ELISA法检测血清抗心磷脂抗体

目的分析ELISA检测血清抗心磷脂抗体(ACA)的方法学影响因素,并对实验条件进行优化。方法用间接ELISA检测559份血清ACA水平,并以欧蒙公司标准品标定临界值,用以判定结果。结果对检测方法进行了优化,本试验特异性为96.4%(503/522),敏感性为89.2%(33/37),临床诊断符合率为96.2%(538/559)。结论优化后的ELISA法检测ACA具有敏感、特异、简便快速、重复性佳的特点,可用于血清ACA水平的常规检测。     

三种Ig类别抗精子抗体的检测及临床意义

抗精子抗体(AsAb)存在于血清、精浆和宫颈粘液中,易导致免疫性不育(孕)或流产。已知AsAb 有IgG、IgA、IgM、IgE 四种Ig 类别,IgE-AsAb 只参与变态性反应,与免疫性不育(孕)、流产无关.检测AsAb 的方法虽然很多,但三种Ig 类别AsAb 的检测未见报道。我们用固相酶染色法建立了检测血清、     

抗角质层抗体的ELISA检测

用盐析法提取大鼠食管上皮组织的角质层抗原成分 ,建立抗角质层抗体 (AKA)的酶联免疫吸附方法 (ELISA) ,探讨AKA在类风湿性关节炎 (RA)、系统性红斑狼疮 (SLE)、干燥综合征 (SS)等风湿病特别是RA诊断中的意义。结果 ,RA、SLE患者中的AKA水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1) 。RA的阳性率为 44 7% (31/ 71) ,SLE阳性率为 2 6 8% (11/41) ,RF阴性的RA患者的AKA检出率为 40 9%。     

不育夫妇抗精子抗体检测结果分析

抗精子抗体是引起免疫性不育的重要原因之一。本文对126对不育夫妇的血清、精浆、宫颈分泌物、应用ELISA法检测抗精子抗体。并与30对健康夫妇对照相比。结果：不育夫妇抗精子抗体显著高于对照组，不育组男性血清抗精子抗体阳性率为19．0％，对照组为3．3％；精液中阳性率为7．14％，对照组为0％；不育组女性血清中阳性率为38．1，对照组为6．6％；宫颈分泌物为19．0％，对照组为6．6％；两组比较各项检测有明显差异（P〈0．01）。女性阳性明显高于男性。结论：抗精子抗体检测对不孕症的诊断和治疗具有重要意义。     

抗独特型抗体ELISA检测日本血吸虫病治疗后病人血清抗体

管晓虹等建立了一株单克隆抗独特型抗体ＮＰ30 ,并证实是日本血吸虫肠相关抗原 (ＧＡＡ)的内影像[1] 。用其检测急慢性血吸虫病人血清抗体取得了与虫源性抗原相似的结果 ,具有快速、简便、适用于现场的特点[2 ] 。现用该法检测治疗后病人血清抗体并与经典抗体检测法对照 ,以评价其在疗效考核中的使用价值。1　材料和方法1 1　治疗后 3个月病人血清 2 16份 ,采用沿湖疫区治疗后Ｋａｔｏ法粪检转为阴性者 ,由江西寄生虫病研究所提供。治疗后 6个月病人血清 5 0份 ,治疗后 12个月血清 45份 ,治疗后36个月血清 48份 ,采自湖北潜江市 ,Ｋａｔｏ法…     

检测抗烟曲霉分泌蛋白抗体的ELISA法及其诊断价值

目的建立检测人血清中抗烟曲霉特异性抗体的ELISA法,评估该法在侵袭性烟曲霉病(IA)诊断中的价值。方法用沙氏液体培养基震荡培养烟曲霉,TCA/丙酮沉淀法分离菌体蛋白和培养上清中的分泌蛋白。用烟曲霉播散感染的家兔血清及确诊IA患者血清,分别与菌体蛋白和分泌蛋白进行免疫印迹分析,选择反应强的分泌蛋白作为包被抗原,建立测定抗烟曲霉特异抗体的ELISA,并对方法的精密度和特异性进行考察、确定cut off值。对实验动物模型血清以及5例确诊、24例临床诊断为IA的患者血清样本进行测定,并与血清半乳甘露聚糖(GM)测定结果进行比较。结果免疫印迹结果显示培养获得的烟曲霉分泌蛋白与感染动物和病人血清均呈现强反应,以其作为包被抗原建立的ELISA法精密度良好,批内CV=12.0%,批间CV=8.1%;阻断试验证实此法对烟曲霉抗体具特异性。依据200份健康人血清测定结果,取吸光度(A)值1.03作为cut-off值。健康人抗体阳性率为2.0%(4/200),IA患者阳性率41.4%(12/29),二者差异显著(P<0.01)。2例临床诊断病人血清GM试验阴性,但抗体阳性,占8.3%(2/24)。实验感染的家兔均在感染后1周内测...     

人工流产后继发不孕患者抗精子抗体的检测

目的：探讨手术流产及药物流产后抗精子抗体（AsAb）的产生对继发不孕的影响。方法：用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测正常组40例，手术流产组41例，药物流产组32例及原发不孕组430例的血清及宫颈粘液AsAb。结果：手术流产组，原发不孕组患者血清和宫颈粘液AsAb阳性率与正常对照组差异有显著性。药物流产组血清和宫颈粘液AsAb阳性率与正常对照组差异无显著性。结论：手术流产对子宫内膜及宫颈机械损伤，使精子易通过破损处进入并产生抗体，有可能导致免疫性不育。药物流产由于子宫内膜及宫颈创伤小，与AsAb产生无明显关系，故药物流产应是初孕，未婚患者的首选。     

检测抗精子抗体在不育、不孕患者中的意义

目的: 探讨检测不育、不孕患者血清或精液中的抗精子抗体(antisperm anibody,As-Ab)水平的临床意义.方法: 应用ELISA法测定202例男性不育患者、210例女性不孕患者(实验组)和345名正常者(对照组)血清或精液中的AsAb,并比较2组的AsAb阳性率.结果: 实验组血清AsAb阳性率男性为36.6%,女性为35.2%,对照组相应为3%、6.1%,2组比较差异有统计学意义(均为P＜0.01).实验组不育患者中,精子质量均正常的25例患者的精液AsAb阳性率为12%,精子质量不正常的30例精液AsAb阳性率为37%,2组比较差异有统计学意义(P＜0.01).原发性不育、不孕者和继发性不育、不孕者的血清AsAb阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于对照组(均为P＜0.01).结论: 不育、不孕患者的AsAb阳性率显著增高,因此,对其进行AsAb的检测是十分必要的,可指导临床进行针对性治疗.     

ELISA法检测抗脑磷脂抗体及其临床意义

本文应用脑磷脂(Sigma公司)为抗原,用ELISA法检查血浆中的抗脑磷脂抗体。通过优选试验条件确定适当抗原包被浓度为10.0μg/ml,血清稀释度1:20,酶标板应用1%硫酸鱼精蛋白预处理,包被后只洗一次。用此法检查65例正常人,阳性率为3.1%,脑萎缩患者的血清阳性率为66.6%,缺血性脑血管病27.4%,脑出血20.0%,一过性脑缺血发作10.0%。表明此种抗体阳性与脑血栓形成有明显联系,阳性患者中78.6%有血流变学检查的异常。     

急性心肌梗死患者血清LD同工酶异常区带的检出及意义

目的 探讨电泳法检测LD同工酶时位于LD5阴极侧异常区带(LD6)的电泳特性及其临床意义。方法 对LD6的电泳特性、热稳定性、抑制剂的影响、显色底物成份的影响进行实验研究,并动态观察了急性心肌梗死(AMI)患者血液酶学指标变化规律。结果 用乙醇取代显色液中的乳酸锂时,LD6显色明显增强,氰化钾可以完全抑制LD6活性;去除显色液中的乳酸锂时,LD6显色减弱,但仍然可见;LD6在4℃保存至少稳定7天,56℃加热lh活性变化不大;4例AMI患者在出现LD6后8-30h内全部死亡。结论 LD6是一种醇脱氢酶,它是肝小叶受损的标志,检出LD6的患者预后不良。     

重症颅脑外伤急性期联合检测空腹血糖和糖化血红蛋白及乳酸脱氢酶临床价值

目的探讨联合检测空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin A1C,HbA1c）及乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenass,LDH）在重症颅脑外伤急性期患者病情评估及预后判断中的价值。方法52例重症颅脑损伤患者,分别依据人院时格拉斯哥昏迷评分（GlasgowComaScale,GCS）、FPG联合HbAtc检测情况及GCS预后评分进行分组,比较重度颅脑损伤组（GCS评分6～8分）与极重度颅脑损伤组（GCS评分3～5分）、糖尿病高血糖组（FPG〉6．1mmol／L且HbAlc〉6．2％）与应激性高血糖组（FPG〉6．1mmol／L且HbAlc〈6．2％）及不同预后患者LDH、FPG水平,并分析GCS评分与LDH、FPG的相关性。结果极重度颅脑损伤组FPG、LDH水平高于重度颅脑损伤组（P〈O．01）;糖尿病高血糖组与应激性高血糖组FPG、LDH水平及预后比较差异无统计学意义（P〉0．05）;恢复良好组、预后差组、死亡组LDH、FPG水平比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;重症颅脑外伤患者人院时GCS评分与LDH、FPG水平呈负相关（r=-0．948,P=0．001;r=-0．941,P=0．001）。结论FPG、LDH可用于评估颅脑损伤严重程度,判断患者预后,HbA,c在鉴别诊断糖尿病性或应激性血糖增高中有重要价值。     

丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验检测试剂盒应用价值的研究

目的探讨丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测试剂盒检测丝虫病患者血清和滤纸血中特异IgG4亚类抗体的敏感度和特异度并评价其应用价值。 方法应用丝虫特异IgG4 ELISA检测试剂盒,检测微丝蚴阳性患者血清或滤纸血、其他蠕虫患者血清、晚期丝虫病患者滤纸血、原微丝蚴血症转阴者滤纸血和基本消除丝虫病后出生儿童滤纸血以及消除丝虫病后不同时间居民血清或滤纸血样本。采用两相关样本的非参数检验,分析血清与滤纸血检测相同稀释度下的IgG4的A值差异。 结果检测86例微丝蚴阳性患者血清,显示丝虫特异IgG4阳性81例,阳性符合率94.19%。检测97份其他蠕虫患者血清、58份阴性冻存血清和100份正常健康人对照血清,显示丝虫特异IgG4全部阴性,阴性符合率100%。4例现症微丝蚴血症患者,血清和滤纸血丝虫特异IgG4全部阳性,血清阳性吸光度(A)值均高于同一患者滤纸血样本A值,但差异无统计学意义(Z＝－1.826,P>0.05)。检测48例晚期丝虫病患者滤纸血、76例原微丝蚴血症转阴者滤纸血、312例基本消除丝虫病地区1983年后出生儿童滤纸血,显示丝虫特异IgG4全部阴性。检测原丝虫病高中度流行地区消除丝虫病后的枣庄、泰安和济宁地市居民滤纸血和血清样本分别为2744份、2243份和800份,显示丝虫特异IgG4全部阴性。 结论丝虫特异IgG4酶联免疫吸附测定试验的检测试剂盒敏感度高、特异度强、操作简便快捷,特别适用于丝虫病诊断和消除丝虫病地区的疾病监测。     

血清乙醇脱氢酶活性测定及其临床意义

本文建立一种用自动生化分析仪双试剂法检测血清乙醇脱氢酶（ADH）活性的方法。同时对100例肝功正常者与9例原发性肝癌、10例肝硬化、40例肝炎患者测定血清该酶活性。在反应体系中，NAD 和乙醇浓度分别为10．0mmol／L和25．0mmol／L，缓冲液为pH9．00的0．1mol／L甘氨酸-NaOH溶液。ADH对NAD 和乙醇的Km值分别为1．67mmol／L和3．03mmol／L。批内CV为0．7％～5.4％。肝功正常者血清ADH活性为1．4±1．2U／L。原发性肝癌为11．4±2．5U／L，肝硬化为4．6±1．5U／L和肝炎为5．5±1．6U／L。这些患者血清ADH活性显著高于肝功正常者。原发性肝癌患者血清ADH活性显著高于肝硬化和肝炎患者。这种简便、准确、灵敏的测定ADH活性方法可用于临床常规分析。     

抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物ELISA法的建立与临床初步应用

目的建立检测血清抗瓜氨酸化蛋白抗体特异性免疫复合物(ACPA-IC)的ELISA技术,探讨ACPA-IC对类风湿关节炎(RA)的临床意义。方法建立检测血清ACPA-IC的ELISA技术,并对方法的特异性、稳定性和重复性进行评估。采用PEG6000沉淀法自RA患者血清中提取IC。用建立的ACPA-IC ELISA法对92例RA患者包括46例ACPA阳性(ACPA+)患者和46例ACPA阴性(ACPA-)患者、46例SLE患者及47例健康献血员血清ACPA-IC水平进行检测。并分析RA患者血清ACPA-IC水平与ACPA和类风湿因子(RF)的相关性。结果经方法学评估,建立的ACPA-IC ELISA法在特异性、稳定性和可重复性方面均达到检测要求。ACPA+患者ACPA-IC水平高于ACPA-患者、SLE患者及健康对照组(P0.01)。当cut off值设为0.9时,该法测得RA患者血清ACPA-IC的阳性率为45.65%(42/92),显著高于SLE(6/46,13.04%)及健康对照组(2/47,4.26%),χ2分别为14.376和24.632,P均0.01。46例ACPA+RA患者ACPA-IC阳性者36例(78.26%),而ACPARA患者ACPA-IC阳性者仅6例(13.04%),差异有统计学意义(χ2=39.429,P0.01)。ACPA-IC与ACPA和RF的Spearman相关分析结果表明,RA患者血清ACPA-IC水平分别与血清ACPA(r=0.708,P=0.000)、RF(r=0.571,P=0.000)呈正相关。结论成功建立检测血清ACPA-IC水平的ELISA技术。RA患者尤其是ACPA+患者血清ACPA-IC水平显著升高。ACPA-IC在RA患者血清中出现可能具有重要的致病意义。     

强生Vitros 5.1 FS生化分析仪上乳酸脱氢酶的性能验证

目的探讨强生Vitros 5.1 FS生化分析仪上乳酸脱氢酶(LDH)的性能验证。方法根据美国临床和实验室标准化协会的检测仪器评价标准,并参照美国强生公司提供的验证方案对LDH的精密度、正确度、线性范围、最大稀释度、生物参考区间进行验证。结果 LDH批内及批间精密度试验均≤3.30%;正确度试验≤4.00%;线性试验决定系数为0.997 2;LDH用生理盐水稀释最大稀释度为8倍;生物参考区间试验证实《VITROS方法学手册》提供的参考区间313~618U/L可以引用。结论强生Vitros 5.1 FS生化分析仪检测的LDH性能验证基本符合质量目标要求和厂商说明要求,满足临床检验的需求。     

恶性血液病患者乳酸脱氢酶水平的临床分析

目的探讨恶性血液病患者血清乳酸脱氢酶(LDH)水平变化情况。方法选择2015—2018年在我院及咸阳市中心医院诊治的56例恶性血液病患者,其中急性白血病(AL)19例,多发性骨髓瘤(MM)29例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)8例。以同一时期60例健康体检者作为对照组。采用全自动生化检测仪测定患者初诊时、第一次完全缓解时(CR1)及复发时的LDH水平,并与对照组进行比较。结果AL、MM和NHL患者初诊时的LDH水平均明显高于对照组(P<0.05);AL、MM和NHL患者CR1时的LDH水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);恶性血液病患者初诊时及复发时的LDH水平明显高于CR1时及对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清LDH可作为反映机体肿瘤负荷的一项重要指标,可判断恶性血液病患者的疗效和预后。     

ELISA检测抗荚膜组织胞浆菌抗体方法的建立

目的 建立检测小鼠血清中抗荚膜组织胞浆菌抗体的ELISA方法。方法 制备荚膜组织胞浆菌（HC）抗原和结核分枝杆菌（MTB）抗原免疫小鼠,通过不同免疫次数获得不同效价的小鼠抗HC血清。以荚膜组织胞浆菌蛋白提取物（P—HTPM）为包被抗原,“方阵滴定法”确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,建立检测抗HC抗体ELISA法。结果 HC抗原免疫小鼠3次获得4份低效价抗血清,平均A值为0．345,免疫4次获得8份高效价血清,平均A值为0．991。ELISA方法中包被抗原和抗血清的最佳工作浓度为1μg／孔及1：1000。P—HTPM和TB—PPD与各自免疫血清均呈阳性反应,A值分别为0．993±0．216和1．606±0．263,但二者之间无交叉反应。结论 本文建立的ELISA方法将成为荚膜组织胞浆菌病和结核病的一种鉴别诊断方法。     

谷氨酸脱羧酶抗体ELISA法的建立与临床应用

人脑组织经过破碎离心、抽提，再经二次凝胶过滤层析与阴、阳离子交换层析分离蛋白质，收集有酶活性组份，即为纯化的谷氨酸脱羧酶，用以建立了测定相应抗体的ＥＬＩＳＡ法。临床检测结果表明，该抗体的阳性率在正常人为１．９６％，在胰岛素依赖性糖尿病为４６．８８％，在非胰岛素依赖性糖尿病为９．３１％。     

血清中心肌肌钙蛋白Ⅰ自身抗体的检测及临床意义

[目的]建立血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）自身抗体的ELISA检测方法,探讨其在冠心病诊断中的临床意义。[方法]采用间接ELISA方法,检测90例冠心病患者血清,其中急性心肌梗死（AMI）患者30例,不稳定性心绞痛（UA）患者30例,稳定性心绞痛（SA）患者30例,另健康对照者30例,进行比较和统计学分析。[结果]cTnI自身抗体阳性率在冠心病各组明显高于健康对照组,AMI组阳性率高于UA组,uA组高于SA组。[结论]cTnI自身抗体的出现与心肌损伤程度显示呈正相关,对病情严重程度的判定具有一定意义。