基于UPLC-ESI-Orbitrap-MS技术对金钗石斛生物碱的分析

目的:通过UPLC-ESI-Orbitrap-MS技术对金钗石斛生物碱的主要化学成分进行分析。方法:采用Thermo Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱-色谱联用系统分析,以Hypersil Gold C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.9μm)为固定相,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~2 min,5%B,2~15 min,5%~95%B,15~17 min,95%B),流速0.3 m L·min~(-1),柱温40℃,进样量2μL;质谱条件采用电喷雾离子化(ESI)方式,在正离子模式下,以full scan/targeted-dd MS2扫描模式检测,研究金钗石斛生物碱的主要化学成分。结果:通过与对照品比对、结合参考文献,分析多级质谱数据,根据化学成分的质谱碎片,推测色谱峰对应的化学结构,共归属8种倍半萜类金钗石斛生物碱,分别是石斛碱(dendrobine),mubironine B,石斛氨碱(dendramine),石斛醚碱(dendroxine),石斛酮碱(nobilonine),6-羟基金石斛碱(6-hydroxynobiline),N-异戊烯基石斛碱(N-isopentenyldendrobinium),N-异戊烯基-6-羟基石斛碱(N-isopentenyl-6-hydroxydendroxinium)。结论:建立了金钗石斛倍半萜类生物碱的主要化学成分的分析方法,为金钗石斛药材的鉴别及质量控制提供了科学依据。     

黔产金钗石斛中1个新的杜松烷型倍半萜

目的研究贵州道地药材金钗石斛Dendrobium nobile的化学成分。方法采用硅胶、MCI柱色谱及制备液相色谱等方法进行分离纯化,经质谱和核磁共振等波谱技术进行结构鉴定。结果从贵州道地药材金钗石斛茎的乙醇提取物中分离得到1个新的倍半萜类化合物,鉴定为δ-杜松萜烯-12,14-二醇(1)。结论化合物1为新化合物。     

气相色谱-质谱联用测定黔产金钗石斛精油成分研究

目的 探索黔产金钗石斛精油成分.方法 采用水蒸气蒸馏方法提取金钗石斛精油,以气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术结合计算机检索对其化学成分进行分离鉴定,按面积归一法计算各化学成分的相对含量.结果 4个产地金钗石斛均含有甲安菲他明、β-蒎稀、莰烯、桉叶油素、芳樟醇、雪松醇、环己醇、安息香酸等成分,此外,赤水产金钗石斛精油中萜类和倍半萜类较多,而其它三地出产的金钗石斛醇类、烯类、烷烃类化合物居多.结论 各产地金钗石斛精油成分含量不同.     

金钗石斛的芴酮类成分研究

目的:研究金钗石斛的芴酮类化学成分。方法:利用各种色谱技术研究金钗石斛的化学成分,并采用波谱方法鉴定化合物结构。结果:从金钗石斛的乙酸乙酯部位中分离得到9个化合物,鉴定出芴酮类化合物4个,分别为:dengibsinin(1)、nobilone(2)、denchrysan A(3)、dengibsin(4);有机酸酯类化合物3个:阿魏酸二十二烷酯(5)、对香豆酸十四烷酯(6)、对香豆酸癸酯(7);烷醇类化合物2个:正二十四烷醇(8)、正二十六烷醇(9)。结论:其中,化合物6～9为首次从兰科植物中分离得到,化合物1～3、5为首次从该植物中分离得到。     

赤苍藤化学成分的GC-MS分析

目的:研究赤苍藤的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱分离赤苍藤药材乙酸乙酯部位的油状物,对其进行甲酯化反应,采用气相色谱-质谱联用分析技术分析其化学成分。结果:从组分1中鉴定出8个化学成分,主要含十七烷酸甲酯(22.29%)、油酸甲酯(18.29%);从组分2中鉴定出5个化学成分,主要含有11,14-十八碳二烯酸甲酯(28.95%)、硬脂酸甲酯(21.71%)。结论:赤苍藤乙酸乙酯部位的主要成分为脂肪酸、烯酸类化合物。     

HPLC-TOF/MS对莱菔子中化学成分的快速鉴定

目的:通过高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术定性分析莱菔子中的主要化学成分。方法:色谱分离采用Diamonsil-C18柱(2.1 mm×150 mm,3μm);流动相组成为乙腈-水(含0.1%醋酸),梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,质谱定性采用飞行时间质谱,正负离子模式扫描。结果:快速鉴别出莱菔子中13种化学成分。结论:建立了一种简单可靠的HPLC-TOF/MS方法对莱菔子中主要化学成分进行了鉴定。     

UHPLC/Q-TOF-MS/MS快速鉴定陈皮化学成分

目的:通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS/MS)联用技术,对陈皮化学成分进行鉴定。方法:采用Welchrom C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在负离子模式下采集数据,运行时间40min,使用质谱分析软件Peakview中的目标化合物筛查法,结合保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片鉴定监测到的化学成分。结果:分离并鉴定出32个化学成分。结论:该方法快速、灵敏度高,可作为鉴定陈皮化学成分的一种有效方法。     

UHPLC/Q-TOF-MS/MS快速鉴定瓜馥木化学成分研究

目的:利用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UHPLC/Q-TOF-MS/MS)联用技术,对瓜馥木根和藤茎的化学成分进行分析。方法:采用Welch C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱进行色谱分离;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下采集数据,运行时间40 min,使用质谱分析软件中的目标化合物筛查法,通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片鉴定化学成分。结果:初步鉴定了44个化学成分。结论:该方法快速、简单,可作为瓜馥木化学成分的一种快速鉴定方法。     

黄芪当归合剂水煎液醋酸乙酯萃取部位化学成分HPLC-ESI-TOFMS分析

目的：采用液相色谱与质谱仪联用技术（HPLC—ESI-MS）对中药复方黄芪当归合剂水煎剂中醋酸乙酯萃取部位的化学成分进行分析，并对主要成分进行鉴定。方法：液相色谱运用Zorbax SB C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，以水（A）-乙腈（B）梯度洗脱，254nm检测；质谱使用ESI离子源，正离子与负离子模式下采集数据。结果：通过一级质谱分析结合对照品数据以及相关文献共鉴定了20个化学成分的结构，主要结构类型为：黄酮及黄酮苷类、皂苷类、苯酞类化合物、寡糖类和氨基酸类。结论：经液相色谱分离，质谱测定相对分子质量及其他信息可以鉴别中药复方中的成分，为阐明黄芪当归合剂的药效物质基础提供部分基础，为中药复方成分的鉴定提供一种快速准确的分析方法。     

平卧菊三七提取物抗氧化活性研究与抗氧化特征成分的HPLC-MS/MS分析

目的:采用DPPH体系测定平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物的抗氧化活性,并利用液质联用(HPLC-MS/MS)技术分析了活性较高的乙酸乙酯部位的抗氧化特征性成分。方法:对平卧菊三七地上部分提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位。考察平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物对清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力以及通过液质联用电喷雾四级杆飞行时间质谱仪(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对其活性部位中的化学成分进行定性分析。采用液质联用(LC-MS/MS),C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI负离子模式下采集数据。通过质谱数据分析,并与对照品及文献对照,对其进行成分鉴定。结果:平卧菊三七地上部分不同极性提取物对DPPH自由基都具有清除力,其中乙酸乙酯部位的清除能力最强。通过其质谱数据分析,并与对照品及相关文献对照,共鉴定出11个化合物。结论:应用DPPH抗氧化活性筛选及HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地发现平卧菊三七地上部分抗氧化活性成分,为进一步研究平卧菊三七的药效物质基础提供参考。     

骨髓间充质干细胞移植对四氯化碳大鼠肝损伤的影响及一贯煎的干预作用

该研究观察BMSCs早期尾静脉移植对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝损伤模型大鼠的影响以及一贯煎的干预作用。雌性Wistar大鼠65只,随机分为正常组,模型组,细胞移植组,一贯煎组和一贯煎加细胞移植组。造模各组大鼠按3 mL·kg^-1每周2次腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液,共9次;细胞移植组和一贯煎加细胞移植组在首次注射CCl4后立即经尾静脉注入第3代BMSCs 1×10^6个;用药组灌胃一贯煎水煎液。结果可见细胞移植和一贯煎均可降低首次造模48 h的血清ALT和AST。造模4周后,模型组血清ALT,AST,γ-GT活性增高,TBIL含量增高;肝组织SOD活性降低,MDA和TG含量增加;肝组织病理可见大泡型脂肪变性,油红O染色可见大量脂滴,天狼猩红染色未见明显胶原增生,血清TNF-α和IL-6含量升高(P<0.05)。BMSC细胞移植组大鼠肝功能和组织病理较模型组进一步恶化,肝组织可见少量胶原增生,肝组织SOD活性更低,MDA和TG含量进一步增高(P<0.05),血清TNF-α和IL-6含量较模型组升高(P<0.05);经一贯煎干预后,各检测指标均较模型组和细胞移植组有所改善。SRY原位杂交检测显示,BMSC移植后在心、肝、脾、肺、肾均可检测到SRY阳性表达,但以肝脏最多,经一贯煎干预后,SRY阳性细胞在肝脏表达减少。Western blot结果显示正常组高表达Wnt和β-catenin,CCl4造模后表达明显减少,细胞移植后有进一步降低的趋势,一贯煎组干预后则表达增高。该研究表明早期尾静脉BMSCs移植可加重大鼠CCl4肝损伤,促进肝纤维化形成,一贯煎可改善BMSCs移植加重的CCl4肝损伤,其机制与减少BMSCs归巢肝脏,上调Wnt/β-catenin信号通路有关。     

黏附力测定新装置及其在预测中药喷雾干燥热熔型黏壁中的应用

设计一套可测定黏附力的新装置,并利用此装置对中药提取液进行喷雾干燥热熔黏壁预测研究。该装置以物性测定仪为基础测试平台,添加一套提供热风的设备,并配上摄像头,温湿度探头等搭建而成,可以模拟喷雾干燥仪的干燥环境,分析药液的黏附性随干燥进程的变化。采用数据挖掘机器,建立预测喷雾干燥热熔型黏壁的模型并进行验证,结果显示该装置可以通过物料的黏附力预测喷雾干燥热熔型黏壁。研究还发现热熔型黏壁的物料黏附性随水分的蒸发而逐渐变大,不黏壁的物料的黏附力则是先变大后急速下降。     

长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构的影响

人参作为中国的传统中药,有着广泛的药用和保健价值,目前人参作为药用食品的营养价值一直是研究热点。肠道菌群在机体中发挥的重要作用得到众多研究者的肯定,该研究利用MiSeq测序平台对长期服用人参提取物的大鼠盲肠内容物样本进行宏基因测序,之后通过对肠道菌群数据结果分析,探究长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构产生的影响。结果表明,经过长期服用人参提取物,大鼠肠道菌群中的益生菌属如Bifidobacterium,Lactobacillus,Allobaculum,Clostridium等发生显著上调,而致病菌属如Butyricimonas,Parabacteroides,Alistipes,Helicobacter等发生显著下调,证明长期服用人参提取物有助于促进益生菌生长而抑制致病菌生长,该研究为长期服用人参提取对大鼠肠道菌群结构的影响提供了重要依据。     

A reliable and rapid pharmacokinetic study of pueraria isoflavones using pueraria reference extractive substance in beagle plasma: Application to study of Yufeng Ningxin Tablets

Objective: In order to evaluate the reliability and feasibility of pueraria reference extractive substance (RES) used in biological sample, the pharmacokinetics of 3''-hydroxy puerarin (3''-HP), puerarin, 3''-methoxy puerarin (3''-MP), and daidzein-8-C-apiosyl-(1-6)-glucoside (DAG) in beagle plasma following oral administration of Yufeng Ningxin Tablet were quantitated. Methods: A reliable and sensitive high-performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-QQQ-MS/MS) method developed with chromatographic separation was operated on a Merck C18 column, and acetonitrile-5 mmol/L ammonium was used as mobile phase in gradient elution. The plasma samples were deproteinized by acetone, detected by triple quadrupole mass spectrometry with an electrospray ionization interface, and quantified using selected ion monitoring mode. The pharmacokinetic parameters were calculated by Winnonlin 4.1. Results: The calibration curves of the reference extractive substance and standard substance methods were linear over the ranges 0.0417–11.3309 μg/mL and 0.0394–10.0000 μg/mL. The intra-day and inter-day precision of the two methods at three concentrations were less than 13.63%, and the average recoveries of 3''-HP, puerarin, 3''-MP, and DAG were more than 70.67%. The RSD of the mean plasma concentrations of the analytes calculated by the two methods was less than 5%, and cos (?) = 1.000. Among the analytes, puerarin showed the highest blood concentration [(940 ± 185) ng/mL] and the longest retention time [(5 ± 1) h] in the dog’s bodies. Conclusion: Pueraria reference extractive substance can be seen as an alternative to the standard substance to overcome the scarcity of standard substance for the analysis of biological samples.     

茶多酚调节STAT3/miR-126/端粒信号通路活性延缓高糖诱导的人肾小球系膜细胞衰老

探讨茶多酚(tea polyphenols,TP)在体外高糖环境下延缓人肾小球系膜细胞(human glomerular mesangial cells,HGMCs)衰老的作用及可能的机制。在体外培养HGMCs,分为正常组(normal group,N,5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、甘露醇组(mannitol group,MNT,5.5 mmol·L^-1葡萄糖+24.5 mmol·L^-1甘露醇)、高糖组(high dose of D-glucose group,HG,30 mmol·L^-1葡萄糖)、低剂量TP组(low dose of TP group,L-TP,30 mmol·L^-1葡萄糖+5 mg·L^-1 TP)及高剂量TP组(high dose of TP group,H-TP,30 mmol·L^-1葡萄糖+20 mg·L^-1 TP),分别在37℃,5%CO2条件下培养,干预72 h后,首先观察TP对HGMCs形态的影响;其次,检测细胞周期、衰老相关半乳糖苷酶(senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率、端粒长度;最后,检测p53-p21-Rb信号通路中关键信号分子p53,p21,Rb的蛋白表达水平及p-STAT3,miR-126的表达水平。结果表明,高糖能诱导HGMCs衰老,不仅表现为细胞周期阻滞于G1期、SA-β-gal染色阳性率升高、端粒长度缩短,还表现为p53,p21,Rb蛋白表达水平升高和p53-p21-Rb信号通路激活。L-TP能延缓HGMCs衰老,不仅表现为HGMCs细胞周期G1期阻滞的改善、SA-β-gal染色阳性率的下降、端粒长度的延长,还表现为p53,p21,Rb蛋白表达水平的下降,端粒-p53-p21-Rb信号通路活性的抑制。此外,高糖诱导HGMCs p-STAT3表达水平上调、miR-126表达水平下调,而L-TP可使这些变化得到改善。总之,高糖能激活端粒-p53-p21-Rb信号通路而诱导HGMCs衰老;L-TP能调节STAT3/miR-126表达水平,抑制端粒-p53-p21-Rb信号通路活性而延缓高糖诱导的HGMCs衰老。这些发现为临床上防治糖尿病肾病相关的肾脏细胞衰老提供了有效的干预措施。     

榄仁树叶中三萜类成分及降糖活性研究

目的:研究榄仁树叶中三萜类成分及其降糖活性。方法:使用各种柱色谱方法对榄仁树叶提取物中的降糖活性部位进行分离纯化,通过波谱数据分析进行结构鉴定。通过体外α-淀粉酶抑制实验对分离所得的三萜化合物进行体外降糖活性检测。结果:从榄仁树叶中共分离出13个三萜类化合物,分别鉴定为:齐墩果酸(1)、白桦脂酸(2)、2α-羟基熊果酸(3)、3-表白桦脂酸(4)、阿江榄仁酸(5)、3-乙酰氧基-齐墩果酸甲酯(6)、麦珠子酸(7)、3β,23-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(8)、3α,19α,23,24-四羟基-12-烯-28-乌苏酸(9)、积雪草酸(10)、rubrajaleelol(11)、maslinic acid(12)、2α-羟基乌苏酸(13)。体外活性实验表明,积雪草酸对体外α-淀粉酶抑制作用显著。结论:其中,化合物2～4、6、7、9、11为首次从使君子科植物中分离得到。榄仁树叶中三萜类成分具有较好的降糖活性。     

跟骨骨折切开复位内固定术后切口愈合不良的危险因素分析

目的:分析跟骨骨折切开复位内固定术后切口愈合不良的危险因素。方法:选取91例(91足)采用切开复位内固定术治疗的闭合性跟骨骨折患者作为研究对象。男66例,女25例;年龄22~80岁,中位数47岁;高处坠落伤79例,车祸伤12例;按照Sanders分型标准,Ⅱ型40例、Ⅲ型39例、Ⅳ型12例;伤后至手术时间3 h至15 d,中位数9 d。收集患者的病例资料,提取年龄、性别、骨折类型、血清白蛋白水平、伤后至手术时间、是否进行人工骨植骨、手术时间、切口缝合方式、切口愈合情况等信息。先采用单因素分析对自变量进行筛选,再通过Logistic回归分析确定跟骨骨折切开复位内固定术后切口愈合不良的危险因素。结果:术后13例切口愈合不良(愈合不良组),其中8例患者出现切口皮缘坏死或裂开、5例发生切口浅表感染,其余78例患者切口愈合良好(愈合良好组)。愈合不良组和愈合良好组骨折类型、低白蛋白血症(血清白蛋白<35 g·L^-1)、伤后至手术时间、手术时间、切口缝合方式比较,组间差异均有统计学意义(χ~2=10.202,P=0.006;χ~2=6.398,P=0.011;χ~2=3.863,P=0.049;χ2=4.658,P=0.031;χ~2=8.729,P=0.003)。以切口愈合情况为因变量,将单因素分析结果中有意义的5个因素纳入多因素Logistic回归分析,结果显示低白蛋白血症(OR=1.757,P=0.000)、伤后至手术时间<7 d(OR=3.324,P=0.015)、手术时间>90 min(OR=4.379,P=0.003)及切口褥式缝合(OR=1.254,P=0.004)是跟骨骨折切开复位内固定术后切口愈合不良的危险因素。结论:低白蛋白血症、伤后至手术时间<7 d、手术时间>90 min及切口褥式缝合是跟骨骨折切开复位内固定术后切口愈合不良的危险因素。     

Shanghai expert consensus on clinical protocol for traditional Chinese medicine treatment of COVID-19 among the elderly population (second edition)

This document is the revised edition of the previously issued Shanghai Expert Consensus on Clinical Protocol for Traditional Chinese Medicine Treatment of COVID-19 among the Elderly Population. Based on the clinical experience and the Protocol for Diagnosis and Treatment of COVID-19 (Trial 9th Edition), this revised edition provides treatment approaches and recommendations to proactively cope with Omicron variant and increase the therapeutic efficacy for coronavirus disease 2019 among the elderly population in Shanghai, China.     

Introduction to Prof. HUANG Xian-ming＇s Needling Techniques

In his over seventy-year practice of Chinese medicine, Prof. HUANG Xian-ming inherited plentiful academic experience from his father, Mr. HUANG Hong-fang and has a thorough understanding of the needling techniques described in Nei Jing （ Inner Canon ） and has developed his own school in the clinical treatment. Prof. HUANG believes that the manipulating skills of the needling techniques are the key to the therapeutic effects, and the needling techniques include the tonifying, reducing, warming, clarifying, ascending, descending, diminishing and opening skills. Among them, the tonifying technique is able to support the anti-pathogenic ability and get rid of deficiency, often used for diseases and patterns induced by insufficiency of qi and blood and low immunity. The reducing technique is used to reduce excessive symptoms and dissipate the pathogens, often used for pathogenic patterns of hyperactive pathogenic heat, qi stagnation and blood stasis, and muscular spasm and swelling.     

上海中医药大学办学定位的思考

上海中医药大学作为新中国诞生后国家首批建立的4所中医药高等院校之一,2003年搬迁至浦东张江,成为"张江药谷"的重要组成部分,其硬件建设已基本完成。在此基础上,从国家发展、上海发展、浦东张江发展等战略需求出发,分析学校可获取的支持条件,对学校办学理念、办学目标、办学定位、学科专业方向定位、培养目标与办学层次定位、服务面向定位等进行了思考。