Nd:YAG激光对口腔鳞癌CAL-27细胞迁移的影响

目的探讨1064 nm Nd:YAG激光对口腔鳞癌CAL-27细胞迁移的影响。方法体外培养鳞癌CAL-27细胞,取处于对数生长期的细胞接种于24孔板中并继续培养24 h,分0、120、240、360、480 s五组接受激光照射,对应剂量为0、44.4、88.8、133.2、177.6 J/cm~2,划痕后分别于0、12、24、48 h在倒置显微镜下观察划痕变化并拍照,以研究激光照射对细胞迁移影响。结果低剂量激光照射后细胞划痕区域愈合程度提高,而高剂量激光照射后,细胞划痕区域愈合程度降低。结论低剂量Nd:YAG激光照射对鳞癌CAL-27细胞迁移有一定促进作用,而高剂量Nd:YAG激光照射则会对鳞癌CAL-27细胞的迁移产生明显抑制作用。     

尼妥珠单抗对125I粒子照射人舌鳞癌CAL-27细胞的增敏作用

目的:观察尼妥珠单抗联合125I粒子持续低剂量照射对人舌鳞癌CAL-27细胞的抑制效果,初步探讨尼妥珠单抗对125I粒子照射人舌鳞癌CAL-27细胞的放射增敏作用.方法:将指数生长期CAL-27细胞随机分为4组,(空白对照组、125I粒子照射组、尼妥珠单抗组和尼妥珠单抗联合125I粒子照射组),采用CCK-8法检测125I粒子照射组对CAL-27细胞的抑制情况,流式细胞技术测定各组细胞周期分布及细胞凋亡率,Hoechst 33258染色比较观察细胞的形态学变化.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:125I粒子对CAL-27细胞生长有抑制作用且呈时间剂量依赖性.尼妥珠单抗联合125I粒子照射组CAL-27细胞凋亡率显著高于单纯尼妥珠单抗组和单纯照射细胞凋亡率之和,联合组S期细胞比例较对照组显著减少(P＜0.05).结论:尼妥珠单抗联合125I粒子照射可以通过诱导凋亡的途径杀伤CAL-27细胞,且尼妥珠单抗与125I粒子照射释放的低剂量γ射线照射CAL-27细胞具有明显的放射增敏作用.     

Kr:F准分子激光对牙体硬组织的热效应研究

目的：评价Kr:F准分子激光照射牙齿后，对牙体硬组织的影响。方法；通过测量Kr:F准分子激光照射后牙齿硬组织的温度，并与Nd:YAG激光照射组进行比较。结果：10s,60s时，Kr:F准分子激光组牙齿硬组织的温度升高值明显低于Nd：YAG激光照射组（P＜0．01）。在照射10s-60s时间内，Kr:F准分子激光照射后牙齿硬组织的温度变化值也明显低于Nd:YAG激光照射组（P＜0．01）。结论：Kr:F准分子激光牙齿产热较少。     

Apicidin对人舌鳞癌CAL-27细胞作用的初步研究

目的探讨Apicidin对体外培养人舌鳞癌CAL-27细胞影响及作用机制。方法体外培养人舌鳞癌CAL-27细胞,采用不同浓度的Apicidin作为实验组,并设立对照组,倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖、TUNEL、流式细胞仪检测Apicidin对CAL-27细胞凋亡作用。结果 Apicidin可显著抑制CAL-27细胞的生长(P<0.05),呈时间剂量依赖性。通过TUNEL法、流式细胞仪检测显示CAL-27细胞的凋亡,并且使CAL-27细胞停留在G2期。结论 Apicidin能显著抑制CAL-27的体外生长并能诱导细胞凋亡。     

热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌CAL-27细胞增殖及侵袭的影响

目的: 探讨热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制。方法: 将培养的舌鳞癌细胞株CAL-27分为4组。①沉默Id-1组（Id-1-siRNA）—用siRNA基因转染法沉默舌鳞癌CAL-27细胞中Id-1的表达,RT-PCR法检测其Id-1的mRNA表达变化;②热疗组（HT）—细胞置于42.5℃恒温培养箱内40min;③联合组（HT+ Id-1-siRNA）—siRNA基因转染法沉默细胞内Id-1的表达后进行42.5℃、40 min的热疗处理;④空白对照组—常规培养细胞。通过CCK8和Transwell侵袭实验,分别检测CAL-27细胞的增殖能力和侵袭能力变化; Western免疫印迹法检测CAL-27细胞中PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: siRNA能成功沉默CAL-27细胞内Id-1的表达,沉默Id-1组与空白对照组相比,Id-1的mRNA表达水平下降81.6%。沉默Id-1和热疗均可抑制CAL-27细胞的增殖和侵袭能力,下调PI3K、p-Akt蛋白表达（P<0.05）,热疗联合沉默Id-1作用于CAL-27细胞后的结果更为显著（P<0.01）。结论: 热疗协同沉默Id-1可显著抑制人舌鳞癌细胞的增殖及侵袭能力,其作用是通过PI3K/Akt信号通路来实现。     

3种激光处理对微弧氧化钛板微结构和牙周膜干细胞成骨活性的影响

目的:研究半导体(Diode)、铒(Er)和Nd:YAG激光照射对微弧氧化(microarc oxidation, MAO)钛板表面的微结构和牙周膜干细胞成骨活性的影响。方法:采用Diode、Er和Nd:YAG激光分别对MAO钛板表面照射,扫描电镜观察MAO钛表面以及人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)的形貌,X射线电子衍射光谱(X-ray diffraction, XRD)分析MAO钛表面的晶相,CCK-8法检测细胞的增殖活性A值,RT-qPCR法检测细胞的Runx2、ALP、OCN和OSX的表达水平。结果:扫描电镜和XRD显示经3种激光照射后MAO钛表面的形貌和晶相均发生改变;经Nd:YAG激光照射的MAO钛表面显著促进hPDLSCs的Runx2和ALP的表达(P<0.001),但其A值下降(P<0.05);经Er激光照射的MAO钛表面促进细胞的ALP基因表达(P<0.005);经Diode激光照射的MAO钛表面的细胞A值以及成骨基因的表达量均减少。结论:经Er和Nd:YAG激光照射的MAO...     

沙利霉素对舌鳞癌细胞体外增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨沙利霉素对口腔舌鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步分析其影响机制。方法:CCK8法检测沙利霉素和顺铂分别作用于CAL-27细胞和EA.hy926细胞后,对细胞增殖的影响;Transwell小室法检测沙利霉素对CAL-27细胞侵袭和迁移能力的作用;Western 免疫印迹检测沙利霉素对CAL-27细胞中E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）和β连环蛋白（β-catenin）表达的影响。采用SPSS20.0 软件包对数据进行统计学分析。结果:沙利霉素抑制CAL-27细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性,且其增殖抑制作用强于顺铂（P<0.05）;经过沙利霉素(4 μmol/L）处理过的CAL-27细胞,其侵袭和迁移能力均显著低于空白对照组(P<0.05);沙利霉素上调CAL-27细胞中E-cadherin蛋白的表达水平,并且下调vimentin和β-catenin蛋白的表达水平。结论:沙利霉素能够明显抑制CAL-27细胞的增殖能力,显著减弱CAL-27细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制癌细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)有关。     

脉冲Nd:YAG激光对几种细菌杀菌作用的实验研究

目的 :评价Nd :YAG激光对三种细菌的杀菌效果。方法 :用剂量分别为 100mJ、2 5Hz、2.5W、140mJ、2 5Hz、3.5W及 160mJ、25Hz、4.0W的脉冲Nd :YAG激光对三种细菌悬液照射 4min后 ,计算其杀菌率。结果 :从低剂量到高剂量 ,激光对各菌种的杀菌率依次为绿脓杆菌 47.07%、86.74%和100% ;金黄色葡萄球菌为 25.69%、60.90%和100% ;大肠埃希氏杆菌为14.81%、33.68%和85.06%。结论 :脉冲Nd :YAG激光对三种细菌的杀菌作用随激光剂量的增加而增强。不同细菌对激光照射的耐受性不同。本文讨论了应用该激光辅助治疗牙周病的可行性。     

Nd: YAG激光对3种树脂水门汀与牙本质粘接强度的影响

目的观察Nd: YAG激光照射前后树脂水门汀-牙本质粘接界面的微观形貌特征,评价Nd: YAG激光对3种树脂水门汀与牙本质间粘接强度的影响。方法选择人离体前磨牙30颗,分为颊、舌两部分,将试件随机分为激光组和对照组。激光组以0.8 W、10 Hz脉冲Nd: YAG激光作用于牙本质表面25 s,联合3种树脂水门汀RelyX ARC、Panavia F和RelyX Unicem充填;对照组直接使用树脂水门汀充填。然后测试剪切强度,在根管显微镜下观察断裂模式并分类。另选人离体前磨牙6颗,按照标准的牙本质粘接面预备后,使用Nd: YAG激光照射3颗牙牙本质表面,并联合充填不同的树脂水门汀,用扫描电镜观察Nd: YAG激光照射前后树脂水门汀-牙本质界面的微观形貌变化。结果
激光照射可以提高自酸蚀树脂水门汀Panavia F和自粘接树脂水门汀RelyX Unicem与牙本质之间的剪切强度（P＜0.05）。激光会降低全酸蚀树脂水门汀RelyX ARC与牙本质间的剪切强度（P＜0.05）。根管显微镜下观察可见：试件断裂大部分发生在树脂水门汀-牙本质界面。扫描电镜观察可见：Nd: YAG激光照射后,全酸蚀亚组和自酸蚀亚组的混合层变薄、树脂突变短且少;自粘接亚组变化不明显,未见树脂突。结论Nd: YAG激光照射后,可提高Panavia F和RelyX Unicem与牙本质的剪切强度,建议临床联合应用。     

脉冲Nd：YAG激光照射对实验性大鼠慢性牙周炎的作用

目的:探讨脉冲Nd:YAG激光照射对大鼠实验性牙周炎牙周临床指标及牙周组织中一氧化氮(NO)含量的影响.方法:健康Sprague-Dawley大鼠共64只,随机分为8组,正常对照组(N组),药物对照治疗组(D组),牙周炎阳性对照组(P组),其余5组按照给予不同剂量激光照射治疗.末次治疗15 d后测量牙周临床指标牙龈指数(GI),牙槽骨吸收值ABL(Alver bone loss),菌斑指数(plaque index,PLI),采用分光光度仪测定大鼠牙周组织中NO的含量.结果:各剂量组ABL、NO值较末照射组(P组)显著降低(P＜0.05).1.5～2.0 W 20 pps剂量组激光照射后牙周指数均较P组显著降低(P＜0.05),与D组无显著差异.结论:在1.5～2.0 W 20pps剂量范围内,采用脉冲Nd:YAG激光牙周袋内照射能有效改善牙周指数,降低实验大鼠牙周组织中NO含量,起到治疗牙周炎的作用.     

EGCG对舌鳞癌细胞CAL-27的EGFR、67LR及VEGF表达的影响

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对舌鳞癌细胞CAL-27的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、相对分子质量为67 000的层粘连蛋白受体(67 000 dalton lamininreceptor,67LR)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor receptor,VEGF)表达的影响,从而揭示EGCG抑致舌鳞癌细胞增殖的可能机制。方法:不同浓度EGCG处理CAL-27细胞24h后,MTT法检测细胞增殖活性;RealTime PCR法和Western Blot法分别检测CAL-27细胞EGFR、67LR、VEGF的mRNA及蛋白表达情况;Western Blot法检测磷酸化EGFR(p-EGFR)的蛋白表达水平。结果:EGCG浓度依赖性抑制CAL-27细胞的增殖,且抑制其EGFR、67LR、VEGF的mRNA和蛋白、p-EGFR的蛋白表达。结论:EGCG能影响EGFR、67LR及VEGF的转录和翻译水平以及p-EGFR蛋白表达,这可能是EGCG抑制舌鳞癌细胞CAL-27增殖的重要机制。     

Effect of enhancer of zeste homolog 2 inhibitor GSK126 on the proliferation and apoptosis of tongue squamous cell carcinoma

目的 观察zeste基因增强子同源物2（EZH2）抑制剂GSK126对人舌鳞状细胞癌细胞体外增殖与凋亡的影响,并探讨其相关机制,为舌鳞状细胞癌的临床治疗提供新思路。方法 将不同浓度的GSK126作用于舌鳞状细胞癌CAL-27细胞,通过甲基噻唑基四唑（MTT）、克隆形成、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）荧光染色实验检测药物对细胞增殖能力的影响;采用Hoechst33342荧光染色、JC-1法观察细胞凋亡情况;采用Western blot法检测CAL-27细胞内相关蛋白细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-9的表达水平。结果 GSK126能抑制CAL-27细胞增殖并对细胞凋亡有促进作用。GSK126能下调细胞内p-ERK、Bcl-2的表达水平,同时可增加Bax、Cleaved caspase-9的表达（P<0.05）。结论 GSK126可抑制舌鳞状细胞癌CAL-27细胞的增殖,并且能促进其凋亡,其机制可能与抑制MEK/ERK信号通路以及激活Bax/Bcl-2通路有关。     

氯喹增强口腔癌CAL-27细胞对顺铂化疗敏感性的观察

目的利用氯喹（chloroquine,CQ）及顺铂（cisplatin,DDP）作用于CAL-27细胞,探讨自噬在口腔癌化疗中的作用及机制,为临床增强口腔癌化疗敏感性提供理论依据。方法应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法比较药物对CAL-27细胞的生长抑制作用,采用激光共聚焦显微镜观察自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ的表达,AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞术观察细胞周期的分布。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果不同浓度氯喹及顺铂处理CAL-27细胞不同时间后,细胞生存率逐渐降低,呈浓度和时间依赖性。5 mg/L氯喹联合顺铂在IC₅₀浓度（5 mg/L）处理后,与单独顺铂处理相比,显著降低了CAL-27细胞的生存率（P<0.05）。氯喹或顺铂作用于CAL-27细胞48 h后,自噬在细胞中分布清晰,顺铂组（DDP组）细胞平均荧光强度高于对照组、氯喹处理组（CQ组）及氯喹与顺铂联合处理组（CQ+DDP组）（P<0.05）;氯喹组细胞平均荧光强度显著低于其他3组（P<0.05）。氯喹或顺铂作用于CAL-27细胞48 h后,与对照组相比,DDP组和CQ+DDP组细胞凋亡率显著提高（P<0.05）;与顺铂单独作用相比,CQ+DDP组细胞凋亡率显著提高（P<0.05）。氯喹和顺铂作用于CAL-27细胞48 h后,DDP组和CQ+DDP组G1期细胞明显增多,出现G1期阻滞,CQ+DDP组G1期细胞数显著高于DDP组（P<0.05）。结论抑制自噬能够提高CAL-27细胞对顺铂的化疗敏感性,CAL-27细胞本身的自噬是产生化疗耐药的重要机制。自噬抑制剂有望成为口腔癌化疗的增敏剂。     

丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞 CAL-27抑制作用的研究

[摘要] 目的 探讨丹参素在体外条件下对口腔鳞癌细胞CAL-27的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 丹参素处理CAL-27细胞,MTT法检测丹参素对CAL-27细胞活性的影响。划痕实验检测丹参素对CAL-27细胞的迁移能力的作用。Transwell实验检测其对细胞的侵袭能力的作用。结果 MTT显示,在丹参素浓度为40 μg/mL、60 μg/mL和80 μg/mL时,丹参素对CAL-27细胞增殖的抑制可呈剂量和时间依赖性。划痕实验中,24h组与对照组相比,具有显著差异性（P<0.01）。Transwell侵袭实验结果表明,丹参素可降低CAL-27细胞的侵袭能力。结论 在体外条件下,丹参素在一定浓度范围内可抑制CAL-27细胞的增殖,降低CAL-27细胞的迁移及侵袭能力。     

Nd：YAG激光照射对提高人牙周膜成维细胞增殖力的作用

目的观察Nd：YAG激光对人牙周膜成纤维细胞增殖和碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法采用酶消化组织块法原代培养人牙周膜成纤维细胞，并进行波形蛋白及角蛋白的免疫细胞化学染色，对所培养的细胞进行鉴定。将牙周膜成纤维细胞分组，接受不同能量密度的Nd：YAG激光照射。测定牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性并观察其生长情况。结果5个实验组的细胞增殖速度及碱性磷酸酶含量均高于对照组，其中能量密度为60j／cm^2组、80j／cm^2组、100i／cm^2组与对照组相比有统计学的差异。结论低能量密度，短时间的Nd：YAG激光照射能促进牙周膜成纤维细胞的增殖，提高碱性磷酸酶活性。     

α亚族趋化因子受体3在人舌鳞癌细胞株的表达及其配体干扰素诱导蛋白-10对CAL-27细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨α亚族趋化因子受体3(CXC-chemokine receptor 3,CXCR3)在不同人舌鳞癌细胞株的表达以及其配体干扰素诱导蛋白-10(interferon induced protein 10,IP-10)对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖和凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法和免疫荧光染色对3种人舌鳞癌细胞株(CAL-27、UM-1、Tca-8113)IP-10的相应受体CXCR3的表达进行检测。CAL-27细胞被分为3个实验组和1个对照组,3个实验组根据IP-10的刺激浓度,分为10 ng/mL组、20 ng/mL组、40 ng/mL组,对照组不予刺激。12 h、24 h、48 h时检测4组细胞的增殖;24 h时用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果 CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株均有表达,并且CXCR3在3株细胞的胞膜及胞质内均有染色。和对照组相比,12 h、24 h时,3种浓度的IP-10均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05);在48 h时,只有40 ng/mL的IP-10能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05),10 ng/mL、20 ng/mL的IP-10对CAL-27细胞的增殖无促进作用(P>0.05)。在24 h时,对照组、10 ng/mL组、20 ng/mL组和40 ng/mL组的细胞凋亡率分别为(0.053 3±0.472 6)%、(3.236 7±0.940 0)%、(4.516 7±1.115 4)%和(3.363 3±0.571 2)%,3种浓度IP-10均能够促进CAL-27细胞的凋亡(P<0.05),但3个实验组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CXCR3在3种人舌鳞癌细胞株的胞膜及胞质内均有表达;IP-10既能促进CAL-27细胞的增殖,又能促进其凋亡。随着时间的延长,IP-10的促增殖作用减弱,而这种减弱可能是由IP-10的促凋亡作用的逐步发挥所引起的。     

白细胞介素1β对两种肿瘤细胞活性氧含量及侵袭迁移能力影响

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)对口腔鳞癌CAL-27细胞及非小细胞肺癌A549细胞增殖、活性氧(ROS)含量及侵袭迁移能力的影响。 方法用外源性重组人IL-1β作用于口腔鳞癌CAL-27细胞及非小细胞肺癌A549细胞,CCK8法检测其增殖能力,活性氧含量检测试剂盒检测其细胞内ROS含量的变化,Transwell法观察IL-1β作用后细胞侵袭迁移能力的改变,使用方差分析方法对所得结果进行统计学分析。 结果IL-1β对两组细胞增殖能力无影响,50及100 ng/mL浓度的IL-1β在8、12 h可上调CAL-27细胞ROS含量(F_{8 h}=24.436,P_{8 h}=0.001;F_{12 h}=64.579,P_{12 h} < 0.05),在4、8及12 h可上调A549细胞ROS含量(F_{4 h}=19.888,P_{4 h}=0.002;F_{8 h}=30.249,P_{8 h} < 0.05;F_{12 h}=32.703,P_{12 h}=0.001),促进两组细胞侵袭迁移(F_CAL-27侵袭=159.783,P_CAL-27侵袭 < 0.05;F_CAL-27迁移=264.045,P_CAL-27迁移 < 0.05;F_A549侵袭=936.278,P_A549侵袭 < 0.05;F_A549迁移=1389.961,P_A549迁移 < 0.05)。 结论IL-1β可以上调口腔鳞癌CAL-27细胞及非小细胞肺癌A549细胞ROS含量,同时促进其侵袭迁移。