白细胞介素-1β介导牙髓细胞 MMP-1和COX-2的 mRNA表达的研究

目的 :观察白细胞介素 -1β对人牙髓细胞基质金属蛋白酶 -1(MMP -1)和环氧化酶 -2 (cyclooxyge nase -2 ,COX -2 )的mRNA表达的影响 ,探讨IL -1β介导MMP -1、COX -2对炎症的基质降解、炎性疼痛产生机制的影响。方法 :重组人IL -1β刺激牙髓细胞 18h ,提取牙髓细胞总RNA ,反转录为cDNA ,半定量PCR检测基质MMP -1、COX -2的mRNA的表达。结果 :外源性的重组人IL -1β明显地刺激牙髓细胞MMP -1、COX -2的mRNA的表达 ,并呈一定浓度依赖性。结论 :IL -1β使得牙髓细胞MMP -1、COX -2的mRNA的表达量增多 ,表明牙髓炎症时IL -1β分泌异常增多 ,会引发基质金属蛋白酶 -1、环氧化酶 -2 (COX -2 )表达异常的增多 ,参与并加剧炎性基质降解、炎性疼痛产生。     

人甲状旁腺激素1—34对培养的人牙髓细胞PTH—PTHrP受体mRNA表达的影响

目的: 观察人甲状旁腺激素1-34(human Parathyroid hormone 1-34,hPTH1-34)对唧-PTHrP(Parathyroid hormone-Parathyroid hormone related protein)受体mRNA在体外培养的人牙髓细胞中表达的影响,探讨PTH影响牙本质形成和矿化的机制.方法:将培养的第4代牙髓细胞分为两组:实验组培养基加入含33.3 nmol/L hPTH1-34,在其培养的第5,10,15,20天提取总RNA,以RNA为模板在逆转录酶作用下合成cDNA,加入特异引物进行PCR扩增,同时扩增β-肌动蛋白的eDNA作为半定量RT-PCR的内参照,对PCR产物进行半定量分析.结果:在人牙髓细胞培养的5、10 d,对照组和实验组的PTH-PTHrP受体mRNA水平均较低,10 d以后PTH-PTHrP受体mRNA水平开始升高,实验组高于对照组,差异有统计学意义.结论:PTH-PTHrP受体的表达与牙髓细胞的分化密切相关;hPTH1-34可以促进PTH-PTHrP受体的表达,PTH可能通过促进PTH-PTHrP受体的表达或与PTH-PrHrP受体结合影响牙本质的形成和矿化.     

IL-1β对体外培养人牙髓成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2的影响

目的:探讨白细胞介素-1β(interleukin-β,IL-1β)对体外培养的人牙髓成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metallproteinase-I,MMP-2)的影响。方法:利用免疫组化和明胶酶谱法,检测正常和经IL-1β刺激后的牙髓成纤维细胞中MMP-2的表达、分泌和活性。结果:MMP-2在正常和经IL-1β刺激后的牙髓成纤维细胞中均有表达,后者表达明显强于前者。明胶酶谱分析显示,与对照组相比,经IL-1β刺激的牙髓成纤维细胞中MMP-2的水平在48 h后持续显著升高。结论:IL-1β可能参与调节牙髓成纤维细胞合成和分泌MMP-2,从而促进牙髓炎症的发生。     

炎症状态下张应力对成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响

目的 观察炎症状态下周期性张应力对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1表达的影响.方法 收集100 ng/ml的经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)24 h后培养上清液,以20％稀释浓度作用于MC3T3-E1细胞24 h,采用四点弯曲细胞力学加载仪对正常培养与炎症状态下培养的MC3T3-E1细胞分别加载张应力0 h(对照组)、1h、3h、6h,采用荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)和免疫组化法检测基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA及蛋白水平表达的变化.结果 炎症状态下周期性张应力作用于小鼠成骨细胞后,加力组基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的mRNA和蛋白表达量较非炎症状态下显著增加,并随着时间的延长而不断增加,且不同时间段的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 炎症状态下张应力可显著影响成骨细胞基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1的表达,从而为炎症状态与张应力共同作用下基质金属蛋白酶-13和金属蛋白酶抑制因子-1参与牙周组织细胞外基质代谢提供了理论依据.     

胞壁酰二肽对人牙髓细胞分化影响的研究

目的 探讨天然免疫受体核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(nucleotide-binding oligomerization domain-2,NOD-2)在深龋牙髓组织中的表达及NOD-2特异性配体胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)对人牙髓细胞分化的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测深龋及健康人牙髓组织中NOD-2表达差异;1 mg/L MDP刺激体外培养的人牙髓细胞0、2、6、12、24 h,实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹法及免疫荧光检测NOD-2基因及蛋白表达;不同质量浓度MDP刺激人牙髓细胞24 h,蛋白质免疫印迹法检测24 h后牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)的表达;0.1 mg/L MDP 作用于人牙髓细胞0、2、6、12、24 h,检测不同时间点牙本质涎磷蛋白(sialophosphoprotein,DSPP)、骨钙蛋白mRNA及骨桥蛋白的表达.结果深龋牙髓组织中NOD-2 mRNA相对表达量为(0.2610±0.0824),较健康牙髓组织(0.0024±0.0002)显著增高(P<0.05).实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法结果显示NOD-2表达随时间上调,免疫荧光检测证实NOD-2蛋白表达于胞质.MDP质量浓度为0.1 mg/L时DSP蛋白表达量最大(0.3782±0.0564),并随MDP质量浓度增加而下降;DSPP、骨钙蛋白mRNA表达呈时间依赖性,12 h达最大值,24 h后有所下降;骨桥蛋白表达量随时间上调.结论深龋牙髓组织中NOD-2表达升高,MDP与人牙髓细胞的分化相关.

Abstract：

Objective To investigate the nucleotide-binding oligomerization domain-2(NOD-2)gene expression in deep caries and the effects of NOD-2 agonist muramyl dipeptide(MDP)on the differentiation of human dental pulp cells(hDPC). Methods NOD-2 gene level in deep caries and healthy pulp tissue was determined by real-time quantitative polymerase chain reaction(realtime-PCR). Realtime-PCR,Western blotting and immunofluorescence were performed to evaluate NOD-2 gene and protein expression. Dentin sialoprotein(DSP)protein level was assessed when hDPC were challenged by different concentrations of MDP for 24 hours, and sialophosphoprotein(DSPP), osteocalcin(OCN)mRNA and osteopontin(OPN)protein level were detected at different time points after incubation with 0.1 mg/L MDP. Results NOD-2 mRNA level was higher in pulp tissue of deep caries(0.2610±0.0824) than that in healthy controls(0.0024±0.0002),P<0.05.The expression of NOD-2 gene and protein increased in a time denpendent manner upon stimulation with MDP. Immunofluorescence confirmed that NOD-2 protein was located in cytoplasm. Moreover, 0.1 mg/L MDP augmented DSP protein level. DSPP and OCN mRNA were elevated with time and reached the peak at 12 h and down-regulated. OPN protein level also increased with time. Conclusions Dental pulp NOD-2 expression are up-regulated in pulp tissue of deep caries. MDP may be related to the differentiation of hDPC.     

大肠杆菌脂多糖影响Toll样受体4在人牙髓细胞的表达

目的:探讨大肠杆菌脂多糖(lippolysacchaide,LPS)对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)表达的影响及TLR4在LPS对牙髓细胞激活中的作用。方法:以大肠杆菌LPS刺激体外培养的人牙髓细胞,运用实时荧光定量RT-PCR和免疫荧光技术分别检测牙髓细胞TLR4mRNA和蛋白的表达。利用抗体阻断和ELISA方法观察TLR4在LPS激活牙髓细胞释放IL-1β中的作用。结果:正常牙髓细胞不表达TLR4,1×10-4g/L大肠杆菌LPS作用HDPCs6、12、24h后均可见TLR4在胞膜/胞质的表达,胞核并不表达TLR4。FQRT-PCR结果表明LPS能明显上调牙髓细胞TLR4mRNA的表达(P<0.001),并具有LPS浓度依赖性。抗体阻断和ELISA结果证实LPS能激活牙髓细胞释放IL-1β(P<0.01),抗TLR4单抗能明显抑制LPS对HDPCs的激活(P<0.05)。结论:正常人牙髓细胞不表达TLR4,大肠杆菌LPS能诱导牙髓细胞表达TLR4mRNA和蛋白。TLR4介导了LPS对牙髓细胞的活化,在LPS对牙髓细胞激活效应中具有重要作用。     

人乳恒牙牙髓组织中P2X3受体mRNA的表达研究

目的:探讨乳牙和恒牙牙髓组织中P2X3受体的差异及与炎症引发的牙齿疼痛的关系。方法:选择14个正常恒牙、10个正常乳牙及疼痛乳恒牙各12个的牙髓组织为实验对象,用基质金属蛋白酶-9(MMP-9)来显示牙髓的炎症状态;采用荧光定量PCR方法检测并比较人正常与疼痛乳恒牙牙髓组织中P2X3受体mRNA的表达水平。结果:恒牙疼痛组与正常组中P2X3受体mRNA的表达水平无明显差异(P>0.05),乳牙疼痛组中P2X3受体的表达较正常组增强(P<0.05),而乳牙正常组与疼痛组中P2X3受体的表达水平均分别高于恒牙正常组和疼痛组(P<0.05)。结论:P2X3受体可能参与乳牙牙髓炎疼痛的发生。     

转化生长因子β1对人牙本质基质蛋白1基因转录活性的影响

目的：观察具有矿化活性的人牙髓干细胞（human dental pulp stem cell，HDPSC）在重组人转录生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）作用下对牙本质基质蛋白1（dentin matrix protein1，Dmp1）表达和Dmp1基因启动子转录活性的影响。方法：通过建立体外培养的HDPSC矿化诱导模型，经10ng／L重组人TGF-β1刺激后，运用RT-PCR、报告基因检测等方法检测细胞在TGF-β1作用后Dmpl mRNA表达变化以及对pGL3-P-193-＋86和pGL3-P505-＋86 2个启动子片段重组报告基因载体活性的影响。结果：诱导矿化后具有部分成牙本质细胞样细胞特征的HDPSC经TGF-β1刺激后，Dmp1 mRNA的表达水平明显下降，并存在时间依赖性。pGL3-P-193-＋86和pGL3-P-505-＋86相对荧光素酶活性均下降，以pGL3-P-505-＋86活性下降更明显，说明TGF-β1具有下调HDPSC Dmp1转录活性的作用。计算机分析结果发现，Dmp1基因启动子-505～＋86bp区存在多个TGF-β1下游作用分子Smads的结合位点。结论：TGF-β1可下调Dmpl mRNA的表达水平和转录活性，以pGL3-P-505-＋86活性下降更明显。启动子-505—-193bp区存在TGF-β1下游作用分子或转录因子的结合位点，从而参与下调Dmp1转录表达过程。     

基质细胞衍生因子1在人炎症牙髓组织中表达的实验研究

目的:研究基质细胞衍生因子1(Stromal cell-derived factor-1,SDF-1)及其受体CXCR4在人炎性牙髓组织中的表达,探讨SDF-1/CXCR4轴在牙髓炎症发生发展中的可能作用。方法:采用免疫组织化学染色的方法检测SDF-1和CXCR4阳性细胞在健康、炎症牙髓组织中的分布情况。以实时荧光定量RT-PCR方法检测SDF-1mRNA在健康和炎症牙髓中的表达。结果:炎性牙髓中SDF-1、CXCR4主要分布于炎性细胞、成牙本质细胞和微血管内皮细胞。而正常组牙髓少见SDF-1、CXCR4阳性细胞。炎性牙髓中SDF-1mRNA的表达较健康牙髓显著增强。结论:与正常牙髓相比,炎性牙髓组织中SDF-1、CXCR4阳性细胞明显增多。炎性牙髓中SDF-1表达水平明显上调。SDF-1/CXCR4轴可能参与了牙髓炎症损伤和修复过程。     

变形链球菌超声提取物对牙髓细胞增殖和天然免疫受体基因mRNA表达的影响

目的:观察变形链球菌超声提取物对牙髓细胞的增殖活性、天然免疫受体基因mRNA表达的影响。方法:采用组织块法原代培养牙髓细胞,通过不同浓度的变形链球菌超声提取物(1、10、100μg/ml)作用于牙髓细胞,MTT法检测牙髓细胞的增殖活性;荧光定量PCR检测牙髓细胞NOD2、TLR2和TLR4 mRNA的表达水平。结果:1μg/ml变形链球菌超声提取物处理24 h可促进牙髓细胞的增殖;10μg/ml和100μg/ml处理24 h和48 h可明显抑制细胞增殖。变形链球菌超声提取物(10μg/ml)作用于牙髓细胞后,NOD2、TLR2和TLR4 mRNA表达量均增加。结论:变形链球菌超声提取物可抑制牙髓细胞的生长,促进NOD2、TLR2和TLR4 mRNA的表达。     

FGF-2对体外培养人牙髓细胞FGFR和OPN表达活性的影响

目的:研究成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)对体外培养的人牙髓细胞表面成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor,FGFR)及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响。方法:以改良组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Western blotting法检测不同浓度FGF-2作用下牙髓细胞FGFR的表达情况;应用Real Time-PCR法,检测不同浓度FGF-2作用下牙髓细胞OPN mRNA的表达。结果:与对照组相比,FGF-2在1～50 ng/mL浓度下均可促进牙髓细胞FGFR的表达(P<0.05),最佳显效浓度为10 ng/mL。FGF-2在1～50 ng/mL浓度下均可诱导牙髓细胞OPN mRNA表达(P<0.05),OPN mRNA的表达在10 ng/mL的FGF-2作用下达到高峰。结论:FGF-2可促进体外培养人牙髓细胞FGFR和OPN的表达,在牙髓牙本质复合体修复中可能发挥重要作用。     

锌指E盒结合同源框2在人牙髓组织和细胞的表达

目的：检测锌指E盒结合同源框2（ZEB2）在人牙髓组织和细胞中的表达,并初步探讨其意义。方法：制作牙髓组织石蜡切片,荧光原位杂交技术（FISH）检测 ZEB2的表达;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测正常及TGF-β1刺激下人牙髓细胞（hDPCs）中ZEB2 mRNA表达水平;制作hDPCs细胞爬片, FISH检测ZEB2的表达。结果： FISH结果显示ZEB2在牙髓组织中主要表达于成牙本质细胞层,在牙髓细胞呈弱阳性表达。 RT-qPCR结果显示TGF-β1的作用促进ZEB2的表达,且具有浓度和时间依赖性,5ng/ml TGF-β1刺激ZEB2表达达最大（P〈0.05）;5ng/ml TGF-β1刺激后, ZEB2 mRNA在24h内表达逐渐上调,24h达峰值（P〈0.05）。 FISH结果示ZEB2在正常hDPCs胞质和胞核均呈弱阳性表达, TGF-β1刺激24h后ZEB2表达增强,胞核表达明显。结论： ZEB2在牙髓组织中主要表达于成牙本质细胞层,正常hDPCs中弱阳性表达,而TGF-β1可促进hDPCs中ZEB2表达,提示ZEB2可能通过参与TGF-β1信号通路调控hDPCs的成牙本质向分化过程。     

人白介素－1β水平与人牙周膜细胞OPG表达关系

目的：检测不同浓度重组人白介素－1β（recombinant human interleukin－1β,rhIL－1β）对体外培养人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,HPDLCs）表达骨保护因子（osteoprotegerin,OPG）的影响,研究rhIL－1β水平对牙周膜细胞骨向分化的作用。方法：正畸需要而拨除的健康前磨牙牙周膜,体外传代培养HPDLCs;ELISA法和RT－PCR法测定不同浓度rhIL－1β（0、5、10、15μg／L）下HPDLCs的OPG分泌量及mRNA表达。结果：ELISA和RT－PCR法检测结果显示,5、10、15μg／L rhIL－1β作用于HPDLCs均会下调其OPG蛋白分泌和mRNA表达。同一时间点与0μg／L对照组比较,5、10、15μg／L组OPG蛋白分泌和mRNA表达依此下调,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：rhIL－1β水平升高会增强对HPDLCs的OPG表达抑制,对牙槽骨健康产生不利影响。     

转化生长因子-β受体在人牙髓中的表达和意义

目的：探讨转化生长因子β受体在人牙髓中的表达和牙髓细胞对 Ｔ Ｇ Ｆβ作用的反应机理。方法：用免疫组化方法检测转化生长因子βⅠ型受体（ Ｔβ Ｒ Ｉ）和Ⅱ型受体（ Ｔβ ＲⅡ）在健康及龋坏人牙髓中的表达。结果：转化生长因子βⅠ型受体和Ⅱ型受体在成牙本质细胞层强阳性表达,其中Ⅰ型受体较Ⅱ型受体表达量多,两种受体在成牙本质细胞层下方的富细胞区及中心部牙髓有表达或弱表达,龋坏牙髓与正常牙髓有相同的反应模式。结论：转化生长因子βⅠ型和Ⅱ型受体在健康及龋坏人牙成牙本质细胞及牙髓其它细胞皆有表达,提示成牙本质细胞及牙髓其它细胞在牙髓损伤修复过程中具有重要作用。     

低浓度洗涤血小板促进人牙髓细胞增殖的作用机制探讨

目的:探讨低浓度洗涤血小板促进人牙髓细胞增殖的作用机制。方法:使用从成年男性志愿者静脉采集、制备的洗涤血小板(washed platelet,WPLT)作用于人牙髓细胞,人牙髓细胞增殖和产生的前列腺素E2(PGE2)采用细胞和PGE2测定试剂盒测定;表达的细胞内环氧酶-2(COX-2)mRNA采用Realtime RT-PCR方法测定。结果:50ml/LWPLT诱导人牙髓细胞COX-2mRNA的表达在作用后3h达到最高峰,而诱导PGE2的产生快于IL-1β;50ml/LWPLT诱导的人牙髓细胞增殖可以被消炎痛和地塞米松抑制,而添加PGE2可以逆转这种抑制作用;WPLT诱导的PGE2量随着其浓度的成倍增加呈现出明显的增多趋势,而PGE2在适当浓度范围内明显促进了人牙髓细胞的增殖。结论:低浓度WPLT可能通过诱导产生的PGE2促进了人牙髓细胞的增殖。     

脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂的研究

目的:探讨低剂量条件下脂多糖诱导牙髓细胞DNA损伤方法,为研究脂多糖诱导牙髓细胞DNA双链断裂及DNA修复提供实验模型。方法:10 μg/L脂多糖连续刺激牙髓细胞1、3、6次后,采取MTT及TUNEL分别检测其对牙髓细胞增殖及凋亡的作用;采用q-PCR及免疫印迹检测γ-H2A.X的mRNA及蛋白水平的表达;使用免疫荧光及免疫组化法观测γ-H2A.X在体内、外牙髓细胞的表达。结果:与对照组相比,10 μg/L脂多糖连续刺激对牙髓细胞增殖及凋亡均无显著性差异;脂多糖连续刺激6次后细胞免疫荧光显示在细胞核检测到γ-H2A.X的阳性表达,且蛋白及mRNA水平的表达较对照组有显著性增加(P<0.05);免疫组化结果表明在脂多糖诱导4、6、8 d后,γ-H2A.X在大鼠牙髓组织较对照组表达水平显著升高(P<0.05)。结论:低剂量脂多糖连续刺激可诱导牙髓细胞产生DNA双链断裂。     

黄芩苷对牙龈成纤维细胞和牙周膜细胞pro-MMP-1和MMP-3 表达的影响

目的　检测黄芩苷对白细胞介素 1β(IL 1β)诱导作用下人牙龈成纤维细胞 (HGF)分泌基质金属蛋白酶 1酶原 (pro MMP 1)的量和牙周膜细胞 (PDLCs)基质金属蛋白酶 3(MMP 3)表达的变化。方法　体外培养HGF和PDLCs,分别运用ELISA和免疫组化方法检测 pro MMP 1的量和MMP 3的表达。结果　与对照组的 (1 96 0± 0 176 ) μg/L相比 ,1μg/L的IL 1β能够显著促进HGF分泌 pro MMP 1(3 333± 0 12 3) μg/L ,且增加PDLCsMMP 3的表达 (P <0 0 0 1) ;加入黄芩苷后能降低HGF的pro MMP 1分泌量 ,其作用呈浓度 (10～ 10 0 0 μg/L)依赖性 ;黄芩苷对IL 1β诱导下PDLCs合成MMP 3的能力没有影响 ,但是能够抑制MMP 3的释放。结论　黄芩苷能够抑制由IL 1β介导的HGF分泌pro MMP 1和PDLCMMP 3的表达 ,提示黄芩苷可用于牙周病的防治。     

白细胞介素-17介导牙髓基质金属蛋白酶表达和调节牙髓炎症的机制初探

目的:探究白细胞介素(IL)-17在牙髓炎症过程中时空表达,研究IL-17对牙髓炎可能的调节机制.方法:构建大鼠牙髓炎模型,苏木精-伊红(HE)染色观察牙髓组织结构形态,免疫组织化学染色检测牙髓中IL-17表达;培养人牙髓细胞,肿瘤细胞坏死因子(TNF)-α刺激模拟炎症状态,RT-qPCR检测IL-17基因表达,ELI...     

转化生长因子β1/细胞外信号调节激酶/基质金属蛋白酶通路对腺样囊性癌侵袭和迁移的影响

目的 探讨转化生长因子β1/细胞外信号调节激酶/基质金属蛋白酶2(TGF-β1/ERKl/2/MMP-2)通路在腺样囊性癌(ACC)侵袭和迁移过程中的作用及机制.方法 以腺样囊性癌ACC-2细胞株为研究对象.用转化生长因子β1(TGF-β1)以及ERK通路抑制剂UO126处理ACC-2细胞.MTT检测ACC-2细胞的增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Westem blot蛋白印迹检测ACC-2细胞中ERKI/2的活化及MMP-2的表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测ACC-2细胞中MMP-2的mRNA的表达情况.结果 TGF-β1及UO126干预后,ACC-2细胞增殖能力无明显变化;TGF-β1刺激可增强ACC-2细胞迁移、侵袭能力,增加ACC-2细胞p-ERKI/2和MMP-2蛋白以及MMP-2 mRNA的表达.而UO126阻断ERK磷酸化后,抑制了TGF-β1刺激的增强作用,ACC-2细胞的迁移、侵袭能力降低,MMP-2蛋白和mRNA的表达均下降.结论 TGF-β1/ERKl/2/MMP-2通路参与了人唾液腺ACC侵袭和迁移能力的调节.TGF-β1可通过上调ERK1/2,继而上调MMP-2,促进人唾液腺ACC细胞的侵袭和迁移能力,ERKl/2可能成为人唾液腺ACC侵袭防治的新靶点.     

脂多糖和白细胞介素-1β对人牙周膜细胞中诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察脂多糖(LPS)和白细胞介素-1β(IL-1β)对人牙周膜细胞(hPDLCs)表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)的影响。方法应用LPS和IL-1β刺激hPDLCs后,通过实时定量PCR检测iNOS基因的表达情况,收集细胞上清液,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定诱导后细胞中iNOS的含量变化,采用硝酸还原酶法检测NO的表达水平。结果未受刺激的hPDLCs仅能产生微量的iNOS和NO;LPS和IL-1β刺激hPDLCs后,检测到iNOS、iNOS mRNA及NO的含量随着时间和质量浓度的增加而显著增加(P<0.05),在相同时间或相同质量浓度的条件下,IL-1β单独刺激或与LPS联合刺激hPDLCs产生iNOS及NO的能力强于LPS单独刺激(P<0.05)。结论 LPS和IL-1β刺激hPDLCs可以增加iNOS和NO的表达,为动物实验中牙周局部注射LPS和IL-1β诱导iNOS和NO表达奠定实验基础。