三氧化二砷对肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2抑制作用的研究

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞株的抑制作用。方法 :用不同浓度的 As2 O3处理人肝癌细胞株 SMMC- 772 1、Hep G2及正常人肝细胞株 L- 0 2 ,应用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )观察 As2 O3对细胞生长的影响 ,并与 3种常用抗癌药羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)及 5 -氟脲嘧啶 (5 - Fu)的抑制率进行比较。结果 :低浓度的 As2 O3、HCPT、DDP及 5 - Fu对 SMMC- 772 1、Hep G2两种肝癌细胞株的抑制率分别是 86 .3% ,4 3.2 % ;4 .2 % ,4 2 .1%和 76 .7% ,4 5 .6 % ;19.8% ,18.6 % ,As2 O3的抑瘤作用最强 (P<0 .0 5 ) ,而对正常人肝细胞株的抑制较弱。浓度≥ 2 .0 μm ol/ L 的 As2 O3对 SMMC- 772 1和 Hep G2的抑制作用差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :As2 O3体外试验能有效抑制肝癌细胞株的生长 ,且在一定浓度范围内 ,抑制率具有一定的浓度和时间依赖性     

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶联用对肝癌的化疗增敏作用研究

目的 通过体内和体外实验,探讨金雀异黄素(Gen)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对肝癌的化疗增敏效果.方法 体外实验中根据干预方法分别将人肝癌细胞株Bel-7404、SMMC-7721和HepG2分为溶剂对照(NC)组、10μmol/L Gen处理组、2μmol/L 5-FU处理组及Gen+5-FU联合处理组,利用CCK-8法及流式细胞技术研究Gen与5-FU联用对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.体内实验分别构建Bel-7404肿瘤细胞系异种移植(CDX)和Liver-0117人源肿瘤组织异种移植(PDX)裸小鼠模型,然后将荷瘤裸小鼠模型分为4组:NC组、Gen处理组、5-FU处理组和Gen+5-FU联合处理组,观察不同剂量Gen与5-FU单独或联合处理肝癌模型对肿瘤生长的影响.结果 在处理24、48、72 h后,Gen+5-FU联合处理组Bel-7404、SMMC-7721和HepG2细胞增殖率均低于NC组、Gen处理组及5-FU处理组(P均<0.01);处理72 h后Gen+5-FU联合处理组Bel-7404、SMMC-7721和HepG2细胞凋亡率均高于NC组、Gen处理组及5-FU处理组(P均<0.01).对于Bel-7404荷瘤裸小鼠,给药28 d后NC组、Gen(15 mg/kg)处理组、5-FU(30 mg/kg)处理组、Gen(15 mg/kg)+5-FU(20 mg/kg)联合处理组肿瘤相对体积(RTV)分别为15.35±2.92、17.51±3.11、12.93±4.88、13.67±3.54,组间差异无统计学意义(F=1.822,P>0.05);提高Gen剂量至40 mg/kg干预21 d后,Gen(40 mg/kg)处理组的RTV低于NC组(9.73±5.85 vs 17.54±5.06),差异有统计学意义(P<0.05).对于PDX模型Liver-0117荷瘤裸小鼠,给药18 d后,Gen(15 mg/kg)+5-FU(20 mg/kg)联合处理组的RTV低于5-FU(30 mg/kg)处理组(12.64±0.92 vs 18.76±0.68),差异有统计学意义(P<0.05),相对肿瘤抑制率(T/C)为0.576.结论 Gen与5-FU联用在体外表现出较好的化疗增敏效果,但对于不同荷瘤裸小鼠模型其增敏效果不同.     

重组人p53腺病毒联合5-氟尿嘧啶对胃癌细胞的作用

目的 研究重组人p53腺病毒增加胃癌细胞对5-氟尿嘧啶（5-Fu）敏感性的作用。方法 重组人p53腺病毒感染胃癌细胞BGC-823，Western blot法检测p53蛋白在胃癌细胞中的表达；MTT法测定重组人p53腺病毒单独及联合5-Fu用药的不同浓度处理细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡。结果 重组人p53腺病毒感染BGC-82348h，p53蛋白在BGC-823中高表达，并产生G2／M期阻滞和细胞凋亡。重组人p53腺病毒联合5-Fu用药增加5-Fu的敏感性，有剂量时间的依赖性。结论 腺病毒介导p53基因感染BGC-823细胞诱导凋亡并增加胃癌细胞对5-Fu的敏感性。本实验为p53基因治疗与胃癌化疗临床结合提供了可靠的实验依据。     

金雀异黄素与5-氟尿嘧啶联用对肝癌的化疗增敏作用

目的 通过体内和体外实验,探讨金雀异黄素(Gen)与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对肝癌的化疗增敏效果.方法 体外实验中根据干预方法分别将人肝癌细胞株Bel-7404、SMMC-7721和HepG2分为溶剂对照(NC)组、10μmol/L Gen处理组、2μmol/L 5-FU处理组及Gen+5-FU联合处理组,利用CC...     

Bcl-2 siRNA增强HepG2细胞对5-氟尿嘧啶敏感性

目的 观察Bcl-2 siRNA对人类肝癌细胞HepG2 5-氟尿嘧啶（5-FU）敏感性的影响。方法 Bcl-2 siRNA表达载体构建并稳定转染至肝癌细胞HepG2中,用G418筛选稳定的阳性细胞克隆。用RT-PCR检测Bcl-2 mRNA水平,免疫荧光检测目的基因Bcl-2蛋白水平的表达。用131、30、1300和13 000 mg/L 5-FU处理稳定转染细胞,用MTT观察细胞对药物敏感性的影响,用流式细胞术观察细胞凋亡情况。Western blot检测Bcl-2和Bax蛋白水平。结果 5-FU处理细胞24 h,Bcl-2 siRNA转染组的细胞生长抑制率明显高于阴性载体转染组和正常细胞;Bcl-2 siRNA转染组细胞凋亡率高于正常细胞和阴性载体转染组;在Bcl-2表达下调时,Bax蛋白表达水平不变。结论 siRNA下调目的基因Bcl-2能增强人类肝癌细胞HepG2对5-FU的敏感性;HepG2细胞对5-FU的敏感性增强与Bax/Bcl-2的比例增高有关。     

沉默Glypican-3基因增强人肝癌细胞HepG2对5-FU致凋亡作用的敏感性

目的沉默人肝癌细胞HepG2的GPC3基因表达,观察其对5-氟尿嘧啶（5-FU）的药物敏感性及细胞凋亡情况的影响。方法①构建干扰GPC3的shRNA载体,将其转染至肝癌细胞,并设立对照组。（2）Western blot测定GPC3蛋白表达情况。③利用MTT法测定转染后肝癌细胞对5-Fu的药物敏感性。④采用流式细胞技术观察转染后肝癌细胞在5-Fu作用下的细胞凋亡情况。结果转染shRNA的肝癌细胞其GPC3表达阴性;其对5-Fu的药物敏感性增加（P〈0．05）;细胞凋亡较对照组增加（P〈0．05）。结论GPC3的高表达在肝癌细胞中起到抗凋亡作用,而下调GPC3可作为一个潜在的靶目标,增加肝癌细胞对5-Fu诱导细胞凋亡的敏感性。     

5-氟尿嘧啶联合人参皂苷Rg3抑制胃癌细胞的增殖

目的探讨5-氟尿嘧啶（5-Fu）联合人参皂苷Rg3对胃癌细胞增殖的抑制作用。方法MTT法检测5-FU联合Rg3对人胃癌细胞MGC-803和MKN-28细胞增殖的抑制作用。构建体外肿瘤球模型研究5-FU联合人参皂苷Rg3对肿瘤球的生长抑制作用;流式细胞仪检测5-FU联合人参皂苷R驴对MKN-28细胞的凋亡诱导作用“构建胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为生理盐水组（阴性对照组）、5-FU组、Rg3组和5-Fu＋Rg3组（联合给药组）;研究5-Fu联合人参皂苷Rg3对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,统计各组肿瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线。结果MGC-803胃癌细胞和MKN-28胃癌细胞给药48h后,联合给药组细胞存活率显著低于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。MGC-03胃癌细胞肿瘤球和MKN-28胃癌细胞肿瘤球给药7d后,联合给药组肿瘤球体积显著小于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。细胞凋亡实验结果显示：联合给药组诱导肿瘤细胞凋亡能力显著强于其他组,差异具有统计学意义（P〈0．01）。荷瘤裸鼠实验结果显示：各给药组均能有效抑制肿瘤的生长,与阴性对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．01）。联合给药显著延长荷瘤裸鼠的中位生存期,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论5-Fu与Rg3均具有抗胃癌细胞的作用,二者联合应用是一种潜在的治疗胃癌的有效手段。     

降脂药奥利司他通过靶向脂代谢途径对肝细胞癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响

目的 探究脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FASN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)进展中的功能,以期为HCC治疗提供有利的理论依据。方法 生信分析FASN在HCC肿瘤组织中的表达及富集通路;细胞计数盒8(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、流式细胞术分别检测细胞活力、增殖和凋亡;实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测FASN的水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测BCL2相关X蛋白(BCL2-associated X,Bax)和B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的表达;亲脂性荧光染料BODIPY 493/503检测中性脂质的积累情况;试剂盒检测游离脂肪酸和甘油的水平。结果 FASN在HCC肿瘤组织中的表达高于邻近癌旁组织。在体外细胞模型中进行验证,结果显示,与MIHA细胞相比,HCC细胞系(Huh-7、HepG2、Hep3B)中FASN的表达显著上...     

5-氟尿嘧啶免疫调节作用研究进展

5-氟尿嘧啶是一种氟化嘧啶类抗代谢药物.通过干扰肿瘤细胞DNA的复制合成发挥抗肿瘤作用。近年研究显示,5-氟尿嘧啶除抑制肿瘤细胞增殖外,对机体免疫系统功能亦有影响,文章对其作用通路及分子机制进行综述,分析其对T细胞、NK细胞、髓源抑制性细胞、炎性树突状细胞、外周血单个核细胞的影响,并对不同剂量5-氟尿嘧啶的免疫调节效应进行分析总结。     

多西他赛联合顺铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌的临床观察

目的 评价多西他赛联合顺铂和5-氟脲嘧啶治疗晚期胃癌的临床疗效和毒性反应.方法 对19例晚期胃癌患者于第1天静脉滴注多西他赛75mg/m2,第2～4天静脉滴注顺铂25mg/(m2·d)及醛氢叶酸100mg/(m2·d),第2天开始持续静脉滴注72h的5-氟尿嘧啶750mg/(m2·d),每21天为1个周期,治疗2～3周期后评定疗效.结果 全组完全缓解(CR)0例,部分缓解(PR)7例,稳定(SD)8例,进展(PD)4例,总有效率36.8%.最常见的毒副反应为骨髓受抑,Ⅲ° Ⅳ°粒细胞减少占42.1%,其它毒副反应可以耐受.结论 多西他赛联合顺铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期胃癌有较好疗效,毒副作用可耐受.     

ZD6474对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的探讨ZD6474对肝癌细胞HepG2的杀伤作用及作用机制。方法甲基噻唑基四唑实验(MTT法)测定ZD6474对HepG2细胞的增殖抑制;通过流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 ZD6474对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用(P<0.001)。ZD6474导致肝癌细胞发生G_0/G_1期阻滞。结论 ZD6474能显著抑制肝癌HepG2细胞的体外增殖,可能与导致肝癌细胞G_0/G_1期阻滞相关。     

贝伐单抗联合5-氟尿嘧啶对人喉癌细胞系Hep-2作用研究

目的:探讨贝伐单抗(bevacizumab)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人喉癌细胞系Hep-2的作用.方法:用MTT法检测贝伐单抗、5-FU单药及其联合对人喉癌细胞系Hep-2的增殖抑制,同时采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况.结果:贝伐单抗单药及5-FU单药对人喉癌细胞系Hep-2均有明显抑制作用,两药联合具有显著协同作用(P＜0.05).贝伐单抗主要使细胞阻滞于G0/G1期,5-FU则使细胞阻滞于S期.两药联合治疗同时产生G0/G1及S期阻滞.联合组凋亡率显著高于任一单药组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论:贝伐单抗和5-FU对人喉癌细胞系Hep-2能产生增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用.     

奥沙利铂联合5-Fu治疗晚期原发性肝癌疗效观察

目的:探讨晚期原发性肝癌患者采用奥沙利铂、氟尿嘧啶的联合方案静脉化疗的疗效与安全性。方法:22例晚期原发性肝癌患者采用奥沙利铂100 mg/m2,第l天,静脉滴注;亚叶酸钙400 mg/m2,第1天,静脉滴注;5-氟尿嘧啶400 mg/m2,第l天,静脉推注;5-氟尿嘧啶2 400 mg/m2,持续静脉点滴(CIV)46 h方案进行治疗和严密观察,分别以RECIST标准评价客观疗效和国际肿瘤通用毒性标准评价毒性反应。结果:22例患者均可以评价疗效,其中4例部分缓解,8例稳定,10例进展。常见的不良反应为骨髓抑制、轻度周围神经毒性、消化道反应和肝功能损害。结论:奥沙利铂联合氟尿嘧啶静脉化疗是治疗晚期原发性肝癌的一个安全、有效的选择。     

索拉非尼联合紫杉醇对肝癌huh-7细胞的作用研究

[摘要]：目的 探讨索拉非尼联合紫杉醇(PTX) 对肝癌细胞huh-7的杀伤作用。方法 用MTT法检测索拉非尼、紫杉醇单药及其联合对huh-7细胞的增殖抑制,同时采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果 索拉非尼单药及PTX 单药对huh-7均有明显抑制作用,两药联合具有协同作用( P <0.05)。索拉非尼主要使细胞阻滞于G1期,PTX则使细胞阻滞于G2期和M期。两药联用后同时阻滞于G1 及G2/M期。联合组凋亡率明显高于单药组( P<0.05),差异有统计学意义。结论 索拉非尼和PTX对肝癌huh-7细胞有增殖抑制及促凋亡作用, 两药联合表现为协同或相加作用。     

ZD6474联合阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用

目的探讨ZD6474联合阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7的抑制及杀伤作用。方法用MTT法检测ZD6474、阿霉素单药及其联合对MCF-7细胞的增殖抑制程度,同时采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况。结果ZD6474单药及阿霉素单药对MCF-7细胞均有明显抑制作用,两药联合具有协同作用(P<0.05)。ZD6474主要使细胞阻滞于G0/G1期,阿霉素则使细胞阻滞于S期。两药联用后同时阻滞于G0/G1及S期。联合组凋亡率明显高于单药组(P<0.05),差异有统计学意义。结论ZD6474和阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合表现为协同或相加作用。     

ZD6474对肝癌细胞和乙肝相关肝癌细胞增殖的影响

目的:探讨ZD6474对肝癌细胞株HepG2和乙肝相关肝癌细胞株HepG2.2.15细胞增殖的影响.方法:用WST方法检测ZD6474对细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪检测ZD6474对细胞周期及凋亡的影响.结果:ZD6474可以显著抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,6.4 μmol/L的ZD6474可以抑制(46.86±10.32)％的HepG2和(41.24±7.35)％的HepG2.2.15细胞增殖,其抑制增殖作用随剂量增加而增强(P＜0.05).ZD6474诱导细胞产生G0/G1期阻滞,6μmol/L的ZD6474可诱导71.90％的HepG2和69.90％的HepG2.2.15细胞阻滞于G0/G1期.结论:ZD6474可以抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,其机制可能与诱导细胞周期阻滞有关.     

姜黄素联合吉西他滨对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡的影响

目的:观察姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响。方法:使用不同浓度的姜黄素、吉西他滨以及两药联合分别作用肝癌细胞HepG2 24h、48h、72h。MTT法检测上述药物单用或联用对HepG2细胞的生长抑制作用;采用流式细胞仪检测其对HepG2细胞凋亡率的影响。结果:姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对HepG2细胞有明显的生长抑制作用,存在时间剂量依赖关系,均可诱导HepG2细胞凋亡,联合用药有协同作用。结论:姜黄素、吉西他滨能够抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,两药联用有协同作用。     

藻酸盐凝胶中肝癌HepG2细胞的三维培养

目的 采用藻酸盐凝胶为支架进行肝癌HepG2细胞的体外培养,构建体外肝癌细胞三维培养模型.方法 将HepG2细胞接种于藻酸盐凝胶中进行培养,通过倒置显微镜观察、H-E染色、钙黄绿素-碘化丙啶荧光复染及MTT实验,了解藻酸盐凝胶内细胞的生长情况.结果 在藻酸盐凝胶中HepG2细胞以细胞团的形式生长,增殖活跃.结论 成功建立了肝癌HepG2细胞藻酸盐凝胶培养体系,且该体系有利于HepG2细胞的生长.     

大麻素受体激动剂WIN55,212-2联合金诺芬对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响

目的 探讨大麻素受体激动剂WIN55,212-2(WIN)联合金诺芬(AF)对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响,并对其机制进行初步研究.方法 分别用5 μmol/L WIN、0.25 μmol/L AF、5μmol/L WIN联合0.25μmol/L AF处理HepG2细胞24h和48 h后,MTS法检测细胞活力;采用AnnexinV-FITC和PI双染色法并通过流式细胞仪分析细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bip、ATF4、PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)表达的变化.分别用5μmol/L WIN联合0.25 μmol/L AF、Z-VAD-FMK以及Z-VAD-FMK预处理1h后再用5 μmol/L WIN联合0.25 μmol/L AF处理HepG2细胞24 h,Western blot检测蛋白PARP、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的变化.结果 与两药单独使用相比,WIN联合AF明显抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,可以引起Bcl-2蛋白表达水平下调,内质网应激反应相关蛋白Bip、ATF4蛋白表达水平上调,以及活化Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,引起PARP蛋白的切割.加入Caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK处理细胞后,能部分逆转联合用药的细胞凋亡比例.结论 大麻素受体激动剂WIN联合AF能有效诱导肝癌细胞凋亡,其机制可能与Bcl-2表达下调、内质网应激反应和Caspase系统活化相关.