两色金鸡菊黄酮提取物对高糖高脂诱导的大鼠肾小球系膜细胞纤维化的影响及相关机制研究

目的:探讨两色金鸡菊黄酮取物对高糖高脂诱导大鼠肾小球系膜纤维化的影响及其作用机制。方法:通过高糖高脂诱导大鼠肾小球系膜细胞建立体外糖尿病肾病细胞模型,使用不同浓度的两色金鸡菊黄酮提取物进行干预,采用CCK-8细胞增殖实验结合细胞形态学观察确定黄酮提取物的使用浓度后将细胞共分为5组,分别为正常对照组、模型组及两色金鸡菊黄酮提取物25、50、100μg/mL组,采用Western blot法检测纤维化因子纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,并通过检测转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、信号分子Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)、Smad4、NADPH氧化酶4(Nox4)蛋白研究两色金鸡菊黄酮提取物的抗纤维化机制。结果:两色金鸡菊黄酮提取物能显著抑制高糖高脂诱导大鼠肾小球系膜细胞中纤维化因子的表达。结论:两色金鸡菊黄酮提取物能抑制高糖高脂诱导的大鼠肾小球系膜的纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β_1/Smads/Nox4信号通路有关。     

两色金鸡菊黄酮成分对高糖高脂诱导的细胞模型能量代谢紊乱的影响

目的观察两色金鸡菊黄酮成分对高糖高脂诱导大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1能量代谢紊乱的影响,探讨其保护作用机制。方法采用高糖高脂诱导HBZY-1细胞建立体外糖尿病肾病代谢紊乱细胞模型,将HBZY-1细胞分为正常组、模型组和两色金鸡菊黄酮成分不同剂量组。采用MTS实验检测模型细胞增殖水平,倒置显微镜观察模型细胞形态变化,细胞划痕实验观察模型细胞细胞外基质分泌,Westernblot检测细胞能量代谢调控因子5’腺苷-磷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、乙酰辅酶a羧化酶1(ACC1)、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)及氧化应激因子一氧化氮合酶(e NOS)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的蛋白表达。结果两色金鸡菊黄酮成分能抑制高糖高脂诱导的HBZY-1细胞增殖,细胞间隙增大、密度显著降低;两色金鸡菊黄酮成分促进模型细胞p-AMPKα、p-ACC1、e NOS的蛋白表达,抑制模型细胞SREBP1、NOX4、ACC1的蛋白表达;划痕实验结果显示,两色金鸡菊黄酮成分对模型细胞细胞外基质分泌有显著抑制作用,同时α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达显著降低。结论两色金鸡菊黄酮成分可能通过调控AMPK/SREBP1/ACC1能量代谢通路,抑制模型细胞增殖、氧化应激,进而改善肾脏纤维化病变。     

两色金鸡菊提取物对大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达的影响

目的:本研究通过高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞建立糖尿病肾病的体外模型,观察两色金鸡菊乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Coreopsis tinctoria,AC)对模型中细胞增殖及纤维化因子表达的影响。方法:采用AC对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞进行干预,将细胞分为正常组,模组组,AC不同质量浓度(25,50,100,150 mg·L~(-1))组。采用噻唑蓝(MTT)比色法,细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测AC不同质量浓度对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)进一步观察AC不同质量浓度对肾脏纤维化蛋白转化生长因子-β_1(TGF-β_1),胶原蛋白Ⅳ(CollagenⅣ),纤维连接蛋白(FN)表达的影响。结果:AC 50,100,150 mg·L~(-1)组均能抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的增殖(P0.01);AC 25,100,150 mg·L~(-1)质量浓度组显著降低细胞中TGF-β_1的mRNA与蛋白表达水平(P0.01);AC 100,150 mg·L~(-1)质量浓度组显著抑制细胞中CollagenⅣmRNA与蛋白的表达水平(P0.01);AC 50,100,150 mg·L~(-1)质量浓度组显著抑制细胞中FN mRNA与蛋白的表达水平(P0.01)。结论:两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达发挥其对糖尿病肾病肾脏保护作用。     

电针联合两色金鸡菊提取物对糖尿病肾病大鼠肾脏Vimentin、α-SMA、TGF-β1及p-smad2表达的影响

目的观察电针联合两色金鸡菊提取物对糖尿病大鼠肾脏波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及p-smad2表达的影响,探讨其作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、两色金鸡菊组、电针+两色金鸡菊组和二甲双胍组,每组6只。采用高糖高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。正常组、模型组不进行干预;电针组针刺大鼠双侧"肾俞""脾俞",连接电针,留针30 min;两色金鸡菊组予两色金鸡菊乙酸乙酯提取物(300 mg/kg)灌胃;电针+两色金鸡菊组予电针联合两色金鸡菊乙酸乙酯提取物灌胃;二甲双胍组予二甲双胍(200mg/kg)药液灌胃。每日1次,治疗4周。HE染色观察肾组织形态学及纤维化程度,Western blot检测肾组织Vimentin、α-SMA、TGF-β1及p-smad2蛋白表达。结果 HE染色结果显示,电针组、两色金鸡菊组、电针+两色金鸡菊组和二甲双胍组均可缓解模型大鼠肾小管扩张,减轻肾小球皱缩现象,改善炎性细胞浸润,减少基底膜增生和融合,且以电针+两色金鸡菊组改善更明显;Westernblot检测结果显示,电针和两色金鸡菊提取物均可降低模型大鼠肾组织Vimentin、α-SMA、TGF-β1及p-smad2蛋白表达,且以两者联合效果最佳。结论电针联合两色金鸡菊提取物可明显改善糖尿病大鼠肾脏纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad2信号通路有关。     

槲皮素对高糖诱导肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的:研究槲皮素在高糖环境下对大鼠肾小球系膜细胞增殖槲皮素对照组及TGF-β1表达的影响。方法:将体外培养的大鼠系膜细胞分为正常组、高糖组、槲皮素对照组及槲皮素低、中、高剂量组6组,MTT法检测槲皮素对肾小球系膜细胞增殖的影响,Western-blot法检测肾小球系膜细胞TGF-β1、P-Smad2、FN的表达。结果:槲皮素能够显著抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1、P-Smad2、FN表达。结论:槲皮素可通过降低TGF-β1水平抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖,并通过抑制Smad2磷酸化部分影响TGF-β1/Smads信号通路的激活,降低FN的表达,对肾脏起到保护作用。     

两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾脏纤维化RhoA/ROCK/Nox4信号通路的影响

目的观察两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾功能损伤及肾脏纤维化的影响,探讨其作用机制。方法 SD大鼠以高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型。将60只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和两色金鸡菊高、中、低剂量组,每组10只。各给药组给予相应剂量药物灌胃4周。Masson染色观察大鼠肾脏纤维物质沉积的变化;放射免疫法检测大鼠早期肾损伤各指标的水平;免疫组化检测大鼠肾组织RhoA、p-MYPT、Nox4、平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肾脏纤维物质沉积、尿微量白蛋白、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-巨球蛋白(β2-MG)水平显著升高,RhoA、p-MYPT、Nox4、α-SMA蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,两色金鸡菊高、中、低剂量组均不同程度地改善大鼠肾脏纤维物质的沉积,抑制尿液微量白蛋白、α1-MG、β2-MG表达水平,肾组织RhoA、p-MYPT、Nox4、α-SMA蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过RhoA/ROCK/Nox4信号通路抑制模型大鼠肾组织α-SMA的表达、肾脏纤维物质沉积,进而减轻模型大鼠早期肾脏损伤。     

糖肾康中药复方含药血清对高糖环境下RMCs的增殖及TGF-β1/Smad2/3 信号通路的影响

目的研究糖肾康中药复方含药血清对高糖环境下大鼠肾系膜细胞(RMCs)增殖及TGF-β1/Smad2/3信号通路的影响。方法 12只SD大鼠采用随机数字法分为小剂量中药组、中剂量中药组、大剂量中药组,空白组,每组3只,灌胃7天后门静脉取血。分别用含中药血清和普通大鼠血清培养RMCs。采用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞的增殖率,以确定最佳中药血清浓度;实时定量、PCR及酶联免疫吸附剂(ELISA)法测定TGF-β1mRNA及蛋白的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)及免疫荧光方法测定Smad2/3蛋白表达及磷酸化水平。结果不同剂量的糖肾康中药含药血清均能抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖;中药血清可显著抑制高糖诱导的TGF-β1表达及Smad2/3磷酸化。结论糖肾康中药含药血清能抑制高糖刺激下的RMCs增殖,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad2/3通路有关。     

黄连素激活TGR5对高糖引起的肾小球系膜细胞纤维化的影响

目的:观察黄连素(Berberine,BBR)是否能够通过活化胆汁酸膜受体TGR5,从而抑制高糖引起的纤维连接蛋白FN的表达升高以及核因子AP-1的激活,改善由高糖引起的肾小球系膜细胞(GMCs)纤维化的发生。方法:采用小分子RNA干扰肾小球系膜细胞TGR5的蛋白表达,Western blot检测肾小球系膜细胞中TGR5、FN、ICAM-1、TGF-β1、p-c-Jun ser63、p-c-Jun ser73以及pc-Fos ser32蛋白水平。结果:30μmol/L黄连素能够明显抑制高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子(ICAM-1)和转化生长因子(TGF-β1)的表达,细胞外基质主要成分纤维连接蛋白(FN)生成明显减少。同样,给予黄连素处理后,能抑制HG诱导的c-Jun/cFos磷酸化水平。TGR5特异性激动剂INT-777能够剂量依赖性抑制高糖引起的FN、ICAM-1以及TGF-β1上调,并且10μmol/L的浓度下其抑制作用即具有显著性意义。而在干扰TGR5表达后,30μmol/L黄连素抑制高糖引起的FN、ICAM-1以及TGF-β1的作用被取消。结论:激活TGR5,抑制AP-1的活性可能是黄连素抑制高糖引起的FN、ICAM-1以及TGF-β1上调的分子机制之一。     

山楂叶总黄酮对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1/Smad4信号转导通路的影响

目的探讨山楂叶总黄酮对链脲佐菌素(Streptozotocin)诱导的糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad4信号转导通路的影响。方法用链脲佐菌素加高脂高糖饲养建立糖尿病肾病模型。60只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、厄贝沙坦组、山楂叶总黄酮组。结果山楂叶总黄酮显著降低糖尿病肾病大鼠的血糖,减少肾小球细胞外基质的相对面积,改善肾功能;下调肾组织中TGF-β1、Smad4 mRNA的表达。结论山楂叶总黄酮可通过干预TGF-β1/Smad信号转导通路,减少肾小球细胞外基质的沉积,改善糖尿病肾病大鼠肾功能。     

消渴平含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖、周期及TGF-β1的影响

目的:观察消渴平(xiaokeping,XKP)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖、周期及转化生长因子(TGF-β1)表达的影响,探讨其治疗DKD的作用机理。方法:使用不同浓度的消渴平含药血清及厄贝沙坦含药血清与高糖共同培养大鼠系膜细胞,应用MTT法观察各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western-blot及RT-PCR检测TGF-β1蛋白和mRNA表达情况。结果:与空白对照组相比,高糖组系膜细胞增殖明显增加(P 0. 01),消渴平可呈浓度依赖性地抑制系膜细胞增殖。细胞周期检测结果显示,与高糖组相比,消渴平高剂量组可明显降低S期系膜细胞的百分比(P 0. 05),Western-blot及RT-PCR检测显示消渴平可显著减少TGF-β1表达(P 0. 05)。结论:消渴平可明显抑制高糖诱导的大鼠系膜细胞增殖,阻滞细胞周期,降低TGF-β1表达,这可能是其防治DKD的机制之一。     

丹参多酚酸盐对人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号转导通路的影响

目的:探讨丹参多酚酸盐对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号传导通路的影响。方法:培养人肾小球系膜细胞,分为正常组;模型组;丹参多酚酸盐高剂量(200μmol/L);中剂量(20μmol/L);低剂量(2μmol/L)组。经预实验筛选结果,采用10-8mol/L血管紧张素Ⅱ诱导模型组及丹参多酚酸盐各组人肾小球系膜细胞增殖,采用MTT法检测各组及各时间点的细胞活性。收集培养48 h时间点各组细胞,采用Western blot法及Real-timePCR法分别检测Smad2、Smad3蛋白及TGF-β及Smad7 mRNA的表达情况。结果:模型组与正常组比较,在培养24 h,48 h,72 h内系膜细胞的增值活性增强、丹参多酚酸盐各组能够抑制其增殖,于48 h达到稳定;模型组与正常组比较,系膜细胞中Smad2、Smad3蛋白及TGF-βmRNA的表达显著上升(P0.05),而Smad7mRNA的表达则明显降低(P0.05);丹参多酚酸盐各组与模型组比较,均能逆转上述变化(P0.05)。结论:血管紧张素Ⅱ能够有效刺激肾小球系膜细胞增殖,丹参多酚酸盐可能通过多靶点抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,从而抑制延缓肾小球硬化及纤维化。     

通络益肾方对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞MMP-9/TIMP-1和TGF-β1表达的影响

目的观察通络益肾方对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质调控系统MMP-9/TIMP-1、TGF-β1表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的可能机制。方法以体外培养的大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将培养的肾小球系膜细胞分为空白对照组、高糖培养组(高糖组)、通络益肾方高、中、低剂量组及西药对照组,用大鼠含药血清给药,分别给予相应处理48 h后,采用四甲偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,ELISA法检测细胞培养上清液TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的水平。结果与空白对照组比较,高糖组肾小球系膜细胞增殖明显(P<0.01),上清液中TGF-β1和TIMP-1水平显著增加,MMP-9水平减少(均P<0.01);通络益肾方高、中、低剂量均能明显抑制肾小球系膜细胞增殖(P<0.01或P<0.05),下调TGF-β1和TIMP-1表达,上调MMP-9表达(P<0.05或P<0.01),尤以高剂量组效果最佳,呈剂量依赖性;西药对照组上述指标表达水平和中药中剂量组相当(P>0.05)。结论通络益肾方可能通过抑制肾小球系膜细胞增殖和下调TGF-β1、促进细胞外基质的降解而拮抗糖尿病肾病肾小球硬化,发挥其肾保护作用。     

牡丹皮苷/酚组分对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及其机制研究

通过建立高糖高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠模型,以肾功能参数和病理组织学检查(HE染色、透射电镜)评价牡丹皮苷/酚组分对DN大鼠肾损伤的保护作用,并对其可能的作用机制进行探索。研究发现,与模型组相比,牡丹皮苷/酚组分高、低剂量组(0.808,0.404 g·kg-1·d-1)能够显著改善血肌酐、血尿素氮、尿蛋白等肾功能参数的异常情况。从HE染色和透射电镜的结果得知模型组大鼠的肾小球基底膜大部分增厚,系膜细胞明显增殖以及足细胞结构破坏,然而牡丹皮苷/酚组分干预后能够有效保护肾小球结构损伤。此外,为了探讨该组分对抗DN大鼠肾损伤的作用机制,实验通过Western blot和免疫组化方法测定了各组大鼠肾组织中TGF-β1,纤连蛋白(FN)以及Ⅳ胶原蛋白的表达量,并对TGF-β1下游效应因子Smad2/3,p38MARK的磷酸化水平进行研究。结果表明,牡丹皮苷/酚组分能够有效拮抗TGF-β1的活性,下调其诱导的细胞外基质(ECM)中纤连蛋白(FN)以及Ⅳ胶原蛋白的表达,对抗肾小球基底膜增厚。更重要的是,其作用机制可能为干预Smad,MARK通路的传导对抗TGF-β1诱导的ECM堆积,从而保护DN大鼠肾损伤。     

人参皂苷Rg1对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤保护作用

目的探讨人参皂苷Rg1对高糖诱导的人肾小管上皮细胞HK-2中炎症反应和纤维化的影响及可能的机制。方法 细胞计数法(CCK-8)检测不同浓度人参皂苷Rg1对细胞活性的影响。HK-2细胞随机分为正常对照组、高糖组、低、高人参皂苷Rg1组。ELISA检测TNF-α和IL-1β,Western blot分析α-SMA、E-cadherin、Fn、TGF-β1、Smad 2和Smad 3的表达情况。结果人参皂苷Rg1对HK-2细胞无明显毒性作用。与正常对照组相比,高糖组TNF-α和IL-1β含量升高(P 0.05),α-SMA、Fn、TGF-β1、Smad 2和Smad 3的表达水平上调(P 0.05),E-cadherin的表达水平下调(P 0.05);与高糖组相比,低、高人参皂苷Rg1组TNF-α和IL-1β含量降低(P 0.05),α-SMA、Fn、TGF-β1、Smad 2和Smad 3的表达水平下调(P 0.05),E-cadherin的表达水平上调(P 0.05)。结论人参皂苷Rg1通过抑制HG诱导的肾小管上皮细胞炎症反应和EMT来阻碍肾纤维化进展,其机制可能与阻断TGF-β/Smad信号通路有关。     

消癥散结扶正活络方药对TGF-β1诱导的HMCs增殖及Ⅳ型胶原分泌的影响

目的观察消癥散结、扶正活络方药对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小球系膜细胞增殖及Ⅳ型胶原分泌的影响。方法采用TGF-β1诱导肾小球系膜细胞增殖和Ⅳ型胶原表达作为肾纤维化的细胞模型,实验分为5组:空白组,TGF-β1处理组,消癥散结、扶正活络方药高、中、低剂量(终浓度分别为50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L)组。MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖抑制率,ELISA法检测肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原的表达。结果与空白对照组比较,TGF-β1处理组细胞经TGF-β1诱导后,HMCs增殖明显,细胞内ECM物质Ⅳ型胶原含量显著提高,差异均具有统计学意义。与TGF-β1处理组比较,消癥散结、扶正活络方药组可抑制TGF-β1诱导的HMCs的增殖及Ⅳ型胶原的表达,差异均具有统计学意义。结论消癥散结、扶正活络方药对TGF-β1诱导的HMCs的增殖及Ⅳ型胶原的表达具有抑制作用,抑制TGF-β1刺激HMCs分泌细胞外基质可能是其抗纤维化形成的机制之一。     

马里苷活化SIRT3蛋白延缓高糖及软脂酸诱导HBZY-1细胞纤维化损伤的研究

目的 研究马里苷介导沉默信息调节因子3(SIRT3)/固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)信号通路修复糖尿病肾病（DN）肾脏纤维化的作用。方法 高糖（HG）和软脂酸（PA）诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）建立体外条件下DN模型,将细胞分为正常对照组、模型组和马里苷不同剂量组;倒置显微镜观察各组细胞数量及形态的变化;Western blot法检测各组细胞中SIRT3/SREBP-1通路蛋白、纤维化损伤相关蛋白转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化（p）-Smad同源物2(Smad2)、p-Smad3、Smad4的表达水平;采用Discovery studio软件将马里苷与SIRT3进行分子对接;免疫荧光法检测各组细胞中纤连蛋白（FN）和胶原Ⅳ（CollagenⅣ）的表达和定位。结果 马里苷可抑制HG及PA诱导的HBZY-1细胞增殖,使细胞间隙增大,细胞密度降低;马里苷能下调模型细胞中SREBP-1、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3、Smad4蛋白的表达;马里苷能上调活性SIRT3表达,同时分子对接结果表明马里苷与SIRT3蛋白能较好结合;马里苷可抑制HG及PA...     

宽叶缬草对高胆固醇血症大鼠肾组织内TGF-β1表达的影响

目的:探讨宽叶缬草对高胆固醇血症大鼠肾组织内转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响及其意义.方法:用含4%胆固醇和1%胆酸钠的高脂饲料饲喂大鼠建立高脂模型,观察宽叶缬草对大鼠血脂、尿蛋白和肾功能的影响,以及对肾小球细胞外基质增生、TGF-β1和Ⅳ型胶原表达的影响.结果:宽叶缬草有降低总胆固醇、低密度脂蛋白、尿蛋白和血肌酐的作用,肾病理和免疫组化证实宽叶缬草在降脂同时,能减轻肾小球系膜病变和细胞外基质产生,降低肾组织内TGF-β1和Ⅳ型胶原表达.结论:宽叶缬草对高脂血症肾脏有保护作用,此作用可能与其降低肾组织内TGF-β1表达有关.     

建中理劳汤含药血清对TGF-β1诱导大鼠系膜细胞HBZY-1纤维化的作用机制的研究

目的通过体外细胞实验探讨建中理劳汤含药血清对TGF-β1诱导大鼠系膜细胞HBZY-1纤维化过程中TGF-β/Smad信号通路的调控作用。方法采用PCR、Western Blot方法观察建中理劳汤含药血清对TGF-β1诱导大鼠系膜细胞HBZY-1纤维化过程中Smad-2、Smad-3、Smad-7 mRNA及蛋白表达的影响;通过Western Blot方法检测5.5μg/L的TGF-β1诱导HBZY-1细胞不同时间p-Smad2、p-Smad3蛋白的表达影响;Western Blot检测建中理劳汤大鼠含药血清对TGF-β1诱导30min后的HBZY-1细胞p-Smad2、p-Smad3蛋白的表达影响。结果与正常组相比,TGF-β1组中p-Smad2、p-Smad3蛋白表达显著升高,Smad-7表达明显降低(P0.05);而与TGF-β1组相比,加入建中理劳汤含药血清后,p-Smad2、p-Smad3蛋白表达显著降低,Smad-7表达明显升高(P0.05)。结论建中理劳汤含药血清对TGF-β1诱导大鼠系膜细胞HBZY-1纤维化过程中TGF-β/Smad信号通路起调控作用,可能是其抗纤维化形成的机制之一。     

糖肾汤对高糖下肾小球系膜细胞TGF-β1表达影响的实验研究

目的：观察高糖对肾小球系膜细胞TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响，以及糖肾汤的干预作用。方法：分别用低糖、高糖以及高糖下糖肾汤不同剂量培养肾小球系膜细胞，采用ELISA法测定TGF-β1蛋白含量，逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)法测定TGF-β1ImRNA表达，并以开博通作为阳性药对照。结果：高糖可刺激肾小球系膜细胞TGF-β1蛋白及mRNA的表达，糖肾汤具有对抗高糖刺激作用，且呈现一定的量效关系。结论：糖肾汤对高糖对肾小球系膜细胞的影响具有干预作用。     

基于TGF-β1/Smad信号通路的加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化机制研究

目的观察加味黄芪赤风汤对TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其抗肾脏纤维化的机制。方法采用血清药理学方法,大鼠予加味黄芪赤风汤和替米沙坦灌胃,制备含药血清。体外培养小鼠系膜细胞,以脂多糖作为炎症刺激因子。实验分为6组:正常组、模型组、替米沙坦组、加味黄芪赤风汤(简称中药)高、中、低剂量组。含药血清干预72h后,采用酶联免疫法吸附试验测定各组细胞上清液中层粘连蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的含量;采用Western blot法检测各组细胞中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达。结果(1)与正常组比较,模型组上清液中LN和FN含量增加(P0.01);与模型组比较,替米沙坦组与中药中剂量组LN及FN含量减少(P0.05,P0.01),中药低剂量组上清液中FN含量亦减少(P0.01)。(2)与正常组比较,模型组TGF-β1、p-Smad2/3、CTGF蛋白表达显著增加,Smad7蛋白表达减少,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,替米沙坦组、中药高、中、低剂量组TGF-β1、CTGF蛋白表达均降低(P0.01,P0.05),替米沙坦组、中药高、中剂量组p-Smad2/3蛋白表达降低(P0.01),中药高、中剂量组Smad7蛋白表达明显增加(P0.05)。结论加味黄芪赤风汤能够抑制致炎因子诱导的肾小球系膜细胞分泌细胞外基质增加和肾小球系膜细胞TGF-β1/Smad信号通路的过度激活,这可能是加味黄芪赤风汤抗肾脏纤维化的机制之一。