高效液相电化学检测器检测羟自由基

高效液相电化学检测器检测羟自由基刘雨，张均田（中国医学科学院，中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０）氧自由基，如羟自由基（·ＯＨ）、超氧阴离子（Ｏ）、过氧化物等在疾病的发生发展及毒性反应中起重要作用［１］，其中·ＯＨ是最活泼的自由基之一。·Ｏ...     

高效液相色谱-蒸发光检测器测定食品中的三氯蔗糖

目的建立食品中三氯蔗糖含量测定方法，并对前处理进行优化。方法采用高效液相色谱仪（HPLC），蒸发光检测器（ELSD），SUPELCO Discovery C18 4．6×150mm色谱柱，柱温：35℃，流动相由乙腈和超纯水组成，流速为1．0ml／min，蒸发管温度：4JD℃，气体压力3．5bar，放大倍数为6。结果采用HPLC—ELSD方法，其工作曲线的线性范围：0．1005～0．8040mg／ml，相关系数：r=0．99993，回收率：94．3％～97．1％，精密度（n=6）：1．9％～2．3％。结论方法准确、可靠，可用于三氯蔗糖的检测。     

用高效液相色谱电化学检测器测定大小鼠脑内单胺类物质的研究

应用反相高效液相色谱法和电化学检测器对单胺类物质如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺及酸性代谢产物3,4二羟基苯乙酸、5-羟吲哚醋酸和高香草酸的色谱条件及样品的制备进行了研究.结果表明:降低流动相的pH及甲醇含量或增加离子对B_8的含量可使样品的保留时间延长,而增加二正丁胺的含量可缩短保留时间。当pH=3.7,甲醇10％,二正丁胺1.3mmol,离子对B_81.2 mmol时,分离效果最好,能在25 min内将七种物质完全基线分离.在样品的制备方面,用高氯酸沉淀蛋白提取单胺类物质,45,000g×20 min一次离心取上清液20μl直接进样,所含杂质少且不干扰单胺类物质的测定.本实验方法简单,快速、灵敏,比较实用.     

高效液相色谱荧光检测法测定人体内血浆中美托洛尔的浓度

目的建立测定人血浆中美托洛尔的HPLC法。方法色谱柱为Kromasil,C18柱（5μm,150×4.6mm）,流动相为水相（含0.63%四甲基乙二胺及0.52%磷酸）：乙腈=74：26,v;Ex：277nm,Em：299nm。流速：1.0mL·min^-1。结果美托洛尔在1.700～108.530mg×L^-1检测浓度范围内呈良好线型关系（r^2=0.9995）。高、中、低3种浓度的日内、日间RSD〈15%,平均回收率分别为102.93%,100.22%,101.29%。结论该方法操作简便、快速,适用于临床美托洛尔的血药浓度监测及其药动学研究。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定松茸中甘露醇的含量

【目的】建立松茸中甘露醇的含量测定方法。【方法】应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器,氨基柱(UG 5μm,250mm×4.6 mm),乙腈-水(81:19)溶液为流动相,流速为1.0 ml/min,漂移管温度为90℃,载气(空气)压力为2.75 Bar。【结果】甘露醇在1.0～5.0 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.9996,n=5),回收率为100.1%(RSD为0.9%,n=5)。【结论】该方法简便准确,重现性好。     

高效液相色谱—荧光检测法测定血清5—羟色胺

介绍一种反相高效液相色谱固定一洗脱结合自然荧检测血清５－羟色胺的方法。该法分析速度快，色谱过程可在５ｍｉｎ内完成，预自理等操作和简便，方法线性良好，回收率可达９７％左右，适合于临床应用     

高效液相色谱—荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度

OBJECTIVE: To establish a high-performance liquid chromatography (HPLC) assay with an internal standard for determining plasma total homocysteine. METHODS: The Hcy-mixed disulfides or protein bound Hcy in the plasma were reduced with TCEP. Subsequently, the thiol-compounds in the samples were derivatized with a thiol-specific fluorogenic reagent, SBD-F. The derivate was then separated and detected by HPLC with fluorometric detection. RESULTS: The detection limit was 0.625 mumol.L-1; the rate of recovery was 98.87%; the intra-assay coefficient of variation (CV) was less than 5.5%; and the inter-assay CV was less than 9.0%. CONCLUSION: The method presented in this paper is simple, sensitive, precise, and stable.     

高效液相色谱—荧光检测法测定血清色氨酸

OBJECTIVE: To develop a rapid assay for determining tryptophan in human serum. METHODS: The serum sample was injected into the high performance liquid chromatography (HPLC) system after the precipitation of protein with perchloric acid, and was monitored with a fluorometric detector with wavelength settings of 254 nm for excitation and 313 nm for emission. The mobile phase is 20% acetonitrile. RESULTS: Good linearity was observed in 1.22-400 mumol.L-1 range for tryptophan. The detection limit was 0.1 mumol.L-1. The intra- and inter-assay coefficients of variation (CV) were 2.57% and 3.66%, respectively. The average recovery was 97.13%. The detection time of serum tryptophan was within 5 min. Phenyalanine, tyrosine, serotonin, and 5-hydroxyindoleacetic acid didn't interfere in the assay. CONCLUSION: This method is simple, rapid, sensitive, accurate, and suitable for clinical application.     

高效液相色谱—电化学检测家兔血清中对乙酰氨基酚

对乙酰氨基酚(扑热息痛)是常用解热镇痛药,测定方法有光谱法、气相色谱法、薄层层析法及液相色谱法,但对于微量血样,用以上方法不能得到满意的结果。本文利用其结构中酚羟基的电化学活性,采用高效液相色谱-电化学检测血清中对乙酰氨基酚,所得结果较为理想,该法稳定,专属性好,简便快速,测定所用血样仅需0.1ml,适用于临床监测。     

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定馒头中的合成色素

目的建立一种前处理简单、灵敏度高、重现性好的馒头中合成色素的检测方法。方法采用高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)法,样品用无水乙醇+氨水+水(7+2+1)溶液提取,Agilent HC-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)液相色谱柱分离,乙酸铵缓冲溶液(0.02mol/L)-甲醇为流动相进行梯度洗脱,检测波长448nm。结果测定结果具有良好的线性和重复性(RSD:1.25%～2.85%),样品加标回收率为87.4%～90.3%,方法检出限为0.002g/kg。结论该方法具有简便、快速、准确等优点,可用于准确测定馒头中的合成色素。     

高效液相色谱在中草药研究中的应用

绪论中草药化学研究主要是利用化学方法研究中草药的化学组成，寻找具有药用价值的活性化合物和其它具有开发价值的新化合物。经典的分离方法大多基于各种化合物溶解度的不同而采用不同溶剂由低极性到高极性分步提取，用溶剂结晶法纯化所提制得到的物质。由于中草药中化合...     

高效液相色谱法检测糖尿病肾病尿儿茶酚胺含量

目的: 研究一种简便、准确、易于临床推广的儿茶酚胺(CAs)检测方法,进行尿中 CAs测定,探讨 2 型糖尿病肾病(DN)动态血压(ABP)与尿儿茶酚胺(UCA)的关系。方法: 利用高效液相色谱及荧光检测器,对正常人和糖尿病肾病病人24 h尿中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)进行测定。结果: NE浓度在3~15 ng/ml范围及E浓度在0.3~1.5 ng/ml、DA浓度在1.5~120 ng/ ml范围内时,与色谱峰峰高的线性关系良好( r=0.999 1);NE、E回收率为 75%~82%,DA回收率为 76%;NE、E、DA的精密度 RSD(%)分别为 1.11%、7.21%、1.43% (n=5)。结论: 高效液相色谱法检测尿CAs具有简单、准确、特异性高的优点。通过对正常人及糖尿病肾病病人24 h尿样分析,不能认为交感神经肾上腺髓质系统活性与糖尿病肾病高血压及血压昼夜节律异常之间有相关性。     

高效液相色谱常用检测器在中药多糖成分分析中的应用概况

查阅文献,对近年来利用高效液相色谱技术分析中药多糖成分的研究进展进行综述,旨在帮助建立真正可靠的中药质量监控标准和监控方法,更好地继承和发展传统中药。     

强心甙的高效液相色谱方法

<正> 由于多数强心甙安全范围小,治疗量和中毒量接近,在剂量上不易掌握,因而在使用上受到一定限制。许多药物分析化学家长期从事植物强心甙及制剂的定性定量方法的研究,探寻灵敏,快速、准确的分析方法。如先后有纸层,薄层分析法,比色分析法,荧光分析法等,但结果往往不能令人满意,尤其在分析成分复杂的生药时,选择性问题难以克服。由于强心甙挥发性衍生物衍生过程复杂,气相色谱方法进展也较为缓慢,1974年     

高效液相色谱柱恒温箱的自制

高效液相色谱因具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高和应用范围广泛等特点，已成为化学、生化、医学、工业、环保、商检和法检等学科领域中的分离分析技术。是分析化学家和生物化学家手中用以解决他们面临的各种实际分析和分离课题必不可缺少的重要工具。高效液相色谱分析仪器主要由固定相、流动相、液相色谱柱和高压泵等组成。而高效液相色谱的分离过程是在液相色谱柱内进行的，     

液相分析仪荧光检测器标准物质的研制

按照国家检定规程的要求,研制了液相分析仪荧光检测器检定用标准物质.本文简要介绍了标准物质的配制方法;重点介绍了标准物质的均匀性检验、稳定性检验过程,详细分析了标准物质不确定度的评定.     

高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠血小板内5-羟色胺的含量

目的：建立高效液相色谱-荧光检测测定大鼠血小板内5-羟色胺含量的方法。方法：色谱柱为Nucleosil-C18（4 mm×250 mm,10 μm）,流动相：磷酸二氢钾（10 mmol/L,内含EDTA-Na2 0.3 mmol,pH=3.5）∶甲醇∶乙腈＝85∶10∶5,流速：0.5 ml/min,荧光激发波长：254 nm,发射波长：360 nm,增益：32。血小板沉淀用300 μl纯水悬浮,加入15 μl内标溶液（30 μg/ml,α-甲基-5-HT水溶液）,100 μl蛋白沉淀液,混匀,离心,取上清液20 μl,进样。结果：5-羟色胺在0.25～4.00 μg/ml浓度范围内,线性关系良好。5-羟色胺测定的批内和批间相对标准差（RSD）分别小于4.29％和4.44％,回收率为84.3％～88.7％。正常雄性SD大鼠血小板内5-羟色胺的平均含量分别为（1.65±0.14） μg/109 plts。结论：本法简便、准确、快捷,可用于大鼠血小板内5-羟色胺的测定。     

高效液相色谱在中药研究中的应用进展

中药制剂多为复方制剂，且所含成分复杂，给分析研究带来很大困难。高效液相色谱法是6O年代末发展起来的一项新技术，具有分离效能高，准确性好，分析速度快等优点、随着HPLC技术的不断发展，在中药分析研究方面的应用也日益广泛，并为中药分析研究工作提供了条件。近些年，HPLC在中药研究中的应用综合有以下几个方面。1HPLC在中药制剂分析研究中的应用中药制剂的质量，直接影响到药物的疗效，密切关系着病人的安危，应确保中药制剂、中成药的质量。但由于中药成分复杂，特别是复方制剂，除被测定的活性成分外，还含有其他许多成分，…     

高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠骨骼肌组织内微量三甲基组氨酸

目的 :建立快速检测肌肉组织内微量三甲基组氨酸 (3 MH)含量的方法。方法 :利用荧光胺与 3 MH在酸性和高温条件下发生柱前衍生反应 ,在ZORBAXSB C18(4 6× 15 0mmol/L ,5 μm)柱上 ,用 10mmol/L磷酸钠缓冲液 (含 30 %乙腈 ,pH 7 5 0 )作流动相 ,以 1 0ml/min的流速进行等度洗脱后 ,荧光 (激发波长 36 5nm/发射波长 4 6 0nm)检测 3 MH含量。结果 :应用此方法检测骨骼肌组织内的氨基酸 ,仅见到 3 MH和组氨酸的色谱峰 ,色谱保留时间分别约为 (4 4 5± 0 0 2 )min和 (6 92± 0 0 5 )min ,分离度 >16 ;线性检测范围是 0 0 0 5～ 10 0nmol/ml(r =0 9999,P =0 0 0 ) ;衍生回收率为 92 6 %～ 96 8% ;3 MH荧光衍生后 15d分析与衍生后立即检测相比结果无显著差异 (P =0 90 95 ,n =2 4 )。结论 :本方法测定骨骼肌组织内 3 MH ,衍生步骤简单 ,重复性好 ,检测灵敏度高 ,适合快速、准确、经济地大批量检测肌组织内的微量 3 MH ,为开展骨骼肌肌纤维蛋白分解代谢研究提供了可行的方法。