中华芦荟多糖对辐射后非瘤细胞周期改变及周期相关蛋白表达的影响

目的:研究中华芦荟多糖(AP)对X射线照射后人非瘤细胞株C.Liver和293细胞周期进程及细胞周期相关蛋白表达的影响.方法:流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达.结果:辐射后293和C.Liver细胞均出现明显的G2/M期阻滞,G0/G1期细胞比例显著下降,50μg/mlAP能显著改变上述趋势.AP预处理能显著下调辐射所致C.Liver细胞P53蛋白水平,显著升高P21、Cyclin B1、pRb蛋白的表达,对P27、CDK4和Cyclin D1蛋白表达水平无显著影响.结论:AP对X射线辐射后非瘤细胞周期紊乱的改善作用与对周期相关蛋白表达的调节有关.     

五味子多糖对环磷酰胺诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

目的探讨五味子多糖对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)诱导小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用及相关机制。方法小鼠腹腔注射CY,建立胸腺细胞凋亡模型,施以不同浓度五味子多糖灌胃,利用流式细胞仪、末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL染色)及Bcl-2、Bax免疫组化分别观察不同剂量的五味子多糖对CY诱导的胸腺细胞凋亡的影响及机制。结果流式细胞仪和TUNEL染色显示CY组与对照组相比的细胞凋亡率明显增高,五味子多糖治疗组与CY组比较凋亡率明显降低(P<0.01)。CY组bcl-2基因表达明显下降,bax基因表达明显增加,Bcl-2/Bax比值下降。五味子多糖组与之相反,二者比值升高(P<0.01)。结论五味子多糖能够抑制CY诱导的胸腺细胞凋亡,降低胸腺细胞的损伤,其抑制作用可能通过促进Bcl-2表达、抑制Bax蛋白表达实现的。     

芦荟多糖对脑缺血模型大鼠细胞凋亡的影响

目的:观察芦荟多糖对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法:采用线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉(MCAO),制备局灶性脑缺血模型,观察芦荟多糖对MCAO模型大鼠脑缺血后神经功能缺损导致的行为学变化,流式细胞仪检测芦荟多糖对MCAO模型大鼠脑缺血后24h大脑皮质细胞凋亡率的影响,以此探讨芦荟多糖抗细胞凋亡及对脑缺血的神经保护作用。结果:芦荟多糖能明显降低缺血脑组织的凋亡率。结论:芦荟多糖对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机理可能与芦荟多糖抑制细胞凋亡有关。     

姬松茸多糖对大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的:观察姬松茸多糖对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱发大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响.方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,姬 松茸多糖低、高剂量组ig姬松茸多糖溶液(60,120 mg·kg-1),1次/d,连续7d.模型组和姬松茸多糖低、高剂量于第7日腹腔注射DEX(0.02 g·kg-1).3h后处死各组动物,迅速无菌取胸腺,采用显微观察、流式细胞技术观察胸腺细胞形态学改变,胸腺细胞凋亡、脱氧核糖核酸(DNA)断裂百分率及线粒体膜电位变化,胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体嵴肿胀明显减轻;姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞凋亡率[低、高剂量(5.96±1.14)％,(5.07±1.02)％],DNA断裂率[低、高剂量(3.67±0.49)％,(3.24±0.45)％]及胸腺组织MDA含量[低、高剂量(1.87±0.25),(1.72±0.23)μg·mg-1]均明显低于模型组[(7.14±1.62)％,(4.25±0.86)％,(2.16±0.38) μg·mg-1];姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体膜电位(荧光指数:低剂量38.57±6.29,高剂量41.36±7.18)及胸腺组织SOD活性量[低、高剂量(25.78±3.94),(27.36 ±4.21)U.mg-1]明显高于模型组(32.76 ±5.48)荧光指数,(21.45±3.52) i g· mg-1.结论:姬松茸多糖可阻断胸腺细胞DNA断裂和线粒体膜电位的下降,有效抑制DEX诱导的胸腺细胞凋亡,其作用机制与姬松茸多糖提高胸腺组织抗氧化功能有关.     

加味玉屏风汤对小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用

目的：研究不同浓度的加味玉屏风汤对地塞米松磷酸钠（Dex-p)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡和胸腺细胞自发凋亡的影响。方法：通过体外细胞培养，采用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜检测手段，观察加味玉屏风汤作用前后对胸腺细胞凋亡程度的影响。结果：胸腺细胞既可发生自发凋亡，又可由Dex-p诱导凋亡，细胞凋亡率与Dex-p呈浓度依赖关系，最佳诱导浓度为10^-7mol/L。加味玉屏风汤（200－400μg/ml）可不同程度地抑制由Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡（P＜0.01)；而低浓度（＜100μg/ml)的加味玉屏风汤则对Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡无明显影响（P＞0.05)；加味玉屏风汤200、400μg/ml可使胸腺细胞的自发凋亡率明显降低（P＜0.01)。结论：不同浓度加味玉屏风汤（200－400μg/ml)可不同程度抑制胸腺细胞的自发凋亡及由Dex-p(10^-7mol/L）诱导的凋亡。     

开闭复方对内毒素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

内毒素能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,表现为凋亡细胞及凋亡小体明显增多,凋亡细胞百分率及DNA断裂百分率明显升高,琼脂糖凝胶电泳出现明显的细胞凋亡特有的“梯状”条带.用中药开闭复方后上述表现明显减轻,“梯状”条带不明显.结果提示:开闭复方对内毒素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡有保护作用.     

黄芪对小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用

目的:研究不同浓度的黄芪水提物对地塞米松(DEX)诱导的小鼠胸腺细胸调亡的影响.方法:通过体内给药,18h后处死动物,取胸腺,采用普通光镜下细胞形态学检查,细胞活力的测定、琼脂糖凝胶电泳检测,研究黄芪水提物对DEX在小鼠体内诱导胸腺细胞凋亡的影响.结果:DEX(50mg/kg)在小鼠体内诱导胸腺细胞凋亡的最佳作用时间为12～18小时.黄芪水提物(25g/kg、15g/kg、5g/kg)可不同程度地抑制由DEX(50mg/kg)诱导的胸腺细胞凋亡(P《0.01);最佳作用时间为给药后18小时.结论:在体内,不同浓度的黄芪水提物可不同程度地提高胸腺细胞活力,抑制DEX诱导的胸腺细胞的凋亡.     

当归多糖影响小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

目的:观察当归多糖(AP)对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法:以地塞米松造成胸腺细胞凋亡小鼠模型,观察胸腺细胞形态学的改变,并统计细胞凋亡率及各组小鼠胸腺细胞凋亡指数的变化。结果:模型组具有凋亡细胞典型的形态学特点,低剂量组凋亡细胞数目明显降低,胸腺细胞凋亡指数随着当归多糖剂量的加大而逐渐减少。结论:当归多糖具有抑制地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的作用。     

补肾益气方对皮质酮致大鼠胸腺细胞凋亡相关基因表达的影响

目的:研究补肾益气方对皮质酮致大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2、Bax、IL-2表达的影响。方法:1×10-5mol/L皮质酮处理乳鼠胸腺细胞制作病理细胞模型,分组:正常组;模型组;补肾益气组。Annexin V-PI双染色法结合FCM检测胸腺细胞凋亡;Real-time PCR和Western blotting法检测Bcl-2、Bax、IL-2的表达。结果:皮质酮诱导胸腺细胞凋亡率显著升高(P0.01);bax表达显著升高,bcl-2/bax比值、IL-2表达降低(P0.05)。与模型组比较,补肾益气组凋亡率降低(P0.05);Bax mRNA表达降低,bcl-2/bax比值、IL-2表达升高(P0.05)。结论:补肾益气方含药鼠血清能通过改善模型细胞bcl-2/bax的异常变化,抑制胸腺细胞过度凋亡,提高胸腺依赖性免疫功能。     

肉苁蓉对败血症大鼠胸腺细胞凋亡的影响

Objective: To study the effects of the extract of Cistanche Deserticola Y. C Ma on thymocyte cell apoptosis during septemia. Methods: Cecum ligation perforation (CLP) induced septemia. Treatment group was administration fourteen days ago preoperative. To put to death in twelve hours or twenty four hours after CLP. qlae apoptosis rate of thmocyte cell and miteehondrial membrance potential was determined by the flow cytometry, the SOD activity and the quantity of MDA was detected by spectrophotography. Results: Twelve hours after CLP the th~yte cell apoptosis percentage significantly increased, the SOD activity decreased, the quantity of MDA increased. And twenty four hours after CLP was significant, The extract of desertliving cistanche effectively repressed the apoptosis of thymocyte cell, maintained the miteehondrial membrance potential, rised the SOD activity, reduced the quantity of MDA. Conclusion: The extract of Cistanche Deserticola Y. C Ma e can protection thymeeyte cell apoptosis during septemia. The mechanisms possibly are maintaining mitochondrial membrance potential and effectual cleaning oxygen- derive flee radical.     

针刺足三里、关元穴对脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 观察电针足三里、关元穴对脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡的影响.方法 将大鼠随机分成正常对照组、模型组、针刺组.采用盲肠结扎穿孔(CLP)致腹腔感染脓毒症模型,应用流式细胞仪以Annexin-PI双染色法及光镜、透射电镜观察CLP致腹腔感染后36h胸腺淋巴细胞的凋亡情况,应用放射免疫法测定脑垂体和外周血血管活性肠肽(VIP)含量的变化.结果 CLP致腹腔感染可导致胸腺细胞凋亡增多,电镜和光镜显示其典型的形态学特征,模型组、针刺组的胸腺细胞凋亡率高于正常对照组;而针刺组的胸腺细胞凋亡率低于模型组.CLP致腹腔感染后脑垂体和外周血中VIP含量下降,模型组、针刺组脑垂体VIP含量低于正常对照组;而针刺组脑垂体VIF-含量高于模型组.模型组、针刺组外周血中VIP含量低于正常对照组;而针刺组外周血中VIP含量高于模型组.结论 电针足三里、关元穴可以减轻CLP致腹腔感染脓毒症大鼠胸腺细胞凋亡,其机理可能与VIP的合成和释放增多有关,并通过这些免疫递质对神经-内分泌-免疫调节网络发挥作用.     

中华芦荟多糖的提取

中华芦荟,又名斑纹芦荟、元江芦荟、中国芦荟,来源于百合科植物芦荟,为多年生肉质草本植物,苦、寒、人肝、胃、大肠经。其凝胶内含芦荟甙、芦荟大黄素、芦荟多糖等成分。据报道芦荟多糖具有免疫增强、调节、抗病毒、抗辐射损伤等活性。我们参考有关文献采用水提醇沉法、紫外分光光度法来提取测定中华芦荟多糖的含量,为评价中华芦荟的内在质量提供了依据。     

复方中药对辐射小鼠细胞周期及免疫功能的影响

目的 :研究复方中药对辐射小鼠细胞周期及免疫功能的影响。方法 :应用流式细胞仪 (FCM)检测脾脏细胞周期和免疫参数 (NK,CD+4 ,CD+8)。结果 :该复方中药能使受照小鼠脾细胞 S,G2 + M期的比例升高 ,促进脾细胞增殖 ,并能提高N K细胞活性和 CD+4 百分率及 CD+4 / CD+8比值。结论 :复方中药对辐射损伤细胞具有一定的保护作用     

芦荟多糖对正常小鼠免疫作用影响的研究

目的：观察芦荟多糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法：用正常小鼠进行实验。结果：芦荟多糖可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，促进溶血素及溶血空斑形成，促进淋巴细胞转化。结论：芦荟多糖有好的免疫兴奋作用。     

芦荟多糖干预的PBMC对肝癌细胞生长的影响

目的:研究芦荟多糖(AP)干预的外周血单个核细胞(PBMC)对体外肝癌细胞(HepG2)生长的影响,从免疫学角度探讨AP的抗肿瘤机理。方法:Alamar Blue法检测AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2对体外培养的PBMC生长的影响;以各组干预后的PBMC为效应细胞,HepG2为靶细胞,MTT法观察各组效应细胞对靶细胞杀伤活性的影响;流式细胞术PI单染法检测各组效应细胞对靶细胞细胞周期及凋亡率的影响。结果:AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2可显著促进PBMC的增殖;各组效应细胞可显著抑制靶细胞的生长,降低S期比例,提高G1比例和凋亡率。其中AP联合Anti-CD3mAb与rhIL-2干预的PBMC对靶细胞生长的抑制率可达46.30%,靶细胞S期比例,G1期比例和凋亡率明分别为24.37%,75.63%和30.37%。结论:AP及其联合Anti-CD3mAb与rhIL-2可提高PBMC抑制肝癌细胞生长的活性。     

当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡及细胞周期变化的研究

有关资料表明，细胞凋亡与肿瘤发生、发展、恶性转移等密切相关，因此筛选特异性药物治疗肿瘤是目前肿瘤学研究热点之一。多糖在分子生物学中起着控制细胞分化，调节细胞生长，衰老和死亡的决定性作用。当归多糖（Anglica polysacchafide，APS）是中医药学补血药当归的主要有效成分之一，近年来APS对造血系统影响及抗恶性肿瘤的实验药理学研究取得较快进展。文献报道APS对多种移植性肿瘤和白血病细胞有抑制作用，但对其机理研究尚不清楚。本研究利用体外细胞培养法，结合流式细胞术研究APS对白血病细胞株K562细胞增殖，细胞周期分布及细胞凋亡的影响。     

芦荟多糖对正常小鼠免疫作用影响的研究

目的 :观察芦荟多糖对正常小鼠免疫功能的影响。方法 :用正常小鼠进行实验。结果 :芦荟多糖可显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数 ,促进溶血素及溶血空斑形成 ,促进淋巴细胞转化。结论 :芦荟多糖有好的免疫兴奋作用。     

树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞凋亡影响的初探

目的 :观察树舌多糖GF对小鼠HepA瘤细胞凋亡的影响 ,进一步研究树舌多糖GF抗肿瘤机制。方法 :将实体瘤常规制备成细胞悬液 ,用流式细胞仪进行分析。结果 :树舌多糖组与阴性对照组比较 ,Ap峰明显增高 ,细胞凋亡率、S期细胞数、G2 -M细胞数均有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :树舌多糖GF能够诱导细胞凋亡 ,并且能够使细胞阻滞于S期不进入M期。     

芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响

目的：探讨芦荟大黄素（AE）对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度（IC5）0;光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测mRNA表达。结果：MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量（32μg/mL）作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;R T-PCR法显示myc基因表达下降。结论：AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡。其机制可能与myc基因表达下调有关。     

中华芦荟多糖对大鼠心肌缺血的保护作用

目的:探讨中华芦荟多糖(AP)对心肌缺血的保护作用及其机制。方法:大鼠灌胃给药15d后皮下注射10mg/kg异丙肾上腺素造成心肌缺血损伤模型,观察心电图变化,检测血清与心肌组织肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,测量心肌组织坏死面积。结果:中华芦荟多糖能使心电图J点升高T波下降,能降低血清和心肌组织CK、LDH活性及MDA含量,增加SOD活性,并减轻心肌组织坏死面积。结论:中华芦荟多糖对异丙肾上腺素所致缺血心肌具有保护作用,其机制与提高大鼠的抗氧化能力有关。