曲古菌素A对人胃癌细胞增殖和细胞周期的作用

目的 观察曲古菌素A(TSA)对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖及细胞周期的影响,探讨其可能的机制.方法 TSA干预人胃癌SGC-7901细胞24 h后.采用四甲基偶氮唑盐法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞技术检测细胞周期,实时PCR检测细胞周期素D1和p21 mRNA的表达情况.结果 经TSA干预24 h后,人胃癌SGC-7901细胞增殖受抑制,TSA 0.1、0.5和2.0μmol/L组抑制率分别为3.52%±6.11%、13.29%±4.13%和14.24%±2.80%;同时TSA 0.5μmol/L组(71.26%±0.51%)和TSA 2.0μmol/L组(71.03%±0.12%)的G0/Gl期细胞比例明显高于对照组(51.12%±1.17%);TSA 0.5μmol/L组(13.55%±0.44%)和TSA 2.0 μmol/L组(10.63%±0.63%)的S期细胞比例明显低于对照组(34.60%±0.60%).出现G0/G1细胞周期阻滞.TSA干预后细胞周期相关基因细胞周期素D1 mRNA表达下调和p21 mRNA表达上调.结论 TSA通过调控细胞周期相关基因细胞周期素D1和p21的表达,抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,引起G0/G1期细胞周期阻滞,最终影响肿瘤细胞的生长.     

曲古菌素A对食管癌EC1细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制

目的:探讨不同浓度曲古菌素A对食管癌细胞系EC1 细胞增殖、细胞周期的影响及其对细胞周期调控基因p21 WAF1/CIP1 表达的影响. 方法:用0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 处理EC1 细胞,MTT 检测TSA 作用24 、48 h 对EC1 细胞的抑制作用,流式细胞仪检测0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 作用24 h 后EC1 细胞周期的改变,Western blot 法检测p21 WAF1/CIP1 变化. 结果:TSA 在0.5 μmol/L 以上时对EC1 细胞有抑制作用;0.3 μmol/L TSA 处理细胞后细胞周期与对照组相比,无明显变化;0.5 μmol/L TSA 处理EC1 细胞后,G0/G1期细胞较对照组明显增加,S 期细胞较对照组明显减少(74.56% ±1.34% vs 62.12%±0.52%;14.52%±1.81% vs 27.50%±0.66%,均P <0.05);0.5,1.0 μmol/L TSA 处理细胞后p21 WAF1/CIP1 表达明显增加(均P<0.05). 结论:一定浓度的TSA 对人食管癌细胞EC 具有的增殖抑制作用,引起EC1 细胞发生G0/G1 期阻滞,其部分机制与p21 WAF1/CIP1 上调有关.     

赛格列酮能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的人内皮细胞表面粘附分子上调

目的研究赛格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞表达细胞间粘附分子1和血管细胞粘附分子1上调的影响。方法以不同浓度的赛格列酮(0.1μmol/L、1μmol/L1、0μmol/L和100μmol/L)预处理人脐静脉内皮细胞24 h,再与10-7mmol/L血管紧张素Ⅱ共孵育12 h。通过半定量逆转录聚合酶链反应和Western Blot分别检测细胞间粘附分子1和血管细胞粘附分子1 mRNA和蛋白表达的情况。结果与血管紧张素Ⅱ组相比,0.1μmol/L和1μmol/L赛格列酮预处理24 h组对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞表达细胞间粘附分子1 mRNA上调无抑制作用(1.107±0.091比1.104±0.081和1.062±0.051,P>0.05),而10μmol/L和100μmol/L组则有明显的抑制作用(0.814±0.016和0.766±0.026,P<0.01和P<0.001);细胞间粘附分子1蛋白表达分别下调52.9%和55.5%(P<0.01和P<0.001)。而不同浓度的赛格列酮(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L)使血管细胞粘附分子mRNA表达分别下调14.2%、19.5%、45.1%和60.7%(0.1μmol/L时P<0.01,余P<0.001);蛋白表达分别下调17.8%、33.8%、54.5%和58.9%(0.1μmol/L时P<0.01,余P<0.001)。结论赛格列酮抑制血管紧张素Ⅱ上调人脐静脉内皮细胞表达血管细胞粘附分子1,并呈浓度依赖效应;但对细胞间粘附分子1无论是mRNA还是蛋白水平,在低浓度(0.1μmol/L和1μmol/L)时无抑制作用,在较高浓度(10μmol/L和100μmol/L)可有较明显的抑制作用。     

γ-氨基丁酸对胰腺癌细胞增殖及转移作用的实验研究

目的 观察γ-氨基丁酸(GABA)对胰腺癌SW1990细胞增殖、细胞周期及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达的影响.方法 应用不同浓度(0～320 μmol/L)GABA干预SW1990细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期.RT-PCR检测细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果 GABA促进胰腺癌SW1990细胞的生长,使G0/G1细胞减少,S期和G2/M细胞增多.320μmol/L的GABA干预细胞后的A570值为1.11±0.03,较无GABA干预组的0.56±0.01显著增加(P<0.01);G0/G1细胞为(46.18±1.12)%,较无GABA干预组的(87.29±1.34)%显著减少(P<0.01);MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA及蛋白表达分别为8.6、6.8、10.5、8.4,较0～40μmol/L组显著增加(P<0.05).结论 GABA能促进SW1990细胞增殖和MMPs的表达.     

HDAC1基因沉默对人胰腺癌细胞PaTu8988细胞周期的影响

目的 探讨组蛋白脱乙酰基酶1( HDAC1)基因沉默对人胰腺癌PaTu8988细胞周期影响及可能机制.方法 常规培养胰腺癌PaTu8988细胞,分为对照组、阴性siRNA转染(c-siRNA)组及15、30 nmol/L HDAC1 siRNA转染组.采用脂质体2000转染细胞48 h后,应用蛋白质印迹法检测细胞HDAC1基因沉默效率及p21基因表达;流式细胞法检测细胞周期的变化.结果 与对照组比较,30 nmol/L HDAC1 siRNA组PaTu8988细胞的HDAC1蛋白表达明显下降,P21蛋白表达明显增加;G2/M 期细胞比例显著减少[(21.48±3.67)％比(28.28±2.94)％,P＜0.05],S期细胞比例显著增加[(50.20±6.85)％比(32.49±2.78)％,P＜0.05].结论 HDACl siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞HDACl的表达,引起细胞S期阻滞,其机制可能与上调p21蛋白表达有关.     

康莱特对Patu-8988细胞周期及其调节基因表达的影响

目的研究康莱特注射液对人胰腺癌细胞周期及其调节基因表达的影响,探讨康莱特的药理机制.方法通过流式细胞仪DNA含量分析法检测康莱特对人胰腺癌细胞系Patu-8988细胞周期的影响,应用基因芯片技术分析加药前后细胞周期调节基因的表达差异,并以Western blot对部分基因蛋白产物的表达进行验证.结果 20 μl/ml康莱特作用Patu-8988细胞24 h后,G2/M期细胞比率从(17.79 ± 0.16)%上升至(23.96 ± 2.33)%,而S期细胞比率则由(36.61 ± 2.97)%降至(24.76 ± 4.92)%.基因芯片结果显示,在96条有关细胞周期的目的基因中共有27条基因表达发生大于3倍的显著变化,其中表达上调的基因17条,下调的10条.Western blot表明cyclin A、cyclin B1、cyclin E、p21等蛋白表达改变与基因芯片结果一致.结论康莱特的药理作用之一是使细胞周期相关基因的表达发生改变,从而影响细胞增殖.     

5-氮-2-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对人胃癌细胞系MGC-803生物学行为的影响

目的: 探讨5-氮-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和曲古抑菌素A(TSA)对人胃癌细胞系MGC-803生物学行为的影响.方法: 人胃癌细胞系MGC-803按常规培养于含100 g/L小牛血清的RPMI 1640培养液中.实验分为5组: (1)空白对照组: 不含细胞的培养液; (2)阴性对照组: 细胞只换液, 不加药物;(3) 5-Aza-CdR组: 细胞接种24 h后, 加入10.0μmol/L的5-Aza-CdR; (4)TSA组: 细胞接种24 h后, 加入300 μg/L TSA; (5) 5-Aza-CdR+TSA组:细胞接种24 h后, 加入10.0 μmol/L 5-Aza-CdR,24 h后再加入300 μg/L TSA. 应用RT-PCR检测各组细胞培养72 h后细胞Runx3 mRNA的表达, MTT比色法测定各组细胞分别培养24、48、72 h后细胞增殖.结果: 单独应用5-Az a-CdR和TSA作用于MGC-803细胞72 h后, Runx3 mRNA相对表达量增加, 联合用药组分别与5-Aza-CdR组及TSA组相比, 差异有统计学意义(0.883±0.025vs 0.760±0.286, 0.735±0.018, 均P<0.05). 细胞生长抑制率在同一组别随着药物作用时间的延长而增加, 并且呈正相关( r = 0.738,P<0.05); 而在同一时间不同组别比较联合用药组细胞生长抑制率较单用药物组明显增加(24 h: 57.3% vs 40.4%, 39.0%; 48 h: 70.0% vs56.0%, 51.3%; 72 h: 86.3% vs 68.0%, 65.8%,均P<0.05). 细胞Runx3 mRNA的相对表达量及生长抑制率在药物组与对照组间比较, 差异均有统计学意义( P<0.05).结论: 与单用5-Aza-CdR或TSA相比, 联合应用2种药物更显著的增强Runx3 mRNA的表达,抑制细胞的增殖.     

埃罗替尼对胰腺癌细胞BxPC3生长的影响及其机制

目的 观察表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂埃罗替尼对体外培养的胰腺痛细胞BxPC3生长的影响,并探讨其作用机制.方法 应用MTT法检测埃罗替尼作用后BxPC3细胞的增殖情况;用流式细胞分析、透射电镜和原位末端标记(TUNEL)法观察细胞凋亡和细胞周期的变化;RT-PCR法检测细胞bcl-2、bax、bel-xl、bak mRNA表达.结果 埃罗替尼呈剂量和时间依赖性抑制BxPC3细胞生长.72h后,1、100μmol/L的埃罗替尼处理组细胞存活率分别为(90.25±2.62)%和(40.75±2.98)%,两者比较具有统计学意义(P<0.01).50 μmol,/L埃罗替尼处理BxPC3后24、96 h的细胞存活率分别为(74.0±4.08)%和(49.50 ±1.29)%,两者比较也具有统计学意义(P<0.01).50μmaol/L埃罗替尼处理组的细胞凋亡率为(11.0±1.1)%,显著高于对照组的(6.2±1.1)%(P<0.01);G_0/G_1细胞占(73.4 ±1.3)%,也显著高于对照组的(63.3 ±1.0)%;透射电镜可见细胞呈现明显凋亡形态,并见凋亡小体形成.埃罗替尼处理组细胞bcl-2、bcl-xl mRNA表达下调,bax mRNA表达轻微上调,bak mRNA的表达不受影响.结论 EGFR抑制剂埃罗替尼体外可抑制胰腺癌细胞系BxPC3的生长,其机制可能与阻滞细胞周期,上调促凋亡蛋白和下调凋亡抑制蛋白有关.     

血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,四氮唑盐比色法检测细胞增殖,流式细胞分析技术测定细胞周期,逆转录—聚合酶链式反应测定心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果①1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ作用24h,心脏成纤维细胞的四氮唑蓝比色分析法吸光度值(0.24±0.01)较无血清对照组(0.14±0.01)明显增加(P<0.01);0.001~1.0μmol/L血管紧张素(1-7)和1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ共同干预后吸光度值逐渐降低,分别为0.20±0.01、0.19±0.01、0.13±0.01、0.16±0.03,均显著低于血管紧张素Ⅱ组(P<0.01)。②血管紧张素Ⅱ组心脏成纤维细胞的S期百分率(14.0%±0.9%)和增殖指数(23.4±1.8)较对照组(5.4%±0.7%和10.8±2.4)明显增高(P<0.01);0.1μmol/L血管紧张素(1-7)干预后S期百分率(8.5%±0.7%)和增殖指数(16.2±2.0)较血管紧张素Ⅱ组降低(P<0.01)。③血管紧张素Ⅱ刺激后心脏成纤维细胞的Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平分别为较对照组明显增高(P<0.01);给予0.001~1.0μmol/L血管紧张素(1-7)和1.0μmol/L血管紧张素Ⅱ共同干预后,胶原表达水平浓度依赖性的下降,均显著低于血管紧张素Ⅱ组(P<0.05)。结论血管紧张素(1-7)具有抑制血管紧张素Ⅱ浓度增加引起的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。     

丙戊酸钠对人胰腺癌细胞PaTu8988增殖的影响及量效关系研究

目的 探讨丙戊酸钠(VPA)对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响.方法 应用0.2、1.0、5.0 mmoL/L的VPA干预人胰腺癌PaTu8988细胞24、48 h,采用WST-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期.以培养基中单加二甲基亚砜为空白对照组,单加PBS为PBS组.结果 VPA干预24 h后,VPA 5.0 mmol/L组的细胞生长抑制率为18.9%,显著高于对照组、PBS组及VPA 0.2、1.0 mmol/L组(0、4.4%、6.8%、6.1%,P值均<0.05);干预48 h后,VPA 1.0、5.0 mmol/L组的细胞生长抑制率分别为12.9%、25.9%,显著高于对照组、PBS组、VPA 0.2 mmol/L组(0、6.2%、4.6%,P值均<0.01).VPA干预24 h后,VPA 1.0、5.0 mmol/L组G2期细胞比例分别为(26.57 ±1.88)%、(34.11±4.74)%,显著高于PBS组、对照组、VPA0.2 mmol/L组[(10.72±2.02)%、(13.53±2.28)%、(13.81±2.40)%,P值均<0.01];VPA干预48 h后的细胞周期变化与24 h一致.结论 VPA呈时间及剂量依赖性抑制人胰腺癌PaTu8988细胞的增殖,诱导细胞阻滞在G2期.     

组蛋白去乙酰化酶1对人胰腺癌细胞增殖凋亡的影响

目的 观察沉默组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖及凋亡的影响.方法 培养胰腺癌PaTu8988细胞株,设空白对照组(未予任何处理)、阴性对照组[予30 nmol/L阴性小干扰RNA(siRNA)]、HDACI低剂量组(予15 nmol/L HDAC1 siRNA)和HDAC1高剂量组(予30 nmol/L HDAC1 siRNA),siRNA转染48 h后,分别采用相对实时定量PCR法和Western印迹法检测HDAC1基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率,细胞计数试剂盒法检测siRNA干扰前、后细胞增殖变化,流式细胞技术检测干扰前、后细胞凋亡变化.结果 转染HDAC1siRNA 48 h后,低剂量组和高剂量组人胰腺癌PaTu8988细胞中HDAC1 mRNA表达率分别为46.1%±6.1%和32.3%±1.4%,均显著低于空白对照组(100.0%±3.4%)和阴性对照组(87.4%±28.3%),差异有统计学意义(P值均<0.05).空白对照组和阴性对照组HDAC1蛋白表达水平高于其余两组.空白对照组、阴性对照组、HDAC1低剂量组和HDAC1高低剂量组的细胞存活率分别为100.0%±17.1%、87.1%±5.0%、68.7%±4.7%和61.6%±2.0%,细胞凋亡率分别为4.20%±0.95%、4.59%±1.26%、10.09%±1.36%和11.19%±6.07%,空白对照组和阴性对照组与其余两组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 HDAC1 siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞HDAC1表达,抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.     

大黄素对人胰腺癌细胞BxPC3增殖及凋亡基因表达的影响

目的 探讨大黄素对人胰腺癌细胞BxPC3的生长抑制作用及其对细胞周期、凋亡率和凋亡相关基因表达的影响.方法 用MTT法测定不同浓度(0、10、20、40、80 μmol/L)大黄素对体外培养的BxPC3细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,RT-PCR法检测BxPC3细胞bax、bak、bad、bid mRNA表达.结果 0(对照组)、10、20、40、80 μmol/L大黄素处理BxPC细胞后,细胞存活率分别为(97.42±2.45)%、(78.58±3.11)%、(62.39±2.19)%、(51.68±2.92)%、(34.30±4.04)%;G0/G1期细胞比例分别为(51.22±0.64)%、(53.88±0.72)%、(55.39±1.12)%、(58.17±1.48)%、(63.72±1.52)%;S期细胞分别为(42.87±0.67)%、(39.68±0.58)%、(34.60±1.06)%、(31.88±1.48)%、(27.26±1.67)%;细胞凋亡率分别为(19.16±1.69)%、(31.78±2.21)%、(47.03±3.39)%、(55.92±5.39)%、(62.78±3.19)%;bax、bak、bad、bid mRNA表达水平呈剂量依赖性增高(F=55.649,P<0.01;F=19.403,P<0.05;F=29.009,P<0.05;F=39.546,P<0.01).结论 大黄素能抑制体外培养的BxPC3细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与上调bax、bak、bad、bid mRNA表达有关.     

维生素D3通过Hedgehog信号通路对胰腺癌PANC1细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨维生素D3抗胰腺癌的作用机制.方法 应用不同浓度的维生素D3（25、50、75、100 μmol/L）干预胰腺癌PANC1细胞,以未干预细胞作为阴性对照组.MTT比色法检测细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测细胞的早期凋亡率;RT-PCR法检测细胞PTCH、Gli-1 mRNA的表达.结果 维生素D3呈浓度依赖性抑制PANC1细胞的增殖,以48 h点的抑制作用最强,阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L维生素D3组的生长抑制率分别为0、16.1％、18.8％、31.8％、39.4％,组间差异有统计学意义（P值均＜0.05）.阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L维生素D3干预24 h时PANC1细胞的早期凋亡率分别为（5.89±0.57）％、（6.06±0.44）％、（16.21± 1.62）％、（16.94±0.91）％、（20.96±0.98）％,早期凋亡率随浓度的增加而增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.维生素D3干预PANC1细胞24 h后,阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L组细胞的PTCH mRNA表达量分别为0.117±0.009、0.104 ±0.011、0.069±0.011、0.052±0.009、0.056±0.007;Gli-1 mRNA表达量分别为0.323±0.007、0.312±0.015、0.299±0.015、0.233 ±0.007、0.175 ±0.014,均随浓度的增加而下调,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.75 μmol/L维生素D3干预0、12、24、36、48 h后,PTCH mRNA表达量分别为0.142±0.008、0.127 ±0.009、0.111±0.010、0.115 ±0.003、0.102±0.007;Gli-1 mRNA分别为0.341±0.011、0.317 ±0.017、0.320±0.018、0.226 ±0.011、0.191±0.010,均随时间的延长而下调,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 维生素D3可以有效抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与阻滞Hedgehog信号通路有关.     

Neutral lipid isolated from endosperm of Job's tears inhibits the growth of pancreatic cancer cells via apoptosis, G2/M arrest, and regulation of gene expression

BACKGROUND: The neutral lipid isolated from the endosperm of Job's tears (NLEJ) has been known to possess an anticancer activity with relatively low toxicity. The present study was designed to examine its antiproliferative effects in the PaTu-8988 and SW1990 human pancreatic cancer cells and to investigate its potential mechanism(s). METHODS: Pancreatic cancer cells were treated with NLEJ to evaluate cell viability, cell cycle progression, nuclear morphology, DNA fragmentation and annexin V binding analysis. Regulation of gene expression was determined by using cDNA microarrays and western immunoblotting. RESULTS: The NLEJ induced a dose- and time-dependent inhibition of proliferation in both PaTu-8988 and SW1990 cell lines. Further studies were carried out with only the PaTu-8988 cells. Flow cytometry analysis showed that NLEJ blocked cell cycle progression at the G(2)/M phase. There was also an increase in annexin V binding and DNA fragmentation, indicative of apoptosis. The cDNA microarray analysis with cell cycle- and apoptosis-targeted arrays showed that the expression signals of 24 genes were found to be significantly altered at 24 h of NLEJ treatment. These genes are involved in cell cycle control (e.g. p21, p27, CDK2, and cyclins), apoptosis regulation (e.g. bcl-2 and bax), and signal transduction (e.g. ATM, RAD50, and p53). Some of these results were confirmed by western blot analysis. CONCLUSIONS: These data show that NLEJ inhibits pancreatic cancer cell growth through induction of apoptosis and cell cycle arrest as well as regulation of gene expression in vitro. Therefore, NLEJ might be a chemotherapeutic agent against pancreatic cancer.     

罗格列酮对尿酸代谢的影响及机制探讨

目的 观察高水平胰岛素是否导致血尿酸浓度的升高,胰岛素增敏剂罗格列酮能否改善高尿酸血症,并进行机制探讨.方法 将自发2型糖尿病伴代谢综合征的OLETF大鼠及其同系的正常对照LETO大鼠各60只随机分为对照组、实验组和干预组,分别给予正常饮食、高嘌呤饮食加腺嘌呤灌胃及罗格列酮干预3周,测量各组大鼠体重、血尿酸、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇等指标,检测肾皮质尿酸转运子(UAT)和尿酸盐转运子1(URAT1)mRNA表达.以不同浓度胰岛素孵育HK-2细胞24 h,检测其UAT mRNA表达.结果 (1)在正常饮食状态下,OLETF大鼠血胰岛素水平明显高于LETO大鼠(P<0.05),尿酸水平差异无统计学意义.(2)高嘌呤饮食喂养和腺嘌呤灌胃3周后,OLETF大鼠血胰岛素水平明显高于LETO大鼠[(61.83±12.13对36.73±12.73)μIU/ml,P<0.05],高尿酸血症的发病率(76.92%对36.13%,P<0.01)和血尿酸[(327.75±45.73对264.40±36.32)μmol/L,P<0.01]水平明显高于LETO大鼠.(3)与实验组OLETF大鼠相比,罗格列酮干预3周后胰岛素水平明显下降[(41.3±10.2对61.8±12.1)μIU/ml,P<0.05],血尿酸水平明显降低[(198.0±45.4对236.9±29.30)μmol/L,P<0.05],尿尿酸排泄量明显增加[(5 644±371对4 692±278)μmol/L,P<0.05].(4)实验组OLETF大鼠血胰岛素水平与对照组OLETF大鼠无明显差异,肾皮质URAT1和UAT mRNA表达差异亦无统计学意义,而罗格列酮干预后URAT1 mRNA表达明显降低,UAT mRNA表达明显增加.(5)随着培养液中胰岛素浓度的增加,HK-2细胞UATmRNA表达量逐渐减少.结论 胰岛素增敏剂罗格列酮可通过调节UAT和URAT1 mRNA的表达,降低高胰岛素血症诱发的高尿酸血症.     

RNA干扰DNA甲基转移酶1对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察以DNA甲基转移酶1(DNA methy transferas 1,DNMT1)基因为靶基因的RNA干扰对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计、合成针对DNMT1基因的siRNA和阴性对照siRNA(N-siRNA).实验分为空白对照组、脂质体组(仅予脂质体)、N-siRNA组(转染30 nmol N-siRNA)、siRNA组(转染30 nmol siRNA).siRNA转染48 h后,实时PCR法检测DNMT1 mRNA水平;WST-8法检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡.结果 siRNA组DNMT1 mRNA的抑制率为(86.0±4.3)%,明显高于N-siRNA组的(40.1±2.2)%和空白对照组的0(P＜0.01);细胞存活率为(47.6±5.6)%,明显低于N-siRNA组的(68.1±4.1)%和空白对照组的100%(P＜0.01);细胞凋亡率为(14.94±2.89)%,明显高于空白对照组的(7.51±1.12)%、脂质体组的(7.06±0.39)%、N-siRNA组的(8.84±1.44)%(均P＜0.01).结论 siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞DNMT1mRNA的表达,同时抑制细胞增殖、促进细胞凋亡.