应用IL-2和IL-3联合基因疗法对骨髓移植后造血及免疫功能重建的影响

以大剂量化疗后骨髓功能严重损伤再给予同基因骨髓移植的小鼠为实验模型，动态观察了联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法对同基因骨髓移植后实验小鼠骨髓造血免疫功能重建的影响。结果表明，ＩＬ－２基因疗法对造血重建无明显效果，ＩＬ－３基因疗法对免疫重建无明显作用，但联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ及ＣＦＵ－Ｅ恢复过程及提高骨髓细胞ＮＫ、ＬＡＫ活性和ＣｏｎＡ刺激的骨髓细胞增殖反应。提示联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓移植后造血及免疫重建过程，从而有可能提高骨髓移植成功率。     

IL－3基因疗法对化疗造血损伤的恢复作用

白细胞介素３（ＩＬ－３）是一种具有很强造血调控作用的细胞因子，本实验观察了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法对大剂量环磷酰胺体内注射后造血功能损伤小鼠的恢复作用。结果表明：接受ＩＬ－３基因疗法的实验小鼠外周血白细胞和血小板数量降低程度减弱，回升速度加快，其脾脏和骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＭＫ、ＣＦＵ－Ｓ水平显著地高于对照小鼠，可见成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法可显著地降低大剂量化疗后造血损伤程度，并能显著地促进受损的造血功能尽快恢复，提示若将ＩＬ－３基因疗法与大剂量化疗联合应用将提高肿瘤治疗的效果。     

IL—3基因疗法对化疗造血损伤的恢复作用

白细胞介素３（ＩＬ－３）是一种具有很强造血调控作用的细胞因子。本实验观察了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法对大剂量环磷酰胺体内注射后造血功能损伤小鼠的恢复作用。结果表明：接爱ＩＬ－３基因疗法的实验小鼠外周血白细胞和血小板数量降低程度减弱，回升速度加快，其脾脏和骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＭＫ、ＣＦＵ－Ｓ水平显著地高于对照小鼠，可见成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法可显著地降低大剂量化疗后造     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促     

白细胞介素3基因疗法和白细胞介素6基因疗法的联合造血调控作用

研究了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法，ＩＬ－６基因疗法以两者联合后对造血系统的影响。结果发现，单用ＩＬ－基因疗法的小鼠白细胞总数，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ等显著上升，但血小板上升程度经，单用ＩＬ－６基因疗法的小鼠血小板，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ上晚为显著。     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

IL－2基因转移的瘤苗与IL－1、低剂量环磷酰胺合用后的肿瘤治疗作用及其免疫学机理

经ＩＬ－２基因转移瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺转移结节明显减少、存活期明显延长，与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ合用后，可使荷瘤小鼠的肺转移结节更少，存活期更长，特别是当ＩＬ－２基因转移的瘤苗、ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ三者合用时抗肿瘤转移效果最强。对瘤苗治疗后荷瘤小鼠体内免疫功能的研究表明，小鼠脾脏ＣＴＬ活性、ＮＫ活性、ＩＬ－２导的ＬＡＫ活性均显著增强，脾脏细胞分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ水平也显著升高，当与ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ合用时，上述抗肿瘤免疫功能升高得更加明显，可见ＩＬ－２基因转移的瘤苗能通过有效地激活体内抗肿瘤免疫功能而具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤效果更佳，当三者同时合用时抗肿瘤效果最佳。     

多抗甲素与IL—2协同促进骨髓移植小鼠免疫功能重建

目的：为了探讨多抗甲素ＰＡＡ与ＩＬ－２对骨髓移植（ＢＭＴ）小鼠免疫功能重建的影响。方法：用致死量照射的Ｂａｂｌ／ｃ小鼠移植同系小鼠骨髓细胞后,分别给予ＰＡＡ、ＩＬ－２或ＰＡＡ＋ＩＬ－２,３０ｄ后检查３组ＢＭＴ小鼠免疫功能重建的情况。结果：ＢＭＴ后３０ｄ,自然恢复小鼠免疫功能十分低下,但ＰＡＡ及ＩＬ－２用药鼠脾细胞对丝裂原反应,对ＳＲＢＣ特异的ＰＦＣ数,对同种异型小鼠脾细胞ＤＴＨ及ＭＬＲ均明显高于移     

多抗甲素与IL—2协同促进骨髓移植小鼠免疫功能重建

目的：为了探讨多抗甲素ＰＡＡ与ＩＬ－２对骨髓移植（ＢＭＴ）小鼠免疫功能重建的影响。方法：用致死量照射的Ｂａｂｌ／ｃ小鼠移植同系小鼠骨髓细胞后,分别给予ＰＡＡ、ＩＬ－２或ＰＡＡ＋ＩＬ－２,３０ｄ后检查３组ＢＭＴ小鼠免疫功能重建的情况。结果：ＢＭＴ后３０ｄ,自然恢复小鼠免疫功能十分低下,但ＰＡＡ及ＩＬ－２用药鼠脾细胞对丝裂原反应,对ＳＲＢＣ特异的ＰＦＣ数,对同种异型小鼠脾细胞ＤＴＨ及ＭＬＲ均明显高于移     

白细胞介素—11对小鼠骨髓造血的影响

白细胞介素－１１（ＩＬ－１１）是一种新的造血生长因子，于１９９０年基因克隆成功。本文对ＩＬ－１１的造血调节作用进行了初步的研究，探讨了ＩＬ－１１及其与其它造血因子协同对小鼠骨髓造血祖细胞增殖的促进作用。结果表明，ＩＬ－１１单独对骨髓集落的形成无显著的促进作用，但与多系集落刺激因子ＩＬ－３一起则具有很强的协同作用，能明显促进小鼠骨髓Ｍｅｇ－ＣＦＵ和Ｍｉｘ－ＣＦＵ的形成。     

成纤维细胞介导白细胞介素6基因疗法对化疗导致的造血损伤的恢复作用

研究了成纤维细胞介导的人白细胞介素６（Ｉｎｔｅｔｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因疗法对预先体内注射１５０ｍｇ／ｋｇ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）所造成的造血损伤小鼠模型的治疗作用。结果发现，外周血血小板数量在移殖高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后第１０天开始持续上升，第２２天血小板数量恢复到化疗前水平，中性粒细胞数量也显著增高，但对白细胞恢复没有明显的促进作用。骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－ＭＫ在体内移殖高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后，体外动态观察发现：骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ在第４～７天左右数量为０，在第１０天左右数量开始上升，于第１６天左右数量显著增高，对ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ具有明显的恢复作用，ＣＦＵ－Ｓ数量也显著增高。表明成纤维细胞介导的白细胞介素６基因疗法能显著治疗化疗导致的造血损伤，可望为肿瘤放、化疗导致的机体造血损伤提供新的治疗途径。     

IL-4基因转染瘤苗体内抗肿瘤转移作用及其免疫机理的初步研究

将白细胞介素４（ＩＬ－４）基因转染Ｂ１６黑色素瘤细胞，筛选出高分泌克隆，体外扩增后经丝裂霉素Ｃ灭活制备成瘤苗，用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，同时用低剂量白细胞介素２（ＩＬ－２）及低剂量环磷酰胺（Ｃｙ）辅助治疗。结果发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺部转移结节明显减少，存活期明显延长，辅以ＩＬ－２治疗后效果更佳；同时辅以ＩＬ－２及Ｃｙ则治疗效果最佳。体内免疫功能研究发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后小鼠脾淋巴细胞诱导的ＣＴＬ及腹腔巨噬细胞杀伤活性明显升高，但脾脏ＮＫ及经诱导的ＬＡＫ活性变化不明显。脾淋巴细胞经诱导后分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ）中，ＴＮＦ和ＧＭ－ＣＳＦ在治疗各组有所升高。本实验结果表明，ＩＬ－４基因转染瘤苗能有效地激活体内抗肿瘤免疫功能并具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与低剂量ＩＬ－２和低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤转移效果更佳。     

rhGM—CSF／IL—3融合蛋白对人骨髓造血祖细胞体外培养的研究

研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白对人骨髓造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ）集落形成的影响，结果表明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３能显著促进ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成，分别与ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３单独或联合用药比较，差异有显著性（Ｐ〈０．００１），ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ＝ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成对融合蛋白均有剂量依赖性，培养体系浓度在５￣１０ｎ     

rhPRL对骨髓移植小鼠结肠腺癌肺转移的实验性治疗及免疫机理初探

通过体内实验进一步观察荷瘤小鼠放疗加骨髓移植后并用ｒｈＰＲＬ的治疗效果。选用Ｃ５７ＢＬ／６纯系小鼠，静脉注入同基因结肠腺癌细胞（ＭＣＡ－３８），待定向形成大量肺转移结节（１０ｄ）时进行全身致死放疗并进行ＳＢＭＴ，同时进行ｒｈＰＲＬ治疗。在治疗开始的１０ｄ和２０ｄ分别处死部分动物观察肺癌结节、骨髓ＣＦＵ－Ｃ、脾脏Ｔ细胞丝裂原反应与ＮＫ活性，最终计算生存期。结果表明ｒｈＰＲＬ对荷瘤小鼠具明显的治疗效果，生存期明显延长（Ｐ＜０．０１），由ＨＢＳＳ组的４３．７ｄ延至６３．１ｄ。治疗后１０ｄ和２０ｄ的肺结节数比ＨＢＳＳ组明显减少（Ｐ＜０．０１），且同时造血系统（ＣＦＵ－Ｃ）和免疫功能（Ｔ细胞和ＮＫ细胞）回升较ＨＢＳＳ组明显（均为Ｐ＜０．０１）。提示ｒｈＰＲＬ在骨髓移植模型中可促进造血系统和免疫功能的重建，从而控制肿瘤的进展并延长生存期。     

白细胞介素－11对小鼠骨髓造血的影响

白细胞介素－１１（ＩＬ—１１）是一种新的造血生长因子，于１９９０年基因克隆成功．本文对ＩＬ—１１的造血调节作用进行了初步的研究，探讨了ＩＬ—１１及其与其它造血因子协同对小鼠骨髓造血祖细胞增殖的促进作用．结果表明，ＩＬ—１１单独对骨髓集落的形成无显著的促进作用，但与多系集落刺激因子ＩＬ－３一起则具有很强的协同作用，能明显促进小鼠骨髓Ｍｅｇ—ＣＦＵ和Ｍｉｘ－ＣＦＵ的形成．     

重组人IL－6对大鼠急性白血病细胞体外增殖的抑制

我们已报道重组大鼠ＩＬ－３和小鼠ＧＭ－ＣｓＦ对ＬＴ１２白血病细胞的增殖有不同程度的抑制活性。本研究发现重组人ＩＬ－６在１０００～５０００Ｕ／ｍｌ呈剂量依赖性抑制ＬＴＩ２白血病祖细胞集落形成及ＤＮＡ合成。５０００Ｕ／ｍｌ对ＣＦＵ－Ｌ的抑制率达５２．９％，而对ＤＮＡ合成则为４１．３％，此外，ＩＬ－６还明显增加ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦ对ＬＴ１２细胞的抑制活性，对ＣＦＵ－Ｌ的抑制强弱依次为ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ、及ＩＬ－６＋ＩＬ－３，ＩＬ－６＋ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ三因子的结合并不能增加抑制效应；对ＤＮＡ合成的抑制作用为ＩＬ－６＋ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－３＋ＧＭ－ＣＳＦ＞ＩＬ－６＋ＩＬ－３。提示上述造血因子除刺激正常造血外，在白血病的治疗中可能具有一定意义。     

成纤维细胞介导白细胞介素6基因疗法对化疗导致的造血损伤的…

研究了成纤维细胞介导的人白细胞介素６（Ｉｎｔｅｔｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因疗法对预先体内注射１５０ｍｇ／ｋｇ，５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）所造成的造血损伤小鼠模型的治疗作用，结果发现，外周血血小板数量在移植高分泌ＩＬ－６成纤维细胞后第１０天开始持续上升，第２２天血小板数量恢复到化疗前水平，中性粒细胞数量也显著增高，但对白细胞恢复没有明显的促进作用，骨髓和脾脏ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－ＭＫ在体内移植     

成纤维细胞介导的人白介素6基因疗法增强机体免疫功能的实验研究

通过研究成纤维细胞介导的人ＩＬ－６基因疗法对机体免疫功能的影响，结果发现，高分泌ＩＬ－６成纤维细胞克隆体内移植后，能显著提高淋巴细胞增殖反应、ＩＬ－２和ＩＦＮ－ｒ产生水平以及ＮＫ和ＬＡＫ细胞的杀伤活性，当与ＩＬ－２合用时，对ＮＫ和ＬＡＫ活性的增强作用更加明显，表明成纤维细胞能显著增强机体免疫功能，可望为肿瘤生物治疗、造血功能重建等开辟新的途径。     

联合应用IL—2及IL—4基因转染瘤苗对实验性肺转移…

将ＩＬ－２基因转染的高分泌ＩＬ－２的Ｂ１６黑色素瘤细胞株（Ｂ２）及ＩＬ－４基因转染的高分泌ＩＬ－４的Ｂ１６黑色素瘤细胞株（Ｂ４）制备成新型瘤苗，用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，并辅以低剂量环磷酰胺，结果表明，荷瘤小鼠存活期明显延长；肺部转移结节数明显减少；两种瘤苗联合治疗后的疗效较单独使用明显，当辅以低剂量环磷酰胺时治疗效果更加明显。体内免疫功能检测表明，经两种瘤苗联合治疗的荷瘤小鼠脾细胞ＮＫ及ＣＴ     

MHCI类抗原多肽致敏IL—2基因修饰的树突状细胞对小鼠引流淋巴结T细胞亚群

目的：探讨ＭＨＣ Ｉ类分子限制性肿瘤抗原多肽Ｍｕｔｌ体外冲击白细胞介素２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２,ＩＬ－２）基因修饰的树突状细胞（Ｄｅｎｄｒｔｉｃ ｃｅｌｌｓ,ＣＤ）对小鼠体内特异性免疫的活化机制。方法：用腺病毒作为载体介导小鼠ＩＬ－２基因修饰ＤＣ,用小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌３ＬＬ细胞株ＭＨＣ Ｉ类分子限制性八肽Ｍｕｔｌ冲击ＩＬ－２基因修饰的ＤＣ（ＤＣ－ＩＬ－２Ｍｕｔｌ）免疫小鼠,用流式细胞术（ＦＡＣＳ）分析免疫保护小鼠接受３ＬＬ细胞再攻击后引流淋巴结内Ｔ细胞亚群的比例变化。结果：用Ｍｕｔｌ冲击的ＤＣ免疫的小鼠抵抗３ＬＬ细胞再攻击时,引流淋巴结内ＣＤ８＾＋Ｔ淋巴细胞比例明显升高,ＤＣ－ＩＬ－２－Ｍｕｔｌ免疫保护的小鼠接受３ＬＬ细胞再攻击后引流淋巴结内ＣＤ８＾＋和ＮＫ细胞的比例都明显升高。结论：研究表明ＭＨＣ Ｉ类