酸枣仁皂苷A对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究酸枣仁皂苷A对大鼠单个心室肌细胞膜L-型钙电流(ICa-L)通道的影响。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的酸枣仁皂苷A对ICa-L的作用。结果:①酸枣仁皂苷A对ICa-L呈浓度依赖性抑制。②100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-LI-V曲线明显上移。③100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-L稳态激活曲线右移,稳态失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示酸枣仁皂苷A能够影响ICa-L通道的激活态和失活态抑制ICa-L。     

白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究白藜芦醇对正常豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响. 方法:采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度白藜芦醇作用前后对ICa-L的影响. 结果:①白藜芦醇呈浓度依赖性阻断ICa-L,但对激活电位、峰电位、反转电位均没有影响;②白藜芦醇使ICa-L稳态激活曲线右移,V1/2由对照的(-18.97±4.08) mV变为(-15.97±4.13) mV (n=7,P=0.02),κ由(3.64±0.56)变为(3.82±0.60)(n=7,P=0.67);③对失活曲线无影响,不改变ICa-L失活特性;④白藜芦醇使ICa-L失活后再恢复时间常数τ缩短,从(98.50±9.00) ms变为(54.53±4.27) ms(n=6,P=0.000). 结论:白藜芦醇对ICa-L有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程.     

异甘草素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的:研究异甘草素对豚鼠单个心室肌细胞膜ICa-L通道的影响,旨在探讨其抗心律失常的机制。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的异甘草素对ICa-L的作用。结果:①异甘草素能使I-V曲线明显上移。②异甘草素0.1-100μmol/L对ICa-L呈浓度依赖性的抑制作用。③3μmol/L异甘草素具有频率依赖性的抑制作用,它能使ICa-L稳态激活曲线右移、失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示异甘草素对ICa-L通道的激活态和失活态有较高亲和力,这些可能成为其抗心律失常作用的机制。     

细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

【目的】观察细辛和细辛配伍附子含药血清对大鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨其抗心律失常的作用机制。【方法】连续给药7 d后制备大鼠含药血清,采用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞L型钙通道电流。【结果】细辛和细辛配伍附子含药血清均能增加大鼠心室肌L型钙通道电流,在0 m V钳制电压下,细辛含药血清使电流增加约(28.36±0.37)%,细辛配伍附子含药血清使电流增加(75.07±0.28)%。细辛含药血清使激活曲线、失活曲线左移,对恢复曲线无明显作用;细辛配伍附子含药血清使激活曲线、失活曲线左移,使失活后恢复时间延长。【结论】细辛配伍附子较单味细辛含药血清对心肌细胞L型钙通道的激活作用更强,表明药物配伍可增加疗效。     

福辛普利对缺氧复氧豚鼠心室肌细胞动作电位及其离子通道的影响

目的 观察福辛普利预处理对缺氧复氧豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)、L-型钙通道电流(ICa-L)和ATP敏感钾通道电流(IK-ATP)的影响,探讨其抗再灌注性心律失常的电生理机制.方法 采用全细胞电流钳和膜片钳技术分别记录AP和ICa-L,IK-ATP.结果 缺氧复氧使心室肌细胞AP时程(APD50,APD90)缩短;ICa-L峰值降低,I-V曲线上移,激活曲线右移,半数激活电压(V1/2)增大,失活曲线左移,失活V1/2减低;ATP敏感钾通道由正常关闭状态到完全开放.与缺氧复氧组相比,福辛普利预处理使APD50,APD90相对延长;ICa-L峰值增加,I-Ⅴ曲线上移幅度减小,激活曲线左移,失活曲线右移,激活与失活V1/2均接近正常,ATP敏感钾通道进一步开放,电流明显增加.结论 福辛普利预处理能显著改善缺氧复氧状态下L-钙通道的抑制状态,促进动作电位参数的恢复,减少有效不应期的离散度及折返形成;通过药物预适应机制,进一步开放ATP敏感钾通道,增加ATP敏感钾电流,而发挥抗再灌注心律失常的作用.     

厄贝沙坦电生理作用的实验研究

目的:研究厄贝沙坦(Irbesartan)对正常豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)、内向整流性钾电流(IK1)、快钠流(INa)以及跨膜动作电位的影响.方法:应用膜片钳全细胞记录方法记录各项离子流和跨膜动作电位.结果:①厄贝沙坦呈浓度依赖性阻断ICa-L,10,100和1000 nmol/L的厄贝沙坦分别使ICa-L密度 (pA/pF)从 (-9.8±1.1)减少到(-6.7±0.9),(-4.2±0.8)和(-2.1±0.4)(n=5,P<0.05或P<0.01).②厄贝沙坦可使ICa-L I-V曲线上移,但不改变其激活的电压依赖性和反转电位.③厄贝沙坦呈使用依赖性阻滞ICa-L.④厄贝沙坦对ICa-L激活曲线无明显影响,但可使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性失活,对照组V1/2和κ值分别为(-30±5)mV,(8.2±0.7),厄贝沙坦组为(-39±7) mV,(11.6±1.3)(n=5,P均<0.05).⑤厄贝沙坦100 nmol/L使ICa-L失活后再激活的恢复时间常数(τ)从对照组(62.5±2.3) ms延长至(126.4±2.6) ms(P<0.01).⑥厄贝沙坦对IK1和INa无明显影响.⑦厄贝沙坦(100 nmol/L)可使单个心室肌细胞动作电位时程(APD30,APD50,APD90)从(106±10),(125±16),(178±23)ms缩短至(82±16),(99±6),(122±18) ms(n=5,P<0.05),对静息电位、动作电位幅度无影响. 结论:厄贝沙坦作用于L-型钙通道的失活态从而阻断ICa-L.     

心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流的动力学改变

目的:观察心肌梗死后抑郁大鼠心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的动力学特性。方法:将60只SD大鼠随机分为4组:正常对照组(n=10),心梗组(n=20),抑郁组(n=10),心梗后抑郁组(n=20)。通过结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,予慢性不可预见性温和刺激建立抑郁模型,利用酶解法分离梗死周边区心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录L型钙电流的变化,研究抑郁对心肌梗死后大鼠心室肌细胞ICa-L的动力学影响。结果:与心梗组比较,心梗后抑郁组的I-V曲线上移,激活曲线右移,并延长失活后恢复时间。结论:抑郁可能通过改变心肌梗死后心室肌细胞L型钙通道的动力学来诱发室性心律失常。     

加巴喷丁对急性分离大鼠三叉神经节神经元高电压激活钙电流的影响

目的:评价加巴喷丁对急性分离大鼠三叉神经节神经元高电压激活钙电流的影响.方法:清洁级SD雄性大鼠,150～200 g,酶消化急性分离双侧三叉神经节神经元,采用全细胞膜片钳技术记录三叉神经节神经元高电压激活钙电流.记录加巴喷丁10、30、100 μmol/L (G1-3组,n=10)作用下的钙电流,计算电流抑制率;并绘制浓度依赖曲线和100 μmol/L加巴喷丁作用下钙电流-电压曲线、钙通道激活曲线和稳态失活曲线.计算半数激活电压和半数失活电压.结果:加巴喷丁(10、30、100 μmol/L)均能抑制三叉神经节神经元钙电流(P<0.05),且抑制率随浓度增加而增大(P<0.05).加入100 μmol/L加巴喷丁后,钙电流峰值降低,激活曲线和稳态失活曲线分别向超极化方向移动,半数激活电压和半数失活电压均降低(P<0.05),且稳态失活曲线移动程度大于激活曲线.结论:加巴喷丁能够抑制三叉神经节神经元高电压激活钙电流,可能与其主要改变钙通道失活动力学特征有关.该作用可能为加巴喷丁治疗三叉神经痛作用机制之一.     

模拟缺血对兔左心室心肌细胞L型钙电流跨壁异质性的影响

目的研究左心室心肌细胞L型钙通道的跨壁异质性及模拟缺血对其影响.方法采用全细胞膜片钳记录技术直接记录左心室三层心肌细胞的L型钙电流(ICa-L),并观察模拟缺血缺氧对心肌ICa-L跨壁异质性的影响.结果左心室三层细胞的ICa-L特性存在异质性,表现为中层细胞的电流密度-电压关系(I-V)曲线最低,中层细胞的峰值ICa-L是心内膜和心外膜层细胞的2倍多;中层细胞的ICa-L失活最快.模拟缺血后,三层细胞的ICa-L-I-V曲线呈时间依赖性下移,中层细胞的变化最显著:ICa-L稳态失活曲线呈时间依赖性左移,以外膜细胞变化最显著;模拟缺血30 min时外膜细胞的恢复明显慢于中层和外膜细胞.结论左心室心肌细胞的ICa-L存在跨壁异质性;模拟缺血缺氧对ICa-L的跨壁异质性有明显影响.     

非去极化停搏液对缺血再灌注心肌细胞L-型钙通道的影响

目的探讨非去极化停搏液（non-depolarizing solution,NDP）对缺血再灌注心肌细胞L-型钙通道（ICa-L）的影响。方法实验分为对照（Con）组、缺血再灌注（I／R）组和非去极化停搏液（NDP）组。选择培养18-48h的sD乳鼠心肌细胞用于实验。Con组细胞不经过缺血再灌注处理;VR组细胞经模拟缺血缺氧3h、再灌注1h处理;NDP组在模拟I／R过程中,加NDP液于细胞培养基中进行干预。用全细胞膜片钳技术检测ICa-L的电流强度和门控特性。结果与对照组相比,I／R组ICa-L的峰值电流密度明显降低[（-9．0±3．8）pA／pFvs（-15．1±8．8）pA／pF,P〈0．05],电流-电压曲线（I-V曲线）上移,翻转电位绝对值减小,稳态激活曲线和失活曲线左移,恢复曲线右移。与I/R组相比,NDP组ICa-L的峰值电流密度升高[（-11．4±6．7）pA／pFvs（-9．0±3．8）pA／pF,P〈0．05],I-V曲线下移,翻转电位绝对值增大,稳态激活曲线和失活曲线右移,恢复曲线左移。结论NDP液可减轻心肌细胞I／R损伤对ICa-L通道的抑制作用和门控特性的改变,有利于保护心肌收缩和舒张功能、减少心律失常的发生。     

枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

OBJECTIVE: To determine the effect of citrus aurantium extract (CAE) on L-type calcium currents (ICa-L) in ventricular myocytes of guinea pigs. METHODS: Single myocytes were dissociated by enzymatic dissociation method. The whole-cell patch-clamp recording technique was used to record the change of calcium current after the administration of CAE. RESULTS: 1. CAE 4 x 10(-3), 2 x 10(-2), 4 x 10(-2), and 1 x 10(-1) g/ml increased the ICa-L by 15.89%, 29.01%, 52.03% and 59.76% (P < 0.05), respectively. 2. CAE 2 x 10(-1) and 4 x 10(-1) g/ml decreased the ICa-L by 16.61% and 30.87% (P < 0.05), respectively. CAE changed the ICa-L significantly, but did not change the shape of I-V curves. CONCLUSIONS: CAE 4 x 10(-3)-1 x 10(-1) g/ml can increase the L-type calcium current in guinea pig ventricular myocytes significantly in a concentration-dependent manner, and promote the opening of calcium channel. CAE 2 x 10(-1)-4 x 10(-1) g/ml may inhibit the L-type calcium channels of ventricular myocytes, and depress the opening of calcium channel.     

间羟胺对大鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的观察α肾上腺素能受体激动剂间羟胺对大鼠心室肌动作电位及L-型钙电流的影响。方法采用全细胞膜片钳方法,记录离体大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙电流。结果 200μmol/L间羟胺可使心室肌细胞L-型钙电流增大（P〈0.05）,动作电位时程（APD）明显延长（P〈0.01）,动作电位复极50%和90%时间（APD50and APD90）明显延长（P〈0.01）。100μmol/L酚妥拉明可使增大的的L-型钙电流和APD、APD50、APD明显恢复。结论间羟胺可明显延长大鼠心室肌动作电位时程,而酚妥拉明可不同程度地拮抗此效应。     

M_3R介导的cAMP-PKA信号途径对L-型钙通道的调控作用研究

目的研究M3受体激动剂通过cAMP-PKA信号途径对L-型钙通道的影响。方法应用全细胞膜片钳技术记录M3受体激动剂胆碱对大鼠单个心室肌细胞L-型钙通道电流(ICa-L)的影响;采用激光扫描共聚焦技术观察细胞内钙离子的变化。结果胆碱使大鼠心室肌细胞ICa-L密度从(9.07±0.68)pA/pF减少至(5.58±0.62)pA/pF(n=4,与对照组相比,P<0.01),H89加胆碱组使ICa-L电流密度减少至(7.68±0.75),幅度明显高于胆碱组(n=4,与胆碱组相比,P<0.01)。胆碱抑制KCl除极诱导的心肌细胞[Ca2+]i的升高,从(2.83±0.08)降至(1.17±0.09)FI/FI0(n=30,与KCl组相比,P<0.01),胆碱与H89组可使[Ca2+]i降至(1.65±0.17)FI/FI0,幅度高于胆碱组(n=30,与胆碱组相比,P<0.05)。结论 M3受体激动剂胆碱通过抑制PKA活性调控L-型钙通道,使外钙内流减少,降低细胞[Ca2+]i,从而发挥抗心肌保护作用。     

Blocking effect of puerarin on calcium channel in isolated guinea pig ventricular myocytes

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｄｅｎｔｉｆｙｗｈｅｔｈｅｒＰｕｅｒａｒｉｎ（Ｐｕｅｒ）ｈａｓｂｌｏｃｋｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｎＬｔｙｐｅｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌＭｅｔｈｏｄｓ　ＷｅｕｓｅｄｗｈｏｌｅｃｅｌｌｒｅｃｏｒｄｉｎｇｏｆｐａｔｃｈｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｔｏａｎａｌｙｓｅｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｃｕｒｒｅｎｔｉｎｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｍｙｏｃｙｔｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆｇｕｉｎｅａｐｉｇｈｅａｒｔｓｂｙｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅＲｅｓｕｌｔｓ　Ｉ…     

姜黄素对大鼠心室肌细胞快钠流和L型钙流的影响

目的：研究姜黄素对大鼠心室肌细胞快钠流（INa）和L型钙流（ICa-L）的影响。方法：采用急性酶解分离法获得大鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术记录快钠流（INa）和L型钙流（ICa-L）,观察50μmol/L姜黄素对INa和ICa-L的影响。结果：50μmol/L姜黄素对INa和ICa-L的抑制率分别是71.9%±6.3%（P〈0.01）和-1.7%±13.1%（P〉0.05）。它使INa电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位和反转电位,对ICa-L的电流密度-电压曲线无明显影响。结论：50μmol/L姜黄素对大鼠心室肌细胞INa有较强抑制作用,对ICa-L无明显影响。     

活性氧对神经母细胞株SH-SY5Y细胞L型钙通道电流的影响

①目的 探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。②方法 在神经母细胞SH—SY5Y细胞体外培养的基础上，采用全细胞膜片钳技术，观察H2O2对SH—SY5Y细胞L型钙通道电流(ICa,L)的影响。③结果 H2O2能够明显增加峰值ICa,L，且该作用具有浓度依赖性。H2O2使ICa,L的I-V相关曲线下移，但对其形状和最大激活电位无明显影响。④结论 H2O2对L型钙通道有明显增强作用，此可能是其导致神经元钙超载的机制之一。     

壬基苯酚对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

 目的观察环境激素壬基苯酚(NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响。方法应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;应用膜片钳全细胞方法观察NP对单个心室肌细胞ICa-L的影响。结果NP可抑制不同膜电位下的ICa-L,NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)使ICa-L峰值电流密度从(-3.2±1.5)pA.pF-1减少到(-1.6±0.8)pA·pF-1(P<0.01)和(-1.4±0.7)pA·pF-1(P<0.01);但对ICa-L激活动力学曲线无明显影响。结论NP可剂量依赖性抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L。     

心力衰竭患者抗β1肾上腺素能受体自身抗体阳性血清对心肌细胞L-型钙通道的影响

目的探讨心力衰竭患者抗β1肾上腺素能受体自身抗体(Abs)阳性血清对豚鼠心室肌细胞膜上L型钙电流(IGa-L)的影响.方法应用全细胞钳制技术,定量观察并比较β1肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素(Iso)和心力衰竭患者Abs阳性血清对豚鼠单个心室肌细胞的ICa-L电流强度的影响.结果β1肾上腺素能受体激动剂Iso可使基础ICa-L峰值电流强度和标准电流密度从(997.09±227.5)pA和(8.20±0.86)pA/pF增大到(2 241.01±348.5)pA和(18.98±1.18)pA/pF(P＜0.01),而β1肾上腺素能受体阻滞剂艾司洛尔(Esm)可以阻断这一作用.同样,心力衰竭患者Abs阳性血清可使基础ICa-L峰值电流强度从(963.57±207.56)pA增大到(1 382.41±241.36)pA,标准电流密度从(8.14±0.72)pA/pF增大到(11.70±1.03)pA/pF(P＜0.01),Esm也可阻断此作用.结论人类心脏Abs阳性血清对心肌细胞受体有异丙肾上腺素样激动剂效应,可能参与了心力衰竭时心肌细胞的病理生理过程.