抗抑郁药米氮平对吉西他滨治疗胰腺癌模型的辅助作用

目的探讨抗抑郁药米氮平对吉西他滨治疗的胰腺癌移植瘤裸鼠进食量、体重和肿瘤生长的影响。方法24只胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型随机分为对照组、吉西他滨组（术后第1、4、7、10天腹腔注射吉西他滨100mg/kg体重）和联用组（吉西他滨组＋米氮平10mg·kg^-1·d^-1灌胃,持续21d）,每组8只。术后21d处死裸鼠,比较3组动物体重、进食量、肿瘤体积的变化。结果吉西他滨组具有显著的抗肿瘤生长作用,但存在显著的胃纳减少和体重降低等不良反应。术后第21天,联用组和吉西他滨组胰腺癌移植瘤体积无明显差异,抑瘤率分别为69．13％和71．60％（P〉0．05）;联用组进食量（3．12±0．11）g、体重（14．68±0．42）g,稍高于吉西他滨组的（2．96±0．14）g和（14．38±0．61）g（P值均〉0．05）,但显著低于对照组的（4．65±0．13）g和（17．46±0．52）g（P值均〈0．05）。结论吉西他滨化疗具有显著的抗胰腺癌作用,米氮平虽无显著增效作用,但可在一定程度上减轻大剂量吉西他滨化疔的不良反应。     

米氮平早期干预对轻度胰腺癌恶液质模型进食和营养状况的影响

目的:探讨抗抑郁药米氮平早期干预对轻度胰腺癌恶液质模型进食量和营养状况的影响.方法:21只胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型随机分为对照组(A组)、米氮平早期干预组(B组)、米氮平后期治疗组(C组),每组7只.B、C组分别在术后第1天和第10天开始以米氮平10mg/(kg.d),灌胃,术后第10、13、16天,3组动物分别腹腔注射吉西他滨(50mg/kg).术后第28天处死裸鼠,比较3组动物体质量、进食量、肿瘤体积、皮下脂肪和臂围的变化.结果:3组胰腺癌移植瘤体积、皮下脂肪和臂围无明显差异(P>0.05).第4周B组进食量显著高于A组和C组(P<0.05);第25天B组体质量(18.05g±0.68g)显著高于A组(17.24g±0.53g,P<0.05),稍高于C组(17.65g±0.60g,P>0.05).结论:米氮平早期干预能显著改善轻度胰腺癌相关恶液质模型的进食量,并能在一定程度上延缓恶液质进程.     

抗抑郁药米氮平对吉西他滨治疗胰腺癌模型的辅助作用

目的 探讨抗抑郁药米氮平对吉西他滨治疗的胰腺癌移植瘤裸鼠进食量、体重和肿瘤生长的影响.方法 24只胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型随机分为对照组、吉西他滨组(术后第1、4、7、10天腹腔注射吉西他滨100 mg/kg体重)和联用组(吉西他滨组+米氮平10 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,持续21曲,每组8只.术后21 d处死裸鼠,比较3组动物体重、进食量、肿瘤体积的变化.结果 吉西他滨组具有显著的抗肿瘤生长作用,但存在显著的胃纳减少和体重降低等不良反应.术后第21天,联用组和吉西他滨组胰腺癌移植瘤体积无明显差异,抑瘤率分别为69.13%和71.60%(P>0.05);联用组进食量(3.12±0.11)g、体重(14.68±0.42)g,稍高于吉西他滨组的(2.96±0.14)g和(14.38±0.61)g(P值均>0.05),但显著低于对照组的(4.65±0.13)g和(17.46±0.52)g(P值均<0.05).结论 吉西他滨化疗具有显著的抗胰腺癌作用,米氮平虽无显著增效作用,但可在一定程度上减轻大剂量吉西他滨化疗的不良反应.     

静默人类真核延伸因子1A2对胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨静默人类真核延伸因子1A2(EEF1A2)对胰腺癌细胞体内生长的影响及其可能的机制.方法 建立胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,均分为空白组、阴性对照组、EEF1A2组,移植瘤内分别注射PBS、阴性对照siRNA和特异性EEF1A2 siRNA.测定各组移植瘤的体积和质量;应用免疫组织化学的方法检测各组移植瘤组织中EEF1A2和抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)的表达;应用TUNEL法检测各组移植瘤组织中细胞凋亡率.结果 在裸鼠移植瘤模型中,从给药后第17天开始,EEF1A2组移植瘤体积增长明显滞后于阴性对照组和空白组(P值均＜0.05).治疗结束后切取肿瘤称重,EEF1A2组肿瘤质量为(0.27±0.06)g,显著低于阴性对照组和空白组[(0.39±0.08)g和(0.43±0.07)g,P＜0.05].EEF1A2主要表达于胰腺癌细胞胞质,其中在阴性对照组和空白组中,阳性细胞分布比较密集,阳性率分别为(72.58±25.47)％和(76.75±23.19)％,而EEF1A2组阳性细胞分布较稀疏,阳性率为(34.78±21.36)％,差异有统计学意义(P＜0.01).EEF1A2组的PCNA蛋白表达也显著低于空白组和阴性对照组(P＜0.01),而原位末端转移酶标记技术(TUNEL)的结果显示EEF1A2组中细胞凋亡率高于空白组和阴性对照组(P＜0.01).结论 EEF1A2在体内能被有效静默,EEF1A2静默后能明显抑制胰腺癌细胞的生长,可能与其抑制细胞增殖和促进细胞凋亡有关.     

人胰腺癌原位移植模型MRI增强扫描特征及病理对照研究

目的 探讨人胰腺癌原位移植瘤模型的MRI影像学表现及其病理基础.方法 应用3.0T磁共振成像仪及临床型乳腺线圈对30只胰腺癌裸鼠原位模型行冠状位及横断位TSE-T1 WI/T2 WI平扫,经腹腔注射钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)行连续动态增强扫描,测量平扫和增强扫描各时相肿瘤信号强度,计算强化率,分析MR图像特征并与病理对照.结果 30只裸鼠荷瘤接种成功率为100%,组织学检查符合胰腺低分化腺癌.与邻近组织信号相比,90%(27/30)肿瘤T1 WI呈均匀稍低信号,10%(3/30)信号欠均匀;80%(24/30)肿瘤T2 WI呈不均匀高信号、内见斑片状更高或等信号区,20%(6/30)呈均匀等高信号.平扫肿瘤信号强度为228.35±11.71,增强扫描后1.5、3、6,9、12 min的肿瘤信号强度分别为258.20±11.17、301.75±17.09、358.65±25.13、480.05±19.01、558.35±40.49,均明显高于平扫(P值均<0.01);各时相强化率分别为0.13±0.04、0.35±0.11、0.56±0.10、1.10±0.10、1.45±0.18,各时相间差异均有统计学意义(P值均<0.01).MR强化明显区为供血丰富的肿瘤生长活跃区域,中央无强化区为坏死组织和(或)肿瘤细胞致密且毛细血管较少区域.结论 经腹腔注射对比剂后可获得清晰的移植瘤MRI图像,与病理检查结果具有很好的一致性.     

三种胰腺癌细胞株Mesothelin的表达及成瘤速度的比较

目的 比较3种人胰腺癌细胞株在体外和裸鼠体内Mesothelin的表达及裸鼠皮下种植瘤生长速度的差异.方法 培养人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3、PANC1,取对数生长期分别注射于裸鼠左腋窝皮下,每周测量裸鼠皮下种植瘤的长、短径,计算体积,SW1990、BxPC3组裸鼠观察3周,PANC1组裸鼠观察5周;用蛋白质印迹法分别检测3种细胞及裸鼠皮下种植瘤组织中的Mesothelin表达,用免疫组化染色检测3种裸鼠皮下种植瘤组织中Mesothelin表达.结果 人胰腺癌细胞株体外Mesothelin表达的强弱顺序是BxPC3＞ PANC1＞ SW1990,体内种植瘤组织表达的强弱顺序是SW1990＞ BxPC3＞ PANC1.3种人胰腺癌细胞种植于裸鼠皮下的成瘤率均为100％,各组肿瘤的生长速度顺序为SW1990＞ BxPC3＞ PANC1.结论 不同人胰腺癌细胞株Mesothelin的表达量不同,裸鼠皮下种植瘤的生长速度亦不同,两者无相关性.     

rmhTNF对人胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型的治疗作用

背景:重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)是原型TNF-α的改构体,前期实验显示其对体外培养的人胃癌细胞株具有抑制增殖和诱导凋亡作用。目的:初步研究rmhTNF对人胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型的治疗作用。方法:雄性BALB/c裸鼠皮下接种人胃癌细胞株BGC-823构建移植瘤模型,随机予rmhTNF、TNF-α,5-氟尿嘧啶(阳性对照)和0.9%NaCl溶液(阴性对照)进行干预,观察各组裸鼠一般情况、移植瘤生长情况及其组织病理学改变。结果:建模裸鼠成瘤率为100%。各药物干预组移植瘤生长均明显减慢,其中rmhTNF组生长抑制最为明显,生长曲线较阴性对照组明显下移,抑瘤率显著高于TNF-α组和阳性对照组(83.1%对59.8%和50.1%,P0.01),一般情况与接种前相比无明显改变,移植瘤组织中可见较多凋亡和坏死细胞。结论:BGC-823细胞在BALB/c裸鼠皮下有良好的成瘤性。rmhTNF在体内能直接诱导胃癌细胞凋亡和坏死,对人胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型具有治疗作用。     

塞来昔布联合氟伐他汀对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及细胞凋亡的影响

目的 探讨塞来昔布联合氟伐他汀对实验性人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长及细胞凋亡的影响.方法 32只实验裸鼠左腋窝皮下接种BEL-7402肝癌细胞株,随机分为对照组、塞来昔布组、氟伐他汀组及塞来昔布和氟伐他汀联合用药组.实验结束时,留取移植瘤标本,流式细胞术及原位缺口末端标记法检测肿瘤细胞凋亡率,Western blot检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)和survivin蛋白的表达情况.数据比较采用析因设计多因素方差分析及多个样本均数间多重比较的SNK-q检验.结果 联合用药组肿瘤生长明显被抑制,塞来昔布组、氟伐他汀组抑瘤率分别为34.0%和25.0%,联合用药组抑瘤率为72.2%.对照组细胞凋亡指数为3.5%±0.8%,联合用药组为19.4%±3.0%,塞来昔布组和氟伐他汀组分别为8.5%±1.4%和9.4%±1.7%,联合用药组肿瘤细胞凋亡明显高于塞来昔布及氟伐他汀单药组(P值均＜0.01).流式细胞术检测结果显示,移植瘤细胞凋亡率对照组为4.1%±1.6%,塞来昔布组为9.1%±2.1%,氟伐他汀组为10.1%±2.3%,联合用药组为23.6%±5.8%,各单药用药组均高于对照组(P值均＜0.05),其中联合用药组高于对照组及各单药组(P值均＜0.01).Western blot检测结果显示,联合用药组较对照组明显下调p-Akt(0.23±0.08比1.12±0.07)和survivin蛋白(0.50±0.07比1.47±0.19)的表达(P值均＜0.01).结论 与单用塞来昔布或氟伐他汀相比,联合用药能更有效地抑制肝癌细胞生长.     

STAT3基因沉默对人胰腺癌SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察信号转导与转录激活因子3（STAT3）基因表达沉默后对人胰腺癌SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长的影响,探讨其机制.方法 构建靶向STAT3短发卡RNA（shRNA）表达载体,稳定转染胰腺癌SW1990细胞（SW1990-RNAi组）,以转染阴性对照shRNA表达载体细胞（SW1990-Con组）及亲本SW1990细胞（SW1990组）作为对照.应用蛋白质印迹法检测各组细胞STAT3、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白的表达.建立各组细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,观察移植瘤的生长,应用免疫组化法检测移植瘤的CD34表达,计算肿瘤的微血管密度（MVD）.结果 SW1990组、SW1990-Con组、SW1990-RNAi组细胞的STAT3蛋白表达量分别为84.69±9.31、82.00±7.76、7.93±1.24,VEGF蛋白表达量分别为82.94±8.97、80.86±10.28、39.04±6.23,MMP-2蛋白表达量分别为40.88±5.09、38.26±5.71、12.54±2.15,SW1990-RNAi组均显著低于其他两组（P值均＜0.05）,而SW1990-Con组与SW1990组细胞的3种蛋白表达量差异均无统计学意义.SW1990组、SW1990-Con组、SW1990-RNAi组裸鼠移植瘤的重量分别为（2.2±0.4）、（2.2±0.3）、（0.5±0.3）g,瘤组织的MVD分别为每高倍视野（20.35±2.41）、（18.79±1.94）、（9.62±1.06）个,SW1990-RNAi组均显著低于其他两组（P值＜0.05或＜0.01）,而SW1990组与SW1990-Con组间的差异均无统计学意义.结论 STAT3基因表达被抑制后SW1990细胞的裸鼠移植瘤生长减缓,其机制可能是通过下调VEGF及MMP-2的表达、抑制肿瘤血管形成所致.     

人胰腺癌细胞株PANC1裸鼠原位模型的建立及磁共振监测

目的 建立一种稳定的人胰腺癌裸小鼠原位移植瘤模型,并探讨无创的磁共振(MRI)对其监测的应用价值.方法 人胰腺癌细胞株PANC1体外常规传代后建立裸鼠皮下种植瘤模型,将皮下种植瘤制成细胞悬液,植入20只BALB/C-nn裸鼠的胰腺包膜下构建人胰腺癌原位移植模型;通过MRI检查监测模型的成瘤率、成瘤时间、肿瘤生长速度、肿瘤形态、信号变化等特征,于第7周末取肿瘤组织行病理学检查.结果 接种后15 d,7只(35%)荷瘤鼠在MRI上显示成瘤,至接种后27 d,成瘤率为100%.肿瘤信号与邻近组织相比,90%(18/20)病灶T1WI呈均匀稍低信号,10%(2/20)呈等信号;75%(15/20)在T2WI呈均匀高信号.移植后2、3、4、5、6、7周经MRI测量的移植瘤体积分别为(12.6±2.4)mm3、(94.3±11.2)mm3、(175.9±82.5)mm3、(395.8±126.6)mm3、(1290.2±167.2)mm3、(1583.4±87.4)mm3.病理学检查确诊为胰腺低分化腺癌,并保持原发瘤的生物学特征.结论 人胰腺癌细胞株PANC1移植瘤制成的细胞悬液种植裸小鼠胰腺包膜下制备胰腺癌模型符合人胰腺癌的特征,且易于无创监测,为临床研究提供了一个有效、稳定的体内实验体系.     

Effect of antidepressants on body weight, ethology and tumor growth of human pancreatic carcinoma xenografts in nude mice

AIM： To investigate the effects of mirtazapine and fluoxetine, representatives of the noradrenergic and specific serotonergic antidepressant （NaSSA） and se- lective serotonin reuptake inhibitor （SSRI） antidepres- sant respectively, on body weight, ingestive behavior, locomotor activity and tumor growth of human pancre- atic carcinoma xenografts in nude mice. METHODS： A subcutaneous xenograft model of hu- man pancreatic cancer cell line SW1990 was estab- lished in nude mice. The tumor-bearing mice were ran- domly divided into mirtazapine group [10 mg/（kg·d）], fluoxetine group [10 mg/（kg·d）] and control group （an equivalent normal saline solution） （7 mice in each group）. Doses of all drugs were administered orally, once a day for 42 d. Tumor volume and body weight were measured biweekly. Food intake was recorded once a week. Locomotor activity was detected weekly using an open field test （OFT）. RESULTS： Compared to the fluoxetine, mirtazapine significantly increased food intake from d 14 to 42 and attenuated the rate of weight loss from d 28 to 42 （t = 4.38, P 〈 0.05）. Compared to the control group, food intake was significantly suppressed from d 21 to 42 and weight loss was promoted from d 35 to 42 in the fluoxetine group （t = 2.52, P 〈 0.05）. There was a significant difference in body weight of the mice after removal of tumors among the three groups. The body weight of mice was the heaviest （13.66 ± 1.55 g） in the mirtazapine group and the lightest （11.39 ± 1.45 g） in the fluoxetine group （F（2,12） = 11.43, P 〈 0.01）. The behavioral test on d 7 showed that the horizontal and vertical activities were significantly increased in the mirtazapine group compared with the fluoxetine and control groups （F（2,18） = 10.89, P 〈 0.01）. These effects disappeared in the mirtazapine and fluoxetine groups during 2-6 wk. The grooming activity was higher in the mirtazapine group than in the fluoxetine group （10.1 ± 2.1 vs 7.1 ± 1.9 ） （t = 2.40, P ?     

褪黑素对小鼠皮下移植性胰腺癌的作用

目的 探讨褪黑素(MT)对Balb/c裸鼠胰腺癌皮下移植瘤的治疗作用.方法 建立Balb/c小鼠皮下胰腺癌移植瘤模型,分别用生理盐水(对照组)、低剂量MT(10 mg·kg-1·d-1)、高剂量MT(20 mg·kg-1·d-1)、吉西他滨(GEM,50 mg·kg-1·d-1)及GEM+高剂量MT(联合)干预,定期测量肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,并用MTT法检测小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)活性.结果 对照组移植瘤体积为(1.476±0.075)cm3,低剂量MT组、高剂量MT组、GEM组和联合组的移植瘤体积分别为(0.998±0.112)cm3、(0.756±0.128)cm3、(0.746±0.115)cm3和(0.305±0.111)cm3,较对照组显著缩小(P值均<0.01),并且高剂量MT组移植瘤体积较低剂量MT组小,联合组移植瘤体积最小.对照组NK细胞的杀伤活性为(18.07±1.23)%,低剂量MT组、高剂量MT组和联合组NK细胞的杀伤活性分别为(44.27±3.19)%、(45.16±3.20)%和(30.29±2.91)%,较对照组显著增强(P值均<0.01);GEM组NK细胞的杀伤活性为(14.24±2.70)%,较对照组显著减弱(P<0.05),而联合组NK细胞的杀伤活性显著高于GEM组(P<0.01).结论 MT能增强荷瘤裸鼠的免疫功能,抑制移植性胰腺癌的生长,与吉西他滨联合应用,则肿瘤抑制作用更强.     

多时间节点荷人胰腺癌SW1990细胞裸鼠模型的建立及其MRI表现

目的 研究裸鼠荷载多时间节点人胰腺癌细胞的能力,分析其MRI表现及皮下移植瘤MRI检出率.方法 将人胰腺癌SW1990细胞悬液在第1天、第8天、第15天分别注射于6只裸鼠左腋窝、右腋窝、右腹股沟皮下,制成分别荷3、2、1枚瘤裸鼠各2只.3周后行MRI平扫加增强扫描.然后剥取皮下肿块行病理学检查.结果 实验期间受试裸鼠全部存活,12枚肿瘤均可见,肿瘤体积与生长时间呈正相关.MRI平扫检出9枚肿瘤,增强扫描又增加检出1枚肿瘤,2枚不能检出.未检出的肿块位于右腹股沟皮下,生长时间最短,长径＜5mm.裸鼠皮下种植瘤具有类似人胰腺癌的MRI信号,有出血、坏死灶,但所有肿瘤边缘清晰,具“假包膜”征.光镜下12枚肿块均可见类似人胰腺癌的细胞.结论 裸鼠可以分期皮下种植3枚人胰腺癌细胞肿瘤,并且至少存活3周,常规3.0T MRI尚不能完全检出生长时间1周、长径＜5mm的早期肿瘤.