自杀基因旁观者效应的研究进展

目前世界上威胁人类健康常见的疾病之一仍然是肿瘤,人类针对肿瘤进行着孜孜不倦的研究,目前在肿瘤治疗方面,基因治疗是一个较为有前途的治疗手段,其中肿瘤自杀基因疗法是研究最为广泛的,而旁观者效应在肿瘤自杀基因疗法中起着相当重要的作用,因此,为提高自杀基因杀伤肿瘤效果,部分研究者从增强旁观者效应方面做了许多研究.故本文从增强自杀基因旁观者效应治疗肿瘤方面做一综述.     

胃肠道肿瘤的自杀基因治疗研究进展

肿瘤自杀基因疗法是一种具有潜在应用价值的肿瘤治疗方法,本文从自杀基因体系。载体构建、靶向性转导和转录、旁观者效应、联合基因疗法等几个方面着重介绍了胃肠道肿瘤自杀基因疗法的研究进展。     

胃肠道肿瘤的自杀基因治疗研究进展(文献综述)

肿瘤自杀基因疗法是一种具有潜在应用价值的肿瘤治疗方法。本文从自杀基因体系、载体构建、靶向性转导和转录、旁观者效应、联合基因疗法等几个方面着重介绍了胃肠道肿瘤自杀基因疗法的研究进展。     

双自杀基因CD、HSV-tk共表达对肝门部胆管癌细胞杀伤作用实验研究

目的:观察逆转录病毒介导的双自杀基因CD、HSV-tk共表达对肝门部胆管癌细胞FRH的杀伤作用,探讨肝门部胆管癌的基因治疗方法.方法:在脂全Lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PwzheoCDglytk转导入包装细胞PA317,经G418筛选后培养产病毒的阳性克隆PA317/CD 细胞株,收集其病毒上清,转染FRH细胞,再次经G418筛选,获得稳定表达双自杀基因的FRH/CD tk细胞株,用RT-PCR检测双自杀基因的表达.给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocy-tosine,5-Fc)或无环鸟苷(Gancicioir,GCV)后,用MTT法测定转基因组及未转基因组FRH细胞的存活率.结果:双自杀基因在FR细胞中可稳定表达,联合使合5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fe或GCV.结论:逆转录病毒介导自杀基因可有交往杀死肝门部胆管癌细胞.双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗瘤作用.     

胰腺癌自杀基因治疗的研究进展

目前消化系肿瘤的治疗主要是手术治疗结合化疗或放疗 ,但辅助治疗如对胰腺癌的化疗效果不理想。自杀基因治疗可以增强胰腺癌化疗疗效、减轻化疗的毒副作用。本文对胰腺癌自杀基因治疗的研究进展作一综述。1　自杀基因的基本概念自杀基因 (ｓｕｉｃｉｄｅｇｅｎｅ)又称化疗敏感基因 (ｃｈｅｍｏｓｅｎｓｉ ｔｉｖｅｇｅｎｅ)、化疗药物前体活化基因 (ｐｒｏｄｒｕｇａｃｔｉｖａｔｉｏｎｇｅｎｅ) ,是存在于细菌或真菌中的一类基因 ,哺乳动物体内往往缺乏。自杀基因通过编码特异的酶 ,将一些低毒或无毒的前体化疗药物转化为具有毒性的代谢产…     

胞嘧啶脱氨酶基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤的研究

目的　观察胞嘧啶脱氨酶基因 (CD)、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)共表达对裸鼠人肝门部胆管癌皮下移植瘤的治疗作用。方法　用转染有双自杀基因的包装细胞PA3 17产生的病毒上清 ,感染裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤 ,给予前体药物 5 氟胞嘧啶 (5 FC) 5 0 0mg/kg体重和 /或无环鸟苷 (GCV ) 10 0mg/kg体重后 ,1次 /d ,共 10d ,观察肿瘤的生长情况。 结果　双自杀基因在裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤中稳定表达 ,转基因组肿瘤的生长明显受到抑制 (P <0 .0 1) ;CD tK / 5 FC GCV组、CD/ 5 FC组、tK/GCV组抑瘤率分别为 88.3 1%、63 .5 2 %、65 .0 5 %。双自杀基因组与单自杀基因比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　双自杀基因可明显抑制裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤生长 ,较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用     

CD-TK双自杀基因联合染料木黄酮治疗前列腺癌的实验研究

目的：研究CD-TK双自杀基因联合染料木黄酮对鼠前列腺癌的体内治疗作用.方法：取鼠前列腺癌细胞RM-1接种于鼠（G57BL/6背郎皮下建立移植瘤模型.将荷瘤鼠随机分为对照组、木黄酮组、TK/CD治疗组及TK/CD＋染料小黄酮联合治疗组进行相应处理.实验结束后比较各组肿瘤体积.全部肿瘤标本行常规病理检验及bcl-2免疫组化检测.结果：对照组肿瘤体积为（1 008.73±126.73）mm3.染料木黄酮组肿瘤体积为（359.06±53.17）mm3,双自杀基因组肿瘤体积为（222.60±26.79）mm3,两者联合时肿瘤体积为（25.31±9.24）mm3.双自杀基因组鼠肿瘤体积比染料木黄酮组小（P〈0.01）,两者联合时肿瘤体积最小（P=0.00）.病理切片中显示埘照组几乎未见细胞坏死,而联合用药组肿瘤大片坏死;免疫组化检测肿瘤标本中bcl-2含量显示对照组显强阳性,而联合治疗组仅见微弱阳性.结论：联用染料木黄酮能明显增强CD-TK双自杀基因系统对前列腺癌的治疗作用.     

甲胎蛋白启动子驱动的yCDglyTK双自杀基因治疗裸鼠肝癌的机制研究

目的研究携带甲胎蛋白（AFP）启动子的酵母菌胞嘧啶脱氨酶胸苷激酶（yCDglyTK）双自杀基因体内靶向性治疗肝癌的效果和机制。方法构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因表达质粒,通过阳离子脂质体将携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因转染HepG2和SMMC7721肝癌细胞的裸鼠肝癌皮下种植瘤,观察自杀基因体内杀瘤效果以及细胞凋亡的情况。结果成功构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因,其靶向性地在AFP阳性的HepG2细胞种植瘤上表达,而AFP阴性的SMMC7721细胞种植瘤上无表达,氟胞嘧啶（5-FC）、更昔洛韦（GCV）及两者联合可有效抑制HepG2细胞种植瘤的生长,抑瘤效果GCV＋5-FC〉5-FC〉GCV,而SMMC7721细胞种植瘤的生长未受影响。HepG2细胞种植瘤治疗后有明显的细胞凋亡,而SMMC7721细胞种植瘤内极少凋亡细胞。结论携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因能有效地靶向性地杀伤AFP阳性的肝癌细胞,细胞凋亡可能是其杀伤的重要机制之一。     

自杀基因联合其他疗法治疗肿瘤的研究进展

肿瘤的基因治疗经多年研究已取得了许多令人瞩目的成就,其中自杀基因疗法的发展尤为迅速,是一种颇具临床应用前景的基因治疗策略。但是自杀基因治疗的单独应用仍有不少局限性,如转染效率低、诱导免疫反应能力弱、缺乏组织特异性、易引起肿瘤耐药性、对肿瘤细胞类型有依赖等。所以,研究自杀基因与其他肿瘤疗法的联合应用以及不同自杀基因之间协同作用以寻求更有效的抗肿瘤效应已逐渐成为非常有前景的治疗手段。本文就近几年自杀基因联合其他疗法治疗肿瘤的研究进展作综述。     

胞嘧啶脱氨酶基因联合放射治疗恶性肿瘤的研究进展(文献综述)

以胞嘧啶脱氨酶基因为主的自杀基因治疗已日渐引起肿瘤研究者的兴趣 ,近几年出现的基因联合放疗对恶性肿瘤的治疗 ,使两者之间的优势得以互补 ,大大增强了对肿瘤治疗的效果。本文就胞嘧啶脱氨酶基因联合放疗对恶性肿瘤治疗的作用机制、基因转导方法、靶向性表达、基因显像、治疗效果等方面予以综述。     

胞嘧啶脱氨酶基因联合放射治疗恶性肿瘤的研究进展（文献综述）

以胞嘧啶脱氨酶基因为主的自杀基因治疗已日渐引起肿瘤研究者的兴趣,近几年出现的基因联合放疗对恶性肿瘤的治疗,使两者之间的优势得以互补,大大增强了对肿瘤治疗的效果。本文就胞嘧啶脱氨酶基因联合放疗对恶性肿瘤治疗的作用机制、基因转导方法、靶性表达、基因显像、治疗效果等方面予以综述。     

人甲胎蛋白增强子驱动自杀基因靶向杀伤肝癌细胞的实验研究

目的 探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷自杀基因系统体内外靶向杀伤肝癌细胞的效应.方法 构建人AFP增强子驱动的pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒;利用脂质体将质粒转染入AFP阳性肝癌细胞株HcpG2和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721;采用RT-PCR和Western blot检测TK mRNA和蛋白表达;MTT检测细胞的存活率;观察丙氧鸟苷对肝癌细胞体外增殖、生长曲线和细胞凋亡的作用,以及丙氧鸟苷体内抑制肿瘤生长的效应.采用t检验分析相关数据.结果 成功构建pAFP-cDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒并转染入肝癌细胞;AFP阳性肝癌细胞株HepG2中能检测到TKmRNA和蛋白表达;丙氧鸟苷呈剂量和时间依赖性抑制转染后肝癌细胞株HepG2的生长并诱导其凋亡;AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721中没有TKmRNA和蛋白表达,细胞增殖、生长曲线和凋亡均不受影响,两者比较,差异有统计学意义(t=2.58,2.73,3.12,P＜0.05).丙氧鸟苷可以特异性地抑制转染后肝癌细胞株HepG2治疗组中肿瘤的生长,肿瘤抑制率为46%,而在转染后肝癌细胞株SMMC7721治疗组中,对肿瘤生长无明显抑制作用,两者比较,差异有统计学意义(t=3.36,P＜0.05).结论 人AFP增强子驱动的HSV-TK/丙氧鸟苷自杀基因系统可以靶向杀伤AFP阳性肝癌细胞,抑制肿瘤生长.     

自杀基因疗法治疗乳腺癌研究进展

乳腺癌除手术切除外，迄令尚无满意的治疗措施，但手术根治切除率低。自杀基因（suicide gene）疗法的出现，为乳腺癌的治疗提供了一种较为有效和具有临床就用潜力的治疗策略。本文就自杀基因治疗乳腺癌的研究进展作一综述。     

大肠癌的自杀基因治疗

大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,常用的手术、化疗、放疗等传统的治疗方式均未能使其疗效得到明显的提高。随着分子生物学及基因工程的发展,基因治疗已成为研究重点,其中自杀基因治疗是一种较为有效的具有临床应用潜力的治疗策略。它是把某些能将非毒性药物代谢成细胞毒性药物的非哺乳动物酶类合成的基因自杀基因,经分子生物学途径导入肿瘤细胞,使之在肿瘤细胞内特异地表达,该基因产物能将无毒的药物前体代谢为毒性产物,从而影响肿瘤细胞的ＤＮＡ合成,引起细胞的死亡。目前用于治疗大肠癌的自杀基因主要有ＨＳＶｔｋ基因和ＣＤ基因。本文就…     

间隙连接蛋白43与自杀基因系统旁观者效应的关系

目的 观察胞嘧啶脱氨酶(CD)基因和单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因对胆管癌细胞和胆管癌移植瘤的作用以及转染间隙连接蛋白43(Cx43)基因对旁观者效应的影响.方法 MTT法比较双自杀基因系统作用下和(或)Cx43基因转染后QBC939细胞的细胞抑制率及旁观者效应. 前体药物应用前、后测量移植瘤的大小,判断自杀基因系统的作用和Cx43蛋白对旁观者效应的影响.结果 CD和HSV-tk基因在转染细胞中获稳定表达. mRNA和蛋白水平均显示CD tk Cx 细胞中Cx43的表达量增加. 自杀基因系统对CD tk Cx 细胞组和它生成的移植瘤组的抑制作用均比CD tk 细胞组高.结论 双自杀基因系统在体内、外对胆管癌细胞和移植瘤均有明显的抑制作用,Cx43基因导入可明显增强旁观者效应和对肿瘤的抑制作用.     

缝隙连接蛋白43对双自杀基因系统旁观者效应的影响

目的观察双自杀基因胞嘧啶脱氨酶基因(CD)和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)对胆管癌细胞的抑制作用以及转染缝隙连接蛋白43(Cx43)基因对旁观者效应的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定双自杀基因系统作用下和/或Cx43基因转染后胆管癌QBC939细胞的细胞抑制率及旁观者效应。RT-PCR检测双自杀基因和Cx43基因的表达。Westernblot检测Cx43蛋白的表达。结果CD和tk基因在QBC939/CD tk细胞和QBC939/CD tk Cx43细胞中获得稳定表达。mRNA和蛋白水平均显示转染Cx43基因的QBC939/CD tk Cx43细胞的Cx43的表达量明显增加。双自杀基因系统对QBC939/CD tk Cx43细胞组的抑制作用较QBC939/CD tk细胞组高。结论双自杀基因系统对胆管癌细胞有明显的抑制作用,Cx43基因的导入可明显增强旁观者效应,提高对肿瘤细胞的抑制作用。     

腺病毒介导HSV-TK/CD基因对胆管癌体内体外的杀伤作用

目的　研究HSV TK /CD融合基因对胆管癌的杀伤作用。方法　腺病毒介导HSV TK /CD融合基因体外转染胆管癌细胞QBC93 9,与单自杀基因对照 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT )比色法测定肿瘤细胞生长抑制率 ,旁观者效应 ;构建胆管癌裸鼠模型 ,瘤内注射重组腺病毒 ,观察肿瘤生长情况。结果　与单一自杀基因转染组对照 ,双基因组表现出更强的抗肿瘤作用。当给予相同浓度的前体药物时 ,融合基因组 ,CD组和TK组的肿瘤细胞存活率分别为 3 .1%、3 2 .1%、5 5 .2 %。体内实验显示 ,融合基因组的肿瘤生长受到明显抑制 ,抑制率达 70 .7%。单自杀基因TK、CD组则分别为 41.2 %和 5 5 .7% ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。组织学检查可见实验组肿瘤发生明显坏死 ,这种现象在融合基因治疗组尤为明显。结论　与单自杀基因相比 ,HSV TK/CD融合基因在体内和体外都具有更强的抗肿瘤活性。     

抑癌基因p53增强胶质瘤自杀基因作用的实验研究

目的 研究抑癌基因p53提高恶性胶质瘤自杀基因治疗的可行性. 方法 以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型,原位注射腺病毒为载体的p53和自杀基因,腹腔给以阿昔洛韦(100 mg·kg-1day-1 × 14 d);观察荷瘤鼠生存期:强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小;TUNEL法检测凋亡;评价P53基因对自杀基因系统治疗胶质瘤的优化作用. 结果 体内p53基因联合自杀基因使荷瘤鼠生存期明显延长,凋亡明显增加;强化MRI示肿瘤生长明显减慢. 结论 在体内p53基因可明显增强胶质瘤自杀基因系统的抑瘤作用.     

肾癌的基因治疗进展

大多数肾癌对化疗和放疗不敏感 ,预后较差 ,目前仍缺乏有效的治疗手段 ,随着基因转导技术、肿瘤免疫学、分子生物学等学科的发展 ,基因治疗成为较有前景的一种方法。应用修复抑癌基因、阻断癌基因、抗血管疗法、免疫基因治疗及自杀基因治疗等疗法治疗肾癌已取得了很大进展。     

53基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗的体内研究

目的　探讨p5 3基因优化恶性胶质瘤自杀基因治疗在动物体内的疗效。　方法　以C6鼠胶质瘤细胞和SD大鼠建立动物模型 ,原位注射腺病毒介导p5 3和单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因 ,腹腔给以更昔洛韦 (GCV ,15mg·kg-1·d-1,共 14d)。观察荷瘤鼠生存期 ;强化MRI动态监测荷瘤鼠肿瘤大小 ;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。评价p5 3基因对HSV TK GCV系统治疗胶质瘤的优化作用。　结果　p5 3基因明显增强HSV TK GCV的疗效 ,使荷瘤鼠生存期明显延长 ,肿瘤细胞凋亡明显增加 ;强化MRI显示 4周肿瘤消失。　结论　p5 3基因联合HSV TK GCV可作为临床上优化自杀基因治疗方案的一种较佳选择