骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的研究

骨髓间充质干细胞(MSC)是一类具有自我增殖和分化潜能的细胞.在特定条件诱导下可向多系细胞分化.近年来,MSC向肝系细胞分化的研究越来越受到人们的关注.一系列实验证明MSC在一定条件下可向肝细胞分化.其向肝细胞分化的机理以及诱导分化条件的优化还在进一步研究之中.     

骨髓间充质干细胞免疫调节作用的研究进展

骨髓间充质干细胞（MSC）是骨髓中除造血干细胞以外的一种成体干细胞，具有自我更新、横向分化和免疫调节作用。MSC是一种能分泌多种细胞因子的较原始的骨髓基质细胞，具有基质细胞的特性，能支持造血，在适宜的条件下能增殖并被诱导分化成骨、软骨、脂肪、神经、心肌、肝脏等组织细胞。目前关于MSC对免疫系统作用的机制尚不十分清楚，本文对其免疫调节作用作一综述。     

骨髓间充质干细胞多能性的研究进展

骨髓中除了造血干细胞 (ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ ,ＨＳＣｓ)以外 ,还存在着另外一类干细胞 ,即间充质干细胞 (ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＭＳＣｓ)。ＭＳＣｓ早在 1976年就被Ｆｒｉｄｅｎｓｈｔｅｉｎ发现 ,他把骨髓标本接种到含胎牛血清的培养体系中 ,发现贴壁的纤维母细胞样细胞形成克隆并不断增殖 ,从而分化成为骨和软骨细胞。从此 ,一些研究者陆续发现ＭＳＣｓ能分化为脂肪细胞、骨骼肌细胞、神经外胚层细胞等 ,本文就骨髓ＭＳＣｓ多能性的研究进展作一综述 ,为其更广泛地应用于组织工程领域提供…     

干细胞因子对骨髓间充质干细胞的促增殖分化作用

本研究探讨干细胞因子 (SCF)促进骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。1.材料与方法 :将SD大鼠随机分成SCF组和对照组 ,每组 12只。SCF组用rhSCF(2 0 μg·kg-1·d-1)连续 5d皮下注射 ,对照组用等剂量的生理盐水连续 5d皮下注射 ,第 7天处死大鼠。取股、胫骨的骨髓液 ,加入培养基 ,接种于 35mm培养皿 ,CO2 培养箱培养。通过不断的换液与传代逐渐纯化扩增MSCs。流式细胞仪检测第 4代MSCs细胞周期。胶原酶加胰蛋白酶共同消化法分离乳鼠的心肌细胞 ,培养 3d。用DAPI(2 5 μg/ml)标记第 4代MSCs ,2h后将DAP…     

骨髓间充质干细胞体外诱导神经干细胞分化的观察

来源于人胚脑组织的神经干细胞及来源于16岁非造血系统疾病患者的胸骨骨髓间充质干细胞(BMSCs),采用Transwell培养板在体外共同培养(共培养组),观察神经干细胞的形态变化,在共培养第7天用免疫荧光染色检测神经干细胞中神经元细胞特异性标志物特异性烯醇化酶(NSE),并与单纯低糖DMEM培养基培养的神经干细胞(对照组)进行比较.结果显示,共培养组中的NSE阳性细胞达32.7%±11. 5%,而对照组未见NSE阳性细胞,两组相比,P＜0.05.认为BMSCs在体外可诱导神经干细胞分化为神经元.     

骨髓间充质干细胞移植对卵巢早衰模型小鼠卵巢功能的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞对卵巢早衰模型小鼠的影响。方法取ICR小鼠骨髓间充质干细胞用于细胞移植。健康ICR小鼠60只随机分为对照组、模型组、治疗组。对照组小鼠不进行任何干预,模型组和治疗组小鼠腹腔注射顺铂建立化疗性损伤小鼠卵巢早衰动物模型。治疗组造模后一次性原位注射骨髓间充质干细胞进行治疗。观察大鼠一般情况、动情周期,并测定血清中E2、FSH含量以及卵巢组织形态改变。结果模型组小鼠动情周期紊乱,经过干细胞治疗后的小鼠动情周期基本恢复正常。与对照组比较,模型组E2下降,FSH水平升高(P0.05)。经骨髓间充质干细胞治疗后E2上升,FSH水平下降,几近恢复正常水平。模型组滤泡大部分受到破坏,滤泡数量明显少于对照组(P0.01)。骨髓间充质干细胞治疗后滤泡及黄体数目均明显增加(包括新形成的黄体),与模型组比较差异显著(P0.01)。结论顺铂可致卵泡颗粒细胞凋亡,造成卵巢功能过早衰退,骨髓间充质干细胞通过调节血清中各激素含量,可降低顺铂对卵巢的损害,促进卵泡发育,改善并增强卵巢功能。     

活血健脾补肾三法对骨髓间充质干细胞移植在结肠炎大鼠肠道定位的影响

[目的]探讨中医活血、健脾、补肾三法对骨髓间充质干细胞(MSC)移植在结肠炎大鼠肠道定位的影响。[方法]雌性SD大鼠以5%2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBs)诱导形成结肠炎模型,造模后随机分为模型对照组、MSC移植组、活血组、健脾组、补肾组,第2天将体外分离培养的雄性SD大鼠MSC经尾静脉注射到各组雌性大鼠体内。疗程结束后取各组大鼠结肠组织,以Y染色体的性别决定区段sry作为标志,以确定MSC的肠道定植情况。[结果]经PCR扩增后,凝胶电泳可以检测到结肠组织雄性性别特异性基因区段sry,MSC移植组阳性率为20%,活血组为35%,健脾组为25%,补肾组为25%。[结论]活血法代表方药桃红四物汤较明显促进MSC在结肠炎大鼠肠道定位。     

骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展

<正>骨髓间充质干细胞(BMSCs)又称骨髓基质干细胞,是骨髓内的一类非造血干细胞,它能够分化为多种中胚层来源的间质细胞。心肌细胞不具备再生能力,故损伤的心肌细胞无法通过自身的增殖和分化来修复,心肌梗死、心衰、心肌重构等均为传统医学方法难以医治的顽疾。近年研究发现,BMSCs在一定的诱导条件下,可以分化为心肌细胞。BMSCs具备易获得性、多     

大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用

目的探讨大鼠脊髓匀浆上清液对骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经样细胞的作用。方法分离得到的MSCs在体外扩增、传代。用碱性成纤维生长因子(bFGF)预诱导后加入不同时间的臂丛神经损伤大鼠脊髓匀浆上清液诱导。免疫细胞化学染色检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,以鉴定分化细胞的表型特征。结果细胞诱导后具有神经元或胶质细胞样细胞的形态,相应细胞表面标志NSE或GFAP阳性,以损伤后7d脊髓匀浆上清液诱导组NSE阳性和GFAP阳性率最高(P<0.05)。结论臂丛根性撕脱伤大鼠脊髓匀浆上清液在体外能够有效地诱导骨髓MSCs分化为神经样细胞,伤后1w可以作为MSCs移植的最佳时间。     

体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的研究

目的观察人骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）体外扩增和定向诱导分化为神经元样细胞的变化,为其临床应用奠定基础。方法采用密度梯度离心法分离BM-MSCs细胞,用MesencultTM培养基和贴壁培养法培养、纯化和扩增细胞,流式细胞术检测细胞表面CD29和CD90分子表达率。采用20 ng/ml重组碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、20 ng/ml新型人表皮生长因子（hEGF）和20 g/L二甲基亚砜（DMSO）、5 mmol/Lβ-巯基乙醇（BME）分别诱导BM-MSCs;采用免疫组化法检测细胞的神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（VIM）表达情况。结果BM-MSCs细胞增殖迅速,3周可传代培养;BM-MSCs传十代扩增1－2×10^3倍。分离和扩增BM-MSCs CD29、CD90强表达率分别为95.02%、93.81%。药物诱导后的BM-MSCs发生轴突等神经元样细胞变化,阳性表达NSE、GFAP、VIM分子。结论人BM-MSCs能体外培养和扩增,并能定向诱导分化为神经元样细胞。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外向心肌细胞诱导分化的机制

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外向心肌细胞(CM)定向诱导分化的机制.方法 全骨髓贴壁法体外获取大鼠BMSC,流式细胞术检测CD44、CD45和CD105的表达率对其进行鉴定,以未加一抗只加二抗的BMSCs作为平行对照组.选用生长良好、纯度达到95％的P5代BMSCs,用5-氮杂胞苷(5-Aza)10 μmol/L进行诱导,对诱导后的细胞进行心肌特异性标志TroponineI的免疫组化检测.在诱导前及诱导2e以RT-PCR方法检测RhoA的表达变化.结果 体外分离纯化培养扩增出大鼠BMSCs,表达CD44、和CD105.经10 μmol/L 5-Aza诱导分化的BMSCs表达心肌特异性标记TroponineI;RT-PCR的结果显示,诱导后的BMSCs表达RhoA.结论 BMSCs可体外分离培养扩增,并具有向心肌细胞分化的潜能,5-Aza最佳诱导浓度为10 μmol/L.5-Aza体外可能通过RhoA途径在BMSCs分化为心肌细胞过程中起着重要调控作用.     

骨髓间充质干细胞的研究进展及其应用前景

干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞群体,最新的分类方法是根据其来源将其分为四类:成体干细胞、胎儿干细胞、胚胎干细胞和核移植干细胞。胚胎性干细胞和成体干细胞除了来源不同,其最大的区别在于增殖能力和分化潜能的不同:胚胎性干细胞可无限增殖,而成体干细胞的增殖能力则有限;胚胎性干细胞分化潜能要较成体干细胞宽。成体干细胞的可塑性已经成为研究热点,目前有越来越多的实验结果都证实成体干细胞确实具有分化为多种细胞类型的潜能,因此成体干细胞成为生物医学领域中一个很好的研究手段,同时具有广阔的临床应用前景。成体骨髓来…     

体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞

目的:体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化(BMSCs)为肝样细胞,提高分化效率.方法:将第一代BMSCs随机分为诱导组和对照组.诱导组加肝细胞生长因子、成纤维生长因子、表皮生长因子、抑瘤素M等进行诱导培养,观察细胞形态,检测甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(A1b)、细胞角蛋白18(CK18)、酪氨酸氨基转移酶(TAT)和细胞色素P450 2b9(CYP2b9)的mRNA表达,A1b合成以及A1b和CK18蛋白标记细胞阳性率.结果:诱导组第3天出现多边形细胞,5—7d上皮样细胞呈岛状分布,14 d呈铺路石状.对照组细胞为长梭形.第7,14,21天,诱导组细胞AFP,A1b,CK18 mRNA和A1b蛋白检测阳性;第14,21天,细胞表达TAT和CYP2b9 mRNA.对照组除AFP mRNA呈弱阳性外,其余均为阴性.第7,14,21天,诱导组CK18阳性率分别为71.4%.75.9%,80.6%:A1b阳性率分别为75.0%,79.7%.81.1%.而对照组第7天CK18和A1b阳性率仅2.3%,1.7%,与诱导组相比有显著差异(P_(CK18)=1.97×10~(-5),P_(A11b)=3.08×10~(-6)).结论:BMSCs在体外可以被诱导分化为肝样细胞,诱导率最高可达80%以上.     

骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的研究进展

骨髓间充质干细胞（MSCs）在不同的诱导条件下可向心肌细胞（CM）分化,但目前对于MSCs心肌化过程中的信号分子、具体途径及基因调控等均不太明确。本文对MSCs向心肌细胞分化的实验条件及目前研究可能包含的分子机制作一综述。     

自体骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后心衰家兔炎性因子表达的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌梗死后心衰家兔核因子-κB(NF-κB)及炎性因子(IL-6、TNF-α、CRP)的影响;探讨BMSCs移植后减轻炎症反应、改善心室重塑的可能机制.方法 新西兰白兔随机分为对照组(假手术组)、急性心肌梗死(AMI)后心衰模型组开胸结扎冠状动脉前降支(LAD)、BMSCs移植组.实时定量PCR法检测心肌组织NF-κB、IL-6、TNF-α的mRNA表达及ELISA法检测血清炎性因子IL-6、TNF-α、CRP浓度.结果 细胞移植后28 d,与AMI后心衰模型组相比,正常对照组、BMSCs组舒张末期容积(EDD)均明显减低,射血分数(EF)及缩短分数(FS)均明显增高(P<0.05).手术后7 d,与正常对照组相比,AMI后心衰模型组、BMSCs组的血清IL-6、TNF-α、CRP的浓度均显著增加(P<0.05),但AMI后心衰模型组和BMSCs组之间差异不显著.细胞移植后28 d,BMSCs组血清IL-6、TNF-α、CRP浓度和心肌组织NF-кB、IL-6、TNF-α比AMI后心衰模型组显著降低(P<0.05).细胞移植后28 d时,EF与炎性因子呈负相关,与心肌NF-κB呈负相关.结论 自体BMSCs移植可显著降低心肌梗死后NF-кB表达及降低炎症反应,减轻左室重塑,改善AMI后心功能.     

骨髓间充质干细胞移植对老年痴呆大鼠的防治作用

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对老年痴呆大鼠的预防治疗作用。方法无菌取Wistar乳鼠骨髓间充质干细胞,培养3代时备用。实验分为正常对照组、模型组、PBS输入组、BMSCs移植组,β-淀粉样蛋白多肽制备动物模型,BMSCs移植组在制备模型前1d静脉回输BMSCs,制备模型8 w后取海马组织,RT-PCR方法检测脑源性神经生长因子(BDNF)的表达,ELISA检测神经生长因子(NGF)的含量。结果 BMSCs经3次传代后,细胞呈单一的长梭形生长。RT-PCR方法检测BDNF的表达,BMSCs移植组的BDNF表达明显高于模型组(P<0.05),接近于正常对照组(P>0.05)。ELISA检测NGF的含量,BMSCs移植组的NGF表达明显高于模型组(P<0.05),略高于正常对照组(P>0.05)。结论 BMSCs移植可防治大鼠老年痴呆。     

益生菌对溃疡性结肠炎患者肠黏膜屏障的修复作用

目的探讨益生菌对溃疡性结肠炎患者肠黏膜屏障的修复作用。方法将54例溃疡性结肠炎患者随机分为研究组和对照组。观察双歧杆菌、乳杆菌、嗜热链球菌治疗前1天、治疗后14天患者乳果糖、甘露醇尿液排泄率比值（LAC／MAN）以及血浆内毒素水平。结果益生菌治疗后患者肠黏膜通透性显著下降（P〈0．01），血浆内毒素水平也明显下降（P〈0．05）。结论益生菌可能对溃疡性结肠炎患者肠黏膜屏障有一定修复作用。     

骨髓间充质干细胞修复急性肺损伤气血屏障的研究进展

正急性肺损伤(acute lung injury,ALI)以及它的危重形式—急性呼吸窘迫综合征(acute respiratiory distress syndrome,ARDS),是由感染、氧中毒及机械刺激等多种原因引起的肺部弥散性损害,以顽固性低氧血症、呼吸窘迫、肺顺应性下降和弥散性渗出为主要特征,典型病理改变是因气血屏障受损,导致广泛严重的肺泡损害和间质性肺水肿,肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,目前尚无特异有效的治疗方法,     

骨髓间充质干细胞治疗心肌梗死的机制

干细胞移植是目前心肌梗死治疗方法的进展,而骨髓间充质干细胞（BMSCs）是其中有临床应用前景的细胞之一。本文通过介绍BMSCs向心肌样细胞的分化;BMSCs的促血管新生作用;BMSCs对心肌细胞保护和抗凋亡作用;改善心室重构等总结了骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的机制。