mip基因聚合酶链反应结合地高辛标记探针杂交鉴定嗜肺军团菌

目的对嗜肺军团菌国外参考菌株及国内分离菌株的巨噬细胞感染增强子（ｍｉｐ）基因分析，建立一种快速、敏感、特异的嗜肺军团菌基因检测鉴定方法。方法利用嗜肺军团菌种特异性ＤＮＡ片段ｍｉｐ基因通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增，对ＰＣＲ阳性产物进行地高辛标记的ｍｉｐ基因探针杂交，观察其反应结果。并对２６株环境和患者中分离的疑似嗜肺军团菌菌株进行分析。结果所有实验用嗜肺军团菌国外参考菌株及国内分离菌株的ｍｉｐ基因的ＰＣＲ扩增结果都为阳性，探针杂交结果也为阳性，而非嗜肺军团菌及与非军团菌对照菌株的ＰＣＲ扩增结果及探针杂交结果都为阴性，本实验其灵敏度和特异度均为１００％。另外２６株疑似嗜肺军团菌菌株有６株被鉴定为嗜肺军团菌。结论所建立嗜肺军团菌的快速初步鉴定方法具有很高的特异性和敏感性，并具有较高的应用价值     

PCR检测动物鼠疫方法的应用研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检查感染鼠疫的动物脏器标本并与细菌分离培养进行比较。在３１份肝组织标本中ＰＣＲ阳性１１份（３５．５％），细菌培养阳性９份（２９．０％）３１份脾组织标本中ＰＣＲ阳性２５份（８０．７％），细菌培养阳性２１份（６７．７％），对照组中以假结核菌感染的小白鼠和未经感染的小白鼠脏器标本ＰＣＲ全部阴性，结果表明，ＰＣＲ法优于传统的细菌分离培养，具有快速，特异性强，敏感性高和不受杂菌污染     

聚合酶链反应检测间日疟原虫的现场应用研究

为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）的现场应用价值。根据Ｐ．ｖ．红内期ＳＳｕｒＲＮＡ基因序列合成１对寡核苷酸引物建立检测Ｐ．ｖ．的ＰＣＲ技术，扩增产物片段为３４１ｂｐ，同时采用ＰＣＲ法和镜检法对７８份临床疑为Ｐ．ｖ．感染患者的血液标本进行检测。用ＰＣＲ法检测阳性者６９份，镜检法检测阳性者５９份，ＰＣＲ检出率（８８．５％）明显高于镜检法检出率（７５．６％），两者符合率为８７．２％。结果表明ＰＣＲ检测Ｐ．ｖ．具有简便、快速、特异性强、敏感性高等优点，可作为Ｐ．ｖ．诊断和流行病学调查的重要手段     

利用聚合酶链反应检测122例结核病患者标本中结核菌的研究

对１２２例门诊及住院结核病人的痰、脓汁等标本进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）和直接涂片荧光镜检，培养检查结核菌，结果表示：ＰＣＲ阳性率为５６．９％（５８／１０２），培养阳性率为１４．７％（１５／１０２），直接涂片荧光镜检为２３．５％（２４／１０２）。说明ＰＣＲ特异性好，敏感性强，与临床符合率较高。ＰＣＲ比培养法大大节省时间，为结核病的诊断和鉴别赢得了时间，是一种可以推广的好方法。     

聚合酶链反应检测间日疟原虫的现场应用研究

为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）的现场应用价值。根据Ｐ．ｖ．红内期ＳＳｕｒＲＮＡ基因序列合成１对寡核苷酸引物建立检测Ｐ．ｖ．的ＰＣＲ技术，扩增产物片段为３４１ｂｐ，同时采用ＰＣＲ法和镜检法对８份临床疑为Ｐ．ｖ．感染患者的血液标本进行检测。用ＰＣＲ法检测阳性者６９份，镜检法检测阳性者５９份，ＰＣＲ检出率（８８．５％）明显高于镜检法检出率（７５．６％），两者符合率为８７．２％。结     

套式聚合酶链反应快速诊断结核性心包炎

快速诊断结核性心包炎以便及早抗痨治疗防止缩窄性心包炎的发生。应用套式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ ＰＣＲ） 、直接涂片、培养对８３ 例心包积液标本进行结核菌检测。结果：结核性心包积液Ｎｅｓｔｅｄ － ＰＣＲ阳性率为７２ ．５ ％ 、培养阳性率为１９ ．６ ％ 、涂片镜检阳性率为２３ ．５ ％ 。非结核性心包积液无１ 例阳性。Ｎｅｓｔｅｄ－ ＰＣＲ特异性好、敏感性强并可能避免一般聚合酶链反应（ＰＣＲ） 所出现的假阳性     

聚合酶链反应检测幽门螺杆菌的临床评价

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对６４例患者的１２８份胃组织和胃液标本中的幽门螺杆菌（ＨＰ）特异性的尿素酶Ａ基因进行检测，其阳性率分别为８１．３％和７８．１％。胃组织标本尿素酶水解试验、涂片染色和培养的阳性率分别为６７．２％、４５．３％和１７．２％，胃液中涂片和培养的阳性率分别为２５．０％和４．７％，表明以ＰＣＲ方法检测临床标本中的ＨＰ快速、敏感、特异，对于研究ＨＰ与上消化道疾病之间的关系及指导治疗有着重要的意义。而且胃液标本和组织标本两者ＰＣＲ阳性率无明显差异，这对于临床检测的重复性和减少活检的创伤性，有着一定的意义。     

聚合酶链反应检测粪便中微小隐孢子虫

目的：利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）原理建立一种敏感且特异的方法检测人和动物粪便标本中的微小隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｒｖｕｍ，Ｃ．ｐ．）。方法：从含有Ｃ．ｐ．卵囊的人和豚鼠粪便标本中直接提取ＤＮＡ用作ＰＣＲ的模板。用一对人工合成的寡核苷酸序列作为ＰＣＲ引物，扩增长为４５２ｂｐ的Ｃ．ｐ．目的ＤＮＡ片段。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色检测。结果：从感染Ｃ．ｐ．的人和豚鼠粪便标本ＤＮＡ抽提物中均扩增出目的片段，而从其他几种寄生虫、肠道微生物或宿主ＤＮＡ中均不能扩增出目的片段。本方法的敏感性比目前常用的检测方法高约１００倍。结论：ＰＣＲ技术检测人和动物粪便中的Ｃ．ｐ．，具有敏感性高且特异性强的特点，有希望成为隐孢子虫病诊断和流行病学调查的有力手段。     

聚合酶链反应试剂对检测痰结核分支杆菌的影响

目的观察聚合酶链反应（ＰＣＲ）的试剂对检测痰结核分支杆菌的敏感性和特异性的影响。方法对结核病组２０５例和非结核病组１０５例的痰标本同时进行三个厂家生产的ＰＣＲ试剂检测、普通细菌培养和抗酸染色法涂片检测。再对ＰＣＲ假阳性的痰普通细菌培养结果进行分析，试找出ＰＣＲ假阳性的其它因素。结果三种不同引物序列和扩增产物片段长度的ＰＣＲ试剂对结核性痰标本的阳性率分别为８２．４％、７１．７％和６１．０％，组间差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００５）。结论ＰＣＲ试剂的引物序列和扩增产物长度对检测痰结核分支杆菌的阳性率和假阳性率有很大的影响     

聚合酶链反应对脑脊液标本中结核杆菌DNA重复序列的检测

采用聚台酶链反应（ＰＣＲ）对３４例结核性脑膜炎（结脑）患者脑脊液（ＣＳＦ）进行检测，其中５份结核杆菌培养阳性的标本，ＰＣＲ检测均阳性；２９例ＣＳＦ结核杆菌培养阴性的标本，１９例ＰＣＲ检测阳性，总的阳性率为７０．５％。而作为对照的２０例非结脑患者的ＣＳＦ标本则无阳性。利用育法微量结核杆菌与对照菌测试，可以反证本方法的准确性，其符合率为１００％，提示本方法可以用于临床标本中结核杆菌ＤＮＡ的快速检测，不失为一快速，灵敏而又特异的诊断手段。关键词