４Ｖ６,其表现为细胞膜表面有呈连续线状分布的棕色颗粒。结论 大肠癌Ｃｏｌｏ－２０５细胞可能具有较高的转移能力。     

肺癌组织CD44和TSP-1基因表达与肿瘤进展的关系

研究肺癌组织中ＣＤ４４和ＴＳＰ－１的表达并分析其与患者临床预后的关系。方法应用免疫组化法检测１１２例肺癌组织中ＣＤ４４和ＴＳＰ－１表达,其中２５例标本同时用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＴＳＰ－１表达。结果ＴＳＰ－１在肺腺癌中的表达（７４．３６％）明显高于鳞癌和小细胞癌（４７．１７％,Ｐ＝０．０３;３５．７１％,Ｐ＝０．０２）,ＣＤ４４Ｈ及ＣＤ４４ｖ６在小细胞肺癌中均表达极低;ＣＤ４４Ｈ在肺腺癌中的表达（６１     

腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶自杀基因联合IL-2基因疗法的肿瘤治疗作用及免疫机理分析

目的以腺病毒作为载体，将大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（ＣＤ）基因与小鼠ＩＬ－２基因联合转移，研究其体内抗肿瘤作用及免疫机理。方法小鼠皮下接种黑色素瘤Ｂ１６Ｆ１０细胞后３天，肿瘤局部注射表达ＩＬ－２的重组腺病毒ＡｄＩＬ－２和表达ＣＤ的重组腺病毒ＡｄＣＤ，然后连续１０天给予５－氟胞嘧啶（５－Ｆｃ）３００ｍｇ／ｋｇ进行治疗。结果联合治疗组荷瘤小鼠皮下肿瘤结节的生长明显受到抑制，小鼠存活期明显长于ＡｄＩＬ－２、ＡｄＣＤ／５－Ｆｃ、ＡｄｌａｃＺ／５－Ｆｃ或ＰＢＳ组。经联合治疗后，小鼠脾细胞的ＮＫ活性和ＣＴＬ杀伤活性明显增强；肿瘤瘤体内ＣＤ４、ＣＤ８细胞浸润增加；肿瘤细胞表达Ｈ－２Ｋｂ和Ｂ７－１分子明显增加。结论联合应用自杀基因和ＩＬ－２基因治疗，一方面可以明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长，另一方面可以提高机体对肿瘤细胞免疫应答，增加机体的抗肿瘤作用，是肿瘤基因治疗中一条行之有效的途径。     

肿瘤疫苗的研究现状与进展

肿瘤疫苗是利用肿瘤细胞或肿瘤抗原类物质诱导机体产生针对肿瘤细胞的免疫反应 ,抑制其生长 ,防止复发和转移。近年来 ,随着肿瘤免疫学、分子生物学的迅速发展 ,肿瘤疫苗的研制取得了重大进展 ,已有多种瘤苗进入了临床试验。一、肿瘤免疫与免疫逃逸　机体肿瘤免疫以细胞免疫为主 ,Ｔ细胞介导的免疫应答起重要作用。抗原致敏的Ｔ细胞只能特异地杀伤、溶解带有相应抗原的肿瘤细胞 ,并受ＭＨＣ限制。激活Ｔ细胞需双重信号 ,Ｔ细胞受体与抗原结合后 ,提供第一信号 ,共刺激因子Ｂ7等为第二信号。ＣＤ8 ＣＴＬ细胞在ＴＨ细胞辅助下活化后除直接杀…     

日达仙诱导肿瘤细胞凋亡的研究

细胞凋亡是有机体各组织细胞衰老和死亡的主要形式 ,而肿瘤细胞的增殖与凋亡 ,决定了肿瘤发生、发展和转归。当肿瘤细胞凋亡基因被抑制 ,致癌基因活化 ,则导致肿瘤细胞无限制的增殖、浸润和转移。本研究通过对日达仙 (Ｔｓα1)体外诱导肿瘤细胞凋亡的研究 ,探讨Ｔｓα1治疗肿瘤的作用机制。方法 :①Ｔｓα1对肿瘤细胞生长的抑制试验 (ＭＴＴ法 ) ,用ＲＰＭＩ 16 40全培养基调整人类肝癌ＳＭＭＣ 772 1细胞 (活度 >98% ,浓度为 2× 10 6/ｍｌ) ,将 10 0 μｌ细胞悬液加入 96孔培养板 ,37℃ ,5 %ＣＯ2 条件下培养 2 4ｈ ,然后加入不同浓度的日…