α7烟碱样乙酰胆碱受体调节干细胞功能的研究进展

α7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha 7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nACHR)作为一种神经递质受体,广泛存在于各种非神经组织,参与调节细胞增殖、分化及生存等功能。最新的研究发现：α7nACHR不仅在成熟的组织和器官,而且也在未分化的干/祖细胞中表达。作为一种重要的受体,具有调节干/祖细胞自我更新和分化的作用。本文就α7nACHR在干细胞中的表达及其作用特征,尤其与干细胞功能障碍相关疾病的关联机制进行了综述。期望以此了解α7nACHR在干细胞中的作用,并为以α7nACHR为靶点的新药研发及干细胞治疗提供可靠的依据。     

rL-RVG通过α7烟碱型乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞系SGC凋亡的机制

目的探讨表达狂犬病毒疫苗糖蛋白的重组新城疫病毒(rL-RVG)通过乙酰胆碱受体诱导胃癌细胞凋亡的可能机制。方法将对数增殖期的胃癌细胞系SGC随机分成rL-RVG、新城疫病毒(NDV)组、PBS组,并同时分别设α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)抑制剂(MLA)及激动剂(ACB)预处理组。病毒感染24 h后,CCK8法测定病毒对SGC增殖影响;蛋白印迹检测α7-nAChR、RVG、NDV;凋亡蛋白cleved-caspase-3、BAX/BCL-2;P-ERK、ERK的表达。免疫荧光法测定P-ERK表达。结果随着rL-RVG、NDV病毒液浓度增加,胃癌细胞活力下降,rL-RVG在10~(-2)稀释倍数时抗增殖作用显著(P0.05);病毒组凋亡相关蛋白cleved-caspase-3、BAX/BCL-2相对表达量较PBS组明显升高,且rL-RVG组较NDV组及PBS组升高明显,乙酰胆碱受体抑制剂预处理后rL-RVG组、NDV组及PBS组凋亡蛋白水平明显增高,胆碱受体激动剂预处理组凋亡蛋白表达水平明显下降(P0.05);P-ERK在病毒组表达下降,且rL-RVG组较NDV组更低,乙酰胆碱受体抑制剂、激动剂预处理后分别下降、上升(P0.05)。结论rL-RVG通过α7-nAChR诱导胃癌细胞系SGC凋亡的机制之一是抑制ERK通路。     

PDLLM5与α7烟碱乙酰胆碱受体的相互作用及作用位点的研究

目的研究支架蛋白PDLIM5与神经元α7烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)间的相互作用及其作用位点。方法构建PDLIM5基因及其截短片段原核、真核重组表达载体和构建α7nAChR真核重组表达载体,并在大肠杆菌中表达与纯化相关蛋白。采用GST pull down及免疫共沉淀(CO-IP)方法检测PDLIM5与α7nAChR分子间相互作用及结合位点。结果 GST pull down和CO-IP方法检测结果显示PDLIM5与α7nAChR具有相互作用,且α7nAChR与PDLIM5中的PDZ结构域具有特异的相互作用,但不与PDLIM5中的LIM结构域发生反应。结论 PDLIM5通过其PDZ结构域介导同α7nAChR的相互作用。     

激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病

目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱(GTS-21),观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1(ARG1)、离子钙结合接头蛋白1(Iba-1)的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果 SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显著下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显著降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显著减少,而GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞的数量。结论 SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少, GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。     

α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂抑制骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性因子

目的探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7n AChR)激动剂PNU282987对骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性反应因子的影响及其分子机制。方法分离培养小鼠外周血单核细胞,使用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微粒刺激后,ELISA检测培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量;RT-PCR检测细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达;Western blot检测p-p65、p65、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3及β-actin的表达;ELISA检测NF-κB DNA结合活力。结果单核细胞经PMMA微粒刺激后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显增高(P0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达明显增高(P0.05);p65、JAK2和STAT3磷酸化明显增强(P0.05);NF-κB DNA结合活力明显增高(P0.05)。不同浓度PNU282987作用后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量呈浓度依耐性下降(P0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达呈浓度依耐性下降(P0.05);总p65、JAK2和STAT3的表达不变;p-p65、p-JAK2和p-STAT3的表达呈浓度依耐性下降(P0.05);NF-κB DNA结合活力也呈浓度依耐性下降(P0.05)。结论α7n AChR激动剂PNU282987能显著抑制PMMA骨水泥微粒所诱导的小鼠血单核细胞炎性反应因子的分泌。     

葡萄糖氧化酶诱导的氧化应激抑制α4β2烟碱型乙酰胆碱受体电流

目的探究葡萄糖氧化酶(GO)引起的氧化应激对α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)电流的影响。方法在HEK293T细胞共转染α4和β2质粒48 h后进行实验。分为对照组(control组)、3.5 k U/L的GO处理组(GO组)、3.5 k U/L的GO与450 k U/L的过氧化氢酶(CAT)共处理组(CAT组)。使用DCFH-DA荧光探针以及激光共聚焦显微镜来检测活性氧(ROS)的产生;采用全细胞膜片钳检测α4β2 nAChR的电流变化,给予1、10和30μmol/L ACh检测受体功能,给予10μmol/L ACh检测电流变化。结果全细胞膜片钳记录到呈ACh剂量依赖性的电流;GO处理HEK293T细胞1 h后可显著地增强细胞活性氧的水平(P0.001);对照组电流在10次给药中均保持稳定,GO组的电流在连续10次的ACh给药下逐渐降低(P0.01);CAT组反转GO引起的α4β2 nAChR电流下降(P0.01)。结论GO引起的氧化应激状态导致α4β2 nAChR电流逐渐下降,α4β2 nAChR电流的下降与ROS的增多密切相关。     

烟碱型乙酰胆碱受体在认知功能中的作用

烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）是化学（配体）门控的离子通道蛋白，属于半胱氨酸环受体家族，广泛分布于中枢和周围神经系统中。中枢nAChR参与许多复杂的功能，如：注意、学习、觉醒和认知等。越来越多的研究表明，中枢nAChR在认知功能活动中发挥了重要的作用。临床资料提示，nAChR与一些认知功能障碍性疾病的发病机制有关，如：阿尔茨海默病（AD）、帕金森氏病（PD）以及癫痫等。     

α7烟碱型乙酰胆碱受体在单核/巨噬细胞介导的炎症反应与极化调控中的作用北大核心CSCD

单核细胞和巨噬细胞在健康和疾病中均发挥重要作用,是固有免疫的重要组成,在其介导的炎症反应中保护宿主、清除病原体和调节免疫平衡,可通过清除细胞碎片、异物及调节炎症和愈合过程等维持内环境稳定。根据微环境和细胞激活状态,巨噬细胞可通过改变不同表型影响疾病转归。近二十年人们对胆碱能抗炎通路(CAP)在炎症反应中的作用及机制研究越来越深入,尤其是该通路中的重要结构——α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR),其本质为神经免疫系统的配体门控离子通道,且在调控单核/巨噬细胞吞噬、趋化因子和细胞因子产生、细胞存活和极化等方面发挥重要作用,相关机制涉及NLRP3炎症小体,可作为多种炎症性疾病的潜在治疗靶点。本文综述α7nAChR在炎症和免疫介导的疾病中对单核/巨噬细胞功能调控和极化的作用。     

神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因多态性与精神分裂症的传递不平衡研究

目的 探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因(neuronal nicotinic acetyleholine receptor α7 subunit gene,CHRNA7)多态性与精神分裂症的关系.方法 应用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术检测129个精神分裂症先证者核心家系CHRNA7基因的rs2337980、rs1909884、rs883473三个单核苷酸多态性,并采用基于单倍型的单倍型相对风险检验(haplotype relative risk,HHRR)、传递不平衡检验(transmission disequilibrium test,TDT)及单倍型分析进行统计.结果 (1)HHRR分析结果显示rs2337980位点精神分裂症患者组与虚拟对照组之间等位基因频率差异有统计学意义(P=0.017);(2)TDT分析发现,rs2337980位点与精神分裂症之间可能存在传递不平衡,杂合子父母过多的传递等位基因C给患病子女(P=0.021).(3)单倍型分析发现,rs2337980、rsl909884及rs2337980、rsl909884、rs883473组成的单倍型与精神分裂症有显著相关(总体P=0.034;glohal P=0.027),其中T-C,T-C-T两个单倍型与精神分裂症可能存在传递不平衡.结论 CHRNA7 基因多态性可能与精神分裂症存在关联,rs2337980的变异等位基因T可能是精神分裂症的保护性因子.     

α4亚基Arg-188和Pro-198突变促进α4β2烟碱型乙酰胆碱受体开放

目的:探讨乙酰胆碱、尼古丁、伐尼克兰和金雀花碱4种激动剂与α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)及其突变体相互作用的活性关键位点.方法:体外转录法制备野生型(wt)与突变型α4亚基cRNAs,注射入非洲爪蟾卵母细胞,应用电生理方法,测定4种激动剂对α4β2 nAChRs及其突变体的门控活性.结果:乙酰胆碱对wtα4...     

α3β2与α3β4烟碱型乙酰胆碱受体α和β亚基不同配比的药理活性研究

目的:比较α和β亚基不同配比形成α3β2和α3β4烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)敏感性的差异。方法:体外转录获得α和β亚基的cRNA,采用显微注射将3种不同配比(α∶β分别为1∶10、1∶1和10∶1)的cRNA注入非洲爪蟾卵母细胞,利用双电极电压钳检测受体表达情况。利用激动剂乙酰胆碱(ACh)和拮抗剂α-芋螺毒素Reg IIA(α-CTx Reg IIA)检测在3种配比条件下形成受体药理活性的差异。结果:对于α3β2 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的半数有效浓度(EC50)分别为91.2μmol/L、104.4μmol/L和130.6μmol/L,α-CTx Reg IIA的半数抑制浓度(IC50)分别为40.2 nmol/L、36.4 nmol/L和42.3 nmol/L。对于α3β4 nAChR亚型,在3种配比情况下,ACh的EC50分别为44.0μmol/L、110.0μmol/L和230.0μmol/L,α-CTx Reg IIA的IC50分别为226.8 nmol/L、71.5 nmol/L和49.4 nmol/L。结论:α3和β4亚基比例的改变会导致α3β4 nAChR结构和药理活性的改变。α3和β2亚基比例的改变对α3β2 nAChR结构和活性没有影响。     

蛇α-神经毒素与乙酰胆碱受体

一、蛇α-神经毒素的理化性质迄今,从各种蛇粗毒中分离纯化出的神经毒素一般分为突触前和突触后两类。突触后神经毒素,即α-神经毒素,作用特点是选择性地与脊椎动物骨骼肌神经肌肉接头后膜中的乙酰胆碱受体结合,阻断接头传递。α-神经毒素主要存在于眼镜蛇科和海蛇科毒蛇     

严重多发伤并急性胃肠损伤家兔的肠道黏膜损伤严重程度及α7烟碱型乙酰胆碱受体的变化北大核心CSCD

目的:探究严重多发伤并急性胃肠损伤(AGI)家兔的肠道黏膜损伤严重程度及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)的变化。方法:使用自制重力小型牵引式对(侧)撞机来模拟交通意外致伤以构建严重多发伤家兔模型;创伤严重程度评分(ISS)评估家兔创伤程度;AGI评分评估家兔AGI程度;ELISA法检测血浆二胺氧化酶(DAO)、内毒素及血清TNF-α含量;高压液相色谱法检测尿液乳果糖(L)、甘露醇(M)含量,并计算L/M;平板计数法检测家兔肠道细菌移位情况;HE染色及透射电镜分别观察小肠组织病理变化及超微结构损伤情况;免疫组化法及Western blot检测小肠组织α7-nAChR表达情况。结果:造模12 h后,AGI分级:Ⅰ级40只,Ⅱ级25只,Ⅲ级11只,Ⅳ级4只;与T0比较,T1、T2、T3家兔血浆DAO及内毒素、尿液L/M及血清TNF-α含量、肠道细菌移位率、肠道病理损伤程度随时间的推移依次显著升高(P<0.05),小肠组织α7-nAChR表达随时间的推移依次显著降低(P<0.05)。结论:严重多发伤家兔于早期便出现肠道功能损伤、肠道菌群移位及肠黏膜屏障功能损伤,这可能与α7-nAChR表达降低有关。     

杏仁核电点燃大鼠认知功能及海马α7型神经烟碱胆碱能受体的表达

目的:本研究旨在探讨杏仁核电点燃大鼠恐惧状况、学习记忆能力及海马区a7型神经烟碱胆碱能受体(α7 nAChR)表达变化.方法:随机将雄性SD大鼠分为手术对照1周组、2周组及电点燃1周组、2周组.实验结束后,用旷场实验检测大鼠的活动水平、探索能力及恐惧状况;Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;免疫组织化学和免疫印迹检测大鼠海马区a7 nAChR表达变化.结果:电点燃组大鼠点燃成功率为91.7％.旷场实验检测结果显示,与手术对照组比较,点燃1周组和2周组大鼠活动的格子数(F1w=24.77,P1w=0.00;F2w=42.86,P2w=0.00)、站立次数(F1w =56.18,P1w=0.00;F2w=42.25,P2w=0.00)及排出粪便的颗粒数(F1w=10.08,P1w=0.01,F2w=31.22;P2w=0.00)有差异,具有统计学意义;Morris水迷宫检测结果显示,与手术对照组比较,点燃1周和2周组大鼠搜寻平台的潜伏期(F1w=3,139,P1w=0.095;F2w=0.884,P2w=0.361)及在平台所在象限的搜寻时间百分比(F1w=1.907,P1w=0.185;F2w=0.446,P2w=0.513),差异均无统计学意义;免疫组织化学及免疫印迹结果显示,与手术对照组比较,点燃1周组和2周组大鼠脑海马区α7 nAChR表达均增高(F1w=15.70,P1w=0.02,F2w=24.61,P2w=0.01).结论:大鼠杏仁核电点燃1周和2周后,导致了其情感行为异常,增加了脑海马区α7 nAChR的表达,但对其学习和记忆能力的影响不明显,可能与点燃部位、发作频率、发作强度及发作的持续时间有关.     

烟碱型乙酰胆碱受体α7在Fmr1基因敲除小鼠中的表达及意义

目的观察烟碱型乙酰胆碱受体α7在Fmr1基因敲除小鼠前额皮层及海马的表达,探讨其在Fmr1基因敲除小鼠学习记忆中的作用。方法将4周龄FVB小鼠分为WT组和KO组,用跳台实验分别检测KO及WT小鼠学习记忆的能力,利用Western blotting和免疫组化方法检测KO及WT小鼠前额皮层及海马α7 nAChR的表达。结果跳台实验结果显示,与WT空白组比较,KO空白组第一天及第二天的潜伏期均显著缩短,错误次数明显增多,差异均具有统计学意义(P0.05);免疫组化结果显示,与WT空白组相比,KO空白组前额皮层和海马区α7 nAChR免疫阳性细胞数均显著减少(P0.05);Western Blotting结果显示,KO空白组前额皮层及海马区α7 nAChR表达量均较WT空白组减少,海马区更为显著,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 Fmr1基因敲除小鼠前额皮层、海马区的α7 nAChR表达量较野生型小鼠减少,提示α7 nAChR参与了Fmr1基因敲除小鼠学习记忆障碍的发病机制。     

烟碱型乙酰胆碱受体与临床疾病

烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是配体门控的离子通道受体家族成员,广泛分布于中枢神经、神经肌肉接头以及其他细胞表面。构成亚基不同和分布部位的差异表现为受体功能的多样性。早期研究发现,nAChR主要与神经电信号传导有关;近期研究认为它是胆碱能抗炎通路的关键受体。阐明这些功能的生理机制对重症肌无力、癫痫以及多器官衰竭等相关疾病有重要的临床意义。     

Tourette综合征认知功能的研究进展(综述)

Tourette综合征（Toureae’s syndrome，TS）又称发声与多种运动联合抽动障碍，是一种复杂的慢性神经精神障碍，临床上以头面部、肢体或躯干的多发性肌肉抽动与爆发性不自主发声为特征，发病机制至今未完全明了。近年来，研究者从脑认知功能角度进行研究，发现其认知功能存在一定损害。本文综述了相关的研究进展，为今后的临床和研究工作提供参考。     

精神分裂症的遗传(综述)

精神分裂症是精神病中最常见的疾病,原因迄今不明,常在青壮年期发病,临床表现为联想散漫、情感淡漠、行为怪异、精神内界失调和幻觉妄想。病程迁延、缓慢进展,除少数病人可自然缓解外,如不经治疗,部分病人可发展为精神衰退状态,从而成为家庭和社会的沉重负担。根据欧美各国资料精神分裂症的发病率约为1.5‰,患病率在3‰左右,患病机率8～10‰。阐明精神分裂症的发病原因是当前精神     

主观记忆减退老年人认知功能的可塑性(综述)

阿尔兹海默症(AD)的发展是个长期的过程,在疾病最初始阶段——主观记忆减退阶段,开展有针对性的干预是延缓AD进程的有效切入点。目前针对主观记忆减退老年人的可塑性研究处于起步阶段,仅有的少数认知训练研究提示主观记忆减退老年人的认知功能仍具有一定的可塑性。迫切需要设计严谨、测查指标丰富的设计来探讨认知训练对延缓主观记忆减退老年人认知老化,并进一步预防AD等神经退行性疾病发生的影响。     

嘌吟能离子通道型受体7介导的帕金森大鼠认知功能障碍

目的 探讨嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)在帕金森(PD)大鼠认知功能障碍中的作用。方法 成年大鼠90只实验分为5组,每组6只大鼠,3个重复,运用6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备PD大鼠模型。向PD大鼠注射P2X7R激动剂2,3-腺苷5-三磷酸三乙铵盐(BzATP)和拮抗剂考马斯亮蓝G(CBBG)检测大鼠在水迷宫中的学习记忆能力和疼痛反应,Real-time PCR和Western blotting检测海马组织P2X7的表达情况。结果 与正常大鼠相比,PD大鼠学习速度缓慢,记忆能力弱,CBBG提高了PD大鼠的学习记忆能力,BzATP使PD大鼠的学习记忆能力减退;海马组织Real-time PCR结果显示,与对照组相比,P2X7R在海马组织中mRNA表达量最高,CBBG组P2X7R表达量下调,BzATP组P2X7R表达量上调;对P2X7R进行Western blotting检测,与PD组相比,BzATP组P2X7蛋白表达量显著升高,CBBG组P2X7蛋白表达量较低。结论 PD大鼠存在认知功能障碍,CBBG可改善PD大鼠的学习记忆功能,BzATP可抑制PD大鼠的学习记忆功能。