氟对大鼠氟斑牙形成和成釉细胞DNA损伤的研究

目的：研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙成釉细胞DNA损伤的影响。方法：给雄性SD大鼠饮用含10、50、100mg/LNaF的高氟水120d,制备氟斑牙模型,用单细胞凝胶电泳检测DNA的损伤。结果：雄性SD大鼠饮用高氟水后,血清氟含量较对照组显著增高,P〈0.05。饮水氟含量与血清氟含量的相关系数为0.9153（P〈0.05）,具有较好的剂量-效应关系,大鼠切牙呈现典型的氟斑牙改变。在50mg/LNaF的剂量条件下,大鼠切牙成釉细胞彗星长与对照组比较,P〈0.05。在100mg/LNaF的剂量条件下,彗星长、Olive尾距、尾分布距与对照组比较,P〈0.05,而尾长值虽比对照组增加,但P〉0.05。低剂量染氟组（10mg/LNaF）大鼠切牙成釉细胞DNA损伤情况与对照组比较,没有显著性差异（P〉0.05）。结论：在氟中毒引起氟斑牙的过程中,大鼠切牙成釉细胞发生明显的DNA损伤。     

氟对大鼠切牙细胞Fas信号通路的作用研究

目的 研究氟对大鼠切牙细胞Fas表达及胱天蛋白酶(caspase)3和caspase-8活性和细胞凋亡的影响,以期进一步探讨氟对牙齿的作用以及氟斑牙的发生机制.方法 将40只SD大鼠按随机数字表法随机分为4组,每组10只.低剂量染氟组(低氟组)、中剂量染氟组(中氟组)和高剂量染氟组(高氟组)分别饮用以蒸馏水配制的含10、50和100 mg/L NaF的高氟水;对照组饮用不添加NaF的蒸馏水;在60、90 d时各组分别处死5只动物.用免疫组化法检测Fas的表达,采用酶标仪检测caspase-3和caspase-8的活性,用流式细胞术检测大鼠切牙细胞凋亡.结果 在染氟60 d时,对照组、低氟组、中氟组及高氟组的Fas表达结果分别为:0.1819±0.0025、0.2120±0.0084、0.2283±0.0183及0.2818±0.0233;在染氟90 d时,对照组、低氟组、中氟组及高氟组的Fas表达结果分别为:0.2077±0.0289、0.2216±0.0105、0.2377±0.0059及0.2775±0.0088.大鼠切牙细胞Fas表达和caspase-3活力随染氟剂量增高而增强,存在显著的剂量-效应关系,实验60及90 d时Fas的相关系数分别为0.9728(P<0.01)和0.9889(P<0.01);caspase-3的相关系数分别为0.9533(P<0.01)和0.9849(P<0.01).在染氟90 d时,大鼠切牙细胞凋亡率和caspase-8活力随染氟剂量增高而增强,凋亡率和caspase-8的相关系数分别为0.9733(P<0.01)和0.9928(P<0.01).在染氟60和90 d时,大鼠切牙细胞Fas表达与caspase-3活力之间存在明显相关关系,相关系数分别为0.9619(P<0.01)和0.9912(P<0.01);在染氟90 d时,大鼠切牙细胞Fas表达与凋亡率和caspase-8活力之间也有明显的相关关系,Fas与凋亡率和caspase-8的相关系数分别为0.9841(P<0.01)和0.9767(P<0.01).结论 在10、50和100 mg/L NaF剂量条件下染氟60和90 d,大鼠切牙细胞Fas表达增强并介导caspase激活和细胞凋亡,详尽机制仍需深入探讨.

Abstract：

Objective To investigate the effects of fluoride on Fas expression, caspase-3 and caspase-8 activity and apoptosis in rat incisor cells. Methods Forty male SD rats were divided into 4 groups randomly and provided with distilled water containing NaF at the doses of 0, 10, 50 and 100 mg/L respectively. Each group had 10 animals. Five animals were sacrificed at 60 and 90 days respectively. Fas expression was measured with immunohistochemistry, and colorimetric assay was used to examine caspase-3 and caspase-8 activity with enzyme-labelled meter. The apoptosis was detected by flow cytometry in mandibular incisor cells. Results NaF at the doses of 10,50 and 100 mg/L for 60 d and 90 d caused Fas overexpression, promoted activity of caspase-3 and caspase-8, increased apoptosis rate in mandibular incisor cells. At 60 days,the value of Fas expression was 0.1819±0.0025 for control, 0.2120±0.0084 for 10 mg/L NaF group, 0.2283±0.0183 for 50 mg/L NaF group, 0.2818±0.0233 for 100 mg/L NaF group. At 90 days,the value of Fas expression was 0.2077±0.0289 for control, 0.2216±0.0105 for 10 mg/L NaF group, 0.2377±0.0059 for 50 mg/L NaF group, 0.2775±0.0088 for 100 mg/L NaF group. Statistics analysis yielded close relationship between the dose of NaF in water and the Fas expression, and also between the dose of NaF in water and caspase-3 activities, and the relative coefficient was 0.9728(60 d, P<0.01) and 0.9889(90 d, P<0.01)for Fas expression, 0.9533(60 d, P<0.01)and 0.9849(90 d, P<0.01)for caspase-3 activity respectively. Apoptosis rate and caspase-8 activity also had close relationship with the NaF doses, and the relative coefficient was 0.9733(90 d,P<0.01)for apoptosis, 0.9928(90 d, P<0.01)for caspase-8. At the doses of 10, 50 and 100 mg/L NaF for 60 d and 90 d, obvious relationship was found between Fas expression and caspase-3 activity, and the relative coefficient was 0.9619(60 d, P<0.01) and 0.9912(90 d, P<0.01). Obvious relationship between Fas expression and apoptosis, between Fas expression and caspase-8 activity was found in groups for 90 d, and the relative coefficient was 0.9841(P<0.01)for apoptosis, 0.9767(P<0.01)for caspase-8. Conclusions Fluoride could induce Fas overexpression and mediate caspase activation and apoptosis at the doses of 10,50 and 100 mg/L for 60 d and 90 d in rat mandibular incisor cells.     

过量氟对大鼠切牙Shh表达的影响

目的 研究过量氟对大鼠切牙Shh(Sonic Hedgehog)表达的影响,从分子水平探讨氟斑牙的发病机制.方法 20只Wistar大鼠随机分为2组:对照组(饮用蒸馏水)和实验组(饮用100 mg/L氟化水),复制氟斑牙动物模型,8周末处死动物,获取切牙标本,免疫组化染色观察Shh在大鼠切牙的表达定位及在对照组与实验组切牙表达的变化.结果 Shh在分泌期成釉细胞、成牙本质阳性表达.实验组Shh的表达明显弱于对照组,差异有显著性(P＜.01).结论 过量氟可能通过抑制Shh的表达,从而影响牙齿发育的启动和随后的细胞分化,导致釉质发育障碍.     

饮水型氟中毒动物模型建立及硬组织形态学改变的研究

目的建立慢性饮水型氟中毒动物模型并观察其硬组织形态学改变。方法 48只Wistar大鼠随机分成4组,建立氟中毒动物模型。染氟组分别饮用含氟化钠浓度为50、100、150 mg/L的自来水,对照组饮用常规自来水。8周后取大鼠切牙及股骨,通过组织HE染色方法观察各组大鼠切牙成釉细胞和大鼠骨组织形态学改变,采用氟离子选择电极测定各组大鼠血氟、牙氟及骨氟浓度。结果实验组大鼠切牙出现不同的氟牙症表现。各染氟组大鼠血氟(F=11.234,P<0.05),牙氟(F=275.148,P<0.05),骨氟(F=217.337,P<0.05)含量显著高于对照组,且随浓度增加而增加,各组间均具有显著差异。HE染色发现实验组大鼠切牙成釉细胞排列不规则呈多层,高柱状细胞结构变矮或消失,少量细胞发生扭曲,且随氟浓度增加以上病理学改变加重。大鼠股骨HE染色发现实验组骨组织出现骨小梁增多,排列致密等骨硬化性表现,骨骺板增厚,增殖层软骨细胞排列紊乱,随浓度的增加以上病理学改变加重。结论长时间饮用高浓度含氟水可引起慢性氟中毒,硬组织出现氟斑牙和氟骨症的病理学改变。     

硼氟联合作用对大鼠切牙釉蛋白表达的影响

目的通过观察过量氟、硼以及氟硼联合作用对大鼠切牙釉蛋白表达的影响,初步探讨硼在预防氟斑牙中的作用。方法选择32只Wistar大鼠,随机分为4组。Ⅰ组常规饮用蒸馏水;Ⅱ组饮用含氟化钠质量浓度为220 mg/L的氟化水;Ⅲ组饮用含硼质量浓度为382 mg/L的水;Ⅳ组饮用含氟、硼质量浓度分别为220 mg/L、382 mg/L的水。8周后处死动物,获取切牙标本,利用免疫组织化学法和HE染色观察大鼠切牙成釉细胞和釉蛋白的表达。结果Ⅱ组釉蛋白的表达明显弱于Ⅰ组（P<0.01）,Ⅲ组与Ⅰ组表达差异无统计学意义,Ⅳ组与Ⅰ组表达差异无统计学意义,Ⅳ组与Ⅱ组表达差异有统计学意义（P<0.01）。结论过量氟可抑制釉蛋白的表达,而经硼与氟的联合作用后,釉蛋白表达所受影响降低。硼可降低氟对牙齿的危害性。     

过量氟对大鼠牙及骨代谢的影响

目的: 观察氟对大鼠牙及骨代谢的影响, 探讨氟斑牙的发病机制。方法: 48只Wistar大鼠随机分为4组, 每组12只。染氟组分别饮用含氟化钠浓度为50、100、150 mg/L的自来水, 对照组饮用常规自来水。8周后麻醉处死, 观察大鼠氟斑牙的发病情况。应用放射免疫法测定血清骨钙素(OC)、甲状旁腺素(PTH)、降钙素(CT)水平;氟离子选择电极法测定血氟及牙氟浓度, 生化方法测定大鼠血清钙含量。采用SPSS13.0软件包对氟斑牙检出率进行χ2检验, 单因素方差分析比较各指标组间差异。结果: 各染氟组大鼠血氟、牙氟含量显著高于对照组(P<0.05), 差异具有显著性, 而且各组氟含量随饮水氟浓度的增高而逐渐增高(F值分别为11.234、275.148, P<0.01)。染氟组大鼠血清钙含量显著低于对照组(P<0.05), 且各组血钙含量随饮水氟浓度的增高而逐渐降低(F=3.906, P<0.05)。中、高剂量组大鼠血清PTH、OC含量显著高于对照组, 差异具有显著性(P<0.01);各组含量随饮水氟浓度的增高而逐渐增高, 组间差异显著(F值分别为8.548、3.801, P<0.05)。低、中剂量组大鼠血清CT呈下降趋势, 但与对照组相比并无显著差异(P>0.05);而高氟剂量组CT比对照组显著下降(P<0.01)。各组血清CT含量的组间差异显著(F=5.121, P<0.05)。结论: 氟影响大鼠的牙及骨代谢, OC、PTH及CT在氟牙症发病中起着重要作用。     

氟对大鼠切牙成釉细胞MMP-20及TIMP-2表达的影响及褪黑素对氟的拮抗作用

目的:通过研究不同浓度氟对大鼠切牙成釉细胞基质金属蛋白酶(MMP-20)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-2)表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制,并通过比较给氟组与加褪黑素组MMP-20、TIMP-2表达的差异,探讨褪黑素是否对氟斑牙的发生有拮抗作用。方法:40只Wistar大鼠随机分为6组,分别为对照组(A)、低氟组(B)、高氟组(C)、低氟组加褪黑素组(D)、高氟组加褪黑素组(E)和对照组加生理盐水组(F),建立氟斑牙动物模型。用HE染色和免疫组化染色观察不同浓度的氟及褪黑素对大鼠切牙成釉细胞的形态及MMP-20、TIMP-2表达的影响,采用MetaMorph显微图像分析系统和SPSS12.0软件包,分别进行图像和数据统计学分析。结果:给氟组大鼠切牙牙面出现白垩色改变,可见釉质表面横纹;成釉细胞形态发生改变,细胞排列紊乱,甚至成灶性堆积,可见空泡性变;MMP-20、TIMP-2在分泌期成釉细胞、成牙本质细胞均有表达,MMP-20在低氟组、高氟组的表达均显著低于对照组(P﹤0.01),但低氟组和高氟组之间无显著差别;TIMP-2在对照组和高氟组的表达差异有显著性(P﹤0.01),对照组和低氟组、低氟组和高...     

不同硒水平对氟中毒大鼠的影响

目的:研究不同硒水平对氟中毒大鼠的影响.方法:雄性SD大鼠60只,随机分为6组,对照组饮蒸馏水饲普通饲料,实验组饮含氟(F-)45 mg/L的蒸馏水,氟组饲普通饲料,4个氟硒组饲料中分别加入硒1.37 mg/kg、1.6 mg/kg、2.3 mg/kg、4 mg/kg,实验2个月.每周观察大鼠的一般情况,收集24 h尿液,测定尿氟含量及对大鼠氟斑牙进行分级.分别于实验1月末和2月末每组8只大鼠采取尾血,测谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性.结果:实验组与对照组相比体重增长慢、尿氟含量升高、血清GSH-PX和CAT活性下降.4个氟硒组较氟组体重增长快、尿氟含量升高、氟斑牙症状减轻,GSH-PX、CAT活性升高.结论:适量硒能纠正自由基代谢紊乱,对高氟具有一定的拮抗作用,过量则对氟有协同作用,以2.3 mg/kg硒对氟中毒的拮抗效果最好.     

不同浓度氟对大鼠切牙成釉细胞Smad2/3表达的影响

目的:研究不同浓度氟对大鼠切牙生长过程中成釉细胞内信号转导分子Smad2/3表达的影响,探讨氟斑牙的发病机制。方法:40只Wistar大鼠随机分为3组,建立氟斑牙动物模型。用HE染色和免疫组化方法观察氟对大鼠切牙成釉细胞形态及Smad2/3表达的影响,采用MetaMorph显微图像分析系统和SPSS12.0软件包分别进行图像和数据分析。结果:给氟组大鼠切牙出现典型氟斑牙症状。给氟组Smad2/3的表达显著低于对照组(P<0.01),但低氟组和高氟组间未见显著差异(P>0.05)。结论:过量氟可能通过抑制Smad2/3的表达来影响釉质的分化和发育,导致氟牙症的发生。     

过量氟对大鼠切牙成釉细胞Cbfα1表达的影响

目的:了解过量氟对大鼠切牙核心结合因子(Cbfα1)蛋白表达的影响,从蛋白水平探讨氟斑牙的发病机制.方法:20只Wistar大鼠,随机分为实验组(饮用100mg/L氟化水)和对照组(饮用蒸馏水),饲养8周后,处死大鼠,获取切牙标本,通过免疫组化染色进行观察,比较Cbfα1在2组大鼠切牙成釉细胞中的表达情况,采用Axioplan 2imaging显微图像分析系统和SPSS10.0软件包分别进行图像和数据统计分析.结果:免疫组化结果显示,Cbfα1在分泌期的成釉细胞胞核中明显表达,实验组阳性率(35.28±1.20)%显著高于对照组(14.41±4.07)%,差异有显著性(P＜0.01).结论:过量氟有可能引起Cbfα1蛋白在分泌期成釉细胞中的表达增多,从而在某种程度上影响釉质的矿化和发育,导致釉质发育障碍.     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节特征的锥形束CT研究

目的:采用锥形束CT(CBCT)研究替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节的影像学特征,探讨Ⅲ类功能状态下,颞下颌关节的生长、改建机制。方法:从就诊于昆明医科大学附属口腔医院正畸科的患者中选取符合纳入标准的替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者及骨性Ⅰ类错牙合患者各20名,使用NNT viewer 5.3图像处理软件进行三维重建及线距和角度的测量,并进行统计学分析。结果:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者组和替牙期骨性Ⅰ类错牙合患者组对比结果为:矢状面双侧关节前间隙偏小、双侧关节上间隙偏小、双侧关节结节斜度偏小;冠状面双侧关节内间隙偏小,双侧关节上间隙偏小,双侧关节外间隙偏小,右侧髁状突角度偏小;横截面右侧髁状突前后径偏小。结论:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节发育不充分,呈现髁状突,关节窝深度,关节结节斜度;冠状面关节内、外间隙均较小的特征。骨性Ⅲ类错牙合患者髁状突在关节窝中处于前置近关节窝顶位置。骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节影像学特征与其功能状态相适应。     

Ghlorhexidine as a root canal medicament for treating inflammatory lesions in the periodontal space

Abstract— The purpose of the present study was to investigate the therapeutic effect of intra-canal application of chlorhexidine on inflammatory root resorption. Dental pulps from monkey incisors were infected and resealed prior to extraction of the teeth. Root dentin was mechanically exposed and the teeth were replanted under aseptic conditions. After 4 weeks, the experimental teeth were dressed with chlorhexidine gel and resealed. Animals were sacrificed 4 weeks later, and their jaws prepared for histologic examination. Results showed that both marginal and apical periodontal inflammation and resorption were reduced in the chlorhexidine-treated teeth. It was concluded that the use of intra-canal chlorhexidine may be a useful adjunct in the treatment of inflammatory root resorption, but further human trials need to be undertaken before its clinical use can be recommended.     

小鼠牙髓干细胞同种异体移植后体内免疫反应初探

目的:初步探究小鼠牙髓干细胞同种异体移植后的全身免疫反应。方法:牙髓干细胞分离获得自C57BL/6 小鼠牙髓组织,培养至第3 代,与纳米羟基磷灰石(n-HA)复合培养形成复合物,扫描电镜观察其生长黏附情况。40只4周龄的C57BL/6 小鼠随机分成两组。实验组将复合物移植入上背部皮下,对照组将纳米羟基磷灰石植入上背部皮下,术后均使用外科方法严密缝合创口。两组动物术后均观察4周、6周处死,分离脾脏,制成脾淋巴细胞悬液,流式细胞仪测定CD4⁺、CD8⁺的值。结果:牙髓干细胞在体外与纳米羟基磷灰石结合良好;免疫组化染色实验组4周、6周均可见牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)阳性表达;实验组与对照组相比,术后4周、6周CD4⁺/CD8⁺值均无明显差异。结论:牙髓干细胞同种异体移植后,尚不能够引起机体的免疫排斥反应,其在体内仍具有低免疫原性,有望成为组织工程同种异体种子细胞来源。