干燥综合征患者结膜免疫细胞及亚群的分布

目的研究正常人与干燥综合征(SS)患者球结膜HLA-DR^ 细胞、郎格罕细胞(LC)及T淋巴细胞亚群的变化特征。方法采用链菌素-过氧化物酶法检测正常人与SS患者球结膜组织免疫淋巴细胞。结果SS患者球结膜大量T淋巴细胞浸润，抑制性T细胞(CD8^ )较辅助性T细胞(CD4^ )为多，LC数量减少，且鳞状上皮化生明显；SS球结膜中HLA-DR^ 细胞较正常人明显增加。结论SS患者球结膜有显著的病理改变和免疫细胞异常。     

宫颈癌患者外周血淋巴细胞亚群分布的差异分析

目的检测分析宫颈癌患者外周血淋巴细胞亚群的差异分布及临床意义。方法采用流式细胞术检测宫颈癌患者和健康对照成人外周血中CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、NK、NKT、CD8~+CD28~+、CD8~+CD28-、CD3~+HLA-DR~+、CD3-HLA-DR~+、Treg细胞的百分比,同时结合宫颈癌患者的临床诊断分期做对比分析。结果与健康对照组比较,宫颈癌患者外周血中CD3~+(P=0.0002)和CD3~+CD4~+T细胞百分比(P=0.0004)以及CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值(P=0.0256)显著降低;宫颈癌患者CD3~+CD8~+T细胞百分比与对照组比较无显著差异,但是随着患者临床分期的提高呈降低趋势(P=0.0480)。NK细胞(P0.0001)、活化T细胞(CD3~+HLA-DR~+:P0.0001)、活化B细胞(CD3-HLA-DR~+:P=0.0021)百分比显著提高;细胞毒性T细胞(CD8~+CD28~+)细胞百分比降低(P=0.0006),抑制性T细胞(CD8~+CD28-)百分比提高(P=0.0009);CD4~+CD25~(bright)T细胞(Treg)阳性细胞百分比与对照组比较没有显著差异,但CD4~+CD25~(bright)T细胞(Treg)在CD4~+淋巴细胞中的百分比显著高于对照组(P=0.0335)。宫颈癌患者外周血中CD8~+CD28-/CD8~+CD28~+之比与对照组比较显著提高(P0.0001)。结论宫颈癌患者细胞免疫功能降低。精确分析宫颈癌患者的T淋巴细胞亚群变化对于临床诊断、治疗和预后评估具有重要的实际意义。     

多发性骨髓瘤患者外周血T细胞亚群及细胞免疫功能研究

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T细胞亚群和CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的表达特点,分析MM与健康者之间的细胞免疫功能差异。方法检测28例初诊的MM患者及22例健康志愿者外周血淋巴细胞中总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T细胞(CD3+CD4+)、抑制/细胞毒T细胞(CD3+CD8+)的比例、(CD3+CD4+)/(CD3+CD8+)、CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+FoxP3+/CD4+CD25+比值,并比较MM患者与健康者之间细胞免疫指标(Th1/Th2比值、AgNOR比值、TGF-β)的差异。结果初诊MM患者与对照组相比,外周血淋巴细胞中总T细胞(CD3+)比例、辅助/诱导T细胞(CD3+CD4+)比例差异无统计学意义(P>0.05);抑制/细胞毒T细胞(CD3+CD8+)比例增加(P<0.05);CD4+CD25+/CD4+、CD4+CD25+FoxP3+/CD4+CD25+比值明显高于健康组(P<0.05);血清中Th1/Th2比值、AgNOR比值均明显低于健康组(P<0.05);血清TGF-β含量较健康组上升(P<0.01)。结论 MM患者外周血T细胞亚群的异常、Treg表达增加及细胞免疫功能低下可能与疾病的发生、发展相关,对判断MM疗效及预后有一定的指导价值。     

贲门癌患者手术前后T 细胞亚群变化的临床意义

目的　观察贲门癌患者手术前后T细胞亚群的动态变化。方法　 32例贲门癌分别于手术前后不同时间 ,测定外周静脉血T淋巴细胞的阳性细胞数 ,并与 32例健康义务献血者进行对照。实验方法采用单克隆抗体酶标S—P染色法。结果　贲门癌患者手术前与对照组相比T淋巴细胞 (CD3+)、辅助T淋巴细胞 (CD4 +)显著低于对照组 (P <0 .0 1) ,抑制性T淋巴细胞 (CD8+)升高明显 (P <0 .0 5 )。术后d3T细胞各亚群与术前无显著差异。术后 6～ 8wkCD3+、CD4 +、CD4 +/CD8+明显升高 ,CD8+明显下降。结论　贲门癌患者可引起T细胞亚群紊乱 ,术后由于切除了肿瘤组织细胞免疫功能逐渐恢复     

康艾注射液对食管癌放疗患者细胞免疫功能影响的临床研究

目的:观察康艾注射液对食管癌放疗患者细胞免疫功能的影响。方法:采用随机分组方法将30例食管癌放疗患者分为对照组(单纯放疗组)和实验组(同时注射康艾注射液)各15例,并观察两组治疗前后患者外周血自然杀伤(NK)细胞活性、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、CD4+/CD8+、B淋巴细胞(CD19+)和NK淋巴细胞(CD16+、CD56+)的变化情况。结果:对照组放疗后CD8+细胞和NK淋巴细胞百分数较放疗前轻微增加,其它检测指标较放疗前均略下降,差异无显著性(P>0.05)。而实验组治疗后CD3+、CD4+、NK淋巴细胞百分数、CD4+/CD8+值明显提高,并明显高于治疗前和对照组的水平(P<0.01)。结论:康艾注射液可明显改善食管癌放疗患者的细胞免疫功能。     

新型冠状病毒肺炎患者Mg~(2+)水平对CD8~+T淋巴细胞和NK细胞功能的影响

目的:探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者血清及外周血单个核细胞(PBMCs)中Mg~(2+)水平变化及其对CD8~+ T淋巴细胞和NK细胞功能的影响。方法:选取2020年1月20日～2月20日期间鄂州市中心医院收治的COVID-19确诊患者165例,其中轻型/普通型组98例,重型/危重型组67例,另选34例健康体检者作为对照组。采集外周血,分离PBMCs,检测各组血清及PBMCs中Mg~(2+)水平;流式细胞术检测各组外周血CD8~+ T淋巴细胞和NK细胞亚群以及其表面抑制分子程序性死亡受体1(PD-1)和激活分子自然杀伤细胞活化受体(NKG2D)的表达水平;并分析Mg~(2+)水平与PD-1和NKG2D表达水平的相关性。结果:与对照组比较,轻型/普通型组和重型/危重型组患者血清及PBMCs中Mg~(2+)水平、CD8~+T淋巴细胞和NK细胞计数均明显降低(P<0.05),同时CD8~+T淋巴细胞和NK细胞表面抑制分子PD-1表达水平明显升高(P<0.05),而活化分子NKG2D表达水平均明显降低(P<0.05)。重型/危重型组患者以上各指标改变幅度又大于轻型/普通型组(P<0.05),且COVID-19患者Mg~(2+)水平与CD8~+T淋巴细胞和NK细胞表面分子PD-1表达水平呈负相关性(P<0.05),与NKG2D表达水平呈正相关性(P<0.05)。结论:COVID-19患者血清及PBMCs中Mg~(2+)水平会明显降低,其可能会导致CD8~+ T淋巴细胞和NK细胞功能被抑制。     

再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

目的 研究再生障碍性贫血(AA)患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞水平的变化及临床意义.方法 采用流式细胞仪对40例AA患者(AA组)及40例正常人(正常对照组)外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测.结果 与正常对照组相比,AA组CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值及CD16+/56+自然杀伤(NK)细胞百分比明显降低(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞百分比明显升高(P＜0.01),CD3+T淋巴细胞与CD19+B细胞百分比与正常对照组比较,无统计学差异(P＞0.05).AA患者外周血中CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25high调节性T细胞比例均明显低于正常对照组(P＜0.01).结论 AA患者细胞免疫功能明显异常,调节性T细胞减少可能与AA免疫发病机制有关.淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价AA疗效及判断预后方面具有一定的临床价值.     

不同临床类型乙型病毒性肝炎患者淋巴细胞亚群的差异性分析

目的研究分析不同临床类型乙型病毒性肝炎(HBV)患者淋巴细胞亚群的差异性及其临床意义。方法采用流式细胞术检测乙肝病毒携带者、慢性乙型肝炎、急性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)患者外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、NK细胞(CD16+CD56+)所占淋巴细胞百分比,并与健康对照组比较。结果与健康对照组比较,乙型肝炎病毒携带者、急性乙型肝炎患者CD3+、CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+比值无统计学差异(P>0.05),慢性乙肝肝炎、LC和HCC患者CD3+、CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+比值逐步递减(P<0.05),以HCC患者下降最为显著。与健康对照组相比,急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞计数显著升高(P<0.05),LC、HCC患者CD8+T细胞则显著下降(P<0.05)。乙型肝炎病毒携带者、急性乙型肝炎患者NK细胞计数与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),慢性乙型肝炎患者NK细胞计数显著增加(P<0.05),LC、HCC患者NK细胞计数则下降显著(P<0.05)。结论 HBV感染者临床类型不同,各淋巴细胞亚群免疫调节差异有统计学意义,对指导临床治疗及评判预后有一定的临床价值。     

食管鳞癌患者NK细胞、T淋巴细胞水平检测及临床意义

目的检测食管鳞癌患者NK细胞、T淋巴细胞水平并分析其临床意义。方法选取2016年4月至2018年1月郑州大学第一附属医院收治的84例食管鳞癌患者作为食管癌组,选择同期于郑州大学第一附属医院体检的84例健康者作为对照组。检测两组外周血NK细胞(CD56~+)、T淋巴细胞(CD8~+、CD4~+、CD3~+)水平,分析其临床意义。结果食管癌组CD56~+、CD8~+水平较对照组高,CD4~+、CD3~+水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.001)。食管癌组Ⅲ期患者CD56~+、CD8~+水平高于Ⅰ、Ⅱ期,Ⅱ期患者CD56~+、CD8~+水平高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组Ⅲ期患者CD4~+、CD3~+水平低于Ⅰ、Ⅱ期,Ⅱ期患者CD4~+、CD3~+水平低于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌组有无淋巴结转移患者CD8~+、CD4~+、CD3~+、CD56~+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管鳞癌患者细胞免疫功能下降,且细胞免疫功能随临床分期增加而下降。     

骨髓增生异常综合征患者免疫功能检测的临床意义

①目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者免疫功能的变化及临床意义。②方法采用流式细胞术检测23例确诊但未治疗的MDS患者及20例健康志愿者的外周血淋巴细胞亚群,包括CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+的比值、B淋巴细胞(CD3-CD19+)和NK细胞[CD3-(CD16+/CD56+)]亚群比例。③结果与健康对照组相比,MDS患者外周血T淋巴细胞计数明显减低,亚群比例失衡,以CD4+的T辅助细胞亚群减低为主,CD8+的抑制性T细胞阳性率增加,CD4+细胞与CD8+细胞比例倒置,具有杀伤肿瘤细胞作用的NK细胞和B细胞数量亦低于正常人。④结论 MDS患者的免疫功能降低,检测MDS患者外周血淋巴细胞亚群表达可用于MDS患者的免疫监测。     

干燥综合征患者球结膜与唇腺T淋巴细胞相关性研究

目的 研究干燥综合征(SS)患者球结膜、唇腺T淋巴细胞分布及两者T淋巴细胞的相关关系。方法 采用链菌素-过氧化物酶法检测Ss患者球结膜及唇腺组织中T淋巴细胞。结果 SS患者球结膜、唇腺均有大量T淋巴细胞浸润，两者T淋巴细胞浸润程度呈直线正相关。结论 Ss患者球结膜、唇腺均有显著的免疫病理改变，两者T淋巴细胞浸润程度具有一致性。     

负载冻融抗原的DC诱导特异性CTL杀伤U937细胞的实验研究

目的　探讨树突状细胞 (DC)负载白血病细胞株U937冻融抗原 ,体外诱导细胞毒性T细胞 (CTL) ,使其对U937细胞产生特异性杀伤作用。方法　应用基因重组人白介素 4 (rhIL 4 )、基因重组人粒 /单细胞集落刺激因(rhGM CSF)联合培养体系自正常人骨髓单个核细胞诱导产生DC ,使其负载U937冻融抗原 ,致敏T淋巴细胞 ,产生CTL。观察负载U937冻融抗原的DC对所激发的T淋巴细胞表型及功能的影响及CTL对U937细胞的特异性杀伤活性。结果　负载U937冻融抗原后DC的CD1a表达率较培养前明显增高 (P <0 .0 1) ,CD86、CD11c、HLA DR表达也较培养前明显增高 (P <0 .0 1) ,而CD83、CD14与培养前相比无明显变化 (P >0 .0 5 )。且负载U937冻融抗原DC诱导的CTL中 ,CD3+ CD8+ T细胞比例较诱导前明显增高 (P <0 .0 1)。U937冻融抗原负载DC诱导CTL对U937细胞及K5 6 2细胞的杀伤率分别为 (6 6 .96± 6 .2 1) %和 (9.81± 4 .4 5 ) % ,两者有极显著性差异 (P <0 .0 0 1)。结论　经rhGM CSF、rhIL 4培养产生的DC为CD14 -CD1a+ 的DC ,能诱导CTL产生明显的特异性杀伤作用 ;负载U937冻融抗原DC诱导的CTL中的CD3+ CD8+ T细胞比例明显增高 ,提示CD8+ T细胞在抗肿瘤免疫中具有极其重要的作用。     

鼻息肉患者外周血T淋巴细胞亚群分布的研究

目的:研究鼻息肉患者外周血T淋巴细胞亚群的分布情况,探讨T细胞介导的免疫反应与鼻息肉形成的关系.方法:采用流式细胞技术检测70例鼻息肉患者外周血T淋巴细胞CD 4、CD 8的表达,并与正常人外周血进行比较.结果:鼻息肉患者外周血中CD 4、CD 8细胞数以及CD 4/CD 8细胞数比值均明显增高(与正常人比较:P＜0.01);且鼻息肉患者外周血中CD 4细胞数明显高于CD 8细胞数(P＜0.05).结论:鼻息肉患者外周血中有大量T淋巴细胞表达且高度表达CD 4分子,提示鼻息肉的形成与T淋巴细胞亚群分布失衡有关.     

系统性红斑狼疮患者外周血CD_8~+CD_(25)~+T细胞亚群改变的初步研究

目的:检测SLE患者与正常人外周血CD8+CD25+T细胞亚群的数量、比例变化,研究其与疾病活动性、临床病理改变的相关性,探讨CD8+CD25+T细胞亚群在系统性红斑狼疮疾病发生、发展中的意义。方法:分离外周血单个核细胞,利用三色流式细胞术分别检测CD3+T细胞中CD8+CD25+、CD8+CD25-、CD8-CD25+和CD8-CD25-亚群的比例,并计算其细胞数量。结果:SLE患者外周血T细胞中CD8+CD25+亚群较正常人显著减少,并导致CD25-/CD25+比值异常增高;并且CD8+CD25+亚群的百分率的降低和CD25-/CD25+比值的增高与肾损相关。结论:CD8+CD25+亚群的减少可能在SLE的发生上较CD8-CD25+细胞亚群减少具有更重要的病理意义。     

独立生长因子1在Sézary综合征患者外周血Sézary细胞中的表达

目的 检测独立生长因子1(GFI-1)在Sézary综合征患者和正常人外周血中的表达,为开发针对GFI-1基因靶点的治疗提供实验依据.方法 利用流式细胞术分离纯化7例Sézary综合征患者外周血中CD4+CD7-的Sézary细胞(SS细胞)作为实验组,以10例正常人外周血CD4+T细胞、Sézary综合征来源细胞系Hut78细胞和人急性T细胞白血病细胞系Jurkat细胞为对照组.应用qPCR检测各组细胞中GFI-1 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测GFI-1蛋白表达.用干扰素α2b(IFN-α2b)诱导Hut78细胞凋亡后,采用MTS法测定细胞增殖情况,用qPCR检测GFI-1、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子P21、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)和Caspase-3 mRNA的表达情况,用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 Sézary综合征患者外周血SS细胞GFI-1 mRNA表达水平高于Jurkat细胞和正常人外周血CD4+T细胞(P均＜0.05).SS细胞和Hut78细胞的GFI-1蛋白表达水平高于Jurkat细胞和正常人外周血CD4+T细胞(P均＜0.05).IFN-α2b能够抑制Hut78细胞增殖,且其抑制作用呈时间和浓度依赖性.IFN-α2b处理Hut78细胞12 h和24 h后GFI1 mRNA的表达水平呈时间依赖性降低,P21、TRAIL和Caspase-3 mRNA的表达水平呈时间依赖性增加(P＜0.05).IFN-α2b处理Hut78细胞12 h和24 h后细胞的凋亡水平增加(P＜0.05).结论 GFI-1基因在Sézary综合征患者外周血SS细胞中表达增加,IFN-a2b能抑制Hut78细胞GFI-1基因的表达,表明GFI-1基因可能在Sézary综合征患者SS细胞的肿瘤性增殖中发挥重要调控作用.     

HLA—DR抗原在尖锐湿疣患者外周血淋巴细胞中的表达

目的：研究尖锐湿疣（CA）患者HLA-DR抗原表达的改变。方法：采用单克隆抗体免疫荧光双标记及流式细胞仪分析技术,检测CA患者外周血HLA-DR抗原的表达,结果：CA患者外周血HLA-DR^ 细胞数较正常对照组明显降低,并与CA患者病程呈负相关;复发CA患者的HLA-DR^ CD3^ 和HLA-DR^ CD8^ 细胞数均低于初发患者;CA患者外周血HLA-DR^ CD8^ 细胞数明显低于正常对照组,并与CA患者病程呈负相关。结论：上述结果表明CA患者外周血淋巴细胞HLA-DR抗原表达存在异常。     

Liposome-mediated Functional Expression of Multiple Drug Resistance Gene in Human Bone Marrow CD34＋ Cells

Myelosuppressionisanimportantdose limitingfactorformostofchemotherapeuticagentsinclinicalpractice.OverexpressionofP glycoprotein (P gp)encodedbyMDR1geneisaccompaniedbyfunctionaldrugresistance.TheexpressionofP gpisconsistent lylowinnormalbonemarrowcells,an…     

肝硬化、慢性乙型肝炎患者外周血自然杀伤细胞亚群的研究

用荧光激活细胞分类计数器检测了肝硬化和慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者外周血中自然杀伤细胞(NK)的亚群状况。结果发现,肝硬化组的总 NK 百分比显著高于对照组和慢乙肝组(P<0. 04和 P<0. 005) ;慢乙肝组的 CD16~+CD57~-亚群百分比与细胞绝对数均明显低于对照组(P<0. 005) ;而肝硬化组的 CD16~+CD57~+亚群百分比则明显地高于慢乙肝组(P<0. 02) 。这些结果表明,慢乙肝患者体内的 NK 反应性低下,而肝硬化患者的 NK 反应性偏强。     

干燥综合征唇腺免疫病理研究

目的 探讨CIM＋CD25＋调节性T细胞在干燥综合征（SS）患者唇腺组织的表达。方法 用免疫组织化学的方法对31例唇腺石蜡组织的连续切片进行CIM、CD25、CD68、CD8和Foxp3染色。结果 唇腺组织免疫组化染色显示25例SS患者唇腺中浸润的淋巴细胞中,CIM＋T细胞占大多数,两组均无CD25和FOXP3的表达。结论SS患者唇腺中缺乏CIM＋CD25＋调节性T细胞;调节性T细胞在SS的发病机制中起重要作用。     

树突状细胞免疫功能与慢性丙型肝炎病毒感染相关分析

目的:探讨树突状细胞(DC)与慢性丙型肝炎患者体内病毒持续感染的关系。方法:密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),贴壁培养2 h,吸去悬浮细胞,联合应用GM-CSF、IL-4刺激正常人及HC患者外周血DCD的增殖及成熟。观察DC外部形态;流式细胞仪检测各组的DC数量(CMRF-44标记法)及DC表面CD86、CD80、HLA-DR的表达水平;ELISA法检测培养7 d的DC上清中IL-12和IFN-的水平。结果:实验组DC细胞数为(7.5±3.3)×106/L,明显低于对照组的(14.9±5.1)×106/L(P<0.01)。实验组DC表面CD86、CD80和HLA-DR表达的阳性率分别为(52.16±13.12)%(、37.26±11.31)%、(29.76±13.34)%,对照组分别为(83.21±15.22)%(、47.93±12.19)%(、38.26±10.58)%,两者相差明显(P<0.05)。培养上清中IL-12平均值为(398±105)ng/L,干扰素γ平均值为(7912±832)ng/L,分别低于对照组(813±216)ng/L和(13407±1532)ng/L(P<0.05)。结论:DC的免疫功能低下与慢性丙型肝炎患者HCV感染的持续化有关。