补骨脂生品及炮制品抗氧化活性

目的:筛选补骨脂生品及5种炮制品(雷公法制补骨脂、炒盐补骨脂、酒炒补骨脂、炒补骨脂和盐蒸补骨脂)各石油醚(PE)部位、乙酸乙酯(EA)部位和正丁醇(BU)部位的体外抗氧化活性,并比较不同炮制方法对补骨脂抗氧化活性的影响.方法:以二丁基羟基甲苯(BHT)为阳性对照,利用清除二苯代苦味酰基(DPPH)和[2,2’-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基以及铁离子还原/抗氧化(ferricreducing/antioxidant power assay,FRAP)3种方法对补骨脂生品及炮制品各部位抗氧化活性进行评价.结果:雷公法补骨脂、炒盐补骨脂、酒炒补骨脂和炒补骨脂各PE部位清除DPPH自由基的能力(IC50分别为97.1,97.7,99.9和95.7 mg·L-1)均低于补骨脂生品PE部位(IC50 =77.3 mg·L-1);补骨脂生品PE部位清除ABTS自由基的能力(IC50=1.8 mg·L-1)强于阳性对照BHT(IC50=2.3 mg·L-1),酒炒补骨脂和盐蒸补骨脂BU部位清除ABTS自由基的能力(IC50为5.8 mg·L-1和5.1 mg·L-1)均高于补骨脂生品正丁醇部位(IC50=6.8 mg·L-1);5种补骨脂炮制品各部位还原Fe3+的能力均比补骨脂生品各部位低.结论:补骨脂生品及炮制品各部位显示出不同的抗氧化活性,且不同炮制方法抗氧化活性差距较大.     

三白草体外抗氧化活性

目的:研究三白草体外抗氧化活性.方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基和[2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基测定法,对三白草提取物抗氧化活性进行评价.结果:正丁醇提取物清除DPPH自由基(IC50=16.94)的能力比BHT清除能力(IC50=18.71 mg·L-1)强,弱于阳性对照PG和BHA清除DPPH自由基的能力(IC50分别为0.89,3.2mg· L-1);清除ABTS自由基的能力(IC50=12.90 mg·L-1)弱于阳性对照PG和BHA清除ABTS自由基的能力(IC50分别为0.81,1.95 mg·L-1),比阳性对照BHT( IC50为7.72mg· L-1)清除ABTS自由基的能力略弱;石油醚提取物和乙酸乙酯提取物清除DPPH和ABTS自由基的能力均比阳性对照PG,BHT,BHA清除DPPH和ABTS自由基的能力弱.结论:三白草正丁醇提取物有抗氧化活性.     

薏苡仁的化学成分及抗氧化活性研究

目的 研究薏苡仁的化学成分和抗氧化活性。方法 运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及半制备型高效液相色谱等技术进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定化合物的结构;以维生素C为阳性药,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)和2,2′-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)自由基清除法测定部分苯丙素类化合物的抗氧化活性。结果 从薏苡仁的乙酸乙酯和正丁醇部位中分离得到24个单体化合物,分别为鉴定为4-(3-hydroxy-propenyl)-phenol(1)、salidrosideⅠ(2)、对香豆酸(3)、阿魏酸(4)、1-O-阿魏酰甘油酯(5)、linusitamarin(6)、americanol A(7)、isoamericanol A(8)、9′-O-methylisoamericanol A(9)、3,3′-bisdemethylpinoresinol(10)、icariol A₂(11)、圣草酚(12)、5,7-二羟基色原酮-5-O-β-D-葡萄糖苷(13)、5,7-二羟基色原酮-7-O-芸香糖苷(14)、1,2-heptanediol(15)...     

疏花假地豆体外抗氧化活性研究

目的:对疏花假地豆体外抗氧化活性进行研究。方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、清除[2,2’-联氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,评价疏花假地豆体外抗氧化活性,并与阳性对照二丁基羟基甲苯(BHT)比较。结果:疏花假地豆体外抗氧化活性较好。其中乙酸乙酯提取部位清除DPPH自由基(IC50=35.66 mg.L-1)、ABTS自由基(IC50=8.49 mg.L-1)及还原Fe3+的能力(TEAC=756.20μmol.g-1)较好,但仍低于阳性对照BHT(IC50=3.69 mg.L-1,IC50=6.64 mg.L-1和TEAC=4 997.76μmol.g-1)。结论:疏花假地豆乙酸乙酯提取部位体外抗氧化活性相对于其他部位最好。     

扁担藤不同极性成分抗氧化活性研究

目的:研究扁担藤不同极性成分体外抗氧化活性。方法:以抗坏血酸和茶多酚为阳性对照,采用铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)、清除羟自由基(OH.)和[2,2’-连氨-(3-乙基苯并噻唑林-6-磺酸)二氨盐]自由基(ABTS+.)测定法,评价扁担藤总提取物、石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层5个不同极性成分在质量浓度为0.005～0.050 g·L-1范围内对铁离子的还原/抗氧化能力和清除OH.,ABTS+.能力。结果:扁担藤不同极性成分的Fe3+还原/抗氧化能力均弱于抗坏血酸,除水层外,均强于茶多酚;当浓度为0.050 g·L-1时,不同极性成分的铁离子还原/抗氧化能力为:抗坏血酸(FRAP值2 377.8)>总提取物(FRAP值683.8)>乙酸乙酯层(FRAP值419.8)>石油醚层(FRAP值201.8)>正丁醇层(FRAP值185.8)>茶多酚(FRAP值73.8)>水层(FRAP值63.8);乙酸乙酯层清除OH.的能力(IC500.028 g·L-1)均强于抗坏血酸(IC500.044 g·L-1)和茶多酚(IC500.032 g·L-1);各不同极性成分清除ABTS+.的能力均强于茶多酚(IC500.416 g·L-1),且乙酸乙酯层(IC500.008 g·L-1)强于抗坏血酸(IC500.011 g·L-1)。结论:扁担藤具有较好的抗氧化能力,为开发功能性抗氧化剂提供科学依据。     

酸模叶蓼抗氧化活性

目的:评价酸模叶蓼体外总抗氧化活性。方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、清除[2,2-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法。结果:将测定结果与6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸(trolox)及阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)进行比较,发现乙酸乙酯和甲醇提取物清除DPPH自由基、清除ABTS自由基及还原Fe3+的能力均比BHT强,比PG和BHA弱。结论:酸模叶蓼具有良好的体外抗氧化活性。在3种提取物中,乙酸乙酯提取物抗氧化能力最强,甲醇提取物次之,石油醚提取物几乎没有抗氧化活性。     

金铁锁体外抗氧化活性研究

目的:研究金铁锁体外抗氧化活性.方法:采用清除采用清除二苯代苦味酰基( DPPH)自由基、清除[2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,对金铁锁体外抗氧化活性进行评价,并阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)比较.结果:金铁锁3个提取物体外抗氧化活性均弱于阳性对照PG,BHA,BHA.在3个提取物中,金铁锁乙酸乙酯提取物清除ABTS自由基(IC50=40.54mg·L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC=(696.9±2.42) μmol·g-1]较强;正丁醇清除ABTS自由基(IC50=83.38 mg· L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC =(166.1±1.06) μmol· g-1]次之,石油醚提取物最弱.结论:金铁锁乙酸乙酯部位体外抗氧化活性较强.     

消癌平注射液HPLC指纹图谱及7种甾体有效成分的含量测定

目的:建立消癌平注射液HPLC指纹图谱,并准确测定消癌平注射液中tenacissoside H(TSH)等7种甾体有效成分的含量。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,流动相乙腈-水,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.8 m L·min-1,平衡时间10min,进样20μL,蒸发光散射检测器漂移管温度60℃,载气压力0.4 MPa,检测17β-tenacigenin B(17β-TB),tenacigenin B(TB),tenacigenin A(TA),tenacigenoside A(TSA),marsdenoside I(MSI)和tenacissoside F(TSF)的含量;并运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件建立消癌平注射液的对照指纹图谱,计算其相似度。结果:11批消癌平注射液的HPLC指纹图谱有13个共有峰,相似度均在0.94以上。TSH等7种甾体在标准曲线范围内均呈现良好的线性(r0.999),精密度、重复性和准确度均符合要求。结论:所建立的HPLC-ELSD方法操作简便、结果可靠,具有良好的精密度、稳定性和重复性,结合指纹图谱研究为消癌平注射液中多成分含量测定和质量控制提供了依据。     

3种检测方法比较忍冬药用和非药用部位的抗氧化活性

目的:分析和比较忍冬药用部位(金银花和忍冬藤)和非药用部位(忍冬叶)的体外抗氧化活性,为忍冬非药用部位——忍冬叶的综合利用和产品开发提供科学依据.方法:分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法和铁离子还原能力(FRAP)微量法测定45份金...     

基于UPLC-ABTS-PDA-Triple TOF/MS的辣木叶中抗氧化活性成分在线筛选

目的 采用在线活性分析方法研究辣木叶中的抗氧化活性成分。方法 针对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）自由基,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱和柱后衍生系统的方法,对辣木叶中化学成分及抗氧化活性成分进行检测。结果 从辣木叶水提物中共鉴定出化合物21个,其中有10个经对照品比对,发现主要的ABTS自由基清除活性化合物有6个,包括3个苯丙素类化合物（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸）和3个黄酮类化合物［芦丁、异槲皮苷和槲皮素3-O-(6?-丙二酰葡萄糖苷)］。线下ABTS自由基清除活性验证结果发现,芦丁和异槲皮苷的ABTS自由基清除活性优于阳性对照Trolox。结论 成功鉴定并验证了辣木叶中的抗氧化活性成分,为辣木叶的相关研究提供了物质基础。     

响应面法优化超声提取益母草中多酚工艺及其抗氧化作用研究

目的：优选出益母草中多酚提取工艺,并对其进行抗氧化活性研究。方法：在单因素实验基础上,以没食子酸标准品为对照,以乙醇浓度、料液比、超声时间为自变量,以益母草多酚得率为响应值,运用响应面法优化超声辅助提取工艺参数;并通过DPPH、ABTS自由基法研究益母草多酚体外抗氧化作用。结果：益母草中多酚最优工艺为：乙醇浓度42%,料液比1:8(g/mL),超声时间15 min,此时得率为3.78%,与理论得率3.82%,相差0.04%,工艺稳定、可行,可用于益母草中多酚提取。抗氧化实验可知,益母草多酚和维生素C对DPPH、ABTS的清除率均随二者在测试浓度（4~14 mg/mL）范围内正相关;当浓度为14 mg/mL时,维生素C和益母草多酚对DPPH的平均清除率分别是89.34%和75.96%,差异不明显;对ABTS的平均清除率分别是79.52%和61.81%,差异在高浓度时较为显著。结论：益母草多酚具有一定的抗氧化作用。该研究为益母草资源广泛开发提供参考。     

广西小叶红叶藤不同极性溶剂提取物体外抗氧化活性

目的:研究小叶红叶藤Rourea microphylla不同溶剂提取物的抗氧化活性.方法:用冷浸法制备小叶红叶藤乙酸乙酯提取物(EAE)、丙酮提取物(AE)和乙醇提取物(EE),采用紫外分光光度法测定DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除率2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率和铁离子还原能力,对小叶红叶藤3种提取物体外抗氧化活性进行考察.结果:小叶红叶藤乙醇提取物(EE)抗氧化能力最强,其ABTS+自由基及DPPH自由基半清除浓度(IC50)分别为0.66,0.60 g·L-1,还原能力强弱的顺序为EE＞ EAE＞ AE,与各提取物总黄酮含量一致.结论:小叶红叶藤提取物特别是乙醇提取物具有作为天然抗氧化剂和功能性食品进行研究和开发的潜力.     

联用技术在自由基清除物筛选中的应用

越来越多的研究表明自由基与人类的生命活动和疾病发生有着密切的联系,自由基清除物筛选技术逐渐成为了医药领域中研究的热点问题之一,尤其是基于在线联用筛选技术的研究得到了迅速发展。采用联用技术筛选自由基清除物,主要是指将具有分离功能的色谱技术同各种自由基的直接或间接检测技术相结合,形成各种集化学分离与自由基清除活性检测为一体的快速分析方法,从而克服了传统研究方法先分离化学物质再进行活性评价的费时、费力的缺点。相对于离线检测方法,在线检测技术操作简便、检测速度快、自动化程度高、方法稳定规范、易于推广。主要对化学发光体系、HPLC-DPPH体系、HPLC-ABTS体系等常用于联用技术的自由基清除体系进行原理及应用的综述,并对联用技术在自由基清除物筛选中的应用进行了展望。     

HPLC法测定复方苦参注射液中5-羟甲基糠醛的含量

目的:建立复方苦参注射液中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters XSelect CSH^TMC₁₈(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.8m L·min^-1,检测波长为284 nm,柱温20℃,进样量10μL。结果:5-HMF质量浓度在0.022～1.11μg (r=0.9998)范围内质量呈良好线性关系。5-HMF平均回收率为95.6%(RSD=6.70%)(n=9)。结论:本研究方法重复性好,准确度高,可用于复方苦参注射液中5-HMF的含量测定。     

高效液相色谱-二苯基三硝基苯肼在线检测葡萄酒中抗氧化活性成分

目的: 建立高效液相色谱-二苯基三硝基苯肼(HPLC-DPPH)在线法评价葡萄酒清除自由基的活性,研究其抗氧化活性物质基础。 方法: 葡萄酒样品经HPLC分离,在柱后与DPPH工作液在三通处混合,于PEEK管中充分反应后,流经检测器记录反应信号,以水溶性维生素E类似物(Trolox)为标准计算活性成分的抗氧化当量(TEAC),比较7种不同地区葡萄酒总抗氧化能力及活性成分差异。 结果: 通过定性分析得出葡萄酒样品中没食子酸、原儿茶酸、原花青素二聚体B₁、龙胆酸、儿茶素、咖啡酸和没食子酸乙酯对DPPH自由基具有清除活性,但原花青素二聚体B₂、香草酸、丁香酸和对香豆酸没有清除活性。不同地区葡萄酒总抗氧化能力不同,所含抗氧化活性成分也有较大差异,共有活性成分有7种,其中原花青素二聚体B₁与没食子酸活性最强,其次是儿茶素和未知物1,活性较弱的是咖啡酸、原儿茶酸和没食子酸乙酯。 结论: 葡萄酒中含有多种抗氧化活性物质;该法能够实现对天然产物抗氧化活性的分析,具有在线、无损、高通量筛选、快速分析的特点。     

刺萼龙葵不同萃取物抗氧化活性研究

目的:研究刺萼龙葵Solanum rostratum Dunal不同萃取物的体外抗氧化活性。方法:采用清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,对刺萼龙葵不同萃取物的体外抗氧化活性进行评价,并与阳性对照药维生素C(VC)进行比较。结果:3种方法测得的抗氧化活性结果趋势一致,刺萼龙葵总浸膏及各萃取物都有较强的抗氧化活性,其中乙酸乙酯萃取物抗氧化活性最强,对DPPH,ABTS自由基清除率的IC50值分别为38.428,29.175 mg·L-1,对Fe3+还原性相当于3.774 mmol·g-1的FeSO4当量,弱于VC(IC50值分别为10.551,8.570 mg·L-1,FeSO4当量为22.795 mmol·g-1);其次是正丁醇萃取物,对DPPH,ABTS自由基清除率的IC50值分别为53.142,57.895 mg·L-1,对Fe3+还原性相当于1.936 mmol·g-1的FeSO4当量。刺萼龙葵不同萃取物和VC体外抗氧化活性的强弱顺序为:VC>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总浸膏>石油醚萃取物>剩余水部位,随着各萃取物浓度的增加,抗氧化能力增强。结论:刺萼龙葵乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及总浸膏均有较强的抗氧化活性,本研究为恶性杂草刺萼龙葵的开发利用提供理论依据。     

不同天数银杏叶发酵液提取物的体外抗氧化活性比较

目的： 考察银杏叶培养基经过冠突散囊菌发酵不同时间后乙酸乙酯提取物的体外抗氧化活性。 方法： 将冠突散囊菌接种于银杏叶培养基中分别发酵4,7,11,14 d后,真空抽滤得到滤液,利用溶剂分级萃取得到提取液,以未发酵银杏叶乙 酸乙酯提取液作为对照。结合酶标仪,通过清除DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基、ABTS 自由基,以及铁还原能力,比较不同发酵天数乙酸乙酯提取物的抗氧化能力。 结果： 测定了不同天数银杏叶发酵液乙酸乙酯提取物的抗氧化活性,发现11 d发酵液提取物抗氧化活性最强,DPPH半数抑制浓度（IC₅₀）105.60 mg·L^-1,ABTS IC₅₀ 102.09 mg·L^-1更接近维生素C（VC）的IC₅₀值,同时,11 d组铁还原实验的吸光度在不同浓度梯度下均为最大值。 结论： 初步确定银杏叶培养基发酵11 d后,发酵液中的抗氧化活性成分积累量最大。     

基于HPLC探讨升降散通过IL-6/JAK2/STAT3信号通路对EAE小鼠的防治作用

建立高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)分析升降散(Shengjiang Powder, SJP)中大黄素和姜黄素类等化合物成分,探讨其对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的防治作用。采用HPLC测定升降散中大黄素和姜黄素类化合物含量;SPF级雌性C57BL/6小鼠72只,随机分为对照组、模型组、升降散低剂量组、升降散中剂量组、升降散高剂量组、阳性对照组。每组12只。除对照组外,其余组小鼠均构造EAE模型。免疫后第1天起,升降散组小鼠分别以升降散灌胃,阳性对照组给予醋酸泼尼松灌胃,对照组和模型组给予等体积超纯水灌胃。记录小鼠一般情况、症状评分及体质量。第21天,取小鼠脑组织,分别采用苏木素-伊红(HE)染色和劳克坚牢蓝(LFB)染色检查脑组织病理变化、免疫组化(IHC)测定髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测闭合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白(...     

HPLC-DAD-ELSD法测定补阳还五汤中8个活性成分含量

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定补阳还五汤中羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷8个活性成分含量的方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 以乙腈-0.1%甲酸为流动相, 梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 柱温30 ℃, 检测波长230 nm(芍药苷)、254 nm(毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素)、322 nm(阿魏酸)和403 nm(羟基红花黄色素A), 蒸发光散射检测器漂移管温度60 ℃, 载气流速1.6 L/min。结果羟基红花黄色素A、芍药苷、毛蕊异黄酮苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素和黄芪甲苷分离度良好, 线性关系符合要求(r=0.994 0～0.999 9), 平均回收率为97.8%～101.4%, RSD为1.28%～3.70%。结论该方法简便、稳定、重复性良好, 可用于补阳还五汤的质量控制。     

基于UPLC-Q/TOF-MS整合网络药理学的刺五加注射液治疗缺血性脑卒中作用机制研究

目的运用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q/TOF-MS)整合网络药理学研究刺五加注射液治疗缺血性脑卒中的物质基础及潜在作用机制。方法利用UPLC-Q/TOF-MS鉴定刺五加注射液的化学成分, 通过Swiss Target Prediction、GeneCards和OMIM数据库预测刺五加注射液治疗缺血性脑卒中的潜在作用靶点, 利用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络, 通过Omicshare平台对治疗靶点进行GO和KEGG富集分析, 运用Autodock软件进行分子对接。结果分析鉴定了刺五加注射液中53种成分, 并以此为基础得到刺五加注射液治疗缺血性脑卒中的相关靶点189个及10个核心靶点, 反向筛选发现刺五加注射液中的25个成分可能是治疗缺血性脑卒中的主要有效成分;KEGG富集结果显示, 刺五加注射液可能主要通过调节PI3K-Akt信号通路来治疗缺血性脑卒中。结论刺五加注射液治疗缺血性脑卒中的作用机制可能与抑制炎症反应、抗氧化应激、促进血管新生和保护神经细胞等作用有关。