大鼠下丘脑-垂体反馈调节对内皮细胞MDA及NO的影响

~~大鼠下丘脑-垂体反馈调节对内皮细胞MDA及NO的影响@徐能全$赣南医学院解剖教研室!江西赣州341000 @符信清$赣南医学院解剖教研室!江西赣州341000 @罗滨$赣南医学院解剖教研室!江西赣州341000 @周小龙$赣南医学院解剖教研室!江西赣州341000 @张兰凤$赣南医学院解剖教研室!江西赣州341000~~~~[1]吴开云,高摄渊．毁损弓状核对总胆固醇、高密度脂蛋白质、氧化型低密度脂蛋白质的影响[J]．中国学术期 刊文摘,1998;4(10)：1256~1257． [2]．吴开云,李耀斌,熊俊平,等．毁损弓状核对一氧化氮和 过氧化脂质的影响[J]．中…     

下丘脑-垂体轴反馈路径对内皮细胞NO和ICAM-1表达的影响

目的：探讨下丘脑-垂体轴反馈调节对动脉粥样硬化形成的影响。方法：将OX-LDL损伤内皮细胞的信息分别反馈于下丘脑（H）、垂体（P）、下丘脑-垂体（HP）,制成下丘脑-垂体轴条件培养液再作用于受损内皮细胞,检测内皮细胞一氧化氮（NO）产量和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达。结果：H组和P组条件培养液对受损内皮细胞NO产量、ICAM-1表达的作用不明显（P〉0.05）,HP组能使其NO产量显著增加（P〈0.01）,同时减少ICAM-1的表达（P〈0.05）。结论：完整的下丘脑-垂体轴对内皮细胞NO代谢、ICAM-1的表达有反馈调控作用,可抑制AS形成。     

联胺诱导下丘脑-垂体对MDA代谢、ICAM-1表达及动脉粥样硬化形成的影响

目的 探讨离体培养下丘脑-垂体受联胺诱导前后对内皮细胞丙二醛(Malondialdehyde，MDA)代谢、细胞间粘附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule-1，ICAM-1)表达的作用以及对动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)形成的影响。方法 将培养内皮细胞随机分为两组：正常组及受损组。每组又再分为3小组：HP组、dHP组、Control组(对照组)。分别培养于预先收集的下丘脑-垂体(HP组)、联胺诱导下丘脑-垂体(dHP组)和对照组(Control组)条件培养液。检测各组上清MDA含量；免疫细胞化学方法观察内皮细胞ICAM-1的表达。结果 联胺作用后内皮细胞MDA含量明显升高，ICAM-1相对高表达。各组下丘脑-垂体对内皮细胞都有下调MDA含量及ICAM-1表达的作用。联胺诱导后下丘脑-垂体对正常内皮细胞的下调作用更大；对受损内皮细胞这种下调作用却明显减弱。结论 联胺诱导后离体下丘脑-垂体对正常内皮细胞起抗损伤作用。可抑制AS形成；对受损内皮细胞的抗损伤作用减弱，可促进AS形成。     

ox-LDL作用下丘脑、垂体条件培养液对内皮细胞MDA代谢和ICAM-1表达的影响

目的:观察ox-LDL作用下丘脑垂体后条件培养液对内皮细胞MDA代谢和ICAM-1表达的变化,探讨下丘脑血管中枢对AS形成的影响.方法:按下丘脑(H组)、下丘脑+垂体(HP组)、ox-LDL作用下丘脑(ox-H组)、ox-LDL作用下丘脑十垂体(ox-HP组)和对照组5组分别收集条件培养液,培养正常及受损内皮细胞.收集上清液检测MDA含量,细胞用免疫细胞化学法检测ICAM-1表达.结果:MDA和ICAM-1的变化:4个实验组的条件培养基对正常内皮细胞MDA的代谢和ICAM-1的表达都有下调作用(P＜0.05);而对受损内皮细胞MDA的代谢和ICAM-1的表达有所不同,ox-H组和ox-HP组与H组和HP组相比,两者的下调作用明显减弱(P＜0.01);与同组的正常内皮细胞相比,有明显加重脂质过氧化作用(P＜0.01).结论:ox-LDL作用下丘脑垂体后条件培养液对正常内皮细胞起抗损伤作用,对受损内皮细胞的抗损伤作用减弱.     

血糖对下丘脑-垂体-性腺轴的影响

［摘要］根据目前国内外流行病学调查研究结果显示有相当一部分糖尿病患者合并性腺疾病并且糖尿病患者的性腺功能与血糖水平相关．综述血糖水平对下丘脑-垂体-性腺轴的影响,探索血糖水平对下丘脑-垂体-性腺轴的影响,对糖尿病合并性腺疾病的认识提供新的见解,提高糖尿病合并性腺疾病患者的生活质量．     

下丘脑-垂体-性腺轴与抑郁症相关性的研究进展

抑郁症是心境障碍的主要类型,其具体的发病机制目前仍在探索中。下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的改变与抑郁症具有相关性。抑郁症患者存在HPGA功能紊乱,具体表现为HPGA功能下调,HPGA与单胺类神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴、褪黑素及脑组织胶源性神经营养因子等相互作用介导抑郁症的发生、发展。该文对抑郁症HPGA的改变以及HPGA与抑郁症的相关机制予以综述。     

女性衰老与下丘脑-垂体-性腺轴

下丘脑-垂体-性腺轴的变化在衰老过程尤为突出.中医认为,肾主生殖,女子七七任脉虚,太冲脉衰少,天癸竭.地道不通,故形坏而无子也.在衰老过程中下丘脑,垂体促性腺激素分泌的脉冲频率减慢,幅度降低,也降低了性腺对促性腺激素的敏感性.同时下丘脑-垂体-性腺轴随着年龄的增长而发生的功能衰退还可使其他的内分泌腺的功能有所减退.     

右归丸对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的动态影响

目的 动态研究右归丸对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响.方法 90只SD大鼠随机分成3组:正常组、模型组和右归丸组.采用氢化可的松构建肾阳虚模型,造模第8天开始,药物组用右归丸汤剂灌胃,正常组和模型组用生理盐水灌胃.分别在第15、23、30天处死动物,检测血清中促甲状腺素(TSH)、三碘甲腺原氨酸(T3)和四碘甲腺原氨酸(T4)的含量,检测下丘脑匀浆中促甲状腺激素释放激素(TRH)的含量,并对垂体、甲状腺质量进行称重和组织切片HE染色观察.结果 与正常组比较,肾阳虚模型组大鼠各期TRH、TSH、T3、T4的含量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,右归丸组各期下丘脑-垂体-甲状腺轴激素水平均有升高,其中垂体-甲状腺轴激素水平升高明显(P＜0.01),右归丸对垂体-甲状腺轴TSH、T3、T4的动态调整程度不一.结论 在肾阳虚证动态发展过程中,下丘脑-垂体-甲状腺轴激素水平变化明显且TSH、T3、T4是敏感指标.     

睾酮对下丘脑—垂体的反馈调节作用

我们在研究男子内源性雌激素对下丘脑-垂体的反馈调节作用时,发现内源性雌激素的作用完全阻断后,黄体生成素(LH)脉冲频率和幅高的增加并未达到去势男子的程度,提示睾酮在靶组织可能不是全部都转化为雌二醇(E_2),其本身对下丘脑-垂体轴还具有不依赖于芳香化酶的独立作用。在本研究中,我们通过4例克氏(Klimefelter)综合征患者口服非芳香化的氟羟甲基睾酮(FMT)前后LH脉冲分泌的变化,进一步论证睾酮的这种独立作用。     

垂体腺瘤摘除术对下丘脑-垂体-甲状腺轴功能的影响

本文通过10例泌乳素(PRL)瘤和7例生长激素(GH)瘤,手术摘除前后下丘脑-垂体-甲块腺轴功能的观察,发现不论PRL瘤和GH瘤手术后血清三碘甲状腺原氨酸(T_3)较术前均呈非常显著的降低,前者术前后血清总T_3为93.37±17.45ng/dl和71.57±18.84ng/dl,P<0.01;后者术前后T_3为97.85±27.30ng/dl和71.46±23.99ng/dl,P<0.05。而基值促甲状腺激素(TSH)、总甲状腺素(T_4及游离甲状腺素(FT_4)手术前后两组均无显著变化。促甲状腺素释放激素(TRH)兴奋试验、10例PRL瘤和7例GH瘤中分别有7例和5例呈低弱或无反应,提示手术摘除垂体腺瘤可引起垂体TSH储备及T_3水平的下降。     

缬沙坦和血管紧张素Ⅱ在不同状态下对成人冠状动脉内皮细胞NOS和NO的影响

目的：研究缬沙坦和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）分别在有氧和无氧状态下对成人冠状动脉内皮细胞一氧化氮合酶（NOS）活力和一氧化氮（NO）含量的影响。方法：将培养的第三代成人冠状动脉内皮细胞分为Ⅰ组（有氧组）和Ⅱ组（缺氧组）,每组再分为6个亚组,即对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、AngⅡ＋不同浓度缬沙坦组。在每组中分别加入不同浓度缬沙坦和AngⅡ进行36h细胞培养,其中Ⅱ组（缺氧组）最后4h在5％CO2/95％N2的缺氧环境下进行培养,然后分别检测NO含量及NOS活力。结果：缺氧和AngⅡ均能显著降低NOS活力及NO含量：单独应用缬沙坦对NOS活力及NO的合成无影响,当缬沙坦和AngⅡ联合作用时可逆转AngⅡ对NOS及NO的抑制作用,且呈剂量依赖性：与缺氧对照组及单独应用AngⅡ组相比较,缺氧＋AngⅡ组能进一步降低NOS活力并抑制NO的合成。结论：缺氧和AngⅡ均能造成成人冠状动脉内皮细胞损伤,且二者具有协同作用;缬沙坦能逆转AngⅡ对内皮细胞的损伤,且呈剂量依赖性。提示缬沙坦可改善成人冠状动脉内皮细胞的功能,缬沙坦的合理运用可起到预防冠状动脉粥样硬化的作用。     

同型半胱氨酸抑制主动脉内皮细胞生长的研究

目的:探讨同型半胱氨酸(HCY)对内皮细胞(EC)生长和功能的影响,了解HCY引起动脉粥样硬化的过程及其可能机制.方法:体外培养新生牛主动脉EC,随机分为6组,即正常对照组,及HCY 0.1、0.5、1 .0 、5.0 和10.0 mmol/L组;培养24 h后,显微镜下观察细胞形态同时采用细胞毒试验,流式细胞仪检测细胞生长情况,检测培养液中的一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、前列腺素(PGI2)、血栓素(TXA2)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL).结果:HCY各组的内皮细胞与对照组相比,细胞形态不规则,立体感差,细胞内颗粒多;细胞毒试验发现HCY对EC的生长与增殖有明显抑制作用;流式细胞仪检测可见HCY抑制EC由G1期进入合成的S期;功能检测可见HCY组EC释放的血管舒张因子NO、PGI2浓度降低;血管收缩因子ET、TXA2升高;对内皮细胞有一定损害作用的ox-LDL含量显著增加.结论:HCY抑制 EC生长且损伤内皮细胞功能,从而在动脉粥样硬化早期形成过程中发挥重要作用.     

用MTT法测定内毒素对培养人肾小球内皮细胞的损伤作用

目的；研究内毒素对人肾小球内皮细胞（ＨＧＶＥＣ）活力的影响，探讨内毒素在烧伤早期损害中的作用。方法：分离人肾小球内皮细胞，把细胞分为正常培养组，内毒素浓度梯度组，内毒素时间梯度组，无血清内毒素作用ＨＧＶＥＣ１２ｈ组，另设烧伤血清时间梯度组为阳性，用ＭＴＴ法测定经内毒素和烧伤血清刺激后ＨＧＶＥＣ活力变化。结果：１μｇ／ｍｌ以上内毒素即可引起ＨＧＶＥＣ活力降低（Ｐ〈０．０１），１μｇ／ｍｌＬＰＳ时间梯     

谷胱甘肽对糖基化终末产物环境中人脐静脉内皮细胞前列环素和内皮素-1分泌的影响

目的：了解谷胱甘肽(GSH)对糖基化终末产物(AGE)环境中人脐静脉内皮细胞(HUVEC)前列环素(PGI2)和内皮素-1(ET-1)分泌的影响。方法：分别用含M199培养基、含AGE(0.8g/L)的M199培养基、含GSH(6mmol/L)的M199培养基及含AGE(0.8g/L)和GSH(6 mmol/L)的M1...     

高糖和MBL对体外培养的人肾小球内皮细胞表达IL-18的影响

目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素（MBL）对体外培养的人肾小球内皮细胞（HRGEC）表达白细胞介素-18（IL-18）的影响。方法体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组（5mmol/L D-葡萄糖）、高糖组（30mmol/L D-葡萄糖）和甘露醇组（5mmol/L D-葡萄糖＋25mmol/L甘露醇）,培养72小时后分别采用实时荧光定量RCR法（Real-time PCR）和ELISA法检测各组细胞IL-18的mRNA及细胞培养上清液中的蛋白表达。另取细胞随机分为单纯高糖组和高糖＋MBL组,均用高糖培养72h后,分别加入等量的30%MBL缺乏人血清,高糖＋MBL组另加10μg/ml MBL,继续培养4h。采用免疫荧光法检测各组细胞表面凝集素补体途径（LCP）激活终产物膜攻击复合物（MAC）的沉积,并检测各组细胞IL-18的mRNA和蛋白表达。结果与其他各组相比,高糖组细胞的IL-18mRNA以及蛋白表达均明显增加（P〈0.05）;高糖＋MBL组细胞表面有明显MAC沉积,IL-18mRNA及蛋白表达与单纯高糖组相比明显增加（P〈0.05）。结论高糖可以诱导人肾小球内皮细胞炎症因子过表达;高糖和MBL共存时可促成LCP激活,并对DN的炎症状态具有促进作用。     

淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响

目的：用过表达表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）的猪动脉内皮细胞（porcine aorta endothelial, PAE）作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase, NOS)活性的影响及其可能机制。方法：利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株, 分别用12.5 μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h,观察各组细胞eNOS的表达变化;另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时,分别加入表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）共同处理细胞,观察各组细胞eNOS的表达变化;检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变,并以西地那非作为对照。结果：Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加,并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01);在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中,当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10^-8 mol/L时,NOS活性增加到(15.37±1.49) u/mg ,比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10^-7,10^-6和10^-5 mol/L时,淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01);淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性,但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%,而西地那非没有显著影响NOS酶活性。 结论：淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性,对血管内皮细胞功能可能具有改善作用,而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。     

同型半胱氨酸促进牛主动脉内皮细胞衰老的研究

目的:体外观察同型半胱氨酸(HCY)是否促进内皮细胞(EC)衰老及可能的作用机制.方法:胶原酶消化法分离新生牛主动脉内皮细胞,随机分成4组,对照组不加HCY,其余3组分别在DMEM培养液中加入HCY,使终浓度为0.1、0.5、1.0 mmol/L.连续体外培养30 d后,观察细胞形态、衰老相关的β-半乳糖苷酶染色,流式细胞仪检测细胞周期,Southern杂交分析端粒长度,同时检测培养上清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)、丙二醛(MDA)浓度和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性.结果:各浓度HCY组与对照组相比,细胞体积增大,胞内颗粒增多;β-半乳糖苷酶染色阳性细胞增多;细胞周期的分布发生改变,表现为G0/G1期细胞增多(P＜0.05),S期显著减少(P＜0.01);端粒缩短;培养上清中NO浓度降低(P＜0.05),ET 和Ox-LDL升高(P＜0.05);氧化还原指标MDA含量和GSH-Px活性没有明显改变.结论:HCY促进体外培养的EC衰老,其作用机制可能与氧化还原无关.     

白细胞介素6、肿瘤坏死因子对体外培养的血管内皮细胞的损伤作用

目的：研究白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF)对人脐静脉内皮细胞（HVEC）的损伤作用。方法：以原代培养的HVEC为模型,将IL-6、TNF及其抗体与HVEC共同孵育,观察内皮细胞（EC）形态变化和培养液中血管紧张素转化酶（ACE）和乳酸脱氢酶（LDH）水平。结果： TNF和IL-6可引起细胞间隙增大,甚至细胞脱落;并且随着TNF和IL-6浓度加大及作用时间延长,培养液中ACE和LDH水平升高。结论： IL-6和TNF对血管EC有损伤作用。